钩藤源活性化合物对急性应激模型小鼠认知功能的影响

目的研究钩藤源活性化合物297和315对急性应激模型小鼠认知功能的影响。方法雄性BALB/c小鼠按照体质量及自主活动性随机分为正常对照组、模型组、297(20,40和80 mg·kg~(-1))组及315(20,40和80 mg·kg~(-1))组。本研究选用2种动物模型,单次皮下注射皮质酮模拟急性应激模型和强迫游泳模型。预防给药1周后造模,造模1 h后进行行为学检测及在体LTP检测。采用新物体识别实验评价认知功能,采用在体LTP实验评价突触可塑性。结果皮质酮模型:与正常对照组相比,皮质酮模型小鼠新物体识别指数显著降低;与皮质酮模型组相比,化合物297各剂量给药组及化合物315 20和80 mg·kg~(-1)组小鼠新物体识别指数均显著提高。与正常对照组相比,皮质酮模型小鼠LTP受到明显损伤;与皮质酮模型组相比,化合物297各剂量给药组及化合物315 40 mg·kg~(-1)组小鼠LTP均显著改善。强迫游泳模型:与正常对照组相比,强迫游泳模型小鼠新物体识别指数显著降低;与强迫游泳模型组相比,化合物297各剂量给药组及化合物315 20和80 mg·kg~(-1)组小鼠新物体识别指数均显著提高。结论钩藤源活性化合物297和315对急性应激模型小鼠认知功能具有明显改善作用。     

急性应激对背、腹侧海马成年神经再生的影响

目的考察急性应激对背、腹侧海马成年神经再生的影响。方法给予C57BL/6J小鼠单次皮下注射皮质酮急性应激造模,剂量为50,100 mg·kg~(-1)。皮质酮注射1周前给予小鼠腹腔注射Brdu 50 mg·kg~(-1),分别于皮质酮注射后第1,7,21天灌注取脑,通过Brdu和DCX免疫荧光染色,观察急性应激对小鼠背、腹侧海马神经干细胞增殖(第1天)、分化(第7天)、迁移(第21天)、存活(第7天短时程存活、第21天长时程存活)的影响。结果皮质酮注射后第1天,与对照组相比,皮质酮100 mg·kg~(-1)组背侧海马Brdu阳性细胞数目显著减少(P<0.01),皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组背侧海马非成熟神经元DCX数目显著减少(P<0.05);但与对照组相比,皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组腹侧海马Brdu阳性细胞数目和DCX数目无显著差异。皮质酮注射后第7天,与对照组相比,皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组背侧海马Brdu阳性细胞存活数目和DCX数目无显著差异;但与对照组相比,皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组腹侧海马Brdu阳性细胞存活数目显著增加(P<0.05),皮质酮100 mg·kg~(-1)组腹侧海马DCX数目显著增加(P<0.01)。皮质酮注射后第21天,与对照组相比,50和100 mg·kg~(-1)皮质酮组背、腹侧海马Brdu阳性细胞存活数目以及迁移数目无显著差异。结论急性应激对背、腹侧海马成年神经再生影响不同。急性应激抑制背侧海马神经干细胞增殖,但对腹侧海马神经干细胞增殖无影响;急性应激对背侧海马神经干细胞分化和短时程存活无影响,但急性应激促进腹侧海马神经干细胞分化和短时程存活;急性应激对背、腹侧海马神经干细胞迁移能力和长时程存活均无影响。     

复方丹参片对APP/PS1转基因小鼠焦虑样行为的调节作用

目的探讨复方丹参片对阿尔采末病(AD)APP/PS1转基因小鼠焦虑样行为的作用及机制。方法4月龄野生型小鼠(正常组)和APP/PS1转基因小鼠分别灌胃给予溶剂(模型组)或复方丹参片低剂量(180 mg·kg~(-1))、中剂量(360 mg·kg~(-1))、高剂量(720 mg·kg~(-1))和阳性药物舍曲林(15 mg·kg~(-1))60 d后,采用Morris水迷宫实验、新奇抑制摄食实验和高架十字迷宫实验评价复方丹参片对小鼠记忆障碍和焦虑样行为学表现的影响,采用高效液相色谱法(HPLC)和ELISA分别检测小鼠前额皮质、海马和杏仁核γ-氨基丁酸(GABA)和脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。结果复方丹参片中、高剂量明显缩短小鼠找到平台的潜伏期,明显增加小鼠原有平台象限的探索时间(P<0.05,P<0.01)。高架十字迷宫试验结果显示,复方丹参片高剂量显著增加APP/PS1转基因小鼠在开臂的时间百分比和进入开臂的次数(P<0.01);新奇抑制摄食实验结果显示,复方丹参片中、高剂量显著缩短APP/PS1转基因小鼠摄食潜伏期(P<0.05,P<0.01)。HPLC和ELISA结果显示,复方丹参片中、高剂量可显著增加APP/PS1转基因小鼠不同脑区如前额皮质、海马和杏仁核GABA和BDNF含量(P<0.05,P<0.01)。结论复方丹参片改善AD转基因小鼠的学习记忆损伤和焦虑样行为,可能与增加脑组织GABA和BDNF水平有关。     

钩藤源活性化合物297和315对慢性不可预知温和应激模型小鼠的影响

目的考察钩藤源活性化合物297和315对慢性不可预知温和应激(CUMS)小鼠的影响。方法应用雄性C57BL/6J小鼠,采用CUMS造模,20 mg·kg~(-1)的297和315分别伴随灌胃给药28 d;采用糖水消耗实验评价小鼠的抑郁样行为,采用高架十字迷宫实验评价小鼠的焦虑样行为,采用水迷宫实验评价小鼠的认知功能。结果 CUMS小鼠与正常小鼠相比,在高架十字迷宫实验中进入开臂时间及次数显著降低(P<0.01),在糖水消耗实验中糖水偏好指数显著降低(P<0.01),在水迷宫实验中进入目标象限的潜伏期显著延长(P<0.05);而化合物297可显著增加CUMS小鼠进入开臂时间及次数(P<0.05)和CUMS小鼠的糖水偏好指数(P<0.05),同时显著缩短CUMS小鼠进入目标象限潜伏期(P<0.05);化合物315对CUMS小鼠焦虑、抑郁样行为和空间学习记忆功能均无显著改善作用。结论 CUMS可造成小鼠的焦虑和抑郁样行为,同时损伤小鼠的空间学习记忆功能;化合物297可显著改善CUMS小鼠的焦虑和抑郁样行为,同时可改善CUMS小鼠的空间学习记忆功能,提示化合物297可能具有抗应激作用。     

枸杞籽油对CUS致小鼠应激行为的保护作用

目的探讨枸杞籽油(LBSO)对慢性应激所致小鼠抑郁样行为和认知功能障碍的保护作用及其机制。方法采用甲酯化反应联合GC-MS法测定LBSO的脂肪酸组成和比例。采用孤养结合建立小鼠慢性不可预见性应激模型,实验动物随机分为正常组、模型组、氟西汀组(20 mg·kg~(-1))、LBSO(2. 5、5. 0、10. 0 m L·kg-1)组。旷场、悬尾、强迫游泳和Morris水迷宫实验评价小鼠抑郁样行为和学习记忆能力;ELISA法检测血清皮质酮水平; Western blot法检测海马中BDNF、CREB和p-CREB的蛋白表达。结果本次实验从LBSO样品中分离得到(Z)-9-十八碳烯酸(66. 40%)、反式-9,12-十八碳二烯酸(21. 56%)和十七碳酸(5. 82%)等5个组分。LBSO干预能够提高CUS小鼠旷场实验运动得分,缩短悬尾实验及强迫游泳实验的不动时间,缩短水迷宫实验中的逃逸潜伏期、平均潜伏距离,增加其穿越平台有效次数;降低血清皮质酮水平;增加海马内BDNF蛋白表达及p-CREB/CREB的比值。结论 LBSO可改善慢性应激小鼠的抑郁样行为和认知功能障碍,其机制可能与降低血清皮质酮水平,上调海马内CREB-BDNF信号通路关键蛋白表达有关。     

复方抗焦虑胶囊对急性应激大鼠的抗焦虑作用及对大鼠脑内ERK/CREB信号通路和BDNF表达的影响

目的研究复方抗焦虑胶囊对急性应激大鼠的药效及其对大鼠脑皮层及海马ERK/CREB信号通路、脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法采用高架十字迷宫实验,观察了复方抗焦虑胶囊低、中、高剂量(0.75、1.5、3 g·kg~(-1))给药7d对急性应激大鼠行为的影响,采用Western blot免疫印迹法研究复方抗焦虑胶囊对ERK/CREB信号通路的影响,对急性应激大鼠脑皮层及海马BDNF表达的影响。结果高架十字迷宫实验显示,复方抗焦虑胶囊高剂量组可明显增加大鼠进入开臂时间的百分数(OT%)(P<0.05)和进入开臂次数的百分数(OE%)(P<0.05)。Western blot实验显示,复方抗焦虑胶囊中剂量组明显减少了海马中p-ERK1/2的表达(P<0.05);高剂量组明显减少了大鼠皮层和海马中p-ERK1/2和p-CREB的表达(P<0.05)。高剂量组明显增加了大鼠皮层及海马中BDNF的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论复方抗焦虑胶囊在高架十字迷宫模型中具有抗焦虑作用,且其抗焦虑机制可能与影响ERK/CREB信号通路,增加BDNF表达有关系。     

圣·约翰草提取物片对创伤后应激障碍模型小鼠恐惧和焦虑行为的改善作用

目的研究圣·约翰草提取物片(ESJWT)对短暂电击所致创伤后应激障碍(PTSD)模型小鼠行为的影响,并探讨ESJWT防治PTSD的可能性。方法 48只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、舍曲林(15 mg·kg-1)和ESJWT(25 mg·kg~(-1))治疗组,每组12只;除正常对照组外其余各组小鼠连续2 d给予不可逃避的足底电击(0.8 mA,持续10 s,间隔10 s,每天15次),实验前1 h药物处理组小鼠分别ig给予盐酸舍曲林和ESJWT,每天1次,持续18 d。第3,8和15天测量小鼠僵住时间百分比和粪便量,于第16,17和18天依次对小鼠进行旷场实验、高架十字迷宫实验和爬梯实验。行为学实验结束后用ELISA测定小鼠血清去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量。结果与正常对照组相比,模型组小鼠僵住时间百分比和粪便量显著增加(P<0.01),进入旷场中央区域的次数和时间均显著降低(P<0.01),进入高架十字迷宫开臂的次数和时间均显著降低(P<0.01),爬梯实验中小鼠爬梯次数无显著性差异,但站立次数明显增加(P<0.01),提示PTSD模型制备成功。与模型组相比,舍曲林和ESJWT均能有效改善上述模型小鼠PTSD样行为(P<0.05,P<0.01),其中ESJWT治疗组小鼠在条件恐惧环境下粪便量较模型组显著减少(P<0.01)。各组小鼠血清NE和5-HT含量均无显著性差异。结论 ESJWT可有效改善PTSD模型小鼠的恐惧和焦虑等行为,有可能用于PTSD治疗。     

钩吻素子对大鼠焦虑行为的影响

目的进一步明确钩吻素子是否具有抗焦虑作用。方法以大鼠高架十字迷宫实验为动物模型,评价钩吻素子单次皮下注射给药和连续皮下注射给药的抗焦虑活性及特点。结果钩吻素子能显著增加大鼠进入高架十字迷宫开臂次数和在开臂的停留时间百分率(P<0.05,P<0.01);钩吻素子在实验剂量下对大鼠自主运动活性无影响(P>0.05)。结论钩吻素子可能具有抗焦虑作用。     

西罗莫司抗红藻氨酸诱发的未成年C57BL/6小鼠癫痫的有效剂量

目的探索西罗莫司(Sir)治疗未成年小鼠癫痫的安全有效剂量及作用。方法 10日龄的C57BL/6小鼠单次ip给予卡莫酸(红藻氨酸,KA)12.0 mg·kg-1诱导癫痫,于造模后24 h隔天分别ip给予Sir 0.3,1.0和3.0 mg·kg-1直至3 d、7 d、3周、5周和6周,采用Western蛋白印迹法检测S6蛋白表达及其磷酸化水平,确定最低有效剂量。观察Sir最低有效剂量对学习记忆和生长发育的影响,其中Doublecortin(DCX)免疫荧光染色检测海马神经元发育,Morris水迷宫测定小鼠学习记忆水平,悬尾、O迷宫和新事物认知实验测定小鼠焦虑抑郁状态。结果 Western蛋白印迹结果显示,Sir 0.3 mg·kg-1对正常小鼠和KA致痫小鼠S6蛋白磷酸化无显著影响,而1.0和3.0 mg·kg-1均可显著抑制KA致痫小鼠S6蛋白磷酸化(P<0.05)。选取Sir 1.0 mg·kg-1作为最低有效剂量。Sir 1.0 mg·kg-1对DCX表达和体质量无显著影响。Morris水迷宫结果显示,与正常对照组相比,模型组小鼠平台潜伏期和游泳距离明显延长(P<0.05),穿越平台象限次数明显下降(P<0.05),而Sir 1.0 mg·kg-1可显著逆转KA致痫模型小鼠学习记忆功能下降(P<0.05),且与正常对照组无显著差异。KA致痫模型小鼠在悬尾实验中显示悬尾不动时间明显上升(P<0.05),O迷宫实验中移动距离、开臂中停留时间以及新事物认知实验中与新事物的触碰时间、触碰频率、移动距离和速度明显缩短(P<0.05),而Sir1.0 mg·kg-1可显著逆转KA致痫模型小鼠的焦虑抑郁状态(P<0.05),且与正常对照组无显著差异。结论Sir 1.0 mg·kg-1对未成年期癫痫小鼠的m TOR信号通路异常激活和癫痫后共病形成有抑制作用,且不良反应轻微,为理想的给药剂量。     

去甲槟榔碱对慢性不可预知应激所致焦虑小鼠改善作用及机制研究

目的 采用慢性不可预知温和应激所致小鼠焦虑模型探究去甲槟榔碱的体内抗焦虑活性及潜在的作用机制。方法 采用旷场、明暗箱和高架十字迷宫等行为学方法 评价去甲槟榔碱对焦虑模型小鼠的行为影响;采用酶联免疫法检测小鼠血清皮质酮含量、血清和脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）水平以及脑组织中神经递质和炎症因子水平;Western blotting检测NMDAR、CamkII、Kalirin、Rac的表达。结果 去甲槟榔碱能显著降低模型小鼠在旷场活动中总路程、平均速度,增加小鼠活动次数;显著增加模型小鼠在明暗箱实验中的穿箱次数和明室时间（P<0.05、0.01）。去甲槟榔碱能显著减少模型小鼠在高架十字迷宫实验中进入闭臂次数和闭臂总路程（P<0.01）。去甲槟榔碱20、40mg/kg组小鼠血清皮质酮（Cort）、MDA显著降低（P<0.01、0.001）,去甲槟榔碱各剂量组小鼠SOD、CAT显著增加（P<0.05、0.001）。去甲槟榔碱各剂量组小鼠脑组织MDA含量显著降低（P<0.01、0.001）,SOD、CAT含量显著增加（P&l...     

海人酸诱导的颞叶癫痫小鼠慢性期行为学变化

目的:研究海人酸(Kainic acid)所致的颞叶癫痫小鼠慢性期行为学改变及意义。方法:用海人酸构建癫痫小鼠模型作为实验组,对照组用生理盐水处理,2个月后分别进行Morris水迷宫实验、条件恐惧实验、高架十字实验和旷场实验。结果:Morris水迷宫实验中,后3d实验组小鼠的定位航行潜伏期长于对照组(P0.01),实验组目标象限滞留时间短于对照组(P0.01);条件恐惧实验中,场景联系性记忆实验实验组小鼠僵直时间百分比小于对照组(P0.01),声音联系性记忆实验实验组小鼠僵直时间百分比小于对照组(P0.01);旷场实验中,实验组小鼠活动路程长于对照组(P0.01),实验组小鼠中间区域滞留时间短于对照组(P0.01),实验组小鼠大小便次数比对照组多(P0.01);高架十字实验中,实验组和对照组小鼠进入开臂的次数比无显著差别(P0.05),两组小鼠在开臂的活动时间比较也无差异(P0.05),但实验组小鼠进入两种臂的总次数较对照组小鼠多(P0.05)。结论:海人酸诱导的颞叶癫痫小鼠慢性期有认知功能和情绪方面的障碍。     

LW-AFC对肿瘤坏死因子α致情绪障碍小鼠模型的作用

目的肿瘤坏死因子α(TNF-α)是精神性应激和非精神性应激(如感染、疾病)致情绪障碍的主要参与因素。本实验室前期研究表明,六味地黄汤活性成分群复方LW-AFC可以改善急性及慢性应激小鼠情绪障碍,并且降低海马和皮质TNF-α水平,提示调节TNF-α表达或功能可能是LW-AFC发挥抗应激作用的重要环节。本研究拟以TNF-α致情绪障碍小鼠为模型,观察LW-AFC的作用,为进一步研究TNF-α在LW-AFC抗应激中的作用及机制奠定基础。方法将40只BALB/c小鼠按体质量、自主活动距离随机分成5组:对照组、TNF-α处理组(ip)、LW-AFC给药组、伊那西普(TNF-α拮抗剂)处理组(ip)和伊那西普对照组(ip)(每组8只)。高架十字迷宫(EPM)实验前,LW-AFC 1.6 g·kg~(-1)连续灌胃给药14 d,伊那西普2.5 mg·kg~(-1)连续腹腔注射3 d,其他各组给予等量去离子水,EPM实验前1 h,TNF-α处理组、LW-AFC给药组和伊那西普(TNF-α拮抗剂)处理组腹腔注射TNF-α0.2 mg·kg~(-1)。结果 TNF-α处理组小鼠表现出明显焦虑样行为,表现为小鼠在封闭臂时间明显增加(P<0.01),开放臂时间明显减少(P<0.01);伊那西普对照组对EPM实验小鼠无影响。LW-AFC可以改善TNF-α致模型小鼠焦虑样行为,表现为小鼠在开放臂时间延长(P<0.01),在封闭臂时间明显减少(P<0.01);伊那西普预处理与LW-AFC预防给药结果类似,有改善小鼠焦虑样行为的作用。结论六味地黄汤活性成分群复方LW-AFC可以改善TNF-α所致小鼠焦虑样情绪,提示这可能是LW-AFC对应激小鼠具有保护作用的基础之一,为进一步作用机制研究奠定了基础。     

初生雄性小鼠氯化锂染毒对其成年后神经毒性作用的研究

目的探究初生雄性小鼠氯化锂染毒对其步入成年期后的影响及其机制。方法本研究实验动物使用雄性SPF级C57BL/6 N小鼠。将小鼠随机分成3组:对照组、低剂量染毒组(4 mg/kg·bw)和高剂量染毒组(40 mg/kg·bw)。染毒组小鼠通过氯化锂水溶液经口染毒构造实验模型。造模后在小鼠2个月大小时进行旷场实验和高架十字迷宫实验,检测小鼠的行为变化,然后使用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠心脏、肝、脾、肺、肾和大脑等各个器官是否发生损伤,通过BrdU和DCX染色,观察神经再生情况。结果 HE染色结果显示小鼠肾、心脏、肝、脾和肺均无明显损伤,仅脑部海马发现细胞缺失、间质水肿等组织损伤。旷场实验结果显示,氯化锂染毒小鼠总行进距离无明显改变,但高浓度染毒组小鼠停留在中央区时间明显减少;高架十字迷宫结果同旷场实验结果一致,表明高浓度染毒组小鼠出现焦虑相关行为。BrdU和DCX染色结果显示高浓度氯化锂染毒组小鼠海马神经再生受损。结论初生雄性小鼠经40 mg/kg·bw氯化锂染毒,进入成年期后有明显的海马组织损伤,神经元再生受到抑制,并表现出焦虑样行为。     

五味子醇甲对小鼠抑郁样行为的影响

目的研究中药五味子的木脂素类成分五味子醇甲(SCH)的抗抑郁作用及其机制。方法小鼠单次ig给予SCH 5,10和30 mg·kg~(-1)后1 h,采用小鼠悬尾实验和强迫游泳实验评价其抗抑郁活性;采用自发活动实验评价其对中枢兴奋性的影响;采用利血平拮抗实验和育亨宾毒性实验评价其对中枢单胺神经功能的影响。结果在行为绝望模型中,与正常对照组相比,SCH 30 mg·kg~(-1)可显著缩短小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间(P<0.05);自发活动实验结果显示,SCH在受试剂量范围内对中枢神经系统无兴奋或抑制作用;在利血平拮抗实验中,与模型组相比,SCH 30 mg·kg~(-1)可拮抗利血平(2.5 mg·kg~(-1),ip)引起的小鼠眼睑下垂和运动不能(P<0.05),对肛温下降无显著影响;在育亨宾毒性实验中,SCH各剂量对育亨宾阈致死剂量(30 mg·kg~(-1),sc)引起的小鼠死亡率无显著影响。结论 SCH具有潜在的抗抑郁药理活性。     

SZY改善氧化应激致认知障碍的作用

目的探讨山茱萸单体化合物SZY对氧化应激致认知障碍的影响。方法采用2月龄雄性昆明小鼠,按体质量随机分为对照组、模型组、SZY(3,12.5和50 mg·kg~(-1))组、阳性药多奈哌齐(1 mg·kg~(-1))及石杉碱甲(0.1 mg·kg~(-1))组,每组15只。模型组每日颈背部皮下注射D-半乳糖(100 mg·kg~(-1)),对照组颈背部皮下注射等体积生理盐水,给药组连续等体积灌胃给药8周后通过Morrris水迷宫、新物体识别、避暗实验、旷场实验观测小鼠行为变化;通过血清内氧化相关指标(SOD,MDA,GSH-Px和T-AOC)来判断小鼠受氧化损伤程度;通过脑内乙酰胆碱(ACh)含量、乙酰胆碱酯酶(AChE)水平以及病理切片(HE、尼氏染色)检测小鼠大脑神经元受损伤程度。结果研究发现,与对照组小鼠相比,模型组小鼠空间和非空间认知功能均受到不同程度损伤;血清内氧化水平升高,抗氧化水平明显降低;ACh E水平升高,ACh含量下降;脑部神经元丢失明显,且具有显著性差异(P<0.05),给药SZY后损伤有所改善,与模型组相比具有显著性差异(P<0.05),并且具有一定的剂量依赖性,在剂量为12.5 mg·kg~(-1)条件下效果最为显著。结论 SZY对D-半乳糖所致小鼠学习记忆障碍有明显的改善作用,而这种作用可能是通过抑制氧化应激引起的神经细胞凋亡而发生的。     

金丝桃苷对慢性不可预知温和刺激大鼠抑郁行为的影响

目的研究金丝桃苷对慢性温和不可预知应激(CUMS)大鼠抑郁样行为的影响。方法大鼠随机分空白组,模型组,金丝桃苷低(5 mg·kg~(-1))、中(10 mg·kg~(-1))、高(15 mg·kg~(-1))剂量组和氟西汀(10 mg·kg~(-1))对照组,每组10只。采用慢性温和不可预知应激进行为期6周的造模,在造模第3周后给药,持续给药3周。采用糖水偏爱实验、旷场实验和强迫游泳实验观察金丝桃苷的抗抑郁样作用;通过检测海马活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性观察金丝桃苷的抗氧化应激作用;通过检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)水平以及海马糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平观察金丝桃苷对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。结果与空白组相比,糖水偏爱实验中模型组大鼠糖水偏爱度明显降低、旷场实验中穿越格子数以及直立次数明显减少、强迫游泳试验中不动时间明显增加(均P<0.01),而在给予金丝桃苷中、高剂量以及氟西汀后均能得到不同程度的逆转(P<0.05,或P<0.01);模型组大鼠的海马ROS和MDA含量以及血清CRH、ACTH和CORT水平明显升高、海马SOD活性与GR蛋白表达明显降低(均P<0.01),而在给予金丝桃苷中、高剂量以及氟西汀后均能得到不同程度的逆转(P<0.05,或P<0.01)。结论金丝桃苷能够改善CUMS大鼠的抑郁样作用,其作用与降低海马氧化应激水平及对HPA轴的调节作用相关。     

3,6'-二芥子酰基蔗糖联合tenuifoliside A协同抗抑郁作用及其机制的研究

目的研究远志中3,6'-二芥子酰基蔗糖(DISS)和tenuifoliside A(TFSA)协同抗抑郁作用及其初步作用机制。方法采用经典的行为绝望抑郁模型——小鼠悬尾实验,随机分为对照组、阳性药组、DISS 5、10 mg·kg~(-1)、TFSA 5、10mg·kg~(-1)、DISS 5 mg·kg~(-1)+TFSA 5 mg·kg~(-1)、DISS 5 mg·kg~(-1)+TFSA 10 mg·kg~(-1)、DISS 10 mg·kg~(-1)+TFSA 5 mg·kg~(-1)和DISS 10 mg·kg~(-1)+TFSA 10 mg·kg~(-1);灌胃给药7 d,观察DISS和TFSA单体及其合用对小鼠悬尾不动时间的影响;免疫组织化学方法检测小鼠海马及皮层内BDNF的表达;蛋白质印记法检测小鼠海马内CRTC1、CREB、p-CREB及BDNF的表达。结果 DISS和TFSA及其二者合用均可缩短悬尾小鼠的不动时间,其中DISS(10 mg·kg~(-1))和TFSA(10 mg·kg~(-1))组与单剂量药物组相比明显,并稳定缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.05)。免疫组化实验中,DISS和TFSA及其合用组均可提高海马及皮层内BDNF的表达量(P<0.05),同时DISS和TFSA及其合用组可增加海马中CRTC1、CREB、p-CREB及BDNF蛋白的含量,其中合用组明显高于单药组(P<0.05)。结论 DISS与TFSA双药合用启动CREB共转录因子CRTC1,激活海马内CREB的磷酸化,进而增加其下游BDNF表达,发挥协同抗抑郁作用。     

小鼠海马糖原合成酶激酶3β过表达对小补心汤总黄酮抗抑郁和抗焦虑作用的影响

目的评价小鼠海马糖原合成酶激酶3β(GSK3β)过表达对小补心汤总黄酮(XBXT-2)抗抑郁和抗焦虑作用的影响。方法小鼠海马立体定位微注射包装有GSK3β(S9A)突变型基因的腺相关病毒(AAV)制备小鼠GSK3β过表达模型,3周后采用Western蛋白印迹法检测GSK3β和磷酸化GSK3β(S9)〔pGSK3β(S9)〕含量,采用开场实验检测小鼠自发活动。而后将空载体AAV组和GSK3β过表达组小鼠各自分为给药组和溶剂组,分别ig给予XBXT-2 100 mg·kg~(-1)或同体积蒸馏水,每天1次,分别于给药14和16 d采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,18和20 d采用高架十字迷宫实验和爬梯实验检测小鼠焦虑样行为。结果 Western蛋白印迹法检测结果显示,与AAV组相比,GSK3β过表达组小鼠海马GSK3β含量显著升高(P<0.01),p-GSK3β(S9)含量无显著性差异。在开场实验中,GSK3β过表达组与AAV组间小鼠跨格次数和站立次数无显著差异。在小鼠悬尾和强迫游泳实验中,AAV+XBXT-2组与AAV组比较,小鼠不动时间显著缩短(P<0.05,P<0.01);GSK3β过表达+XBXT-2组与GSK3β过表达组比较,小鼠不动时间无明显差异。在高架十字迷宫实验中,与AAV组比较,AAV+XBXT-2组小鼠进入开臂次数百分比和开臂停留时间百分比显著增加(P<0.01,P<0.05);与GSK3β过表达组比较,GSK3β过表达+XBXT-2组小鼠上述行为指标无明显改变。在爬梯实验中,AAV+XBXT-2组比AAV组小鼠爬梯站立次数显著减少(P<0.05);GSK3β过表达+XBXT-2组与GSK3β过表达组比较,小鼠站立次数无明显差异。结论海马脑区GSK3β过表达可取消XBXT-2在小鼠悬尾和强迫游泳实验中的抗抑郁作用及在高架十字迷宫实验和爬梯实验中的抗焦虑作用。     

槲皮素通过SIRT1/NLRP3通路改善db/db糖尿病模型小鼠的认知功能障碍

目的流行病学研究发现,糖尿病与认知功能障碍密切相关。槲皮素已被证实具有改善糖尿病和认知障碍功能,但是其相关机制仍然不清楚。本研究采用db/db糖尿病模型小鼠,探讨槲皮素是否可以通过SIRT1/NLRP3途径来改善糖尿病模型小鼠的认知功能障碍。方法将10月龄的雌性db/db小鼠随机分成3组(每组8只),模型组、槲皮素低剂量组(35 mg·kg~(-1))和槲皮素高剂量组(70 mg·kg~(-1));相同月龄雌性野生型db/m小鼠8只设为正常对照组。连续给药12周后进行学习记忆相关的行为学检测(Morris水迷宫测试和新物体识别测试)、葡萄糖耐量OGTT和胰岛素耐量ITT。行为学测试结束,取材,免疫印迹检测小鼠脑中神经和突触相关蛋白及SIRT1/NLRP3通路相关蛋白的表达。结果 Moriss水迷宫实验结果显示,槲皮素组较模型组逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台的次数和目标象限停留的时间显著提高(P<0.05);新物体识别实验结果显示槲皮素组较模型组对于新物体的识别指数明显提高(P<0.05),表明槲皮素能够增加db/db小鼠的学习记忆能力。同时,胰岛素耐量实验和葡萄糖耐量实验结果显示,槲皮素组较模型组胰岛素抵抗和空腹血糖水平显著降低(P<0.05)。蛋白质印迹分析还表明,槲皮素组较模型组小鼠脑中神经和突触相关蛋白(PSD93,PSD95,BDNF和NGF)的表达显著增加(P<0.01,P<0.05),同时槲皮素还显著改善了SIRT1的蛋白质表达(P<0.05),降低了NLRP3炎症相关蛋白(NLRP3,ASC,Cleaved Caspase-1,IL1β,IL18)的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论 SIRT1/NLRP3通路可能是槲皮素对糖尿病脑病神经保护作用的关键机制。     

芳香烃受体对皮质酮致LTP损伤作用影响的初步研究

目的研究芳香烃受体(AhR)对皮质酮所致长时程增强(LTP)损伤的影响。方法将体质量18～22 g雄性BALB/c小鼠分为对照组,模型组以及AhR激动剂及拮抗剂处理组,每组5只,应用在体LTP实验记录海马前穿通纤维-齿状回通路的LTP,以观察神经突触可塑性的变化。其中模型组为皮下注射皮质酮(50 mg·kg~(-1)),给药1 h后开始LTP实验,AhR激动剂及拮抗剂处理在给予皮质酮处理前30 min腹腔注射(50μg·kg~(-1))给药。结果与正常小鼠相比,模型组小鼠LTP显著降低(P<0.001),单独给予AhR激动剂或拮抗剂对小鼠海马LTP无影响;与模型小鼠相比,AhR激动剂组能使海马LTP显著升高(P<0.05),而AhR拮抗剂组则出现小鼠死亡的毒性反应。结论激动AhR对皮质酮所致的LTP损伤具有保护作用,而抑制AhR则会加重皮质酮导致的LTP损伤。