诃子制草乌的炮制工艺研究

目的 以乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量为指标,优化得到诃子制草乌的炮制工艺;并尝试用特征图谱的方法,分析炮制品的质量.方法 建立测定草乌中3种乌头碱含量的HPLC法和测定草乌特征图谱的方法,根据《蒙药炮制学》中记载的工艺进行单因素、正交试验和验证试验,优化炮制工艺,同时,对生品和不同炮制品进行特征图谱的分析,考察相似...     

蒙药“诃子解草乌毒”的配伍比例研究

目的:探讨蒙药"诃子解草乌毒"的最佳配伍比例。方法:将40只大鼠随机分为空白对照组(0.05%羧甲基纤维素钠溶液)、生草乌组(以生药量计0.12 g/kg)和生草乌-诃子(1∶3、1∶1、3∶1,质量比)组(生草乌给药量以生药计均为0.12 g/kg),每组8只;每天灌胃给药1次,连续给药28 d;末次给药0.5 h后,测定大鼠血清中肌钙蛋白(cTn-I)、肌红蛋白(MB)含量,并观察其心脏病理结构变化,以考察诃子对草乌致心脏毒性的解毒作用。采用平衡透析法并联合液质联用技术测定草乌中3种乌头碱(乌头碱、新乌头碱和次乌头碱,质量浓度均为5、10、20、40、80、160、400 ng/mL)与正常人血浆的血浆蛋白结合率;然后固定3种乌头碱的质量浓度均为100 ng/mL,考察加入不同比例诃子中主要解毒成分单宁酸后(3种乌头碱与诃子的质量比均分别为1∶0.025、1∶0.075、1∶0.1、1∶0.5),对3种乌头碱血浆蛋白结合率的影响,以考察诃子解草乌致心脏毒性的可能机制。结果:在解毒实验中,与空白对照组比较,生草乌组大鼠血清中cTn-I、MB含量显著升高(P<0.05),心肌组织出现细胞排列紊乱、细胞固缩、胞浆炎染等明显病理结构改变。与生草乌组比较,生草乌-诃子(1∶3、1∶1、3∶1)组大鼠血清中cTn-I、MB含量均显著降低(P<0.05),并且生草乌-诃子(3∶1、1∶1)组含量与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05);心肌组织病变都得到不同程度改善,其中生草乌-诃子(3∶1)组大鼠心肌组织结构与空白对照组相似。在机制考察试验中,在不同质量浓度下,草乌中3种乌头碱与正常人血浆的血浆蛋白结合率均约为30%,差异均无统计学意义(P>0.05),且无明显的浓度依赖性;加入单宁酸后草乌中3种乌头碱的血浆蛋白结合率均不同程度降低,当3种乌头碱与单宁酸按1∶0.1、1∶0.075、1∶0.5比例配伍时,血浆蛋白结合率显著降低(P<0.05),且有配伍比例的依赖性。结论:生草乌-诃子(3∶1)配伍使用对草乌致心脏毒性的解毒效果最好;在此配伍比例下,草乌中3种乌头碱与正常人血浆的血浆蛋白结合率相对较高,游离药物浓度相对较低。     

HPLC测定草乌与贝母配伍后乌头碱类成分含量的变化

目的探讨生草乌与贝母不同配比在煎煮过程及体外模拟消化环境中乌头碱类成分的变化规律。方法采用HPLC法,测定生草乌与浙贝母不同配比水煎液及其经人工胃、肠液解离后的溶液中乌头碱及其水解产物焦乌头碱、苯甲酰乌头碱和苯甲酸的含量。结果除草乌贝母(2∶1)合煎液外,草乌贝母不同配比合煎或单煎后混合溶液中乌头碱的含量均较草乌单煎液明显提高。经人工胃肠液处理后各配伍液中乌头碱类成分的含量明显降低,但水解产物焦乌头碱、苯甲酰乌头碱与乌头碱的构成比较处理前明显提高。结论草乌与贝母一定比例下的配伍,毒性成分明显增大,证实了"草乌反贝母"的科学性。     

诃子制草乌模拟炮制品在人工胃液与肠液中的水解行为研究

目的:研究诃子制草乌模拟炮制品在人工胃液与肠液中的水解行为,明确二者相互作用机制,为诃子制草乌的炮制减毒提供依据。方法:采用高相液相色谱(HPLC)法测定诃子制草乌在人工胃肠液中孵育不同时间(胃液中孵育2 h,肠液中孵育5、6、7、8 h)后其降解产物乌头碱、苯甲酰乌头原碱和苯甲酸的含量。结果:诃子制草乌中乌头碱含量在人工胃液中减少,在人工肠液中明显回升,在人工肠液孵育6~8 h时含量稳定;诃子制草乌中苯甲酰乌头原碱在人工胃液中未测得,在人工肠液中测得;诃子制草乌中苯甲酸在人工胃肠液中含量变化呈先递增再递减的趋势,且在人工肠液中孵育6 h时达最大值,7~8 h时维持稳定。结论:诃子制草乌炮制过程中鞣质与乌头碱可能结合生成难溶性物质,胃肠液p H对游离乌头碱的释放和水解有一定影响,人工胃液酸性环境对其水解有抑制作用,而人工肠液碱性环境对其水解有促进作用。     

Elisa法测定口服诃子制草乌的大鼠心肌cTn

目的:测定大鼠口服诃子制草乌的心肌钙蛋白,为临床提供安全用药实验数据。方法:Elisa法测定大鼠心肌钙蛋白T,并对实验结果进行T检验。结果:Elisa法能够早期预测大鼠口服诃子制草乌后的心脏毒性,为临床安全用药提供了可靠的早期预测。     

15例草乌中毒患者的急救体会

草乌为毛莨科植物乌头的块根。其栽培品为乌头，野生品名为草乌头，旁生块根(子根)称附子，独根称天雄，均含有毒成分乌头碱。草乌属乌头类药物，乌头类药物还包括川乌(出产于四川省一带)，别名：附子、雪上一枝蒿、短棒锤等。民间老百姓认为草乌此类药物可祛风、除湿、活络、止痛，并兼有滋补，提高机体免疫力，强身健体之功效，用此物泡酒饮用或油炙服用。在我们个旧市片区，每年缝秋末初冬，用猪肉水煮草乌(俗称大草乌)食用之风相当盛行，导致食用草乌中毒者也不少见。现将我院综合科2003年1月-2004年1月，收治15例草乌中毒患者的急救体会总结如下。     

草乌中有毒生物碱的提取分离

针对药材中乌头碱,中乌头碱、次乌头碱的提取分离方法进行了研究,本方法提取回收率与碱性苯溶液提取方法相似.方法中所用试剂成本低、毒性小,适用于乌头碱、中乌头碱、次乌头碱的提取分离以及对照品的制备.     

草乌的化学成分与药理作用研究进展

药用植物草乌为中医临床上常用中药材,多年来国内外对其进行了大量研究,涉及鉴别、炮制、药理、化学成分、毒性及临床应用等,该植物具有较大的开发潜力和应用前景.本研究通过查阅国内外大量文献,精心梳理分析,对草乌的化学成分及药理作用的研究概况进行了综述.     

生草乌和诃子制草乌细胞毒性及抗炎作用的比较研究

目的:比较生草乌和诃子制草乌的细胞毒性及抗炎作用。方法:以大鼠心肌细胞H9c2为对象,采用CCK-8法检测0.5、1、2、4、6、8、10 mg/mL生草乌和诃子制草乌作用4、8、12、24 h对细胞抑制率的影响,采用Hoechst 33258染色法观察2、4、6 mg/mL生草乌和诃子制草乌作用24 h对细胞形态学特征的影响。以小鼠巨噬细胞RAW264.7为对象,采用CCK-8法检测0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2 mg/mL生草乌和诃子制草乌作用24 h对细胞存活率的影响,采用酶联免疫吸附试验法检测0.05、0.1、0.25、0.5mg/mL生草乌和诃子制草乌对LPS致RAW264.7炎症细胞中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)释放的影响。结果:当质量浓度为0.5、1 mg/mL时,生草乌和诃子制草乌对H9c2细胞几乎均无抑制作用;当质量浓度为2 mg/mL时,诃子制草乌在各时间点对H9c2细胞的抑制率均显著高于生草乌(P<0.05或P<0.01),且作用24 h的细胞荧光强度虽强于生草乌,但其细胞核完整...     

草乌类中药的薄层鉴别及人生物碱测定

通过调查发现全国各地使用的草乌原植物较多，因此对１５种草乌类药材进行了总碱、酯碱、乌头碱及滇乌碱的含量测定，并进行了薄层鉴别。     

草乌中酯型生物碱的提取动力学

目的研究草乌中酯型生物碱提取过程的动力学机理。方法采用改良异羟肟酸铁-高氯酸铁比色法,测定不同提取温度条件下草乌提取液中酯型生物碱的含量。以Fick扩散定律为基础,建立其提取过程的动力学方程,并由此推算出提取的速率常数、活化能、半衰期等动力学函数值。结果所得的动力学模型能较好地描述草乌中酯型生物碱提取的动态过程,其表观活化能为12.33 kJ/mol。结论草乌中酯型生物碱提取过程的动力学符合一级动力学方程特征。     

高效液相色谱法测定草乌叶中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱

目的 建立以高效液相色谱法同时测定蒙药草鸟叶中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的方法.方法 Extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3 mol/L三乙胺(65:35),体积流量为0.8 mL/min,检测波长为235 nm,柱温为35℃.结果 经过方法学考察,本测定方法具有一定的专属性、准确性、重现性和可行性,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱分别在1～5、0.35～1.75、0.5～2.5 μg呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.43%、98.98%、98.82%,RSD分别为1.38%、0.89%、1.03%.结论 本方法简便、准确、分离效果好、线性范围宽、灵敏度高,可用于本品的质量控制.     

蒙药“诃子解草乌毒”减毒存效机理的代谢组学

目的：从代谢组学的角度,采用高效液相与质谱联用的方法研究诃子对于生草乌的"减毒存效"作用机制。方法：将小鼠随机（数字表法）分为空白组、生草乌组、诃子制草乌组、生草乌-诃子3∶1配伍组、生草乌-诃子1∶1配伍组、生草乌-诃子1∶3配伍组、阳性药组,按0.12 g·kg^-1的剂量给药7 d,分别进行棉球肉芽肿试验、二甲苯耳肿胀试验、醋酸扭体试验及热板试,比较每组小鼠肉芽肿胀率、耳肿胀率、扭体次数及舔足潜伏期;将大鼠按以上方法随机分组,按0.12 g·kg^-1的剂量给药4周,通过SIMCA-P软件分析生草乌导致大鼠毒性作用的生物标志物及代谢通路,通过试剂盒检测每组大鼠血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌红蛋白和肌钙蛋白的含量来评估生草乌对大鼠心脏和肝脏的毒性作用。结果：与空白组相比,各实验组都具有明显的抑制肉芽肿胀及耳肿胀效果（P<0.05）,扭体次数明显降低（P<0.05）,舔足潜伏期明显延长（P<0.05）;与阳性药组相比,结果无明显差异;生草乌导致大鼠毒性代谢通路有酰胺tRNA的生物合成,组氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢,甲烷代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢6条代谢通路;生草乌会使大鼠血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌红蛋白和肌钙蛋白的含量明显升高（P<0.05）,诃子可以降低谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌红蛋白和肌钙蛋白的含量。结论：诃子对于生草乌具有"减毒存效"的作用。     

静电离子色谱法测定草乌药材中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱含量

目的:优化《中华人民共和国药典》2015年版草乌含量测定项下方法,并测定草乌中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的含量.方法:采用Xcharge C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.05％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长235 nm.结果:新乌头碱、次乌...     

基于均匀设计的诃子制草乌特征性成分对H9c2心肌细胞毒性的影响

摘要：目的:筛选诃子制草乌特征性成分中的主要毒性作用成分和减毒作用成分。方法:采用均匀设计法安排实验,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法考察诃子制草乌中4种特征性成分的不同配比对H9c2心肌细胞存活率的影响;应用Data Processing System（DPS）数据处理软件,对不同配比的细胞存活率进行逐步回归并绘制等高线图,分析4种特征性成分对H9c2心肌细胞毒性的影响及交互作用关系;以细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞核平均荧光强度、线粒体膜电位为指标进一步对分析结果进行实验验证。结果:4种指标性成分中,存在于草乌中的新乌头碱、苯甲酰新乌头原碱均可明显降低H9c2心肌细胞存活率,以新乌头碱对毒性的贡献更大;诃子中的没食子酸、鞣花酸均可提高模型组（新乌头碱+苯甲酰新乌头原碱）细胞存活率,且没食子酸的作用强于鞣花酸。从交互作用的程度来看,具有显著降低H9c2心肌细胞存活率的交互项为新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱;而交互项新乌头碱和鞣花酸、苯甲酰新乌头原碱和没食子酸可明显提高H9c2心肌细胞存活率。实验证实,新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱共同作用,与对照组相比,细胞存活率明显降低（P<0.01）,LDH漏出率和细胞核平均荧光强度增加（P<0.01）,线粒体膜电位降低（P<0.01）;在新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱混合物中单独加入没食子酸或鞣花酸均可提高细胞存活率（P<0.01）,升高线粒体膜电位（P<0.05或P<0.01）,降低LDH的漏出和细胞核平均荧光强度（P<0.01）;同时加入没食子酸和鞣花酸,其毒性作用进一步减弱。结论:诃子制草乌中的新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱均具有一定的心肌毒性,以新乌头碱对毒性的贡献更大,两者具有协同作用;没食子酸和鞣花酸均可降低由两种乌头碱类成分产生的毒性作用,以没食子酸的减毒作用贡献更大,两者具有协同作用。     

诃子和毛诃子的本草考证

诃子和毛诃子始载于《新修本草》，分剧叫作诃梨勒和毗梨勒，为少用中药。但在菠、蒙等民族药中却是最常用药，二者和余甘子，藏人谓之“三果”。诃子眯苦、酸、涩．性平，有涩肠敛肺、降火利咽之功．在我国主产于云南、广西、广东、福建等地，多为栽培。毛诃子味苦、涩，性平，清热解毒、收敛养血、调和诸药，在我国云南有少量分布。这两种药材果实在国外如印度、缅甸、斯里兰卡、马来西亚等国有大量出产．     

草乌花及其煎煮液中二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究草乌花及其煎煮液中二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究

目的 对草乌花及其煎煮液中的二萜生物碱进行定性分析,说明煎煮前后化学成分发生的变化。 方法用注射泵自动进样,电喷雾离子阱串联质谱直接分析草乌花及其煎煮液中生物碱混合物。结果 在生草乌花中发现3个新生物碱,草乌花煎煮后其中的双酯型生物碱和三酯型生物碱都发生水解,前者水解为苯甲酰乌头原碱和乌头原碱类生物碱,后者水解为3-乙酰-乌头原碱类生物碱。结论 该法简便、快速、灵敏、特异性强,为乌头属植物煎煮液中的生物碱分析提供了新途径。     

草乌花及其煎煮液中二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究

目的对草乌花及其煎煮液中的二萜生物碱进行定性分析,说明煎煮前后化学成分发生的变化. 方法用注射泵自动进样,电喷雾离子阱串联质谱直接分析草乌花及其煎煮液中生物碱混合物.结果在生草乌花中发现3个新生物碱,草乌花煎煮后其中的双酯型生物碱和三酯型生物碱都发生水解,前者水解为苯甲酰乌头原碱和乌头原碱类生物碱,后者水解为3-乙酰-乌头原碱类生物碱.结论该法简便、快速、灵敏、特异性强,为乌头属植物煎煮液中的生物碱分析提供了新途径.     

中药饮片制川乌、制草乌中乌头碱、次乌头碱的HPLC测定

目的:建立一种测定中药饮片制川乌、制草乌中乌头碱、次乌头碱含量的高效液相色谱方法。方法:饮片粉碎成粗粉,用氨试液润湿,乙醚浸提14h,提取液挥弃乙醚,残渣以二氯甲烷溶解,定容至5mL,用0.01mol·L~(-1)H_2SO_4溶液1mL萃取等体积的二氯甲烷液,取水相进样20μL,以Kromasil C_(18)(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,甲醇-水-氯仿-三乙胺(70:30:2:0.1)为流动相,检测波长230nm,柱温为室温。结果:乌头碱在9.63-96.26μg·mL~(-1),次乌头碱在24.2-242μg·mL~(-1)范围内,线性关系良好(进样量为20μL),方法加样回收率>96%,RSD<2%。结论:该方法准确,精密度高,分离效果好,操作简单。     

兔急性草乌中毒血液灌流后的毒代动力学研究

目的：建立高效液相色谱．质谱检测兔血浆乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的方法,研究兔急性草乌中毒血液灌流后的毒代动力学。方法：普通级健康成年雄性日本大耳白兔8只,体重（2．5±0．2）kg,予草乌酒1．0mL／kg灌胃（i．g．）染毒,染毒后0．25h予血液灌流2h。分别于染毒后0．5、1、1．5、2、3、4、6、12、24h取血浆。以高效液相色谱．质谱法检测血浆新鸟头碱、乌头碱、次乌头碱的浓度。应用DAS2．0程序计算毒代动力学参数。结果：急性草乌中毒血液灌流后,新乌头碱毒代动力学参数为：tmax（3．1±0．8）h、Cmax（11．5±2．1）μg／L、Ka（1．6±0．9）h、Ke（0．13±0．05）h、t1/2（5．9±1．7）h、V/F（85．4±20．9）L／kg、CL／F（10．28±1．46）L·h～·kg～;乌头碱毒代动力学参数为：tmax（3．2±0．5）h、Cmax（18．7±5．5）μg／L、Ka（1．2±0．4）h、Ke（0．10±0．03）h、t1/2（7．5±2．4）h、V/F（2．7±1．0）L／kg、CL／F（0．25±0．08）L·h^-1·kg^-1;次乌头碱毒代动力学参数为：tmax（3．0±0．8）h、Cmax（14．6±11．0）μg／L、Ka（1．4±1．2）h、Ke（0．09±0．03）h、t1/2（8．3±2．1）h、V／F（10．7±6．9）L／kg、CL／F（0．85±0．38）L·h^-1·kg^-1。结论：急性草乌中毒兔血液灌流治疗后的毒代动力学呈一级吸收的一室模型。