柯里拉京杀伤人喉癌Hep-2细胞的体外实验研究

目的 观察柯里拉京（Corilagin）对人喉癌细胞系Hep-2的杀伤作用。方法 在体外细胞培养的基础上,通过倒置显微镜、肼比色法、流式细胞仪观察Corilagin作用后Hep-2细胞的形态学、增殖率和细胞周期的改变。结果 Corilagin作用后的Hep-2细胞形态发生了明显变化;其抑制增殖作用呈量效、时效关系;Corilagin可阻肿瘤滞细胞于S期,并可诱导细胞凋亡。结论 Corilagin能显著抑制Hep-2细胞增殖,可能与阻滞细胞于S期和诱导凋亡有关,Corilagin抗肿瘤作用值得进一步研究。     

紫杉醇诱导人胰腺癌细胞Bxpc-3细胞凋亡的实验研究

目的 观察紫杉醇(PA)对体外培养的Bxpc-3细胞凋亡的影响. 方法 体外培养Bxpc-3人胰腺癌细胞,采用MTT法检测不同浓度PA对Bxpc-3细胞的抑制情况,采用流式细胞术检测Bxpc-3细胞的周期及凋亡率.加入正常的培养液作为对照. 结果 与对照相比,不同浓度PA(100,50,25mg/ml)作用24 h可使Bxpc-3细胞生长明显抑制,抑制率呈浓度依赖关系;Bxpc-3细胞在PA 100,50 mg/ml作用下,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例和增殖指数(PI)下降;PA 100,50 mg/ml作用48 h后凋亡指数(AI)增高,AI/PI比例分别是对照组的6倍和2.5倍. 结论 PA对Bxpc-3细胞生长有抑制作用,可诱导人胰腺癌细胞Bxpc-3细胞凋亡.     

三氧化二砷对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的体内抑制作用

目的 探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的抑制作用,并探讨其初步机制。方法 建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组：模型组,低剂量、高剂量 (2.5、5.0 mg/kg) 三氧化二砷组和吉西他滨组,各组 ip 给药,作用2周后,检测实验前后裸鼠体质量变化,观察药物对肿瘤生长的影响,免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子 ki-67 的表达,TUNEL 法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果 给药2周后,各组裸鼠体质量变化差异不显著,三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量,且三氧化二砷 (5 mg/kg) 组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子 ki-67 的阳性表达;TUNEL 检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论 三氧化二砷可抑制胰腺癌 BXPC-3 细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

柯里拉京的心脑血管保护作用及机制研究进展

近年来,心脑血管疾病的发病率和死亡率逐年上升,且发病年龄日趋年轻化.因此,寻找安全有效的药物来防治心脑血管疾病显得尤为重要.柯里拉京属天然多酚单宁酸类化合物,具有广泛的药理作用,包括抗氧化、抗炎、抗动脉粥样硬化、降血压、抑制血小板聚集及降血糖等,其作用机制主要涉及增强抗氧化酶活性、清除自由基、下调环加氧酶活性、阻断核因...     

紫杉醇对Bxpc-3增殖抑制和诱导凋亡的实验研究

目的 通过体外实验评价紫杉醇对人胰腺癌细胞Bxpc-3的抑制作用。方法 应用形态学、MTT分析法、流式细胞术对紫杉醇诱导的人胰腺癌细胞Bxpc-3进行检测和观察。结果 人胰腺癌细胞Bxpc-3在紫杉醇的作用下,细胞发生一系列形态学改变;紫杉醇对Bxpc-3的抑制率有剂量和时间的依赖关系;流式细胞仪分析结果显示细胞有G2-M期阻滞和细胞凋亡。结论 紫杉醇诱发的人胰腺癌细胞凋亡与细胞周期阻滞密切相关,随浓度和时间的延长,G2-M期细胞的比例增高。     

胡桃醌体外抗胰腺癌细胞机制的初步研究

目的:探讨胡桃醌体外抗胰腺癌细胞的机制.方法:采用MTT法检测胡桃醌对BXPC-3细胞的生长抑制作用,流式细胞仪分析胡桃醌对BXPC-3细胞周期的影响.结果:MTT法试验结果显示,胡桃醌对体外培养的人胰腺癌BXPC-3细胞具有明显的生长抑制作用,24、48 h的IC50值为1.64x10-5,5.8x10-5 mol/L.同时胡桃醌能随着浓度的增加,时间的延长,诱导BXPC-3细胞周期停滞于G2期和S期,呈G2期和S期阻滞作用.结论:胡桃醌对胰腺癌BXPC-3细胞有明显的生长抑制作用,并能阻止其周期,诱导BXPC-3细胞凋亡.     

青蒿素对人胰腺癌JF305细胞增殖抑制作用研究

目的 研究不同浓度的青蒿素对人胰腺癌细胞JF305增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 常规体外培养人胰腺癌JF305细胞,加入不同浓度的青蒿素处理48 h.倒置显微镜下观察细胞形态的改变,MTT法检测青蒿素对细胞增殖情况的影响,Hochest33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学改变.结果 倒置显微镜结果表明,随着药物浓度的增加,细胞数目逐渐减少.MTT结果表明,青蒿素对JF305细胞的增殖具有明显的抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加而增强.Hochest33258荧光染色结果表明,给药组细胞发生典型的凋亡形态改变.结论 青蒿素对胰腺癌细胞JF305的增殖有明显的抑制作用,并能诱发细胞凋亡.     

白藜芦醇诱导胰腺癌细胞凋亡通路的实验研究

目的:探讨白藜芦醇对人胰腺癌细胞凋亡的诱导作用及其凋亡通路.方法:运用细胞培养、Western blot分析、MTT方法和流式细胞仪,对一系列胰腺癌细胞株进行白藜芦醇敏感性筛选,同时对其毒性进行评估.结果:白藜芦醇并不能有效地诱导人胰腺癌细胞capan-1、Bxpc-3、Miapaca-2细胞凋亡,但能够有效地诱导colo357及capan-2细胞的凋亡,其机制是通过诱导caspase-3的激活而促进capan-2和colo357凋亡.白藜芦醇对colo357及capan-2细胞株的增殖有抑制效应.白藜芦醇对正常胰腺导管上皮细胞HPDE无明显毒性作用.结论:白藜芦醇通过诱导细胞周期抑制性的蛋白上调和细胞周期的阻滞而在细胞水平上有效地诱导特定胰腺癌肿瘤细胞的凋亡.     

TGF-β1对胰腺癌细胞BxPC-3增殖的影响及机制

目的观察不同浓度梯度及不同时间梯度下外源性TGF-β1对胰腺癌细胞株BxPC-3增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法以正常培养的BxPC-3细胞为空白对照,分别采用1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ng/mL的TGF-β1干预BxPC-3细胞4d。MTT法观察各组胰腺癌细胞的生长情况,并计算肿瘤生长抑制率。同时以正常培养的BxPC-3细胞为对照组,以2.0ng/mL的TGF-β1分别干预BxPC-3细胞1～7d,MTT法绘制两组细胞生长曲线。另外,以2.0ng/mL的TGF-β1干预培养至第4天时分别采集两组细胞,用FCM检测细胞周期,Western blot方法检测细胞周期蛋白CyclinD1的表达。结果与空白对照组相比,TGF-β1干预组BxPC-3增殖受抑,并呈时间及浓度依赖。2.0ng/mL的TGF-β1干预组的最大生长抑制率为12.5%,出现在第4天;细胞周期阻滞在G1/S期;CyclinD1的蛋白表达也明显下调。结论外源性TGF-β1可轻度抑制Smad4纯合子缺失的BxPC-3胰腺癌细胞的生长,机制与细胞周期G/S阻滞及Cyclin D1下调有关。     

高效液相色谱法测定通络通散中柯里拉京的含量

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)测定通络通散中柯里拉京的含量。方法:采用Waters Symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至2.14)(9:91,V/V)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长220nm,柱温40℃。结果:柯里拉京的线性范围为7.90～505.28μg/ml (r=0.9997,n=5);精密度、重复性、稳定性试验的RSD<2%;平均加样回收率为100.83%(RSD<2%)。结论:本实验所建立的HPLC方法简便、准确、可靠,可为通络通散质量标准提供依据。     

生长抑素抑制胰腺癌细胞株生长的作用

目的：观察生长抑素对人胰腺癌细胞株HS766T生长的作用；测定神经鞘磷脂（sphingomyolin,SM）、cAMP、细胞内Ca^2 水平，探讨生长抑素的受体后信息传递作用。方法：细胞培养，分别加入不同浓度的生长抑素，PACAP1－38。应用MTT法来观察细胞增殖程度；薄层层析法测定细胞内SM，放免法测定细胞内cAMP含量；Fura-2/AM测定[Ca^2 ]i。结果：不同浓度的生长抑素（10^-6-10^-12mol/L）均能有效地抑制S766T的生长。能抑制HS766T细胞内SM、cAMP生成和细胞内Ca^2 水平，cAMP生成量和细胞内Ca^2 水平与生长抑素浓度呈负相关。结论：生长抑素能抑制HS766T细胞的生长，它的抑制作用是通过受体介导的。     

Corilagin对HUVEC增殖及细胞周期的影响

目的 研究corilagin对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)损伤人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial ceils,HUVEC)增殖及细胞周期的影响,探索corilagin抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机理.方法 采用ox-LDL复制HUVEC的损伤模型,MTT法观察Corilagin对ox-LDL损伤HUVEC的保护作用.流式细胞术方法分析Corilagin对ox-LDL损伤HUVEC细胞周期的影响.结果 与模型对照组比较,Corilagin (6.25 μmol/L～ 50 μmol/L),作用12h、24 h、48 h对HUVEC有保护作用(P＜0.05).与模型组比较,corilagin组S期细胞比例增加,G1、G2的变异系数减小,sub-G1减小,其各期细胞分布图趋于正常组的分布比例.结论 Corilagin呈浓度依赖性明显抑制ox-LDL对HUVEC的损伤,其机制可能是通过改善内皮细胞周期的G2/M期阻滞而发挥作用.     

姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3生长的影响

目的 探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3体外生长的的影响.方法 采用MTT法测定姜黄素不同浓度及不同时间对人卵巢癌细胞株skov3生长的抑制作用,计算细胞生长抑制率;光镜和电镜下观测细胞形态学及超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果 姜黄素具有诱导人卵巢癌细胞株skov3细胞凋亡的作用,呈剂量和时间依赖性....     

常用化疗药物对胰腺癌细胞株Aspc-1和Bxpc-3生长抑制作用的研究

目的:探讨不同化疗药物浓度、作用时间及联合用药对胰腺癌(Aspc-1和Bxpc-3)细胞株生长抑制作用的影响。方法:单独或联合使用不同浓度的4种化疗药物:5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂及表阿霉素(浓度分为d1、d2、d3、d4),分别作用24h、48h和72h后,用MTT比色法检测药物对两株细胞的生长抑制作用,并对计算出的每组细胞生长抑制率行析因方差分析。结果:单独和联合用药时两株细胞对不同药物的敏感性存在显著性差异(单独用药F=111.0,P<0.001;联合用药F=4.5,P=0.034)。无论是单用药还是联合用药两株细胞的生长抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而显著上升(浓度F=17018,P<0.001;时间F=8461,P<0.001)。另外,两株细胞对相同药物的敏感性也具有有显著性差异(单用药物F=470,P<0.001;联合用药F=136,P<0.001)。结论:通过动脉灌注或保留导管持续灌注以提高化疗药物局部浓度及延长药物作用时间以及根据药敏试验结果采取个体化的化疗方案能够改善胰腺癌的化疗效果。     

敲低造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白对胰腺癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 探讨造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(HPIP)对胰腺癌细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法 采用免疫组织化学染色方法检测胰腺癌组织及对应癌旁组织中HPIP的表达水平,小干扰RNA瞬时转染的方法敲低胰腺癌细胞中HPIP的表达水平,细胞计数试剂盒-8实验、克隆形成实验、流式细胞术检测敲低HPIP对细胞增殖、周期及凋亡的影响,免疫印迹法检测敲低HPIP对于cyclin D1、caspase 7和cleaved caspase 7表达水平的影响。结果 胰腺癌组织中HPIP的表达明显高于癌旁组织(Z=-2.060,P=0.039)。敲低HPIP表达水平后,在24 h起MIA PaCa-2和BxPC-3细胞的生长受到抑制(P均<0.05);MIA PaCa-2(t=4.706,P=0.009)和BxPC-3细胞(t=9.514,P=0.000)形成的阳性克隆数明显减少;MIA PaCa-2(t=7.642,P=0.001)及BxPC-3细胞(t=2.714,P=0.051)中S期细胞比例明显降低,G₀/G₁ 期细胞比例明显增加(t=3.244,P=0.031;t=6.095,P=0.003);MIA PaCa-2(t=24.58,P=0.000;t=29.43,P=0.000)和BxPC-3细胞(t=36.45,P=0.000;t=43.52,P=0.000)中的晚期凋亡率和总凋亡率均明显上升;MIA PaCa-2(t=6.705,P=0.002)和BxPC-3细胞(t=6.238,P=0.003)的cyclin D1表达水平明显下降,caspase 7表达水平变化无统计学意义(t=0.711,P=0.516;t=0.027,P=0.979),cleaved caspase 7表达水平明显上升(t=3.991,P=0.016;t=6.536,P=0.002)。结论 与癌旁组织相比,HPIP在胰腺癌中表达水平较高。敲低HPIP可导致胰腺癌细胞生长受到抑制,细胞周期由G₀/G₁期向S期转化受阻,并促进胰腺癌细胞凋亡。HPIP可能在胰腺癌中发挥癌基因作用。     

多西他赛对结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用

目的探讨多烯他赛治疗结肠癌的作用机制。方法采用不同浓度的多烯他赛处理结肠癌LoVo细胞后,应用四唑蓝比色试验检测细胞增殖,采用端粒重复扩增一微孔板杂交法检测端粒酶活性,分别用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测细胞凋亡,采用流式细胞仪测细胞周期。结果多烯他赛对结肠癌LoVo细胞增殖具有较强的抑制作用。多烯他赛能够抑制端粒酶活性,可诱导结肠癌细胞凋亡,均呈浓度和时间依赖性。结论多烯他赛抑制结肠癌细胞恶性增殖与抑制端粒酶活性、诱导凋亡及细胞周期阻滞有关。     

苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响 及其作用机制探讨

目的:观察苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTT法检测苦参碱对Bcap-37细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:苦参碱对Bcap-37细胞增殖具有明显抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。与对照组比较,药物作用24、48、72h后,苦参碱组的凋亡率均明显增高(P<0.01),并以作用48h最明显。Caspase-3、Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白降低。结论:苦参碱对Bcap-37细胞生长具有明显抑制作用,其作用机制可能与上调Caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡有关。     

人乳腺癌原代细胞和细胞系中肿瘤干细胞的比较

目的比较人乳腺癌原代细胞以及人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231S中乳腺癌干细胞的含量和细胞表型。方法采用流式细胞技术对人乳腺癌原代细胞以及MCF-7、MDA-MB-231S进行检测和分选,并测定不同细胞亚群在裸鼠体内重建肿瘤的能力。结果人乳腺癌原代细胞以及MCF-7、MDA-MB-231S细胞的CD44和CD24表达与分布不同;和人乳腺癌原代细胞相比,MCF-7、MDA-MB-231S细胞中乳腺癌干细胞的含量更高(P<0.01)。结论和人乳腺癌原代细胞相比,人乳腺癌细胞系中含有更高比例的乳腺癌干细胞,并且细胞表型也发生了改变。