淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能影响的研究

目的:研究淫羊藿苷(Icaritin,ICA)对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能的影响。方法:按体重随机挑选10只8月龄抗快速老化小鼠SAMR1和50只同月龄快速老化小鼠SAMP8,并将SAMP8随机分为5组(模型组、多奈哌齐组和ICA50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg组),灌胃给药1个月,在给药前后分别用Morris水迷宫、SMG-2迷宫和跳台方法检测SAMR1和SAMP8的学习记忆功能能力。结果:与给药前相比,给药后的快速老化小鼠SAMP8定位航行和空间搜索能力以及被动反应能力得到提高。结论:ICA可以改善SAMP8的学习记忆能力。     

G蛋白在快速老化痴呆小鼠SAMP8脑组织中的表达

目的:观察在不同月龄小鼠SAMP8皮质和海马中G蛋白的表达情况.方法:利用Western-blot方法检测Gαq/11、Gαi和GαS蛋白在8月龄和18月龄快速老化痴呆小鼠SAMP8的表达,并以正常老化小鼠SAMR1作为对照研究.结果:与同月龄SAMR1相比,Gαq/11、Gαi和Gαs蛋白在8月龄小鼠SAMP8皮质和海马组织中的表达无明显异常(P＞0.05),而到18月龄时,SAMP8皮质部位Gαq/11表达量低于SAMR1(P＜0.05),海马部位Gαq/11和Gαi的表达量低于SAMR1(P＜0.05).结论:18月龄SAMP8脑组织中Gαq/11和Gαi的异常表达参与了阿尔茨海默病(AD)的病理进展,并有望作为AD治疗的一个靶点.     

G蛋白在快速老化痴呆小鼠SAMP8脑组织中的异常表达

摘要 目的：探索在不同月龄小鼠SAMP8皮层和海马中G蛋白的异常表达情况。方法：以正常老化小鼠SAMR1为对照,利用Western-blot方法检测Gαq/11、Gαi和GαS蛋白在8月龄和18月龄小鼠SAMP8的异常表达。结果：与同月龄SAMR1相比,GαS、Gαi和Gαq蛋白在8月龄小鼠SAMP8皮层和海马组织中的表达无明显异常（p﹥0.05）,而到18月龄时,SAMP8皮层部位Gαq表达量明显低于SAMR1（p﹤0.05）,海马部位Gαq和 Gαi的表达量也明显低于SAMR1（p﹤0.05）。结论：18月龄SAMP8脑组织中Gαq和 Gαi的异常表达参与了阿尔海默病（Alzheimer’s, AD）的病理进展,并有望作为AD治疗的一个靶点。     

淫羊藿苷预防给药对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及脑组织线粒体氧化应激的影响

目的考察淫羊藿苷(icariin,ICA)预防给药对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及脑组织线粒体氧化应激的影响。方法选择即将出现学习记忆障碍的6月龄快速老化小鼠SAMP8为实验对象,随机分为模型组、ICA组(75,150 mg·kg-1)、阳性药己烯雌酚组和雌激素受体抑制剂ICI182780联合ICA高剂量(150 mg·kg-1)组,以同月龄抗快速老化小鼠SAMR1为正常对照。预先灌胃给药8周,用Morris水迷宫和跳台行为学实验检测ICA预防给药对SAMP8小鼠学习记忆能力的影响。提取脑线粒体,通过测定脑组织线粒体内活性氧(ROS)水平、脂质过氧化物(MDA)含量、还原性谷胱甘肽GSH含量和过氧化氢酶(CAT)的活力,研究ICA预防给药对SAMP8小鼠脑组织线粒体氧化应激的影响。结果 ICA预防给药可以明显改善SAMP8小鼠的定位航行能力以及空间探索能力,提高其在跳台实验中的被动回避条件反射能力,减少SAMP8小鼠脑组织线粒体ROS水平和MDA含量,增加GSH含量,但对CAT活性作用不明显。ICA和ICI182780联合给药后,与ICA单独给药组相比,ICA对SAMP8小鼠学习记忆能力的改善作用明显降低,对脑组织线粒体氧化应激的改善作用变化不大。结论ICA预防给药可明显改善快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及脑组织线粒体氧化应激的水平,其改善学习记忆能力的作用机制可能与其植物雌激素样作用有关,其对脑组织线粒体发挥抗氧化应激的作用可能与雌激素受体无关。     

快速衰老小鼠的Klotho表达与β淀粉样肽清除的相关性研究

目的 探讨快速衰老小鼠(SAMP8)中Klotho低表达对β淀粉样肽(Aβ)清除的影响.方法 采用Y迷宫和跳台实验评测12月龄SAMP8小鼠和抗衰老系列小鼠(SAMR1)的学习和空间记忆能力;免疫组化检测小鼠脑中Aβ1-42、同种异体移植炎性因子-1(AIF1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Klotho的变化;蛋白免疫印迹法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP-1)、晚期糖基化末端产物(RAGE)的蛋白表达.结果 与SAMR1小鼠相比,SAMP8小鼠的学习、记忆功能明显下降,脑内Aβ1-42、AIF1、GFAP和RAGE的表达显著增加,Klotho和LRP-1的表达明显降低.结论 SAMP8小鼠中Klotho表达的降低可能导致LRP-1降低和RAGE增加,从而增加Aβ在脑内沉积.     

脂筏蛋白质组学分析揭示快速老化因素对SAMP8 小鼠海马组织的关键影响

摘要：目的 探讨快速老化小鼠SAMP8老年性痴呆的关键细胞学机制。方法 以2月龄和8月龄SAMP8小鼠 各40只为痴呆相关快速老化动物模型,以同月龄各40只正常老化小鼠SAMR1为对照,从小鼠海马组织提取脂筏蛋 白,采用高效液相色谱-串联质谱法分析。脂筏蛋白质组学检测数据导入DAVID生物信息学分析工具,进行Gene Ontology（GO）生物信息学分析和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）代谢网络分析,并用线粒体膜电位 和Morris水迷宫方法验证生物信息学分析结果。结果 与SAMR1小鼠比较,快速老化的SAMP8小鼠出现明显的认 知障碍。GO 分析显示,老年期 SAMP8 小鼠脂筏蛋白组中线粒体相关蛋白大幅度减少。KEGG 分析显示,老年期 SAMP8小鼠海马组织线粒体的氧化磷酸化功能大幅度衰退。线粒体膜电位分析显示,老年期SAMP8小鼠海马组织 线粒体膜电位大幅度降低。结论 在老化过程中,SAMP8小鼠海马组织最关键的细胞变化是线粒体氧化磷酸化功 能的过度衰退,这可能是其痴呆发生的重要细胞学机制。     

快速老化小鼠SAMP8研究进展

快速老化小鼠SAMP8(senescence-accelerated mouseprone/8)是一个从普通的遗传群AKR/J系小鼠中通过表型选择培育出的快速老化小鼠,表现为早期增龄性学习记忆缺陷,同时伴有Aβ淀粉样蛋白沉积,是目前公认的有效的研究阿尔采末病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。同属SAMR1表现为抗快速老化,具有正常的老化特性,常用作正常对照。目前SAMP8已被广泛应用于研究快速学习记忆缺陷的发病机制,以及评价抗衰老及改善学习记忆功能的药物等。     

通络醒脑泡腾片对SAMP8小鼠海马的NeuN蛋白及其超微结构的影响

目的 观察通络醒脑泡腾片对快速老化小鼠亚系8(SAMP8)海马的NeuN蛋白及其超微结构的影响.方法 将SAMP8小鼠随机分为SAMP8组、安理申组、通络醒脑泡腾片组(高、中、低剂量),另取抗快速老化小鼠亚系1(SAMR1)作为对照组,分组后连续给药60d,采用Morris水迷宫和避暗法评价其学习记忆的改变;采用免疫组化法考察海马Aβ和NeuN蛋白的表达;采用电镜法考察海马的超微结构.结果 通络醒脑泡腾片能够缩短SAMP8模型小鼠的潜伏期、明显地增加平台所在象限的时间百分比和进入目标象限的次数,可显著地减少(避暗)错误次数和延长逃避潜伏期;能够下调海马Aβ的表达并上调NeuN蛋白的表达,可显著地减少核糖体的丢失,降低线粒体的肿胀度,改善海马的超微结构.结论 通络醒脑泡腾片可通过抑制Aβ沉积,提高NeuN的表达来修复神经元,保护线粒体,从而提高SAMP8小鼠的学习记忆能力.     

龙眼参多糖对SAMP8学习记忆及脑组织单胺类神经递质含量影响的研究

目的:研究龙眼参(LYS)多糖对快速老化小白鼠(SAMP8)学习记忆及脑组织单胺类神经递质含量的影响。方法:选用6月龄的SAMP850只,随机分为SAMP8、石杉碱甲和LYS多糖低、中、高剂量组,每组10只,另选用6月龄正常老化小白鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。各组分别ig相应药物40d后,采用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力,采用高效液相色谱法测定小鼠脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量。结果:与正常对照组比较,SAMP8组的学习记忆能力显著下降,且其脑组织NE、DA、5-HT的含量显著降低(P<0·05或P<0·01);与SAMP8组比较,LYS多糖组小鼠的学习记忆能力及脑组织单胺类神经递质的含量均显著提高(P<0·05或P<0·01)。结论:LYS多糖可有效调整中枢神经递质的合成及提高学习记忆能力,具有良好的抗痴呆作用。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体的保护作用

目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体功能的影响。方法：将8月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、盐酸多奈哌齐1mg/kg组、吡啦西坦200mg/kg组、ICA75mg/kg组和150mg/kg组,每组6只;8只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1作为正常对照组。给药30d后,提取小鼠脑线粒体,测定线粒体呼吸功能、肿胀度、膜电位、活性氧（ROS）和ATP含量。结果：与SAMR1正常对照组相比,SAMP8小鼠脑线粒体呼吸功能显著降低,表现为线粒体Ⅲ态呼吸明显降低,Ⅳ态呼吸改变不明显,呼吸控制指数和磷氧比值降低（P〈0.05）;线粒体膜肿胀度增高,膜电位降低,线粒体内ROS含量增高,而ATP含量明显降低（P〈0.05）。与SAMP8模型组相比,ICA75mg/kg和150mg/kg均可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和呼吸功能（P〈0.05,P〈0.01）。结论：ICA可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和功能。     

六味地黄汤对快速老化小鼠海马差异表达基因的影响

目的研究六味地黄汤(LW)对快速老化小鼠(senescenceacceleratedmouse,SAM)海马差异表达基因的影响,揭示LW增强认知功能的分子作用机制。方法应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达cDNA芯片,比较SAMP8和SAMR1、SAMP8阴性对照和SAMR1阳性对照、石衫碱甲处理的SAMP8和SAMP8阴性对照以及LW处理的SAMP8和SAMP8阴性对照8个基因表达谱,并对LW的药物效应基因进行比较。结果给予SAMP8LW后,基因DUSP12、NSF、STUB1、CAMKⅡα、AMFR、UQCRFS1和11个新基因的表达出现显著差异,这些基因涉及蛋白酪氨酸磷酸酶家族、苏氨酸/丝氨酸蛋白激酶家族、泛素连接酶和线粒体功能等,LW对SAMP8海马的基因表达具有明显的调控作用。结论提示LW作用于认知功能也许是通过维持正常的细胞增殖和分化、保护正常的突触传递、调节Ca2+信号转导、改善线粒体的功能等途径实现的,基因DUSP12、NSF、STUB1、CAMKⅡα、AMFR、UQCRFS1和11个新基因可能是LW改善学习记忆功能的潜在作用靶标。     

姜黄素对痴呆模型小鼠学习记忆能力的改善作用及对细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素对痴呆模型小鼠学习记忆能力的改善作用和对脑细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法选用自然快速脑老化小鼠为研究对象,随机将SAMP8脑老化小鼠分为模型组、姜黄素治疗组和盐酸多奈哌齐对照组,将SAMR1小鼠作为正常对照组。采用行为学方法评价各组小鼠治疗前后的学习记忆能力变化,TUNEL法检测海马与皮层的细胞凋亡率,免疫细胞化学法测定细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达情况。结果姜黄素能够明显改善自然快速脑老化小鼠的学习记忆能力,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);姜黄素治疗组小鼠海马和皮层的细胞凋亡数减少,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);凋亡相关蛋白bcl-2表达升高,bax表达降低,并且bcl-2/bax比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素对痴呆模型小鼠的学习记忆能力具有一定的改善作用,其作用机制可能与其调节凋亡相关蛋白bcl-2与bax的表达有关。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP10脑组织单胺类及氨基酸类神经递质的影响

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP10脑组织单胺类及氨基酸类神经递质的影响。方法:本实验采取8月龄快速老化小鼠SAMP10为实验对象,随机分为模型SAMP10组、阳性药多奈哌齐组(1mg/kg)、ICA 3个剂量(50、100、200mg/kg)组,每组12只,以12只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1为正常对照。灌胃给药30d,一天一次,高效液相-电化学法检测快速老化小鼠SAMP10大脑皮层的去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量来探讨ICA对SAMP10脑组织单胺类神经递质的影响,通过检测谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GA-BA)、牛磺酸(Tau)、甘氨酸(Gly)的含量来探讨ICA对SAMP10脑组织氨基酸类神经递质的影响。结果:ICA可显著降低SAMP10大脑皮层内Glu、Gln、GABA含量(P<0.01),升高NE、DA、DOPAC、5-HT、HVA、Asp以及Tau的含量(P<0.01或P<0.05),但对SAMP10大脑皮层内Gly的含量并没有显著影响(P>0.05)。结论:ICA可能通过升高脑内单胺类神经递质的含量、调节兴奋性氨基酸类递质的代谢平衡以及调节抑制性氨基酸的代谢平衡达到改善SAMP10的学习记忆的作用。     

运动对快速老化小鼠海马突触素表达的影响

目的研究运动对快速老化小鼠（SAMP8）海马突触素表达的影响,探讨运动改善阿尔茨海默病（AD）学习记忆功能的机制。方法 3月龄SAMP8小鼠40只随机分为运动组（采用跑笼运动训练）和对照组,2个月后HE染色观察2组海马神经元形态改变;免疫组化技术检测2组海马突触素表达。结果 5月龄SAMP8小鼠对照组海马部分神经元细胞变性、死亡,核浓缩,空泡变性;运动组偶有神经元细胞变性、死亡,大部分细胞形态正常。海马突触素表达运动组较对照组显著增高（P〈0.05）。结论运动可以延缓SAMP8小鼠海马神经元变性,提高海马突触素表达,这可能是运动改善AD学习记忆功能的重要机制之一。     

天胡荽积雪草苷对SAMP8小鼠学习记忆功能的改善作用

目的观察天胡荽积雪草苷(asiaticoside from Hydrocotyle sibthorpioides,AHS)对快速老化模型SAMP8小鼠学习记忆功能的影响及其可能机制。方法选用6月龄SAMP8小鼠75只,随机分为SAMP8空白组、阳性药石杉碱甲对照组和AHS低、中、高剂量组,每组15只;另选用6月龄SAMR1小鼠15只作正常对照。各组分别灌胃相应药物3个月后,采用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力,采用Western blot测定Aβ1-42蛋白和可塑性相关蛋白在海马组织的表达水平,采用实时荧光定量PCR测定Aβ相关基因的表达。结果 AHS能明显提高小鼠的学习记忆能力。其机制研究表明,AHS明显降低脑组织Aβ1-42蛋白的含量,抑制Aβ相关基因APP、BACE1和CatB的表达,但提高NEP和IDE的水平;另外,AHS能明显提高突触可塑性相关蛋白包括突触后密度蛋白-95、磷-N-甲基-D-天门冬氨酸受体1、磷酸-钙-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ、磷酸蛋白激酶A Cβ亚基、蛋白激酶Cγ亚单位、磷酸化CREB和脑源性神经营养因子的表达。结论 AHS能明显改善学习记忆功能,其机制可能与降低脑组织Aβ的形成与沉积、提高突触可塑性相关蛋白的表达有关。     

快速老化痴呆模型小鼠海马细胞凋亡检测及金属硫蛋白3对其的影响

目的：研究快速老化痴呆模型小鼠（SAMP8）海马CA1区神经元细胞凋亡的变化及不同浓度的金属硫蛋白3（MT3）对其的影响．并且与金属硫蛋白1（MT1）作用相比较。方法：给予7月龄SAMP8小鼠腹腔注射age浓度的MT3及MT1,28d后灌注取脑。进行海马CA1区Tunel试剂盒染色。结果：8月龄的SAMP8小鼠海马区神经元细胞凋亡指数明显高于对照组SAMR1小鼠。高浓度MT3组凋亡指数最低,差异有统计学意义。相同浓度MT3组和MT1对照组间差异无统计学意义。结论：SAMP8小鼠海马结构存在大量的神经元细胞凋亡;MT3有抑制细胞凋亡的作用,并有浓度依赖关系;MT3和MT1对细胞凋亡的影响无差异。     

海昆肾喜胶囊通过激活自噬改善SAMP8小鼠认知功能障碍

目的以SAMP8小鼠为模型,初步探索海昆肾喜(HKSX)胶囊对AD的防治作用及其作用机制。方法将4月龄SAMP8小鼠随机分为AD模型组(P8)、HKSX低剂量组(L-HKSX)、HKSX高剂量组(H-HKSX),同月龄SAMR1小鼠作为对照组(R1)。采用新物体识别和Morris水迷宫实验检测小鼠学习、记忆能力;ELISA法检测各组小鼠海马Aβ_1-40和Aβ_1-42水平;Western blot实验对海马LC3-Ⅱ、P62、Beclin-1、PSD95、Synaptophysin(Syn)的表达进行检测。结果相较于P8组小鼠,HKSX低、高剂量治疗均可增加小鼠对新物体的识别指数,提高小鼠穿越平台次数和在目标象限停留的时间,并且缩短潜伏期,增强对Aβ_1-40和Aβ_1-42的清除力,上调Beclin-1、LC3-Ⅱ相对表达量,下调P62的表达;此外,还提高了突触相关蛋白PSD95、Syn的表达水平。结论HKSX胶囊可调节自噬相关蛋白表达,改善自噬功能障碍,减少Aβ在体内的沉积,降低其毒性,提高突触可塑性,最终改善AD小鼠学习认知、记忆能力。     

金钗石斛总生物碱抑制海马tau蛋白的过度磷酸化

目的研究金钗石斛总生物碱(DNLA)对衰老小鼠及痴呆模型大鼠脑内tau蛋白过度磷酸化的影响。方法以SAMP8小鼠作为衰老小鼠模型,SAMR1小鼠作为正常对照,自4月龄始给予DNLA(20和40 mg·kg~(-1)),每天灌胃1次,连续6个月;SD大鼠双侧侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)作为痴呆模型,侧脑室注射溶媒大鼠作为正常对照,术后给予DNLA,每天1次,连续28 d。Morris水迷宫及Y迷宫检测各组动物学习记忆功能;HE和Nissl染色观察海马神经元形态及数量;Western印迹法检测海马组织tau蛋白表达及Ser199,Ser396,Ser404,Ser422和Thr231位点的磷酸化水平;GSK-3β蛋白表达及Ser9和Y216位点的磷酸化水平;以及PP2A的蛋白表达水平。结果 DNLA可改善SAMP8小鼠和STZ大鼠的学习记忆功能(P<0.05);减少模型小鼠和大鼠海马组织神经元形态的损伤和数量的丢失(P<0.01);并降低tau蛋白Ser199,Ser396,Ser404,Ser422和Thr231位点的磷酸化水平(P<0.05),提高GSK-3β在Ser9位点的磷酸化水平(P<0.05),对GSK-3β的Y216位点磷酸化、PP2A、总tau蛋白及总GSK-3β的蛋白表达无明显的影响。结论 DNLA对脑内tau蛋白的过度磷酸化的具有抑制作用。     

SAMP8小鼠血浆和海马皮质酮水平升高及与海马ATP减少的关系

早衰小鼠SAMP8 9 00时和16 00时, 血浆皮质酮水平均明显高于正常对照小鼠SAMR1; 大脑皮层和海马区皮质酮水平在16 00时亦显著高于SAMR1, 而下丘脑皮质酮含量与SAMR1相比无差别同时,SAMP8大脑海马ATP,ADP和AMP水平均低下,而皮层ATP, ADP和AMP水平无改变. 切除AMP8小鼠肾上腺60 h后,海马区低水平的ATP, ADP和AMP被逆转, 而皮层未受影响. 给切除肾上腺的SAMP8补充皮质酮(10 mg·kg^-１, ip, 12 h一次, 共5次)后,海马区ATP,ADP和AMP水平再次被显著降低,皮层仍未受影响上述结果说明,SAMP8小鼠大脑海马ATP水平低下是肾上腺依赖的，SAMP8血浆和海马区皮质酮水平升高可能与海马ATP和ADP水平降低有关.     

拟人参皂苷-F11对SAMP8小鼠认知障碍的改善作用及机制

目的阿尔茨海默病(AD)是一种常见的、以认知障碍为主要症状的中枢神经系统退行性疾病。β-淀粉样蛋白(Aβ)聚集形成的淀粉样斑块(SP)和过度磷酸化的Tau蛋白引发的神经原纤维缠结(NFT)是AD临床上的主要病理特征。拟人参皂苷F11(PF11)是西洋参茎叶中分离提取的一种三萜皂苷化合物,本文通过自发快速老化(SAMP8)模型小鼠,从Aβ沉积和Tau过度磷酸化等方面,结合神经行为学、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹等手段,进一步评价PF11对AD模型动物认知障碍的改善作用及潜在机制。方法灌胃给予6月龄雄性SAMP 8快速衰老小鼠PF11(2,8和32 mg·kg~(-1)),在给药3个月后进行行为学实验,并检测APP和β-分泌酶(BACE1)、晚期内含体Rab7和循环内含体Rab11的表达。结果灌胃给予PF11(8和32 mg·kg~(-1))3个月可以显著改善SAMP8小鼠的识别记忆和空间学习记忆障碍,显著增加SAMP8小鼠海马和皮质中突触后致密蛋白95的水平;显著降低SAMP8小鼠海马和皮质中胞浆淀粉样蛋白前体蛋白(APP)和β-分泌酶(BACE1)的水平,减少海马和皮质中APP与晚期内含体(LE)的共定位,从而降低脑内Aβ的沉积;PF11可以显著提高SAMP8小鼠海马和皮质中异常降低的亮氨酸羧甲基转移酶(LCMT-1)水平,增加甲基化蛋白磷酸酶2A(PP2A)的水平,从而减少过度磷酸化的Tau。结论 PF11能够明显改善SAMP8小鼠的认知障碍,其机制与抑制海马和皮质脑区中APP淀粉样剪切途径进而减少Aβ沉积,以及增加PP2A活力进而减少Tau蛋白的过度磷酸化相关。