神经肽Y对大鼠心肌细胞胞浆钙及钙瞬变的影响

目的观察神经肽Y（neuropeptideY，NPY）对静息状态下心肌细胞胞浆钙含量及兴奋-收缩耦联过程中心肌细胞钙瞬变的影响。方法用NPY（100nmol／L）刺激Sprague—Dawley乳鼠心肌细胞24h，用荧光染料Fluo 4-AM负载胞浆钙，记录静息状态下心肌细胞胞浆钙浓度，并用场刺激诱发胞浆钙瞬变。所有钙影像均由LeicaSP2激光共聚焦显微镜记录。结果NPY组心肌细胞胞浆钙含量明显高于对照组（P〈0.05）；场刺激诱导下NPY组心肌细胞胞浆钙瞬变幅度明显高于对照组（P〈0.01），NPY组钙瞬变恢复时间明显缩短（P〈0．01），钙瞬变上升时阍则无显著差别。结论长时间的NPY刺激可显著影响兴奋-收缩耦联过程中钙的动态活动，并导致胞浆内钙含量增加。     

慢性心衰大鼠心肌细胞内异常钙诱导钙释放的研究

目的研究慢性心衰大鼠心肌细胞内异常的钙诱导钙释放。方法将实验动物分为手术组和假手术组,运用全细胞膜片钳、激光扫描共聚焦显微镜、蛋白印迹（Western-blot）等方法研究胞浆内钙诱导钙瞬变及钙调控相关蛋白L-型钙通道（LTCC）表达的变化。结果慢性心衰大鼠心肌细胞肌浆网内的钙瞬变（ΔF/F0=12.72±1.13）显著低于对照组大鼠心肌细胞肌浆网内的钙瞬变（ΔF/F0=28.87±2.02,P〈0.01）;慢性心衰大鼠心肌细胞内LTCC的表达较对照组下调。结论 LTCC表达下调所致心肌兴奋-收缩耦联的异常是导致心衰的原因之一。     

心肌细胞中的钙火花

细胞离子钙是最普遍、最重要的第二信使之一,参与包括肌肉收缩、突触传递、激素分泌、基因转录以及细胞分裂、受精、代谢和凝血等多种生理过程.对心肌细胞来说,离子钙将电活动与收缩联系起来,即介导细胞的兴奋-收缩耦联.1993年我们首次在激光共聚焦显微镜下发现心肌细胞胞内钙释放的基本单位--钙火花.历经十几年的研究,人们对钙火花和胞内钙信号的本质及兴奋-收缩耦联的微观机理的认识日趋深刻.特别是,新发展起来的非紧密封接膜片钳和激光共聚焦显微镜成像合成技术可以激活单个L型钙通道,通过钙致钙释放机制,诱发钙火花.此文简要介绍心肌细胞中自发和诱发钙火花的研究及其意义,并对有关研究领域的前景作一展望.     

心肌细胞钙稳态研究新进展

钙稳态失衡会引起细胞功能障碍和代谢紊乱,尤其是钙调节紊乱与心血管疾病关系密切,国内外四十多家主流细胞钙实验室正在这一新开拓的领域作综深的研究。在兴奋-收缩耦联过程中,胞质Ca2+浓度发生迅速的升高(钙瞬变的升支)和降低(钙瞬变的降支),这一变化是由肌膜和SR膜上的许多Ca2+转运蛋白完成的。形成钙瞬变升支的Ca2+中,经DHPR内流的约占10%～20%,其余80%～90%是由SR释放的。钙瞬变降支的形成与SRCa2+泵、肌膜Na+/Ca2+交换体和Ca2+泵的活动有关。目前,对心肌细胞的钙转运了解较多。包括心肌细胞膜的钙转运系统钙通道Na+/Ca2+交换体…     

δ阿片受体信号转导的研究进展

δ阿片受体属G蛋白偶联受体,其配体可抑制细胞内环磷酸腺苷水平和调节电压依赖的钙离子通道和钾离子通道.最近研究还发现,δ阿片受体选择性配体可介导细胞内储存钙的释放,并且调节各种蛋白激酶.本文就δ阿片受体的信号转导途径的研究进展进行.     

成年大鼠心肌细胞分离培养及兴奋-收缩耦联表征

目的比较两种细胞分离液分离成年大鼠心肌细胞,进一步表征成年大鼠心室肌细胞兴奋-收缩耦联。方法 Langendorff装置进行主动脉逆流灌流,分别用两种细胞分离液分离成年大鼠心肌细胞,无血清培养并进行腺病毒感染。显微镜下观察单个心肌细胞的形态学特点,荧光显微镜下检测病毒感染。采用IonOptix仪器检测心肌细胞肌节收缩-舒张指标以及心肌细胞钙离子摄入-排出指标。结果两种分离液均可获得70%横纹清晰的长杆状心肌细胞,培养可存活7 d以上。腺病毒感染48 h,绿色荧光蛋白持续表达7 d以上。分离液一获得的心肌细胞不能很好地随电场刺激产生收缩,分离液二获得的细胞可用于检测兴奋-收缩耦联特性,心肌细胞肌节缩短分数为11.61%±2.15%,舒张时间为(0.177±0.031)s,钙瞬变幅度为30.79%±9.74%,钙瞬变衰减时间为(0.300±0.074)s。结论两种分离液均可用于分离和培养成年大鼠心肌细胞,并用于腺病毒转染等长时程研究。分离液二更适用于检测成年大鼠心肌细胞的兴奋-收缩耦联特性。     

依托咪酯对大鼠大脑皮层突触体神经递质释放的影响

目的了解依托咪酯是否通过抑制突触前神经递质释放而影响中枢突触传递的。方法利用SD大鼠新鲜分离的大脑皮层突触体，以50mmol／LKCl为化学刺激剂去极化。采用高效液相测定法。测定依托咪酯对去极化诱发突触体神经递质谷氨酸和GABA释放的影响。结果不同浓度的依托咪酯（0．4、4和40μmol／L）分别抑制大鼠大脑皮层突触体钙依赖的兴奋性氨基酸谷氨酸（抑制率为对照值的13％．25％和30％）和抑制性氨基酸GABA（抑制率为对照值的7％，16％和37％）的释放。结论依托咪酯抑制突触前神经递质-谷氨酸和GABA的释放，提示依托咪酯在突触前水平可能通过下调突触传递．而使整个大脑皮层处于低水平的兴奋／抑制平衡状态。     

良性前列腺增生致逼尿肌活动低下患者逼尿肌细胞Ryanodine受体2水平的变化

良性前列腺增生（BPH）是老年男性的常见疾病，其发病率在逐年上升。BPH引起的膀胱出口梗阻（BOO）常导致逼尿肌活动低下（underactive detrusor，UAD）等逼尿肌功能障碍，从而引起一系列的排尿困难症状，如：排尿用力、排尿等待、尿线断续等。Ryanodine受体（Ryanodine receptor，RyR）是位于肌浆网／内质膜网上的一种细胞内钙离子释放通道，主要参与肌细胞的兴奋．收缩耦联。有研究表明人类膀胱逼尿肌中只存在RyR亚型2。我们采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹方法从mRNA及蛋白两个水平观察BPH致UAD患者膀胱逼尿肌中的RyR2表达水平变化的情况，现将结果报道如下。     

羟嘌呤醇对衰竭心肌蛋白氧化和心肌收缩力的长期效果

目的研究黄嘌呤氧化酶（XO）抑制剂——羟嘌呤醇（Oxy）增强缺血后心力衰竭心肌收缩力的长期效果,并初步探讨其作用机制。方技将120只SV120小鼠随机分为心肌梗死（MI）对照组、假手术组和Oxy治疗组。通过结扎冠状动脉左前降支（LAD）建立小鼠缺血后心力衰竭模型。Oxy治疗组口服1mmol／L Oxy。9～11个月后,对三组小鼠进行心脏超声检查;取右心室束状肌分析其心肌兴奋-收缩耦联的变化。应用激光光栅衍射测定肌节长度;应用离子渗透微注射法向样本心肌细胞内注入Fura-2荧光染料,测量心肌细胞质内游离Ca^2＋浓度（[Ca^2＋]．）;通过应用ryanodine和增加刺激频率的方法使心肌达到强直收缩,即心肌纤维与Ca^2＋的相互作用处于稳定状态,分析在稳定状态下心肌收缩力一细胞内钙关系;应用Western blotting测定肌丝蛋白的氧化情况。结果长期口服Oxy能明显改善心力衰竭小鼠的心脏收缩功能,减小室壁厚度;明显改善心肌细胞的兴奋-收缩耦联过程,有效地增强心肌收缩力,显著提高稳态时心肌细胞钙激活的最大收缩力（Fmax）。Western blotting检测显示,与MI对照组心肌肌丝蛋白相比,Oxy治疗组中的肌动蛋白氧化修饰受到明显抑制。结论长期服用Oxy能够有效改善衰竭心肌的工作状态,改善／促进兴奋-收缩耦联过程,增强心肌收缩力。这种长期作用的机制是抑制心肌肌丝中肌动蛋白的氧化修饰,从而增强肌丝对钙的敏感性,增加收缩力。Oxy由于对[Ca^2＋]．的增加较小,能够减轻细胞内Ca^2＋负担及其所带来的负作用,具有更好的临床应用前景。     

慢性心衰大鼠心肌细胞内异常的钙通道研究

目的研究慢性心衰大鼠心肌细胞内异常的钙通道。方法将雄性SD大鼠被随机分为手术组和假手术组,运用激光扫描共聚焦显微镜、Western-blot等方法研究胞浆内咖啡因诱导钙瞬变及钙释放通道RyR2和其调节蛋白FKBP12.6表达的变化。结果慢性心衰大鼠心肌细胞内钙瞬变（ΔF/F0=11.9±0.9）显著低于对照组大鼠心肌细胞内钙瞬变（ΔF/F0=33.2±1.6,P〈0.05）;慢性心衰大鼠心肌细胞内FKBP12.6的表达较对照组下调。结论 FKBP12.6表达下调所致Ca2＋泄漏是导致心衰的原因之一。     

椎弓根内固定两种术式治疗腰椎爆裂骨折效果探讨

目的：探讨硫酸钙骨水泥联合椎弓根内固定治疗腰椎爆裂骨折的临床效果。方法：选择35例患者使用硫酸钙骨水泥联合椎弓根内固定,并与单纯使用椎弓根内固定的患者比较,两组患者术中术后情况以及术后椎体前缘高度比值、后凸Cobb角及复位丢失率。结果：两组手术时间差异无统计学意义（P〉O．05）,同时术中出血亦无统计学意义（P〉O．05）,而术后下床时间上,观察组则显著快于对照组（P〈O．05）,术后观察组患者椎体前缘高度比值显著大于对照组（P〈O．05）,后凸Cobb角显著小于对照组（P〈O．05）,而复位丢失率则显著低于对照组（P〈O．05）。结论：使用硫酸钙骨水泥联合椎弓根内固定能更好的恢复患者脊柱稳定性,促进患者术后恢复。     

氯吡格雷联合阿托伐他汀钙治疗急性脑梗死疗效观察

目的:对比氯吡格雷联合阿托伐他汀钙与单用阿托伐他汀钙治疗脑梗死的疗效。方法:将符合入选标准的110例患者随机分为观察组和对照组各55例,观察组在常规治疗的基础上加用氯吡格雷和阿托伐他汀钙,对照组单用阿托伐他汀钙,分别于治疗前、治疗后3个月检测患者的血脂水平、颈动脉中膜厚度(IMT);对患者进行0.5年随访,用美国国立卫生研究所脑卒中量表(NIHSS)和日常生活功能量表(ADL)进行评分,评定患者神经功能缺损和日常生活能力。结果:治疗后3个月与治疗前比较,观察组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均下降(P<0.05),对照组TC值、LDL-C值下降(P<0.05);观察组患者经治疗后3个月IMT值较治疗前降低(P<0.05);治疗后6个月两组患者ADL评分增加、NIHSS评分减低,但是治疗后6个月时观察组ADL评分高于对照组(P<0.05),NIHSS评分低于对照组(P<0.05)。结论:氯吡格雷联用阿托伐他汀钙应用于脑梗死患者能更有效地降脂、使IMT变薄、有效改善脑梗死患者日常生活活动能力和神经功能缺损。     

依达拉奉对幼鼠惊厥持续状态后海马XBP1 mRNA和caspase12表达及神经元凋亡的影响

目的：探讨依达拉奉对幼鼠惊厥持续状态（status convulsion,SC）后海马内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）关键标志分子X盒结合蛋白1（X-box binding protein 1,XBP1）mRNA、caspase-12的表达及神经元凋亡的影响。方法：将19～21日龄SD大鼠随机分入惊厥持续状态（SC）组、依达拉奉（ED）组、生理盐水对照（NS）组;各组再按不同时间点分五个亚组。应用氯化锂-匹鲁卡品建立大鼠SC模型,用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）动态观察SC后海马XBP1、caspase-12 mRNA的表达情况。用免疫组织化学方法观察海马caspase-12蛋白表达情况。用TUNEL法观察神经元凋亡细胞数。结果：幼年大鼠海马中XBP1和caspase-12在SC组表达显著增强,与NS组比较差异有显著性（P〈0.01）;与SC组比较,ED组XBP1 mRNA表达显著升高（P〈0.01或P〈0.05）,caspase-12 mRNA及蛋白表达显著降低（P〈0.01或P〈0.05）;SC组在惊厥12 h后的各时间点海马CA1区TUNEL阳性细胞数均显著高于NS组（P〈0.01）,而ED组TUNEL阳性细胞数均较SC组显著下降（P〈0.01或P〈0.05）。结论：依达拉奉有可能通过上调XBP1的表达与下调caspase-12的表达,并使神经元凋亡数目减少,从而发挥对神经元的保护作用。     

孕期给予复方碳酸钙制剂对孕妇及新生儿骨健康的影响

目的：观察孕期给予复方碳酸钙制剂对孕妇及新生儿骨健康的影响。方法：选取我院2010年3月至2012年11月受检的130例健康孕妇作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组与对照组各65例,两组孕妇均给予饮食指导、补充钙质摄入,观察组加用复方碳酸钙制剂口服,直至分娩结束。比较两组孕妇血钙浓度、骨密度及新生儿骨密度、体质量及身高等情况。结果：两组孕妇治疗前血钙浓度及骨密度水平比较均无明显差异（P〉0．05）,分娩1周后两组孕妇血钙浓度水平与治疗前比较无明显差异（P〉0．05）,观察组骨密度较治疗前有明显提高（P〈0．05）,与对照组比较有显著差异（P〈0．05）,具有统计学意义。两组新生儿身高比较无明显差异,观察组体质量、骨密度水平均明显高于对照组（P〈0．05）,具有统计学意义。结论：孕期给予补充钙剂可促进孕妇及新生儿的骨健康,对促进新生儿骨骼发育有一定价值。     

氨氯地平阿托伐他汀钙片应用于高血压并高血脂治疗的临床效果分析

目的：探讨氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗高血压并高血脂的临床疗效。方法：选取2009年2月至2012年2月入我院治疗的52例高血压并高血脂患者。随机分为治疗组和对照组各26例,治疗组给予氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗,对照组给予阿托伐他汀钙片治疗,比较两组的临床疗效。结果：治疗后治疗组的总有效率为88．46％（23／26）,显著高于对照组的总有效率69．22％（19／26）,P〈0．05;治疗后TG、TC、LDL治疗组均显著低于对照组,P〈0．05,HDL显著高于对照组,P〈0．05;治疗组收缩压（SBP）和舒张压（DBP）均较治疗前显著降低,且治疗后均显著低于治疗组,P〈0．05。结论t氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗高血压并高血脂的临床疗效显著,能有效控制血脂和血压,临床价值可观。     

不同配比辛芍组方对PC12细胞氧糖剥夺损伤的保护作用

目的：观察不同配比辛芍组方对PC12细胞氧糖剥夺损伤的保护作用,探讨组方的最佳配比.方法：采用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）建立PC12细胞氧糖剥夺损伤（oxygen glucose deprivation,OGD）模型,将细胞分为空白组、模型组、阳性组（尼莫地平）、辛芍药物不同配比组（灯盏细辛与赤芍质量比分别为5∶0、4∶1、3∶2、2∶3、1∶4、0∶5）,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）释放量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮（N0）含量.结果：与正常组比较,模型组的细胞存活率和SOD活性显著降低（P＜0.01）,细胞LDH释放量、MDA和NO水平显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,辛芍2∶3配比组显著提升细胞存活率（P＜0.05）,同时辛芍3∶2和2∶3配比组均显著降低细胞LDH释放量以及MDA和NO水平（P＜0.05）,提高SOD活性（P＜0.05）.结论：辛芍2∶3配比对PC12细胞氧糖剥夺损伤的保护作用较好.     

醋酸钙与碳酸钙治疗血液透析患者高磷血症的疗效比较

目的：比较醋酸钙与碳酸钙治疗血液透析患者高磷血症的治疗效果.方法：以碳酸钙作为对照,以血磷、血钙、血浆全段甲状旁腺激素（iPTH）和不良反应发生率为观察指标,比较醋酸钙和碳酸钙的疗效和安全性.结果：0-8周两组血磷水平均下降,第2周醋酸钙和碳酸钙组血磷水平分别为（1.91＆#177;0.78）mmol/L和（2.14＆#177;0.57）mmol/L,差异有显著性（P＜0.05）;0-8周两组血钙水平均上升,第8周醋酸钙和碳酸钙组血钙水平分别为（2.41＆#177;0.31）mmol/L和（2.72＆#177;0.21）mmol/L,差异有显著性（P＜0.05）;0-8周iPTH两组比较无差异;不良反应发生率醋酸钙组为20％,碳酸钙组为23％,发生率比较无显著性差异.结论：醋酸钙降低血磷的效果与碳酸钙相同,但其起效时间较碳酸钙短;醋酸钙同样可导致血钙的升高,但血钙升高的幅度较碳酸钙小,也较少发生高钙血症,胃肠道反应是其主要的副作用,综合考虑,醋酸钙较碳酸钙在治疗高磷血症上有更多的优势.     

重症患者红细胞膜钙泵和胞内总钙的变化及其临床意义

目的研究重症患者红细胞内外钙离子浓度的变化与预后关系。方法检测100例重症患者及50例健康对照组的红细胞膜钙泵活性、细胞内外钙离子浓度,重症患者根据血清钙离子水平分为低血钙组和正常血钙组,比较两组间APACHEⅡ评分、MODS发生率、ICU住院时间和住院病死率的差异。结果与健康对照组比较,重症患者的红细胞内总钙水平较高、红细胞膜钙泵活性较低,重症低血钙组的红细胞内总钙水平明显高于重症正常血钙组（P〈0.05）,而红细胞膜钙泵活性明显低于重症正常血钙组（P〈0.05）,血清钙离子水平与红细胞膜钙泵活性呈正相关（r=0.547,P〈0.01）,与红细胞内总钙水平呈负相关（r=-0.558,P〈0.01）;重症低血钙组的APACHEⅡ评分、MODS发生率、ICU住院时间和病死率明显高于重症正常血钙组（P〈0.05）。结论重症患者低血钙的发生机制可能与细胞外钙向细胞内流动有关;血清钙水平与患者的疾病严重程度呈负相关。     

温灸家兔足三里诱发钙离子在不同组织分布研究简

目的：研究钙离子在温灸经穴线上不同组织分布的空间特异性,探讨经络信息传导通路的相对位置。方法：选用健康成年家兔,选取--＇N后肢“足三里”温灸后,对灸后经穴皮肤、浅筋膜、深筋膜、肌肉的钙离子浓度分层定位测定分析,并与另一侧后肢“足三里”及非经穴组上各层组织钙离子浓度进行比较。结果：①正常家免足三里穴上皮肤以及浅筋膜层钙离子浓度明显高于非经穴组（P〈O．05）,而深筋膜层和肌肉层钙离子浓度没有显著差异;②温灸家兔足三里穴上肌肉层钙离子浓度均高于非艾灸足三里以及非经穴组（P〈O．05）：③温灸家兔足三里穴上皮肤、浅筋膜层钙离子浓度与非灸经穴组对比有减少的趋势,但无显著性差异（P〉O．05）。结论：①经穴皮肤与浅筋膜存在钙离子富集现象,可能是经络实质机理之一。②温灸穴位后,肌肉层钙离子浓度增高可能与温灸引起经络效应有关。     

硫酸镁联合碳酸钙治疗子痫前期的效果观察

目的：探讨硫酸镁联合碳酸钙治疗子痫前期的临床效果。方法：回顾性分析本院收治的118例子痫前期患者的临床资料,根据治疗方法分为治疗组和对照组各59例,治疗组采用硫酸镁联合碳酸钙治疗,对照组仅采用硫酸镁治疗,疗程结束后,观察两组患者的临床疗效。结果：治疗后治疗组的总有效率为93.22%,明显高于对照组的84.75%,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗前两组患者的血黏度、血细胞压积、24 h尿蛋白定量比较差异均无统计学意义（P〉0.05）,治疗后治疗组血黏度（2.21±0.62）mPa·s、血细胞压积（35.71±5.22）%、24 h尿蛋白定量（1.04±0.29）g/24 h,均显著低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用硫酸镁联合碳酸钙治疗子痫前期孕妇能显著改善血液指标,降低尿蛋白量,临床疗效显著。