血吸虫卵及环丙沙星对小鼠TNBS肠炎的预防作用

 目的 研究腹腔注射血吸虫卵及口服环丙沙星对TNBS肠炎小鼠肠道炎症及Toll样受体4（Toll-like receptor 4, TLR4）的影响。方法 Balb/c小鼠50只随机分为正常对照组（10只）、TNBS肠炎组（20只）、血吸虫卵组（10只）及环丙沙星组（10只）。血吸虫卵组于造模前第3、14天腹腔注射冰冻灭活血吸虫卵104个，环丙沙星组于制作肠炎模型前予小鼠口服环丙沙星50mg/kg/d共2周。分别评价小鼠一般情况、死亡率、肠壁炎症程度、肠壁TLR4蛋白表达、肠壁tlr4 mRNA表达及血清TNF-α水平。结果 血吸虫卵组小鼠死亡率较TNBS肠炎组明显降低（20％ vs 70%，P<0.05），肠壁炎症明显改善（Ameho criteria评分 1.43 &#61617; 0.52 vs 4.21 &#61617; 0.61，P<0.01），肠壁TLR4表达下调（0.33 &#61617; 0.03 vs 0.76 &#61617; 0.05，P<0.01）；血清TNF-α表达下调，但尚无统计学显著意义（29.62 &#61617; 9.71 vs 40.50 &#61617; 12.48，P>0.05）。环丙沙星组小鼠死亡率较TNBS肠炎组亦明显降低（20％ vs 70%，P<0.05），肠壁炎症改善（Ameho criteria评分 1.54 &#61617; 0.71 vs 4.21 &#61617; 0.61，P<0.05），肠壁TLR4表达下调（0.40 &#61617; 0.03 vs 0.76 &#61617; 0.05，P<0.01），血清TNF-α表达下调，但尚无统计学显著意义（27.85 &#61617;16.17 vs 40.50 &#61617; 12.48，P>0.05）。结论 血吸虫卵及环丙沙星可有效预防TNBS诱导的小鼠肠炎，其作用机制可能与调节Th1/Th2平衡及下调TLR4表达有关。     

血吸虫卵对小鼠三硝基苯磺酸肠炎的预防作用

目的：研究腹腔内注射血吸虫卵对小鼠三硝基苯磺酸（TNBS）肠炎的预防作用及对肠道上皮Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法：40只BALB／c小鼠随机分成正常对照组（10只）;TNBS肠炎组（20只）;血吸虫卵组（10只）。评价小鼠病死率,肠黏膜病理表现,血浆肿瘤坏死因子（TNF）-α含量,免疫组化法、逆转录（RT）-PCR法检测结肠TLR4的表达。结果：血吸虫卵组小鼠病死率低于TNBS肠炎组（20％vs 70％,P〈0．05）,肠道炎症轻于TNBS肠炎组（Ameho标准评分1．4±0．5VS4．2±0．6,P〈0．01）。结肠TLR4表达（TLR4／β-肌动蛋白吸光度比值）：TNBS肠炎组〉血吸虫卵组〉正常对照组（0．762±0．054VS0．325±0．029VS0．237±0．021,均P〈0．01）。结论：腹腔内注射血吸虫卵可预防小鼠TNBS肠炎,可能与其下调结肠TLR4表达有关。     

口服环丙沙星对三硝基苯磺酸诱导小鼠肠炎的影响

目的评价口服环丙沙星在小鼠三硝基苯磺酸（TNBS）肠炎模型中的作用,探讨Toll样受体4 （TLR4）在肠炎发生中的作用。方法40只BALB／c小鼠随机分成正常对照组（10只）;TNBS肠炎组（2t）只）;环丙沙星干预组（10只）。评价下列指标：小鼠一般情况,肠黏膜病理学改变,远段结肠内容物细菌培养,结肠黏膜TLR4表达（免疫组化和RT-PCR法）和血清TNF-α（ELISA法）水平。结果环丙沙星干预组小鼠死亡率、肠道炎症（Ameho criteria结肠组织学评分）明显减轻,低于了NBS肠炎组（70％vs 20％,4．21±0．61 vs 1．54±0．71,P〈0．01）。菌落计数（×10^9 CFU／mL）环丙沙星组低于正常组及TNBS肠炎组（1．36±0．23 vs 1．83±0．28 vs 2．54±0．42,P〈0．01）。结肠TLR4表达情况（tlr4／β-actin光密度比值）：TNBS肠炎组〉环丙沙星干预组〉正常对照组（0．76±0．05 vs 0．40±0．03 vs 0．24±0．02,P〈0.01）。小鼠血清TNF-α水平（pg／mL）：TNBS组〉对照组（40．50±12．48 vs 20．41±2．11,P〈0．01）,环丙沙星干预组0．05）。结论环丙沙星可以减轻小鼠TNBS肠炎,机制可能与其减少肠道细菌、下调结肠TLR4表达有关。     

铜绿假单胞菌肺部感染对小鼠 Toll 样受体 2、4 的影响

目的探讨Toll样受体（TLR）2、4mRNA在铜绿假单胞菌慢性感染小鼠肺内的动态改变及其作用。方法56只雄性Balb／c小鼠随机气道接种含有铜绿假单胞菌（PA）琼脂糖珠（感染组,34只）和无菌琼脂糖珠（对照组,22只）。于第1、3、5、7、10天处死小鼠,取肺组织细菌培养,行肺组织病理观察,ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）中自介素（IL）-6和IL-17的含量,采用Real—timePCR检测TLR2mRNA及TLR4mRNA表达。结果感染组在接种后第3天IL-6和IL-17水平均达高峰,分别为（154．83±12．51）ng／L和（601．05±25．53）ng／L,均显著高于对照组（40．05±2．98）ng／L和（213．75±9．25）ng／L,差异有统计学意义（P〈0．05）,且两者在接种后第10天仍处于高水平。感染组中TLR4mRNA的相对表达量第7天达高峰（4．09±0．25）,与对照组第7天（0．97±0．05）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;而TLR2mRNA在感染组和对照组各时间相比变化均不明显（P〉0．05）。结论TLR4与小鼠肺部慢性感染PA的发生发展密切相关,其机制可能与TLR4在肺的免疫损伤中起到重要作用有关。     

TLR2和TLR4在大鼠光滑念珠菌肺部感染中的表达及意义

目的：研究Toll样受体2（TLR2）和TLR4在光滑念珠菌肺部感染大鼠中的作用。方法将36只大鼠分为3组,每组12只：对照组（A组）、未免疫抑制肺部光滑念珠菌感染组（B组）及免疫抑制肺部光滑念珠菌感染组（C组）。每组分别在造模成功后第1、3天各处死大鼠6只,观察肺组织病理变化,用逆转录PCR（RT-PCR）法检测肺组织 TLR2、TLR4 mRNA的表达、酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定TNF-α蛋白水平。结果 A组肺组织正常;B组部分肺泡塌陷、炎症细胞浸润,未见孢子或菌丝;C组大部分肺泡塌陷,部分扩张,大量炎症细胞浸润、并有孢子菌丝聚积。第1、3天 TLR2 mRNA和 TNF-α蛋白表达水平C组明显高于其他两组（P＜0．01）,B组高于A组（P＜0．05）;C组第3天 TLR2、TLR4 mRNA ,TNF-α表达水平高于第1天（P＜0．05,P＜0．01）,且TLR4表达高于A组（P＜0．05）。结论 TLR2和 TNF-α可能参与光滑念珠菌肺部感染的发生发展,TLR4可能起协同作用。     

降解魔芋多糖对三硝基苯磺酸诱导实验性结肠炎的治疗作用

目的：观察降解魔芋多糖（DAKP）治疗2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导结肠炎的疗效并探讨其作用机制．方法：将SD大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、地塞米松（DX）组及DAKP50,100,200mg／kg3种不同剂量组,每组动物10只．除正常对照组外,其余5组均以TNBS／乙醇造模．造模6h后,DAKP不同剂量组给予DAKP50,100,200mg／kg灌胃;DX组给予DX0．2mg／kg灌胃．均为1次／d,共5d,6d时以乙醚麻醉大鼠致死,并分别腹腔收集巨噬细胞,采用ELISA法检测巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;截取8cm结肠,称质量并计算结肠指数及溃疡面积;分离结肠黏膜,液氮速冻,测定髓过氧化物酶（MPO）活性;取2cm结肠组织40g／L甲醛固定,HE染色;摘取胸腺、脾脏称质量．结果：与模型组相比较,DAKP 100,200mg／kg剂量组能够降低结肠指数,缓解黏膜水肿并能显著缩小结肠溃疡面积[（31．8±8．1）％,（30．9±6．4）％vs（41．5±9．1）％,P〈0．05];降低结肠炎大鼠肠黏膜MPO的水平[（96．7±2．2）,（85．0±1．0）郴（161．7±2．3）,P〈0．05]．TNF-α表达DAKP 100,200mg／kg剂量组低于模型组[（215．1±7．2）,（201．3±5．5）vs（306．9±8．1）,P〈0．05];与DX组相比较其疗效差异无显著性．结论：DAKP对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有显著治疗作用．低分子DAKP可能是调节胃肠道功能的主要有效成分．     

日本血吸虫卵对TNBS诱导小鼠结肠炎肠黏膜表达NOD2/CARD15的影响

 目的 研究日本血吸虫卵对2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzesulfonic acid,2,4,6-TNBS）诱导小鼠结肠炎肠黏膜表达NOD2/CARD15的影响。方法 实验小鼠（n=50）随机分成3组:正常对照组（n=10）、TNBS+生理盐水组（n=20）和TNBS+日本血吸虫卵组（n=20）,后两组用TNBS溶液灌肠（100 mg/kg）建立结肠炎模型,TNBS+日本血吸虫卵组在造模前第14天和第3天分别给予腹腔注射冰冻灭活血吸虫卵10 000个（1 mL冰生理盐水混悬液）,TNBS+生理盐水组同时给予相同体积的冰生理盐水腹腔注射,建模后第7天处死存活小鼠,用荧光定量RT-PCR（Real time PCR）法测定结肠组织的NOD2的mRNA基因表达,Western blot方法测定结肠组织NOD2蛋白表达水平。结果 TNBS+日本血吸虫卵组死亡率明显下降,结肠肉眼及组织病理炎症程度明显减轻;荧光定量RT-PCR分析显示,TNBS+生理盐水组较正常组结肠黏膜NOD2 mRNA相对表达量显著增加（P<0.01）,TNBS+日本血吸虫卵组较TNBS+生理盐水组NOD2 mRNA相对表达量显著下降（P<0.05）;Western blot分析显示,TNBS+生理盐水组NOD2的蛋白表达量较正常组增加了近3倍（P<0.01）,TNBS+日本血吸虫卵组较TNSB+生理盐水组下降52.8%（P<0.01）,差异有显著统计学意义。结论 结肠炎时,黏膜NOD2/CARD15表达明显升高,日本血吸虫卵抗原可能通过下调NOD2/CARD15表达改善结肠炎症状态。     

丙泊酚后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤时Toll样受体4、NF-κB及血清TNF-α表达的影响

目的探讨丙泊酚后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响。方法成年健康Wistar大鼠60只,随机分为5组（n=12）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、丙泊酚1、2、4mg/kg后处理组（P1、P2、P4组）。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定肝组织中TLR4 mRNA、NF-κB mRNA的表达,放射免疫法测定血清TNF-α的浓度,光镜观察肝组织形态学变化。结果与S组比较,各组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达上调,TNF-α升高,差别均有统计学意义（P〈0.01）;与IR组比较,P1、P2、P4组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达下调,TNF-α降低（P〈0.01）;与P4组比较,P1、P2组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达下调,TNF-α降低（P〈0.01）;与P1组比较,P2组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达下调,TNF-α降低（P〈0.01）。病理检查显示P1、P2、P4组肝组织结构损伤明显小于IR组。结论丙泊酚后处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤的机制可能与下调TLR4、NF-κB的表达,降低肝组织炎症反应有关。     

美金刚对脂多糖致 C57 BL／6 J 小鼠空间学习记忆能力下降的影响

目的：认知功能障碍的发病机制尚不明确。探讨美金刚对脂多糖所致C57BL／6J小鼠空间学习记忆能力的影响。方法36只C57BL／6J小鼠随机列表法分为对照组、脂多糖组、美金刚组,每组12只。3组分别连续7 d腹腔注射等容量等渗盐水,脂多糖和美金刚混合溶液。于第8天进行Morris水迷宫实验,记录登台潜伏期及平均靶象限活动时间。取海马组织测定淀粉样蛋白β（amyloid βprotein, Aβ）、糖原合成激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β）及雷帕霉素靶蛋白（mammalian tar-get of rapamycin, mTOR）的含量。结果脂多糖组较对照组登台潜伏期显著延长[（71．01±13．21）s vs （50．56±9．89）s, P＜0．05]、平均靶象限活动时间显著缩短[（42．58±7．85） s vs （63．74±12．43） s, P＜0．05]、海马Aβ及GSK-3β表达显著增加[（1．75±0．43） vs （1．27±0．23）,（184．0±18．6）％ vs （100．0±12．1）％, P＜0．05],但mTOR明显下降[（75．0±13．5）％ vs （100．0±10．3）％, P＜0．05];美金刚组较脂多糖组登台潜伏期显著缩短[（61．45±7．65）s vs （71．01±13．21）s, P＜0．05]、平均靶象限活动时间显著延长[（58．25±9．02）s vs （42．58±7．85）s, P＜0．05]、海马Aβ及GSK-3β、mTOR明显下调[（1．35±0．28） vs （1．75±0．43）,（92．4±10．8）％vs （184．0±18．6）％,（97．0±14．3）％vs （75．0±13．5）％, P＜0．05]。结论美金刚可改善脂多糖所致小鼠空间学习记忆能力下降,可能与海马组织中GSK-3β及mTOR的表达变化有关。     

卡介苗、卡介苗多糖核酸对肺炎大鼠肺Toll样受体mRNA的影响

目的探讨卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）、卡介苗（BCG）对肺炎大鼠肺TLR2、TLR4mRNA表达的影响。方法57只大鼠随机分为肺炎模型组（PM组，n=51）及健康对照组（HC组，n=6）．第4天PM组随机抽取6只（非吸入组，NI组）进行相关检查确定肺炎模型是否制作成功。然后肺炎模型组45只肺炎大鼠再随机分成生理盐水组（NS组）、卡介苗组（BCG组）、卡介苗多糖核酸组（BCG-PSN组）。每组又按吸入次数分为3次、5次、7次组。采用RT-PCR方法研究肺炎大鼠肺TLR2mRNA、TLR4mRNA的表达，以及肺炎时雾化吸入前后肺TLR2mRNA、TLR4mRNA表达。结果肺炎第4天，肺TLR2mRNA、TLR4mRNA表达与HC组相比无统计学差异。吸入BCG-PSN5次时，TLR2mRNA表达与HC组相比P〈0．05，7次时P〈0．01；与NI组及NS组相比吸入BCG-PSN7次时P〈0．05。吸入BCG3次时，TLR2mRNA表达与HC组、NI组、NS组相比，P〈0．05，吸入5次、7次时，P〉0．05。同组间吸入BCG或BCG-PSN5次，7次时TLR4mRNA表达略增强，但无统计学差异（P〉0．05）。结论BCG、BCG-PSN能使肺炎大鼠肺TLR2mRNA表达明显增强，但BCA3-PSN较BCG起效慢、作用强、持续时间长，而且也不能使肺炎大鼠肺TLR4mRNA表达增强。     

白头翁醇提物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎细胞免疫调节的研究

目的探讨白头翁醇提取物对三硝基苯磺酸（TNBS）诱导大鼠结肠炎的抗炎效果和对细胞免疫的调节。方法SD雄性大鼠28只,随机分成白头翁组（n-10）,模型组（n-10）,对照组（n-8）。白头翁组（n-10）和模型组建立TNBS大鼠结肠炎模型。白头翁组和模型组大鼠,用舍30mgTNBS的TNBS50％乙醇溶液0．85m1灌肠,对照组给予等量生理盐水灌肠。造模后白头翁组大鼠用白头翁醇提物灌肠,每天1次,模型组和对照组以等量生理盐水灌肠。造模后第8天断颈处死大鼠,进行疾病活动指数（DAI）和组织学损伤评分,ELISA法测定结肠组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平。免疫组化学法检测结肠及脾脏组织CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞的表达。结果白头翁组DAI和组织学损伤评分较模型组低（P〈0．01）。结肠组织TNF-α、IL-6水平白头翁组低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。白头翁组结肠组织CD4^＋T细胞表达低于模型组（P〈0．05）,而CD8^＋T细胞表达高于模型组（P〈0．05）。白头翁组脾脏组织CD8^＋T细胞表达高于模型组（P〈0．05）。结论白头翁醇提物对TNBS诱导大鼠结肠炎有抗炎作用,可能是通过对CD4^＋T、CD8^＋T细胞的免疫调节,促使细胞因子和炎症介质水平降低,而达到抗炎效果。     

铜绿假单胞菌脓毒症大鼠肝组织中TLR4／SIGIRR的表达与静脉血中IL-6和IL-12水平的变化

目的探讨铜绿假单胞菌（P—seudomonasaeruginosa,PA）脓毒症肝组织中单免疫球蛋白白细胞介素-1受体相关蛋白（SingleimmunoglobinIL-1receptorrelatedprotein,SIGIRR）表达对TLR4的表达及IL-6、IL-12合成的影响。方法将60只SD级大鼠随机分为两组,对照组lO只不做处理,试验组50只再细分为5组,分别在腹腔内注射PA,构建PA脓毒症模型;对照组、试验组分别于注射PA1h、2h、4h、8h、12h后无菌取肝脏,下腔静脉无菌抽血。采用实时荧光定量PCR仪检测肝组织中TLR4、SIGIRR的mRNA相对含量;采用双抗夹心ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-12浓度。结果试验组TLR4表达均大于对照组（P〈0．05）,但试验组各组间TLR4表达差异无统计学意义（P〉0．05）;1h组、2h组、4h组IL-6、IL-12水平均低于对照组（P〈0．05）,8h组、12h组IL-6、IL-12水平均高于对照组（P〈0．05）,组间差异比较具有统计学意义（P〈0．05）。结论SIGIRR的上调表达可抑制大鼠血清IL-6、IL—12的产生,但对TLR4表达无影响,提示SIGIRR对TLR4信号通路的负调节作用不是通过直接抑制TLR4表达实现的。     

TLR4对脑缺血再灌注小鼠海马IRF-3和IFN-β表达的影响

目的探讨Toll样受体4（TLR4）对脑缺血再灌注小鼠海马IRF-3和IFN—β表达的影响。方法采用TLR4抗体封闭阻断TLR4,Westernblot检测海马TLR4、IRF-3和IFN—β表达变化。小鼠随机分为3组：假手术组（s组）、缺血再灌注组（I组）、TLR4阻断组（T组）,各组又分1天、2天、3天、4天4个时间点组。结果缺血再灌注组TLR4、IRF-3和IFN—β表达水平明显高于假手术组表达水平（P〈0．05）,而TLR4阻断组表达水平明显少于缺血再灌注组（P〈0．05）。结论缺血再灌注可激活TLR4,并引起IRF-3和IFN-β表达量增加,而采用TLR4抗体封闭阻断TLR4后,IRF-3和IFN—β表达量减少。提示TLR4通过上调IRF-3和IFN—β表达参与脑缺血再灌注的反应机制。     

Toll样受体系统在肾脏衰老中的表达变化

目的观察Toll样受体（TLRs）系统在肾脏衰老中的表达变化。方法用免疫印迹和实时定量PCR（qRT—PCR）技术分析3月龄组（青年组,n=20）、12月龄组（中年组,n=20）和24月龄组（老年组,n=20）大鼠肾脏中TLRs系统分子、核转录因子（NF—κB）信号通路分子以及炎症因子包括趋化因子配体3（CCL3）、CCL4、CCL5、CD80、肿瘤坏死因子-d（TNF—α）和白细胞介素-12b（IL-12b）的表达变化情况。结果①12月龄组和24月龄组体重[（466．86±32．62）、（617．8±57．34）g]、肾重[（43．25±0．50）、（5．01±1．00）g]、三酰甘油（TG）[（2．32±0．46）、（3．22±0．82）mmol／L]和尿蛋白／肌酐比值[（164．81±38．31）、（256．00±49．39）mg／mmoL]高于3月龄组[（236．3±12．28）g、（1．67±0．68）g、（1．20±0．32）mmol／L、（146．01±22．72）mg／mmoLl,差异有统计学意义（P〈0．05）;24月龄组大鼠血尿素氮（BUN）水平[（6．86±1．10）mmol／L]高于3月龄组[（5．73±0．47）mmol／L1,差异有统计学意义（P〈0．05）;而血肌酐（SCR）、血糖（GLU）和胆固醇（CrtOL）水平三组差异无统计学意义（P〉0．05）。24月龄组肾重I（5．01±1．00）g]和尿蛋白／肌酐比值[（256±49．39）mg／mmoL]高于12月龄组[（3．25±0．50）g、（164．81±38．31）mg／mmoL],差异有统计学意义（P〈0．05）。②12月龄组和24月龄组TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLRll表达水平均高于3月龄组,24月龄组TLRl和TLR3水平高于3月龄组,24月龄组TLR9水平高于3月龄组,差异均有统计学意义（P〈0．05）：三组TLR6、TLR7、TLRl0水平差异无统计学意义（P〉0．05）;TLR8未检测到。24月龄组TLRl：TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLRll水平高于12月龄组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。③12月龄组和24月龄组IK—Ba和活化的磷酸化NF—κBp65（Phospho—NF—κBp65）水平高于3月龄组,差异有统计学意义（P〈0．05）;24月龄组NF—κBp65水平高于3月龄组,差异有统计学意义（P〈0．05）。24月龄组NF—κBp65和Phospho—NF—κBp65水平高于12月龄组,差异有统计学意义（P〈0．05）。④24月龄组CCL3、CCL4、CCL5、CD80、TNF—d和IL-12b水平高于3月龄组,差异有统计学意义（P〈0．05）;12月龄组CD80和IL-12b水平低于3月龄组,差异有统计学意义（P〈0．05）。24月龄组CCL3、CCIA、CCL5、CD80、TNF-仅和IL-12b高于12月龄组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TLRs系统可能通过激活NF—κB信号通路、促进炎症因子的表达而在肾脏衰老过程中发挥重要作用。     

TLR4对脑缺血再灌注小鼠海马IRF－3和IFN—β表达的影响

目的探讨Toll样受体4（TLR4）对脑缺血再灌注小鼠海马IRF-3和IFN—β表达的影响。方法采用TLR4抗体封闭阻断TLR4,Westernblot检测海马TLR4、IRF-3和IFN—β表达变化。小鼠随机分为3组：假手术组（s组）、缺血再灌注组（I组）、TLR4阻断组（T组）,各组又分1天、2天、3天、4天4个时间点组。结果缺血再灌注组TLR4、IRF-3和IFN—β表达水平明显高于假手术组表达水平（P〈0．05）,而TLR4阻断组表达水平明显少于缺血再灌注组（P〈0．05）。结论缺血再灌注可激活TLR4,并引起IRF-3和IFN-β表达量增加,而采用TLR4抗体封闭阻断TLR4后,IRF-3和IFN—β表达量减少。提示TLR4通过上调IRF-3和IFN—β表达参与脑缺血再灌注的反应机制。     

TLR2和TLR4在生殖器疱疹患者外周血白细胞上的表达

目的探讨Toll样受体2和4（Toll—likereceptor,TLR2、TLR4）的表达在生殖器疱疹发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测32例生殖器疱疹患者及22例正常人外周血淋巴细胞、单核细胞和粒细胞表面TLR2和TLR4的表达。结果TLR2和TLR4在外周血单核细胞上的表达相对较高,而在淋巴细胞和粒细胞上的阳性率平均值均低于5％;患者和对照组相比,各细胞表面TLR2的表达水平无显著差异（P＞0．05）,TLR4在两组淋巴细胞上表达水平无显著差异（P＞0．05）,患者TLR4在单核细胞上的表达水平为（18．49％±10．01）％。显著高于对照组（8．02％±5．37）％（P〈0．001）;患者TLR4在粒细胞细胞上的表达水平为（1．90％±1．46）％,比对照组的（0．45％±0．25）％明显升高（P〈0．001）。结论单核细胞和粒细胞表面的TLR4在对病毒识别、增强特畀陡的信号传导、启动抗病毒的固有免癌反应中起着重要作用。     

鞘内注射丹参酮ⅡA对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓水平炎症因子的影响

目的探讨鞘内注射丹参酮ⅡA对骨癌痛小鼠热痛觉过敏及脊髓水平白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-理（TNF-仅）表达的影响。方法C3H／HeNCrlVr雄性小鼠84只,应用随机数字表法分为：（1）丹参酮IIA10μg组;（2）丹参酮IIA20μg组;（3）丹参酮IIA40μg组;（4）正常组;（5）DMSO＋Sham组;（6）丹参酮IIA＋Sham组;（7）DMSO＋Tumor组。用热辐射刺激仪测定缩足潜伏期（PWTL）。应用Real．timePCR技术检测mRNA表达。结果各组小鼠基础PⅥ吼差异无统计学意义（P〉0．05）。术后14d,与正常组相比,假手术组PwTL差异无统计学意义（P〉0．05）,而骨癌痛组PWTL明显降低（P〈0．05）。术后21d,和正常组相比,丹参酮IIA＋Sham组、DMSO＋Sham组PwTL和脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达差异均无统计学意义（P〉0．05）;DMSO＋Tumor组PWTL[（6．19±1．26）s]明显低于正常组[（16．01±1．59）s]（P〈0．05）,脊髓IL—1β、IL-6、TNF—α表达则高于正常组;丹参酮IIA20μg组[（9．83±1．26）s]、丹参酮IIA40μg组[（10．29±2．95）s]PWTL高于DMSO＋Tumor组,脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达则低于DMSO＋Tumor组（P〈0．05）;丹参酮IIA10μg组PwTL[（6．67±0．96）S]、脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平与DMSO＋Tumor组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论鞘内注射丹参酮ⅡA具有剂量依赖性抗癌痛作用,抑制脊髓水平表达释放炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α可能是其机制之一。     

脾动脉血流减少对门静脉高压大鼠脾脏TLR4及巨噬细胞吞噬活性的影响

目的 观察脾动脉血流减少对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）表达和巨噬细胞（Macrophage,Mφ）吞噬活性的影响.方法 肝硬化门静脉高压大鼠模型诱导成功后随机分为肝硬化组（MCG组）、脾动脉缩窄组（SAC组）和脾动脉结扎组（SAL组）,每组10只,另10只正常大鼠为对照组（NCG组）.术后4周处死大鼠,用免疫组化法测定脾脏TLR4表达量,鸡红细胞吞噬实验检测脾脏Mφ吞噬活性,就脾脏TLR4表达量和Mφ吞噬活性进行相关分析.结果 脾脏TLR4表达量：MCG组明显高于NCG组[（210.83±42.57）vs（63.08 ±18.53）],差异有统计学意义（P〈0.01）;SAC组（180.03±29.67）、SAL组（170.83±32.65）,均明显低于MCG组.差异有统计学意义（均P〈0.05）.脾脏Mφ吞噬率和吞噬指数：MCG组明显高于NCG组[（35.83%±4.95%）vs（17.32%±3.51%）]、[（0.63±0.12）vs（0.22±0.08）],差异有统计学意义（均P〈0.05）;SAC组（23.46%±3.31%）、（0.29±0.05）和SAL组（22.34%±2.95%）、（0.23±0.07）,均明显低于MCG组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.脾脏Mφ吞噬率、吞噬指数与TLR4表达量呈显著正相关（均P〈0.01）.结论 肝硬化门静脉高压大鼠脾脏TLR4表达量增高,Mφ吞噬活性增强,脾动脉缩窄和结扎能减弱脾脏Mφ吞噬活性,这可能与术后脾脏TLR4表达量减少有关.     

L-精氨酸减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制研究

目的研究L-精氨酸（L-Arg）减轻急性出血坏死性胰腺炎（SAP）肺损伤的机制。方法采用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠（TAC）制造SAP模型,动物分为假手术组、SAP组、氯喹阻断组和L-Arg治疗组。计算肺组织学评分和肺损伤指数以评价肺损伤程度,荧光实时定量-PCR方法检测肺组织TLR2/4 mRNA表达变化。结果与假手术组（0.013±0.209E-2,0.110±0.742E-2）比较,SAP组肺组织TLR2和TLR4 mRNA表达明显增高（1.045±1.741E-2,2.067±1.914 E-2,P〈0.01）,肺损伤加重,肺组织TNF-α浓度升高（P〈0.05或P〈0.01）;氯喹阻断TLR2/4 mRNA表达后（0.478±7.412E-2,0.012±1.513 E-3,P〈0.01）,肺损伤程度减轻,肺组织TNF-α浓度降低（P〈0.05或P〈0.01）。给予L-Arg治疗后,TLR2/4 mRNA表达降低（0.260±0.891E-2,0.732±5.135 E-2,P〈0.01）,肺损伤程度减轻,肺组织TNF-α浓度降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论SAP时,肺组织内TLR2和TLR4表达上调。肺组织内TLR2和TLR4的表达增高可能在SAP肺损伤的发生、发展中起重要的作用。L-Arg可以通过抑制TLR2/4表达从而减轻肺损伤。     

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠海马CalpainI-Cdk5／p25通路表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠海马CAl区CalpainI-Cdk5／p25通路表达的影响。方法小鼠随机分为假手术组、模型组和盐酸多奈哌齐治疗组。分别于脑缺血一再灌注后第4周、6周和第8周应用免疫组化观察海马CAl区CalpainI的表达,Western-blot方法测定Cdk5／p25的表达。结果术后4周、6周和8周时模型组小鼠海马CAl区CalpainI的表达分别为（0．098±0．009）、（O．129±0．01）、（0．116±0．01）,显著高于假手术组的（0．03±0．003）、（0．031±0．003）、（0．029±0．003）（P〈0．05）;模型组Cdk5的表达为（0．54±0．05）、（0．73±0．07）、（0．7±0．06）,假手术组为（0．23±0．02）、（0．31±0．02）、（0．33±0．02）,差异有显著性（P〈0．05）;模型组p25的表达分别为（0．44-4-0．04）、（0．51±0．04）、（0．55±0．06）,显著高于假手术组的（0．19±0．02）、（0．24±0．02）、（0．2±0．02）（P〈0．05）。多奈哌齐治疗组小鼠在术后4周、6周和8周时海马CAl区CalpainI表达为（0．041±0．004）、（0．054-4-_0．004）、（0．046±0．003）,较模型组显著降低俨〈0．05）,Cdk5的表达为（0。28±0．02）、（0．33±0．03）、（0。38±0．02）,p25的表达为（0．26±0．02）、（0．25±0．03）、（0,21±0,02）,分别显著低于模型组小鼠（P〈0．05）。结论盐酸多奈哌齐改善小鼠学习和记忆的能力可能与其降低CalpainI-Cdk5／p25通路的表达有关。