夜仁合改善睡眠的量效时效关系研究

目的:探讨夜仁合改善睡眠的量效和时效关系。方法:选择ICR小鼠为实验对象,通过戊巴比妥钠阈上和阈下剂量协同实验方法,以记录小鼠的潜睡期、睡眠时间和睡眠发生率为指标,分别观察了夜仁合改善小鼠睡眠的量效关系、时效关系和睡眠发生率。结果:(1)量效关系:与空白组相比,阳性给药组可极显著缩短睡眠潜伏期和延长睡眠时间(P<0.01);剂量3组(10 g·kg~(-1))可显著缩短睡眠潜伏期(P<0.05),延长睡眠时间(P<0.01),剂量4组(20 g·kg~(-1))、剂量5组(40 g·kg~(-1))均可极显著缩短睡眠潜伏期和延长睡眠时间(P<0.01)。(2)时效关系:与空白组相比,给药7 d组、给药9 d组、给药11 d组,夜仁合水煎液可显著缩短睡眠潜伏期和延长睡眠时间(P<0.05)。(3)睡眠发生率:与空白组相比,阳性给药组和给药组均可显著提高小鼠的睡眠发生率(P<0.05)。结论:夜仁合水煎液改善小鼠睡眠的最佳量效时效关系为:给药浓度20 g·kg~(-1),连续7 d。     

铃兰毒苷通过PPARγ/NF-κκB信号通路抑制葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠实验性结肠炎

目的研究铃兰毒苷(CNT)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠实验性结肠炎的保护作用及其对PPARγ/NF-κB信号通路的影响。方法 40只雄性C57BL/6小鼠分为正常对照组、模型组、CNT(50和150μg·kg~(-1))组和阳性药(柳氮磺胺嘧啶,200 mg·kg~(-1))组。除正常对照组外,各组分别给予4%DSS饮用水建立实验性结肠炎模型,各组小鼠连续7 d每天灌胃给予不同剂量的药物或生理盐水。观察小鼠体质量,结肠长度、大肠和脾重和疾病活性指数;Western印迹和免疫组化实验检测结肠组织中P65和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)蛋白表达;ELISA法检测小鼠血清和结肠组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β的含量。结果与正常对照组相比,模型组小鼠体质量下降(P<0.01),结肠长度缩短(P<0.05),小鼠大肠和脾质量增加(P<0.05),疾病活性指数增加(P<0.01),结肠组织中P65和PPARγ表达水平升高(P<0.01),同时,血清和结肠中TNF-α,IL-6和IL-1β的含量升高(P<0.01)。与模型组相比,不同剂量CNT组小鼠体质量、结肠长度、大肠和脾重及疾病活动指数均有所改善(P<0.05),血清和结肠中TNF-α,IL-6和IL-1β的含量降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织中上述炎症相关蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论 CNT对DSS诱导的小鼠实验性结肠炎具有保护作用,其机制可能与PPARγ/NF-κB信号通路有关。     

二氢杨梅素对小鼠葡聚糖硫酸钠结肠炎的干预作用

目的探讨二氢杨梅素(DMY)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用效果。方法将60只Balb/C小鼠随机分为正常对照组、模型组、DMY低剂量组(50 mg·kg~(-1)·d~(-1))、DMY中剂量组(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))、DMY高剂量组(200 mg·kg~(-1)·d~(-1))和5-氨基水杨酸组(50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),各10只。正常对照组小鼠每日给予蒸馏水饮用,其余组小鼠给予4%DSS连续饮用7 d,诱导小鼠急性UC模型,与此同时给予对应剂量的药物灌胃治疗。7 d后处死小鼠并计算小鼠疾病活动指数(DAI)、光镜下结肠组织损伤评分(TDI),流式细胞法测定外周血中调节性T淋巴细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)占CD4+T细胞的百分比,Western blot及免疫组化法测定结肠组织中基质金属蛋白酶9(MMP 9)的表达水平。结果与正常对照组相比,模型组DAI、TDI明显升高(P<0.01),Treg/Th17比值明显降低(P<0.01),MMP 9表达升高(P<0.05)。与模型组相比,DMY低、中、高剂量组小鼠Treg/Th17比值明显升高(P<0.01),MMP 9表达降低(P<0.05),DMY中、高剂量组小鼠DAI、TDI明显降低(P<0.01),且随着治疗剂量增加,升高或降低幅度愈明显。结论 DMY可以显著缓解DSS诱导的小鼠UC炎症,且与剂量呈正相关。     

复方丹参片对APP/PS1转基因小鼠焦虑样行为的调节作用

目的探讨复方丹参片对阿尔采末病(AD)APP/PS1转基因小鼠焦虑样行为的作用及机制。方法4月龄野生型小鼠(正常组)和APP/PS1转基因小鼠分别灌胃给予溶剂(模型组)或复方丹参片低剂量(180 mg·kg~(-1))、中剂量(360 mg·kg~(-1))、高剂量(720 mg·kg~(-1))和阳性药物舍曲林(15 mg·kg~(-1))60 d后,采用Morris水迷宫实验、新奇抑制摄食实验和高架十字迷宫实验评价复方丹参片对小鼠记忆障碍和焦虑样行为学表现的影响,采用高效液相色谱法(HPLC)和ELISA分别检测小鼠前额皮质、海马和杏仁核γ-氨基丁酸(GABA)和脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。结果复方丹参片中、高剂量明显缩短小鼠找到平台的潜伏期,明显增加小鼠原有平台象限的探索时间(P<0.05,P<0.01)。高架十字迷宫试验结果显示,复方丹参片高剂量显著增加APP/PS1转基因小鼠在开臂的时间百分比和进入开臂的次数(P<0.01);新奇抑制摄食实验结果显示,复方丹参片中、高剂量显著缩短APP/PS1转基因小鼠摄食潜伏期(P<0.05,P<0.01)。HPLC和ELISA结果显示,复方丹参片中、高剂量可显著增加APP/PS1转基因小鼠不同脑区如前额皮质、海马和杏仁核GABA和BDNF含量(P<0.05,P<0.01)。结论复方丹参片改善AD转基因小鼠的学习记忆损伤和焦虑样行为,可能与增加脑组织GABA和BDNF水平有关。     

槐果碱的镇痛、抗炎作用及其对COX-2/PGE_2信号通路的影响

目的:研究槐果碱(SC)对炎性痛模型小鼠的镇痛、抗炎作用及环氧化酶2/前列腺素E_2(COX-2/PGE_2)信号通路的影响。方法:(1)镇痛实验。将50只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(阿司匹林,100 mg/kg)和槐果碱高、中、低剂量组(40、20、10 mg/kg),每组10只,每天灌胃给药1次,连续给药5 d;末次给药后2 h,各组小鼠腹腔注射冰醋酸溶液,记录小鼠15 min内的扭体次数;另取50只小鼠,分组及给药同上,采用智能热板仪测定末次给药15、30、60、120 min后小鼠的反应痛阈值(Tr)。(2)抗炎及机制实验。取60只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、阳性对照组(阿司匹林,100 mg/kg)及槐果碱高、中、低剂量组(40、20、10 mg/kg),每组10只,每天灌胃给药1次,连续给药5 d;末次给药后60 min,除空白对照组外,其余各组小鼠均注射1%角叉菜胶致炎,并于致炎1、3、5 h后测定各组小鼠足趾肿胀度。另取60只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、槐果碱组(40 mg/kg),每组10只,每天灌胃给药1次,连续给药5 d;末次给药后60 min,除空白对照组外,其余各组小鼠均注射1%角叉菜胶致炎,5 h后采用生化法检测各组小鼠足趾肿胀组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测足趾肿胀组织中PGE_2水平;分别采用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)和Western blot法测定小鼠足趾肿胀组织中COX-1、COX-2 mRNA和蛋白表达水平。结果:在镇痛实验中,与空白对照组比较,各给药组小鼠扭体次数均明显减少(P<0.05或P<0.01),末次给药30、60、120 min后Tr值明显升高(P<0.05或P<0.01)。在抗炎及机制实验中,与空白对照组比较,模型对照组小鼠致炎1、3、5 h后的足趾肿胀度明显升高(P<0.01),足趾肿胀组织中SOD、GSH-Px、T-AOC水平明显降低(P<0.01),MDA、PGE_2水平明显升高(P<0.01),COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,阳性对照组和槐果碱高、中剂量组小鼠致炎3、5 h后的足趾肿胀度明显降低(P<0.05或P<0.01),槐果碱组小鼠足趾肿胀组织中SOD、GSH-Px、T-AOC水平明显升高(P<0.05或P<0.01),MDA、PGE_2水平明显降低(P<0.01),COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),其他指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:槐果碱具有较好的抗炎、镇痛作用,其作用机制可能与其抗氧化应激和抑制COX-2/PGE_2信号通路有关。     

薄荷酮对内毒素致炎症模型小鼠的保护作用研究

目的观察薄荷酮对内毒素(LPS)致炎症模型小鼠的保护作用,并初步探讨与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制。方法♂C57BL/6J小鼠按体质量分层随机分为空白对照组、模型对照组、地塞米松组(5 mg·kg~(-1))、薄荷酮0.25 g·kg~(-1)及0.5 g·kg~(-1)剂量组。除地塞米松组实验当日腹腔注射给药1次外,其余各组小鼠连续灌胃给药5 d,每天1次。各组小鼠末次给药30 min后,除空白组小鼠外,其余各组小鼠腹腔注射LPS(15 mg·kg~(-1),10 m L·kg~(-1))制备炎症反应模型,造模12 h后,小鼠取血分离血清,采用ELISA及液相蛋白芯片技术测定炎症因子IL-18、IL-1β、IL-5、TNF-α、IFN-γ、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)的水平;取小鼠全血进行白细胞(WBC)计数;剖取肺组织计算肺脏指数,并测定肺组织中NO含量,进行肺组织病理组织学检查;RT-PCR法检测肺组织中NLRP3、caspase-1及IFN-α mRNA表达;免疫组化法观察肺组织中cathepsin B、P2X7R蛋白表达。结果 0.5 g·kg~(-1)薄荷酮明显降低内毒素致炎症模型小鼠血清IL-18、IL-1β、IL-5、TNF-α、IFN-γ、G-CSF、GM-CSF、MIP-1β的水平(P<0.05或P<0.01),下调模型小鼠肺组织NLRP3、IFN-α mRNA表达及cathepsin-B、P2X7R蛋白表达(P<0.05或P<0.01),明显降低模型小鼠肺组织中NO的含量(P<0.05);0.25 g·kg~(-1)薄荷酮明显降低模型小鼠血清中IL-1β、IL-5、TNF-α、MIP-1β含量(P<0.05),下调肺组织中P2X7R蛋白表达及NO水平(P<0.05或P<0.01);病理组织学检查显示0.5、0.25 g·kg~(-1)薄荷酮能明显减少肺组织切片中嗜中性粒细胞数量(P<0.01),减轻肺泡膈的增厚;薄荷酮对模型小鼠全血白细胞计数与肺指数的升高表现出降低趋势。结论薄荷酮对内毒素致炎症模型小鼠有保护作用,能抑制血清多种炎性细胞因子的释放而减轻肺部炎性损伤,该作用可能与干扰NLRP3炎症小体的激活有关。     

一氧化氮供体JS-K对H22荷瘤小鼠肿瘤能量代谢的调节作用

目的研究新型一氧化氮(NO)供体O~2-(2,4-二硝基苯基)1-[(4-乙氧羰基)哌嗪-1-yl]偶氮-1-鎓-1,2-二醇(JS-K)对H22荷瘤小鼠肿瘤能量代谢的调节作用。方法 BALB/c小鼠皮下接种H22细胞建立荷瘤小鼠模型,并随机分为模型组、氟尿嘧啶(5-FU)组、JS-K 0.75和1.50 mg·kg~(-1)组。JS-K组和模型组小鼠每3 d尾静脉注射不同剂量JS-K或生理盐水,连续14 d(共给药5次);5-FU组每天1次ip给予5-FU 20 mg·kg~(-1),给药后第15天将小鼠处死,分离胸腺、脾和完整瘤体,并称取其质量,计算抑瘤率和脏器系数、比色法检测瘤组织中已糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和腺苷三磷酸酶(ATPase)活性,以及乳酸和ATP水平;Western蛋白印迹法检测各组瘤组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)蛋白表达。结果与模型组比较,JS-K0.75和1.50mg·kg~(-1)组瘤质量显著下降(P<0.01),抑瘤率分别为23.9%和50.3%JS-K 0.75和1.50 mg·kg~(-1)组小鼠胸腺系数和脾系数与模型组无明显差异比色法检测结果显示,JS-K 1.50 mg·kg~(-1)组瘤组织中HK,PFK,SDH,PK和ATPase活性较模型组的[22.6±3.7,14.4±2.6,(10.5±2.6)U·g~(-1)蛋白,(12.9±3.2)kU·g~(-1)蛋白和(0.70±0.10)mmolPi·g~(-1)蛋白·h~(-1)]分别下降了42.0%,26.6%,23.3%,22.7%和21.7%(P<0.01,P<0.05);JS-K 1.50 mg·kg~(-1)组瘤组织中ATP水平较模型组下降16.6%(P<0.01);JS-K0.75和1.50mg·kg~(-1)组瘤组织中乳酸水平较模型组分别下降38.7%和59.4%(P<0.01)。Western蛋白印迹检测结果显示,与模型组比较,JS-K 1.50 mg·kg~(-1)组瘤组织中HIF-1α(蛋白表达显著降低(P<0.01);JS-K 0.75和1.50 mg·kg~(-1)组HKⅡ蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 JS-K能抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长,其机制可能与抑制糖酵解和有氧氧化途径从而调节肿瘤能量代谢有关。     

3,6'-二芥子酰基蔗糖联合tenuifoliside A协同抗抑郁作用及其机制的研究

目的研究远志中3,6'-二芥子酰基蔗糖(DISS)和tenuifoliside A(TFSA)协同抗抑郁作用及其初步作用机制。方法采用经典的行为绝望抑郁模型——小鼠悬尾实验,随机分为对照组、阳性药组、DISS 5、10 mg·kg~(-1)、TFSA 5、10mg·kg~(-1)、DISS 5 mg·kg~(-1)+TFSA 5 mg·kg~(-1)、DISS 5 mg·kg~(-1)+TFSA 10 mg·kg~(-1)、DISS 10 mg·kg~(-1)+TFSA 5 mg·kg~(-1)和DISS 10 mg·kg~(-1)+TFSA 10 mg·kg~(-1);灌胃给药7 d,观察DISS和TFSA单体及其合用对小鼠悬尾不动时间的影响;免疫组织化学方法检测小鼠海马及皮层内BDNF的表达;蛋白质印记法检测小鼠海马内CRTC1、CREB、p-CREB及BDNF的表达。结果 DISS和TFSA及其二者合用均可缩短悬尾小鼠的不动时间,其中DISS(10 mg·kg~(-1))和TFSA(10 mg·kg~(-1))组与单剂量药物组相比明显,并稳定缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.05)。免疫组化实验中,DISS和TFSA及其合用组均可提高海马及皮层内BDNF的表达量(P<0.05),同时DISS和TFSA及其合用组可增加海马中CRTC1、CREB、p-CREB及BDNF蛋白的含量,其中合用组明显高于单药组(P<0.05)。结论 DISS与TFSA双药合用启动CREB共转录因子CRTC1,激活海马内CREB的磷酸化,进而增加其下游BDNF表达,发挥协同抗抑郁作用。     

雄激素对雌激素引发去势雄性SD大鼠前列腺炎症及炎症因子的抑制作用

目的给予不同比例苯甲酸雌二醇(E2)和丙酸睾酮(T)诱导SD大鼠前列腺炎,探讨炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、环氧合酶2(COX-2)和巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP~(-1)α)表达的变化。方法 SD大鼠无菌条件下去势后,颈背部分别sc给予E20.25 mg·kg~(-1)+T 0.25,0.5和1.0 mg·kg~(-1),连续给药30 d。取血离心取血清,采用ELISA检测E2,T和双氢睾酮(DHT)激素水平。HE染色观察前列腺组织病理变化,免疫组化检测前列腺中TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α的表达。结果 ELISA检测结果显示,与假手术组比较,E20.25 mg·kg~(-1)组血清E2水平明显升高[(80±7)ng·L~(-1),P<0.01];E20.25 mg·kg~(-1)组和E2+T 0.25 mg·kg~(-1)组血清T水平显著下降[111±6和(111±5)nmol·L~(-1),P<0.05]。与去势对照组相比,E20.25 mg·kg~(-1)组血清E2明显升高[(80±7)ng·L~(-1),P<0.01],其他各指标未见统计学差异。光学显微镜观察发现,假手术组和去势对照组前列腺组织结构完整、腺腔和间充质无炎症细胞浸润;E20.25 mg·kg~(-1)组前列腺腺腔内有少量炎症细胞浸润,间充质未见炎症细胞浸润;E2+T 3个剂量组间充质内有少量炎症细胞浸润。假手术组前列腺上皮细胞及前列腺基质细胞胞浆内TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α均为阴性表达或极少量表达,去势对照组和E20.25 mg·kg~(-1)组TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α均为强阳性表达,E2+T 3个剂量组TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α呈弱阳性表达。结论雄激素具有抑制雌激素引起的去势SD大鼠前列腺炎及炎症因子TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α表达的作用。     

当归芍药散通过调节ER/NF-ΚΚB/NLRP3缓解卵巢切除小鼠认知功能

目的雌激素下降是导致围绝经期女性认知功能障碍的风险因素,雌激素的缺失大大增加了围绝经期女性罹患阿尔茨海默病(AD)的风险。然而,长期的雌激素代替疗法在安全性上尚存在较大的争议,因此寻找更为安全有效的治疗方法,显得尤为重要。当归芍药散(DSS)是治疗妇人妊娠腹痛的经典方,其对AD也有较好的疗效。近来,研究人员进一步发现,DSS可以改善增加海马雌激素的合成改善雌激素缺乏引起的认知功能缺陷,但其发挥作用的分子机制尚不清楚。本研究旨在探讨DSS发挥改善雌激素缺失模型小鼠认知障碍的分子机制,为中医药治疗神经退行性疾病提供实验依据。方法将75只雌性ICR小鼠随机分为对照组和模型组,通过双侧卵巢摘除法(OVX)建立雌激素缺失动物模型,对照组仅切除卵巢旁附近少量脂肪,随后将模型动物随机分为:OVX组,DSS治疗组(每天3.2和6.4 g·kg~(-1))和阳性药治疗组(β-雌二醇,E2,每天100μg·kg~(-1)),DSS治疗组给予灌胃治疗,阳性药治疗组给予皮下注射治疗,对照组给予等体积蒸馏水治疗。治疗12周后,通过Morris水迷宫测试、Y迷宫测试及旷场实验观察认知功能,免疫组化染色法观察小鼠海马小胶质细胞和星形胶质细胞激活,ELISA法检测海马炎症因子IL-1β分泌,Western蛋白印迹法检测海马NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶1、ASC、IL-1β及雌激素受体(ER)ERα和ERβ蛋白的表达。结果 DSS可显著缩短OVX小鼠在Morris水迷宫定位航行的逃避潜伏期,增加模型小鼠在Y迷宫三个臂中的交替百分比,增加模型小鼠在旷场中心区域活动的时间,此外,DSS可明显下调OVX小鼠小胶质细胞标志物Iba-1和星形胶质细胞标志物GFAP的表达,下调海马IL-1β的分泌,降低OVX模型小鼠海马p-NF-κB、NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶1、ASC和IL-1β蛋白的表达,此外,DSS还能增加OVX小鼠海马的雌激素受体ERα和ERβ的表达。结论 DSS可能是通过调节海马ER/NF-κB/NLRP3通路发挥缓解雌激素缺乏引起的认知功能缺陷,DSS可能是治疗围绝经期女性认知功能障碍的潜在药物。     

氧化苦参碱对坐骨神经结扎小鼠的镇痛作用及其对CaMKⅡ受体表达的影响

目的研究氧化苦参碱(OMT)对神经病理性疼痛小鼠的镇痛作用及其机制。方法采用坐骨神经结扎模型(CCI)机械缩足反射法观察OMT的镇痛作用,并分析其镇痛作用与Ca MKII受体的关系。结果 1给小鼠腹腔注射160、80 mg·kg~(-1)OMT可明显延长小鼠的机械缩足反射期(P<0.05)。2给小鼠腹腔注射160、80、40 mg·kg~(-1)OMT可明显降低小鼠的冷缩足反射次数(P<0.05)。3 OMT能够跟CaMKⅡ拮抗剂KN-93和AIP发挥协同作用。4模型组小鼠的pCaMKⅡ蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.01);与模型组比较,OMT(160 mg·kg~(~(-1)))组可明显降低p CaMKⅡ蛋白的表达(P<0.01)。结论 OMT对神经病理性疼痛具有镇痛作用,其镇痛作用可能与CaMKⅡ有关。     

健脑益智汤对类阿尔茨海默病大鼠血清胆碱酯酶和脑皮质细胞凋亡的影响

目的:观察健脑益智汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠血清乙酰胆碱酯酶(AChE)和脑皮质细胞凋亡的影响。方法:老年Wistar大鼠侧脑室注射聚集态的β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))建立复合式类AD大鼠模型,测定健脑益智汤灌胃给予AD大鼠(10.6,21.2,42.4g·kg~(-1),qd)3周后血清AChE和脑皮质细胞凋亡百分率,实验设立盐酸多奈哌齐(0.525 mg·kg~(-1))作为阳性对照组。结果:与正常对照组比较,AD模型组血清AChE活性增强(P<0.01),脑皮质细胞凋亡百分率显著增加(P<0.01);与模型组比较,健脑益智汤中、高剂量组AChE活性和脑皮质细胞凋亡百分率均降低(P<0.05,P<0.01),与盐酸多奈哌齐组接近。结论:健脑益智汤可抑制AD大鼠血清Ache活性和脑皮质细胞凋亡。     

手掌参多糖延缓衰老作用的研究

目的观察手掌参多糖对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠的作用。方法 60只昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为6组:空白对照组、衰老模型组、阳性对照组(21.6mg·kg~(-1))和手掌参多糖高、中、低剂量组(0.20,0.10和0.05g·kg~(-1))。除空白对照组外,其余各组小鼠每日颈背部皮下注射0.5g·kg~(-1) D-半乳糖溶液。60d后,测定小鼠血清、肝组织和脑组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,称量小鼠体质量和计算肝脏指数。结果手掌参多糖高剂量组能提高衰老小鼠血清、脑组织和肝组织中T-SOD、CAT和GSH-PX活性(P<0.01,P<0.05),降低MDA含量(P<0.01,P<0.05),还能显著增加衰老小鼠体质量(P<0.01),提高衰老小鼠肝脏指数(P<0.05)。结论手掌参多糖具有一定的延缓衰老作用,其机制可能与提高机体抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化物的产生有关。     

黄连总生物碱与三七总皂苷组合物对糖尿病心肌病小鼠的作用

目的研究黄连总生物碱与三七总皂苷组合物对小鼠糖尿病心肌病的影响。方法 Balb/C小鼠预留10只作为空白组,普通饲料喂养,其余动物高糖高脂饲料喂养2周后禁食12 h,以100 mg·kg~(-1)剂量注射链脲佐菌素。两周后小鼠禁食测量空腹血糖(FBG),FBG≥8.7 mmol·L~(-1)的小鼠随机分为模型组、二甲双胍(220 mg·kg~(-1))组、血塞通(290 mg·kg~(-1))组、A组(黄连总生物碱625 mg·kg~(-1)+三七总皂苷200 mg·kg~(-1)),B组(黄连总生物碱625 mg·kg~(-1)+三七总皂苷60 mg·kg~(-1)),每组10只。分组后各组小鼠每天灌胃给药,连续给药12周。观察小鼠FBG、糖耐量及血糖曲线下面积(AUC)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、肌酸激酶(CK)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),免疫组化染色观察心肌组织Bax、Bcl-2与胱天蛋白酶3蛋白表达情况;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况,HE染色观察胰腺与心肌组织病理变化。结果与空白组相比,小鼠造模后血糖、血脂、炎症因子、心肌酶水平均显著升高,心肌细胞凋亡指数升高,胰岛及心肌组织损伤较重,差异具有统计学意义。与模型组相比,A组与B组给药期间小鼠血糖明显降低(P<0.01),葡萄糖灌胃后0～120 min血糖值与AUC降低(P<0.01);给药后小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量降低,HDL-C水平升高;小鼠血清中CK、IL-6以及TNF-α水平均明显低于模型组(P<0.05);心肌细胞凋亡相关蛋白Bax与胱天蛋白酶3表达明显降低(P<0.05),抑制凋亡的Bcl-2蛋白在心肌组织的表达则显著升高(P<0.05)。TUNEL染色结果显示,A组能降低小鼠心肌细胞凋亡指数(P<0.05)。HE染色结果显示,A组、B组小鼠胰腺内可见体积较小、数量较多的胰岛组织散在分布,胰岛数量高于模型组;组合物A组小鼠心肌水肿程度明显减轻,心肌细胞排列紧密,损伤程度轻于模型组;组合物B组小鼠心脏组织可见心内膜少量心肌疏松、水肿,心肌受累面积较模型组明显减少。结论黄连总生物碱与三七总皂苷组合物对高糖高脂结合链脲佐菌素诱导的糖尿病心肌病小鼠有良好的治疗作用,其机制可能与抑制炎症反应及心肌细胞凋亡途径有关。     

旋覆花素抑制阿尔茨海默病模型大鼠脑海马组织COX-2和iNOS基因表达

目的:观察旋覆花素对Aa25～35海马内注射诱导Alzheimer病(AD)模型大鼠海马环加氧酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨其对AD大鼠的治疗作用及机制.方法:SD大鼠海马内注射Aa25～35制备AD大鼠模型,在造模前3 d和造模后18 d灌胃旋覆花素26 mg·kg-1·d-1,bid,共21 d.用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力,免疫组化及Western blot测定大鼠海马 COX-2和iNOS蛋白表达.结果:AD大鼠在定位航行实验中,逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,空间记忆力受损,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05);实验d2,d3,d4给药组的逃避潜伏期较模型组均显著缩短,与正常对照组接近(P>0.05).模型组海马COX-2和iNOS基因表达较正常对照组显著升高,给药组COX-2和iNOS基因表达较模型组显著下降(P<0.05).结论:旋覆花素的抗炎作用可能是其改善AD大鼠学习记忆能力的作用机制之一.     

芒果苷对脂多糖诱导慢性炎症中环氧合酶/脂氧合酶的双重抑制作用

目的:探讨芒果苷对脂多糖(LPS)诱导慢性炎症中环氧合酶1/2(COX-1/2)、5脂氧合酶(5-LOX)的抑制作用。方法:60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、泼尼松(PNS,5 mg.kg-1.d-1)组与芒果苷高、中、低剂量(MGFH/M/L,200,100和50 mg.kg-1.d-1)组,每组10只。对照组以外的各组大鼠每周1次尾静脉注射LPS(200μg.kg-1)建立慢性炎症模型,灌胃给药,共4周。第4周末以酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞COX-1/2和5-LOX以及血清前列腺素E2/F2α(PGE2/F2α)、白三烯B4/C4/D4/E4(LT-B4/C4/D4/E4);RT-PCR检测白细胞COX-1/2和5-LOX基因表达。结果:与模型组比较,MGFH和MGFM组白细胞COX-2和5-LOX水平与基因表达以及血清PGE2/F2α和LT-B4/C4/D4/E4水平降低(P<0.01或0.05)。MGFH组白细胞COX-1水平与基因表达低于模型组(P<0.01)。结论:芒果苷对LPS诱导慢性炎症中COX-1/2与5-LOX均有抑制作用。     

天麻全药对APP/PS1小鼠痴呆模型的神经保护作用及机制

目的研究天麻全药是否可以改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,减少其对大脑海马区域中β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集程度及老年斑的形成,以及这些作用是否与调控keap1-Nrf2/HO-1抗氧化应激通路方面有关,进一步探讨天麻全药的神经保护作用机制及在老年性痴呆预防及治疗中的作用。方法 APP/PS1双转基因痴呆小鼠模型,实验小鼠分为A组:正常组;B组:正常给药组;C组:APP/PS1模型组;D组:模型给药组。B和D组取2月龄APP/PS1双转基因小鼠每日灌胃同等剂量天麻全药(每天1.5 g·kg~(-1)),A和C组灌胃同等量的生理盐水。灌胃至5月龄时进行Morris水迷宫检测各组小鼠学习和记忆能力;取小鼠血清检测谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)的含量;HE染色观察小鼠脑组织形态学变化、免疫组织化学检测脑组织中Aβ的沉积;实时PCR检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、相关基因的m RNA水平;生化试剂盒检测小鼠海马组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western蛋白印迹实验检测kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白的表达水平。结果与对照组相比,水迷宫检测结果显示,C组小鼠的学习记忆能力降低(P<0.05);各组小鼠血清中GOT和GPT的含量差异无统计学意义;HE染色结果显示,各组小鼠脑组织形态结构无明显差异;免疫组织化学检测到C组小鼠脑组织中出现明显Aβ沉积;海马组织中Nrf2和HO-1的m RNA及Keap1,Nrf2,HO-1和NQO1蛋白表达水平均有不同程度的减少(P<0.05,P<0.01);与C组小鼠比较,D组小鼠中Aβ斑块形成减少;海马组织中Nrf2,HO-1的m RNA及Keap1,Nrf2,HO-1和NQO1蛋白表达水平均有不同程度的增加(P<0.05,P<0.01);海马组织MDA含量明显降低(P<0.05),SOD酶活性显著升高(P<0.05)。结论血清学检测结果显示,长期灌胃天麻全药,小鼠血清中的GOT和GPT无统计学差异,说明小鼠在长期给予天麻后,对肝脏功能代谢功能并无明显毒性作用;水迷宫及其他结果显示天麻全药能够改善阿尔茨海默病(AD)痴呆小鼠模型的学习和记忆能力,这提示天麻全药对AD痴呆小鼠模型具有一定的神经保护作用,且其可能通过调控keap1-Nrf2/HO-1通路,增强下游抗氧化基因的表达、SOD酶活性发挥抗氧化功能。在一定程度上减缓AD病理进程、减少Aβ的沉积,进而改善AD痴呆小鼠模型的学习记忆能力。     

黄连素或联苯双酯及其与环孢素合用对小鼠小肠运动的影响

目的:研究黄连素(berberine,Ber)或联苯双酯(bifendate,BFD)分别与环孢素(Cyclosporin A,CsA)合用对小鼠小肠运动的影响。方法:采用小鼠炭末推进法研究药物对小鼠小肠运动的影响。结果:与溶媒(CMCⅠ)组比较,Ber(300 mg·kg~(-1))组和Ber CsA(300 mg·kg~(-1) 20 mg·kg~(-1))组炭末推进率显著减少(P<0.01,P<0.05);与CsA(20 mg·kg~(-1))组比较,Ber CsA(200 mg·kg~(-1) 20 mg·kg~(-1))组和Ber CsA(300 mg·kg~(-1) 20 mg·kg~(-1))组炭末推进率显著减少(P<0.01)。与溶媒(CMCⅡ)组比较,CsA(10 mg·kg~(-1))组和BFD(100 mg·kg~(-1))组炭末推进率显著增加(P<0.05);与CsA(10 mg·kg~(-1))组比较,BFD(100 mg·kg~(-1))组炭末推进率有显著增加(P<0.05),而BFD CsA(100 mg·kg~(-1) 10 mg·kg~(-1))组推进率没有显著差异。结论:Ber单用及其与CsA合用,对小鼠的小肠运动有极显著的抑制作用,BFD单用有显著促进小鼠小肠运动的作用,而BFD与CsA合用,未显示对小鼠的小肠运动有影响。     

盐酸苯环壬酯对大鼠后循环缺血性眩晕和小鼠位置性眩晕的改善作用

目的研究盐酸苯环壬酯的抗眩晕作用。方法利用双侧颈总动脉结扎法制备大鼠脑缺血模型,大鼠ig给予盐酸苯环壬酯0.1~4.0 mg·kg~(-1),每天2次,连续3 d,结合激光多普勒脑血流仪检测盐酸苯环壬酯对脑血流量变化的影响。通过XY-5双轴变速旋转刺激制备小鼠眩晕症模型,小鼠ig给予盐酸苯环壬酯1.4~5.6 mg·kg~(-1)后变速旋转刺激30 min,检测自发活动的变化;小鼠ig给予盐酸苯环壬酯1.4~8.4 mg·kg~(-1)30 min后,通过检测胃酚红排空率指标观察盐酸苯环壬酯对小鼠胃平滑肌的影响。结果大鼠双侧颈总动脉结扎24 h后脑血流量显著减少(P<0.01);与模型组比较,盐酸苯环壬酯0.5,2.0和4.0 mg·kg~(-1)可显著增加缺血大鼠脑血流量(P<0.05)。通过旋转刺激后,模型小鼠自发活动的总路程减少(P<0.05),运动速度减慢(P<0.05);与模型组比较,盐酸苯环壬酯2.8和5.6 mg·kg~(-1)可增加眩晕小鼠总路程和运动速度(P<0.05);盐酸苯环壬酯5.6和8.4 mg·kg~(-1)降低小鼠胃酚红排空率(P<0.05)。结论盐酸苯环壬酯增加脑血流量,改善后循环缺血,对眩晕的呕吐症状和运动功能具有显著的改善作用。     

颈骨康胶囊的活血化瘀及抗炎镇痛作用

目的研究颈骨康胶囊的活血化瘀及抗炎镇痛作用。方法构建大鼠血瘀模型,通过研究颈骨康组和模型组血液流变学指标的差异,评价其活血化瘀作用。构建大鼠足肿胀模型、小鼠棉球肉芽肿模型和耳廓肿胀模型,通过比较颈骨康组和模型组(或对照组)肿胀程度的差异,评价其抗炎作用。通过比较颈骨康组与对照组小鼠在腹腔注射醋酸后扭体反应的差异,及热刺激痛阈的差异,研究其镇痛作用。结果颈骨康0.24和0.48 g·kg~(-1)组大鼠的全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞压积、卡森黏度等血液流变学指标均低于模型组(P<0.05,P<0.01),约降低至模型组的87%。大鼠后足皮下注射蛋清致炎后的1,2和4 h,颈骨康0.48 g·kg~(-1)组的足体积增加值(足肿胀程度)明显低于模型组,是模型组的31%～67%(P<0.05或P<0.01);颈骨康0.2、0.4和0.8 g·kg~(-1)小鼠棉球肉芽肿湿、干重是对照组的63%～66%和63%～73%(P<0.01);颈骨康1.6和3.2 g·kg~(-1)组小鼠的左右耳廓质量差(耳廓肿胀程度)是模型组的56%(P<0.01)。颈骨康1.6和3.2 g·kg~(-1)小鼠的扭体次数是对照组的45%～56%,热刺激痛阈是对照组的1.3倍(P<0.05,P<0.01)。结论颈骨康胶囊可降低血瘀大鼠的血液流变学指标,缓解大鼠足肿胀、小鼠棉球肉芽肿和耳廓肿胀,减少小鼠扭体次数,提高小鼠热刺激痛阈,有明显的活血化瘀和抗炎镇痛作用。