脑损伤大鼠胫骨骨痂中降钙素基因相关肽的改变

目的研究脑损伤后大鼠胫骨骨痂中降钙素基因相关肽（CGRP）的变化及骨痂量的改变。方法将100只雄性Wistar大鼠随机分为两组,脑损伤加右胫骨骨折组和单纯右胫骨骨折组各50只。术后3、7、14、21、28 d分批处死,检查血清碱性磷酸酶,摄右胫骨X线片测量骨痂面积,骨痂行苏木精2伊红（HE）染色和降钙素基因相关肽免疫组织化学染色。结果脑损伤加骨折组较单纯骨折组术后3、7 d,碱性磷酸酶均显著升高（P〈0.01）;脑损伤加骨折组较单纯骨折组术后14、21 d,骨痂X线面积大;脑损伤组早期形成大量纤维骨痂和软骨骨痂,骨痂中降钙素基因相关肽免疫阳性神经纤维多,明显增厚的骨膜内层骨祖细胞、幼稚的软骨细胞胞浆内降钙素基因相关肽强阳性表达;骨折愈合快,降钙素基因相关肽表达明显增强。结论脑损伤后骨痂中降钙素基因相关肽有显著改变,并引起骨痂量和质的改变,推测降钙素基因相关肽参与调节骨折愈合过程。     

上运动神经元损伤后脊髓前角运动神经元中降钙素基因相关肽的变化

目的 观察上运动神经元损伤后大鼠脊髓前角运动神经元中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的变化。方法 选用３６只成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,于下胸段行脊髓横断术,分别于术后０、１、２、４、７、１４ｄ取出腰段脊髓并分为腹侧和背侧,用放免方法测定腹侧脊髓中ＣＧＲＰ的含量。结果 大鼠脊髓前角ＣＧＲＰ的含量自术后第２天开始显著降低,最低值出现在术后第２天,此后维持这一低水平。结论 上运动神经元损伤后大鼠脊髓前角ＣＧ     

雌激素对去势SD雌性大鼠骨折愈合早期骨痂形成影响的实验研究

目的：初步探讨雌激素在雌性ＳＤ大鼠骨折愈合早期的作用及其机制。方法：将ＳＤ大鼠分为Ａ、Ｂ、Ｃ３组,后２组摘除卵巢,２１ｄ后定支点折骨造成动物左胫腓骨闭合骨折,Ｃ组应用雌激素,分别于骨折后１、２、３、５周采取骨痂标本行ＡＫＰ测定,Ｘ线及组织学检查。结果：骨痂形成早期Ｂ组软骨骨痂较另两组稍多,但各组骨痂成熟程度无明显差异,骨痂形成后期Ｂ组骨痂结构疏松,而Ｃ组小梁致密,有编织、板层化趋势。结论：雌激素在ＳＤ大鼠骨痂形成早期轻度抑制软骨骨痂形成,骨痂形成后期有利于小梁骨形成、堆积及向编织骨的转化。     

中枢神经损伤对大鼠股骨骨折愈合影响观察

摘要：[目的] 观察中枢神经损伤后大鼠股骨骨折愈合速度和骨痂量的变化，分析中枢神经损伤对大鼠股骨骨折愈合速度影响的机制。[方法] 54只雄性Wistar大鼠随机分成3组，（1）脑外伤合并股骨骨折组18只；（2）脊髓损伤合并股骨骨折18只；（3）单纯股骨骨折18只。术后7、14、28d分批处死动物，大体体积测量骨痂，X线片评分，并做HE染色比较。[结果] 脑外伤组，脊髓损伤组形成骨痂体积、X线片评分高于单纯股骨骨折组，差异有显著性（P〈0．05）。HE染色结果显示脑外伤组、脊髓损伤组骨折愈合速度较单纯骨折组加快。[结论] 中枢神经损伤后大鼠骨折愈合加速，骨痂量增多，中枢神经损伤后引起骨痂量和骨折愈合速度的改变，表明中枢神经损伤对骨折愈合有促进作用。     

降钙素基因相关肽控制性降压对大鼠肾功能及肾素—血管紧张？…

目的：探讨人降钙素基因相关肽（α－ｈＣＧＲＰ）应用于控制性降压对肾功能的影响。方法：２０只ＳＤ大鼠分为α－ｈＣＧＲＰ组（Ｃ组）和硝普钠组（Ｓ组），两组动物的ＭＡＰ均降至６．７ｋＰａ并维持１小时。测定两组动物降压前后ＧＦＲ、ＥＴＰＦ、ＰＲＡ、ＡⅡ浓度、尿量、ＨＲ以及钠、钾和氯离子的排泌速率。结果：在降压１小时时，Ｃ组ＧＦＲ和ＥＲＰＦ极显著升高；Ｓ组ＧＦＲ和ＥＲＰＦ极显著降低。两组尿量显著减少，钠和氯     

大剂量甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓GAP-43 mRNA表达的影响

目的：研究大剂量甲基强的松龙（ＭＰ）对大鼠脊髓损伤后ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ的表达,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果：术后７ｄ大剂量ＭＰ组ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ的表达,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果：术后７ｄ大剂量ＭＰ组ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ蛋白表达比单纯损伤组增加约１倍,大剂量ＭＰ组损伤脊髓高表达ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ持续到术后４周,单纯损伤组仅持续到术后１周。增加的ＧＡＰ－４３     

中枢神经损伤大鼠骨痂中神经肽的表达

[目的]研究中枢神经损伤后大鼠股骨骨折骨痂中神经肽的表达。[方法]45只雄性Wistar大鼠随机分成3组，脑外伤合并股骨骨折组15只，脊髓损伤合并股骨骨折15只，单纯股骨骨折15只。术后4、7、14、21、28d分批处死动物，行神经肽免疫组织化学染色。[结果]脑外伤组，脊髓损伤组免疫组化染色结果显示骨折愈合过程中骨痂骨膜内、外层骨祖细胞、软骨细胞、成骨细胞内CGRP、SP阳性表达，与单纯骨折组相比，差异具有显著性。[结论]中枢神经损伤大鼠骨痂中神经肽有显著性改变，推测神经因素参与调节骨折愈合过程。     

骨折合并颅脑损伤大鼠血小板衍生生长因子表达的研究北大核心CSCD

目的观察胫骨骨折合并颅脑损伤大鼠血清及骨痂组织内血小板衍生生长因子（PDGF）的表达变化,探讨颅脑损伤对骨折愈合的影响及作用机制。方法选择144只SD大鼠随机分为4组（n=36只）：正常对照组（N组）、颅脑损伤组（TBI组）、单纯骨折组（F组）和骨折合并颅脑损伤组（TBI＋F组）,并制作相应组别的损伤模型。造模后第3天、1周、2周、3周、4周处死大鼠,4组均采用酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清PDGF的表达;F组和TBI＋F组大鼠通过x线片观察右胫骨骨折处骨痂生长情况,通过苏木精．伊红染色观察骨痂生长及组织形态,免疫组织化学法检测骨痂组织PDGF的表达,逆转录聚合酶链反应法检测骨痂组织PDGFmRNA的水平,并进行比较。结果x线片示TBI＋F组大鼠骨折愈合速度比F组快。TBI＋F组大鼠血清PDGF表达量较其他3组高,且峰值时间提前,差异均有统计学意义（P〈0．05）。TBI＋F组大鼠骨折端局部成骨活动较F组强。TBI＋F组大鼠第3天、1周时局部骨痂组织中PDGF阳性细胞数较F组明显增多升高,且峰值时间提前,差异均有统计学意义（P〈0．05）。TBI＋F组大鼠第3天、1周时局部骨痂组织中PDGFmRNA表达水平较F组显著增高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论颅脑损伤可以加速大鼠骨折愈合的进程,这可能与颅脑损伤后大鼠体内PDGF的表达增高有关。     

神经生长因子对胫骨骨折大鼠骨力学、骨强度及骨桥蛋白及下游相关因子水平的影响

目的 探讨神经生长因子（NGF）对胫骨骨折大鼠骨力学、骨强度及骨桥蛋白（OPN）及下游相关因子水平的影响。方法 将42只大鼠按照随机数字表法分为A组（腓肠肌两侧注射生理盐水）、B组（腓肠肌两侧注射NGF）,每组21只。建立胫骨骨折模型后,观察两组骨痂的大小、骨折愈合情况,测定生物力学检测指标（最大载荷、弹性载荷、最大挠度）、胫骨骨强度指标（骨密度和骨矿含量）,HE染色观察胫骨骨折形态,Western blot法检测OPN和局部黏着斑激酶（FAK）蛋白表达。结果 (1) B组骨折愈合更快,更早地完成了骨痂重塑,且愈合过程中,形成的骨痂更大。(2)术后1、3、5周,B组最大载荷、弹性载荷、最大挠度及OPN、FAK蛋白表达、骨密度明显大于A组（P<0.05）,骨矿含量明显少于A组（P<0.05）;A组术后各时间点各项指标比较差异均无统计学意义（P> 0.05）;B组骨矿含量随时间推移逐步降低,其余指标随时间推移逐步升高（P<0.05）。(3) B组骨痂组织中软骨组织形成更早,面积更大,软骨组织向骨组织转化的过程更快。结论 NGF可以改善大鼠胫骨骨折最大载荷、弹性载荷、...     

感觉/运动神经切断影响大鼠骨折愈合的实验研究

[目的]通过建立切断组成大鼠坐骨神经的不同成分、联合胫骨骨折的动物模型,来研究感觉/运动神经损伤对骨折愈合的影响,并进一步探讨周围神经系统对骨组织的生理作用。[方法]Wistar大鼠90只平均分为3组：对照组,运动神经（前根）切断组,感觉神经（后根）切断组,选择性切断一侧L4～6神经根。所有大鼠于神经根暴露侧/切断侧胫骨造成横行骨折,髓钉固定。30d后取大鼠双侧胫骨,测患侧胫骨近端骨密度、在影像学资料上测量患侧骨痂宽度及健侧胫骨相应位置的皮质宽度、取所有大鼠双侧胫骨行湿重称量、骨痂组织学切片观察、双侧胫骨行生物力学拉伸测试。所得结果均以患侧数据除以相应健侧数据得出一相对数,以相对数数据进行统计分析。[结果]患侧胫骨近端骨密度无显著差异（P〉0.05）;检测项目示神经切断组骨折处骨痂形成多,力学强度差,骨痂成熟度差（P〈0.05）,以感觉神经（后根）切断组尤甚（P〈0.05）[结论]感觉神经纤维对骨折愈合的影响较运动神经纤维显著;完整的神经支配是正常骨折愈合的必要条件。     

鞘注神经生长因子促进大鼠胫骨骨折愈合的实验研究

目的 研究鞘注神经生长因子(NGF)对大鼠胫骨骨折愈合的影响,以及相应脊髓背根神经节(DRG)与胫骨骨痂中的降钙素基因相关肽、P物质的表达变化. 方法 成年雄性SD大鼠48只随机分为两组.实验组予NGF 1μg/d连续鞘注14 d,对照组予等量生理盐水.术后7、14、21、28 d分批处死动物,行骨痂X线评分、骨痂/骨干比值测量.免疫组织化学法测定相应节段DRG与胫骨骨痂中的CGRP、SP表达.结果 术后21 d,NGF组X线评分低于对照组,21 d、28 d骨痂/骨干比值低于对照组.HE染色显示各时期NGF组软骨内成骨过程增强,骨痂成熟度高于对照组,骨痂改建过程提前且更为完全.CGRP、SP在DRG及胫骨骨痂中表达的平均光密度(OD)值高于同期对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).相关性分析显示DRG神经肽表达OD值与骨痂OD值明显正相关. 结论 鞘注神经生长因子可促进DRG与骨折骨痂中的神经肽表达,促进成骨细胞增殖与软骨内骨化,减小骨痂体积并加速骨折的愈合及塑形改建过程.推测神经生长因子与DRG神经肽参与了中枢神经调控外周成骨活动的过程.     

高能震波促进骨折愈合机理的探讨

目的 探讨高能震波（ＨＥＳＷ）对兔骨折愈合的影响及其机理。方法 手术造成家兔双侧胫骨标准骨折模型,对１侧胫骨骨折部施以ＨＥＳＷ;另１侧为对照。术后每周进行Ｘ线及组织学检查,并取骨折骨痂切片用骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）抗体进行免疫组织化学染色（ＳＡＢＣ法）。结果 Ｘ线摄片及组织学观察显示,实验侧骨痂出现时间及骨折愈合时间均明显早于对照组;骨痂区毛细血管计数、ＢＭＰ表达强度在第２～４周时实验侧均明显大于     

小剂量格列本脲对大鼠急性脊髓损伤后继发性损害的影响

目的 探讨格列本脲对大鼠脊髓损伤后继发性损害的保护作用.方法 90只SD大鼠随机分为3组,每组30只,即单纯椎板切除组(对照组)、脊髓损伤组(损伤组)与脊髓损伤后格列本脲治疗组(治疗组).HE染色及电镜观察脊髓损伤后病理变化;免疫组织化学法检测脊髓损伤后45min、6 h、24 h、3 d、7 d的磺脲类药物受体1(sulfonylurea receptor type 1,SUR1)表达变化,利用IPP 6.0软件对SUR1的表达进行定量分析.采用BBB评分评价大鼠后肢功能的恢复.并对大鼠血糖进行定量检测.结果 HE染色显示:脊髓损伤后脊髓出血和胶质细胞增生随时间延长而加重,治疗组的组织出血、小胶质细胞增生和中性粒细胞浸润均较损伤组轻.电镜观察:治疗组的炎症细胞浸润、髓鞘板层结构破坏及线粒体肿胀程度等均较损伤组明显减轻.免疫组织化学染色显示:除45 min时SUR1尚未表达外,其余各时间点治疗组的SUR1表达均较损伤组弱.术后24 h,损伤组SUR1表达达高峰,此后随时间逐渐下降.三组各时间点的SUR1平均光密度经单因素方差分析,差异有统计学意义.治疗组大鼠BBB评分明显高于损伤组大鼠,各组差异有统计学意义.治疗组大鼠的血糖稍下降,但三组差异并无统计学意义.结论 格列本脲治疗能显著减轻脊髓的继发性损伤,促进脊髓功能恢复.格列本脲通过抑制SUR1的表达而发挥脊髓保护作用.     

Smoking delays chondrogenesis in a mouse model of closed tibial fracture healing.

Smoking delays the healing process and increases morbidity associated with many common musculoskeletal disorders, including long bone fracture. In the current study, a murine model of tibial fracture healing was used to test the hypothesis that smoking delays chondrogenesis after fracture. Mice were divided into two groups, a nonsmoking control group and a group exposed to cigarette smoke for 1 month prior to surgical tibial fracture. Mice were euthanized at 7, 14, and 28 days after surgery. The outcomes measured were immunohistochemical staining for type II collagen protein expression as a marker of cartilage matrix and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) staining to measure proliferation at the site of injury. Toluidine blue staining and histomorphometry were used to quantify areas of cartilaginous and noncartilaginous fracture callus. Radiographs were analyzed for evidence of remodeling after injury. At day 7 after injury, mice exposed to cigarette smoke had a smaller fracture callus with less cartilage matrix compared to controls. Proliferation was present at high levels in both groups at this time point, but proliferating cells had a more immature morphology in the smoking group. At day 14, chondrogenesis was more active in smokers compared to controls, while a higher percentage of bone was present in the control animals. At day 28, X-ray analysis revealed a larger fracture callus remaining in the smoking animals. Together, these findings show that the chondrogenic phase of tibial fracture healing is delayed by smoking. This study represents, to our knowledge, the first analysis of molecular and cellular mechanisms of healing in a smoking mouse fracture model.     

Ephrin-B1在大鼠脊髓损伤的表达

[目的]探讨红细胞生成素诱导肝癌细胞株配体-B1 (Ephrin-B1)在大鼠脊髓损伤的表达变化.[方法]将60只成年Wistar大鼠分正常组、假手术组、伤后3、7、14 d及28 d组.假手术组大鼠不损伤脊髓,损伤组大鼠采用Allen's氏打击法损伤T10脊髓.分别在各个时间点取材,免疫荧光和Western Blot检测Ephrin-B1蛋白表达情况.[结果]免疫荧光结果显示Ephrin-B1在正常、假手术和损伤脊髓的灰质和白质中均有表达,但在损伤脊髓组织中表达较高,脊髓组织中的星形胶质细胞表达Ephrin-B1.Western Blot显示损伤组比对照组Ephrin-B1蛋白含量显著增加(P＜0.01),从伤后3d开始持续到伤后28 d;伤后14 d蛋白含量达到高峰,明显高于对照组及伤后其他组(P＜0.01);伤后28 d蛋白含量较14 d减少(P＜0.01),与伤后7d相比无显著性差异(P＞0.05).[结论]Ephrin-B1在大鼠脊髓损伤后表达升高,伤后14d表达升高显著,表达于脊髓的星形胶质细胞.     

急性脊髓损伤后促红细胞生成素受体的表达及其意义

目的探讨急性脊髓损伤后促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPO-R)在脊髓内的表达。方法Wistar大鼠69只,随机分为三组：正常对照组(5只,不手术,作为后两组的对照)、假手术组(仅行椎板切除术)和脊髓损伤组。根据术后时间点不同后两组又分为1h、6h、12h、24h、3d、7d、14d和28d八个亚组(每组4只)。采用RT-PCR、Western blot免疫印迹法和免疫组织化学染色法检测EPO及EPO-R的表达。结果正常对照组、假手术组和脊髓损伤组在各时相点均未发现有EPO表达。正常对照组、假手术组未发现EPO-R的表达,脊髓损伤组在伤后1h未见EPO-R mRNA和蛋白的表达,6h开始有表达,12h有明显的表达,至24h达到高峰,3d和7d时仍维持在高表达水平,未见减弱,14d开始下降,至28d时仍有EPO-R蛋白的表达。免疫组化显示EPO-R阳性细胞主要位于神经元、少突胶质细胞、血管内皮细胞和脊髓中央管内室管膜细胞。结论大鼠急性脊髓损伤后脊髓内大量表达EPO-R,这是外源性EPO与EPO-R结合产生神经保护作用的分子基础。     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的时效性分析

目的：观察脊髓损伤后不同时间点骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）移植治疗后大鼠行为学变化、脊髓的病理改变及脑源性神经营养因子（brain—derived neurotrophic factor,BDNF）和神经生长因子（nervegrowthfactor,NGF）表达变化,探讨BMSCs的最佳移植时间。方法：80只健康成年SD大鼠随机分为8组,每组10只。A组为假损伤组,暴露胸10段脊髓但不造成冲击伤,B、C、D、E、F、G、H组以改良Allen法建立脊髓损伤模型。造模成功后,C、D、E、F、G、H组分别于损伤后0h、6h、24h、3d、5d和7d,将lxl0。体外培养的BMSCs用微量注射器注入于脊髓损伤局部,B组为单纯造模组,用等量细胞培养液代替。各组分别于损伤后1、2、4周进行脊髓运动功能BBB（Basso,Beattie,Bresnahan）运动学评分;分别取各组脊髓损伤组织0．5cm,制作HE染色病理切片,观察其形态学改变;Elisa法检测各组大鼠脊髓BDNF和NGF表达情况。结果：假手术组1、2、4周大鼠脊髓功能BBB评分均明显高于其余7组（P〈0．01）;术后l周细胞移植各组评分与单纯造模组相比差异无统计学意义（P〉0．05）;术后2周和4周细胞移植各组评分高于单纯造模组（P〈0．05）;损伤后2周BBB评分从高到低依次为F、E、G、D、H、C组,但6组组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）;损伤后4周BBB评分,F组与其余5组（C,D,E,G,H组）比较差异有统计学意义（P〈0．05）,但其余5组组间差异无统计学意义（P〉O．05）。EUSA检测结果显示,F组BDNF和NGF含量均高于其他7组（P〈0．05）。大鼠脊髓标本切片HE染色,假手术组脊髓组织结构完整清楚,无中性粒细胞浸润;其余7组局部组织水肿明显,灰白质交界处模糊,周围可见不同程度胶质细胞增生及炎细胞浸润。结论：大鼠脊髓损伤后同种异体BMSCs移植对脊髓功能恢复有一定疗效,损伤后3d可能是BMSCs最佳移植时间。