硒干预过量碘致甲状腺滤泡上皮细胞组织蛋白酶活性下降的作用

目的:探讨硒干预过量碘对甲状腺滤泡上皮细胞组织蛋白酶活性下降与胶质潴留的作用及其机制。方法:FRTL细胞培养于Kaighn’s改良的Ham’sF-12培养基。①测定组织蛋白酶B和D(CB、CD)活性。细胞分组:正常对照组:培养基内不加碘或硒;过量碘组:培养基内加入50mmol/L碘化钾(KI);过量碘加硒组:培养基内加入50mmol/LKI和硒浓度分别为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0和5.0μmol/L的亚硒酸钠(Na2SeO3)。②测定CB和CDmRNA的水平。细胞分组同上,但过量碘补硒组只加0.1μmol/L的硒。收集细胞,荧光定量PCR测定CB和CDmRNA水平。结果:0.1～0.5μmol/L补硒组CB、CD活性较过量碘组显著升高(p﹤0.05)。补充硒可以升高由50mmol/L碘导致的CB、CDmRNA水平下降。结论:补充0.1～0.5μmol/L剂量范围的硒可使过量碘导致的CB、CD损伤好转,这也是硒可缓解胶质潴留的原因之一。     

过量碘对甲状腺细胞凋亡的影响

目的通过研究观察过量碘对甲状腺细胞凋亡相关基因的影响,探讨过量碘促进甲状腺细胞凋亡的机制。方法选取FRTL细胞系为研究对象,正常对照组培养基内不加碘,过量碘组分别含碘(碘化钾)1、5、10、50和100mmol/L,培养24h,流式细胞术测定凋亡细胞的比例,荧光定量PCR法测定5、10、50mmol/L碘剂量组fas、fasL、Bcl-2和Bax的 mRNA水平。结果与正常对照组比较,10、50和100mmol/L碘剂量组FRTL细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。5mmol/L碘组各项指标与正常对照组比较差异无显著性。10mmol/L和50mmol/L碘组fasL和Bax mRNA水平较正常对照组显著升高(P<0.05),Bcl-2 mRNA水平较正常对照组显著下降(P<0.05)。10mmol/L碘组fas与正常对照组比较差异无显著性,50mmol/L碘组fas较正常对照组显著升高(P<0.05)。结论过量碘可通过调节fas、fasL、Bcl-2及Bax的表达而促进影响甲状腺细胞凋亡的发生。     

过量碘对甲状腺激素代谢的损伤及硒的干预作用

目的研究过量碘性甲状腺激素代谢紊乱的机制并寻求合适的硒干预剂量。方法140只Balb/c小鼠分为7组:正常组、过量碘组(饮水含碘3000μg/L)和5个补硒组(饮水含碘3000μg/L,硒分别为0.1、0.2、0.3、0.4和0.5mg/L),共喂养16周。放射免疫法测定血清甲状腺激素水平,砷铈催化分光光度法测定尿碘和甲状腺碘水平,测定甲状腺谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和甲状腺过氧化物酶(TPO)活性以及丙二醛(MDA)水平。结果0.1～0.5mg/L补硒组甲状腺激素水平与正常组比较差异无显著性,0.2mg/L补硒组甲状腺内碘含量较过量碘组显著下降(P<0.05),0.2～0.3mg/L补硒组甲状腺GSH-Px、SOD活性和MDA水平与正常组比较差异无显著性,0.1～0.3mg/L补硒组TPO活性与正常组比较差异无显著性。结论补充硒对过量碘导致的小鼠甲状腺氧化/抗氧化水平失衡、TPO活性水平下降都有有效的干预作用。     

硒对小鼠过量碘性1型脱碘酶损伤的干预作用研究

目的研究过量碘性甲状腺损伤的机制并寻求合适的硒干预剂量。方法160只BALB/c小鼠分为8组:正常组、过量碘组(饮水含碘3000μg/L)和6个补硒组(饮水含碘3000μg/L,硒分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5和0.75mg/L),共喂养16周。测定肝脏、肾脏和甲状腺组织1型脱碘酶(D1)活性,逆转录聚合酶链反应技术测定D1mRNA水平。结果与正常组比较,过量碘组D1活性、mRNA水平下降,而补充0.1～0.4mg/L硒组上述指标与正常组差异无显著性。结论D1活性、mRNA水平下降可能是过量碘性甲状腺损伤的机制之一,而补充硒应选择合适的干预剂量。     

碘过量对人甲状腺细胞的损伤作用及机制研究

目的探讨碘过量对人正常甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)的损伤作用及机制。方法用0(对照)、1、10、50mmol/L的碘化钾(KI)作用于体外培养的Nthy-ori 3-1细胞24 h后,分别采用噻唑蓝(MTT)法、乳酸脱氢酶(LDH)比色法检测细胞存活率和LDH漏出率,利用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、细胞周期构成比及凋亡率。结果与对照组相比,50 mmol/L碘染毒组细胞存活率明显下降(P<0.05),LDH漏出率明显上升(P<0.05)。各剂量组之间ROS产生水平差异无统计学意义。50 mmol/L碘染毒组G0/G1期细胞百分比明显增多(P<0.05),但S期百分比明显减少(P<0.05),且细胞凋亡率明显上升(P<0.05)。结论一定剂量的碘能降低甲状腺细胞存活率,增加LDH漏出率,细胞G0/G1期阻滞和诱导细胞凋亡,碘对甲状腺的损伤作用可能与碘对细胞周期的影响有关。     

Effect of Iodide Excess on Human Thyroid Cells ( Nthy-ori 3-1) Apoptosis

目的 探讨碘过量对人正常甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)的损伤作用及机制.方法 用0(对照)、1、10、50mmol/L的碘化钾(KI)作用于体外培养的Nthy-ori 3-1细胞24h后,分别采用噻唑蓝(MTT)法、乳酸脱氢酶(LDH)比色法检测细胞存活率和LDH漏出率,利用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、细胞周期构成比及凋亡率.结果 与对照组相比,50 mmol/L碘染毒组细胞存活率明显下降(P＜0.05),LDH漏出率明显上升(P＜0.05).各剂量组之间ROS产生水平差异无统计学意义.50 mmol/L碘染毒组G0/G1期细胞百分比明显增多(P＜0.05),但S期百分比明显减少(P＜0.05),且细胞凋亡率明显上升(P＜0.05).结论 一定剂量的碘能降低甲状腺细胞存活率,增加LDH漏出率,细胞G0/G1期阻滞和诱导细胞凋亡,碘对甲状腺的损伤作用可能与碘对细胞周期的影响有关.     

高碘和/或高氟致人甲状腺细胞凋亡与内质网应激的关系

目的研究内质网应激在高碘和/或高氟致人甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)凋亡中的作用,探索高碘和/或高氟致甲状腺细胞凋亡的机制。方法用碘化钾(KI)1、10、50mmol/L,氟化钠(NaF)1mmol/L及高碘高氟联合(50mmol/L KI+1mmol/L NaF)作用于人甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)24h,利用噻唑蓝(MTT)法、比色法检测细胞活性和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,利用逆转录PCR法、Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌醇需要酶(IRE1)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的mRNA和蛋白及切割的X盒结合蛋白(sXBP-1)mRNA表达情况。结果 50mmol/L KI组、1mmol/L NaF组及50 mmol/L KI+1 mmol/L NaF组细胞活性[(73.54±8.37)%、(84.54±7.55)%、(72.62±7.15)%]低于对照组细胞活性[(100.00±0.00)%](P0.05),LDH漏出率[(38.00±2.04)%、(36.43±0.82)%、(38.73±1.36)%]高于对照组[(32.86±2.32)%](P0.05),凋亡率[(15.53±1.26)%、(12.42±2.05)%、(16.42±1.35)%]也高于对照组[(7.87±1.40)%](P0.05)。高氟和高碘高氟联合可诱导GRP78、IRE1和CHOP的mRNA和蛋白及sXBP-1mRNA表达上升(P0.05)。结论高碘和/或高氟可通过诱导细胞凋亡对甲状腺细胞造成毒性作用,高碘诱导的凋亡可能与IRE1途径无关,但高氟、高碘高氟联合诱导的甲状腺细胞凋亡可能与IRE1途径有关。高碘高氟共存作用于甲状腺时存在拮抗效应。     

碘过量对胰岛β细胞功能的影响及机制

目的探索碘过量暴露对小鼠胰岛素瘤细胞系β-TC-6胰岛素分泌功能影响及机制。方法β-TC-6细胞在对数生长期暴露于0、0.01、0.1、1、10和100 mmol/L碘24 h,采用四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率。细胞经0.01、1、和100 mmol/L碘干预24 h后,用5.6 mmol/L葡萄糖刺激细胞1 h,酶联免疫分析(ELISA)法检测上清胰岛素含量。蛋白印迹法(Western blot)检测GRP78、IRE1α、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与对照组比较,1~100 mmol/L碘处理组细胞存活率显著降低(P<0.05);1 mmol/L组细胞胰岛素分泌量显著增加(P<0.05),100 mmol/L组细胞胰岛素分泌量显著下降(P<0.05),1和10 mmol/L组GRP78、IRE1α和Bax蛋白表达量显著增加(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。5.6 mmol/L葡萄糖+0 mmol/L碘组、5.6 mmol/L葡萄糖+0.01 mmol/L碘组和5.6 mmol/L葡萄糖+1 mmol/L碘组分别与相应对照组比较,细胞胰岛素分泌量组间差异显著(P<0.05)。结论过量碘可降低β-TC-6细胞胰岛素分泌量,损害胰岛素分泌功能,其机制很可能与内质网应激和Bcl-2/Bax蛋白表达比例失衡密切相关。     

IRE1通路在高碘诱导甲状腺细胞凋亡中的作用

目的 观察IRE1通路在高碘诱导甲状腺细胞凋亡中的特征,进一步分析高碘诱导甲状腺细胞凋亡的作用机制.方法 用0(对照)、1、10、50 mmol/L的碘化钾(KI)染毒体外培养的Nthy-ori 3-1细胞,24h后采用流式细胞术检测Nthy-ori 3-1细胞凋亡率,用荧光定量PCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、肌醇需求酶-1(IRE1)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)基因蛋白的表达水平.结果 与0(对照)、l、10 mmol/L KI染毒组相比,50 mmol/L KI染毒组细胞凋亡率升高(P＜0.05);与对照组相比,各染毒组GRP78、IRE1 mRNA表达水平均无统计学差异(P＞0.05),CHOP mRNA表达水平升高(P＜0.05),GRP78、IRE1和CHOP蛋白表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 内质网应激中IRE1通路可能没有参与高碘诱导的Nthy-ori 3-1细胞凋亡过程.     

硒对小鼠高碘性氧化损伤的干预作用研究

目的:研究高碘性甲状腺肿形成的机制并寻求合适的硒干预剂量。方法:140只Balb/c小鼠分为7组:正常组、高碘组(饮水含碘3000μg/L)和5个补硒组(饮水含碘3000μg/L,硒分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L),共喂养16w。放射免疫法测定甲状腺激素水平,测定血浆、肝脏、肾脏和甲状腺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)水平。结果:高碘组GSH-Px、SOD活性下降,MDA含量升高,而经饮水补充0.2~0.3mg/L硒组各项指标与正常组无显著性差异。结论:高碘会导致小鼠抗氧化能力下降,而经饮水补充0.2~0.3mg/L硒是有效的干预剂量。     

钙磷对体外培养成骨细胞增殖、分化和矿化影响的研究

目的研究钙、磷对体外培养成骨细胞(OB)增殖、分化及矿化的作用,探讨钙、磷对骨代谢的影响。方法在体外培养OB的基础上,分别添加1、2、4mmol/L钙、1、2、4mmol/L磷及2mmol/L钙+1mmol/L磷(钙磷比2∶1)、1mmol/L钙+2mmol/L磷(钙磷比1∶2)。检测细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)含量及其mRNA表达情况。结果与对照组比,饲料中添加4mmol/L钙从D2开始促进OB增殖,差异显著(P<0.05),添加1、2mmol/L钙从D5开始差异显著(P<0.05),而钙磷比2:1与1:2到D8差异才显著(P<0.05)。除1mmol/L钙组外,各试验组从D2起均抑制细胞内ALP活性(P<0.05),在D5抑制其mRNA表达(P<0.01),在D2、D8促进其mRNA表达(P<0.05)。除1mmol/L钙组外,各试验组在D2均促进Col-Ⅰ分泌(P<0.01),但钙各组和1mmol/L磷组在D5、D8及2mmol/L磷组和钙磷比(1:2)组在D8均抑制其分泌(P<0.05)。各试验组,在D2、D8均促进Col-ⅠmRNA表达(P<0.01),在D5除钙磷比(1:2)组外均抑制其mRNA表达(P<0.01)。各试验组促进OPNmRNA表达(P<0.01),除1、2mmol/L钙组外,各实验组从D2起均促进其分泌(P<0.0)。结论添加钙及2种钙磷比(2:1,1:2)均能抑制成骨细胞早期分化,诱导其增殖及重叠生长,促进其基质成熟及矿化,而磷对其增殖作用不明显。     

乙苯对HEI-OC1细胞增殖及氧化应激水平的影响

目的:研究乙苯染毒后耳蜗毛细胞株（HEI-OC1）细胞增殖及氧化指标的变化。方法:于2019年7至12月,设置乙苯浓度分别为0、30、60、90、300、600、900 μmol/L和3、6、9、10 mmol/L,共11个浓度组,用CCK-8法测定乙苯染毒24 h后HEI-OC1细胞增殖活性;以0、1、2、4、8、1...     

膳食碘过量对大鼠脑中胆囊收缩素基因表达的影响

目的 观察过量碘膳食对成年大鼠脑中胆囊收缩素(CCK)基因表达的影响,探讨发生机制.方法 选用断乳1月龄的Wistar大鼠,按体重随机分为5组,每组30只,摄碘量分别为6.15(A组)、30.75(B组)、61.5(C组)、307.5(D组)、615 μg/d(E组),各组均饲以正常鼠料,饮用含不同碘浓度的水,饲养3、6个月后处死,用放射免疫分析方法测定血清甲状腺激素水平;取脑组织,采用RT-PCR方法检测脑组织CCK mRNA的表达.结果 3个月时,E组大鼠血清总甲状腺素T4(TT4)(45.2±13.7)nmol/L、总甲状腺素T3(TT3)(0.65±0.20)nmol/L、游离甲状腺素T3(FT3)(0.93±0.45)pmol/L、游离甲状腺素T4(FT4)(7.07±2.43)pmol/L、反三碘甲状腺原氨酸(rT3)(0.15±0.04)nmol/L均明显低于A组的TT4(76.0±18.8)nmol/L、TT3(1.34±0.41)nmol/L、FT3(2.45±0.62)pmol/L、FT4(15.12±3.40)pmol/L、rT3(0.24±0.04)nmol/L(F值分别为14.68、16.03、21.16、20.25、13.52,P＜0.01);C组、D组的FT3水平与A、B组比较降低(F=21.16,P＜0.05);D组的rT3水平与A、B、C组比较也有降低(F=13.52,P＜0.05).6个月时,E组TT4(51.84±15.83)nmol/L、TT3(0.77±0.22)nmol/L、FT3(0.74±0.28)pmol/L、FT4(6.88±2.23)pmol/L、rT3(0.14±0.03)nmol/L均低于其余各组(F值分别为6.05、12.22、11.25、13.42、5.89,P＜0.05).E组大鼠脑中CCK mRNA水平在3个月和6个月时与其余各组比较均降低(F值分别为4.04、3.95,P＜0.01).相关分析结果显示:3、6个月时血清FT4水平与CCK mRNA水平间存在着线性相关趋势(r值分别为0.990、0.948,P＜0.05).3个月、6个月时血清FT3水平与CCK mRNA水平间不存在线性相关关系(r值分别为0.970、0.932).结论 高于正常100倍的碘摄入会引起大鼠脑中CCK mRNA水平的降低;在此过程中,FT4水平的改变较FT3而言可能起着更重要的作用.     

Prolonged high iodine intake is associated with inhibition of type 2 deiodinase activity in pituitary and elevation of serum thyrotropin levels

Our previous epidemiological study indicated that excessive intake of iodine could potentially lead to hypothyroidism. In the present study, we aimed to investigate the time and dose effect of iodine intake on serum thyrotropin (thyroid-stimulating hormone, TSH) levels and to explore the non-autoimmune regulation of serum TSH by pituitary type 2 deiodinase (D2). A total of 360 Wistar rats were randomly divided into five groups depending on administered iodine dosages (folds of physiological dose): normal iodine (NI), 3-fold iodine (3HI), 6-fold iodine (6HI), 10-fold iodine (10HI) and 50-fold iodine (50HI). At 4, 8, 12 and 24 weeks after administration of sodium iodide, blood was collected for serum TSH measurement by chemiluminescent immunoassay. Pituitaries were also excised for measurement of TSHβ subunit expression, D2 expression and activity, monocarboxylate transporter 8 (MCT8) and thyroid hormone receptor β2 isoform (TRβ2) levels. The results showed that iodine intake of 10HI and 50HI significantly increased pituitary and serum TSH levels from 8 to 24 weeks (P?相似文献   

碘化钾对实验性铅性肾病的保护作用及其对核因子-κB及纤维连接蛋白表达的影响

目的 观察碘化钾对染铅大鼠肾脏组织的核因子-κB(NF-κB)及纤维连接蛋白(FN)表达的影响.方法 SD大鼠72只适应性饲养1周,随机分为9组,每组8只,正常对照组,分别予蒸馏水喂饮1、2、3月;染铅组分别给予0.5%的醋酸铅喂饮1、2、3月;碘化钾组,在给予0.5%的醋酸铅喂饮的同时予碘化钾3 mg/100g体重,每天1次灌胃.用电子显微镜观察肾脏超微病理改变;用免疫组化的方法检测肾组织中NF-κB及FN蛋白的表达,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测肾组织中NF-κB及FN mRNA的表达.结果 染铅3个月时,碘化钾可抑制铅所导致的肾脏小管上皮细胞和线粒体损伤.染铅1、2、3个月组肾组织中NF-κB蛋白表达分别为0.2315±0.0624、0.3213±0.0740、0.4729±0.0839,mRNA表达分别为0.4370±0.0841、0.5465±0.0503、0.6443±0.0538,较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).碘化钾治疗3个月组NF-κB蛋白表达为0.3152±0.0881,mRNA表达为0.5491±0.0746,较相应染铅组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).染铅2、3个月组肾组织FN蛋白表达为0.4243±0.0595、0.4917±0.0891,mRNA表达为0.8650±0.0880、0.8714±0.0980,较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).碘化钾治疗3个月组FN蛋白表达为0.4068±0.0696,mRNA表达为0.7793±0.0613,与相应染铅组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 碘化钾能改善染铅大鼠肾脏超微结构,可降低铅所导致的肾脏组织中核因子-κB及纤维连接蛋白的表达.     

过量碘摄入导致肝脏脂肪变性及其机制的研究

目的观察过量碘摄入对肝脏脂代谢的影响,并探讨其相关分子机制。方法清洁级雌性断乳Balb/c小鼠60只,按体重随机均分为6组。碘剂量分组为:A组0;B组,300μg/L;C组,600μg/L;D组,1200μg/L;E组2400μg/L;F组4800μg/L。第3月末,放射免疫法测定甲状腺激素水平,测定血清及肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。通过实时聚合酶链反应(real-time PCR)方法测定肝脏固醇结合原件调节蛋白-1C(sterol regulatory element binding proteins1c,SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)基因表达水平。结果各剂量组小鼠的尿碘水平呈碘剂量依赖性升高。过量碘摄入导致血清总三碘甲状腺氨酸(TT3)水平降低,血清总甲状腺素(TT4)、促甲状腺激素(TSH)水平增加。在碘剂量≥2400μg/L时与对照组相比差异具有显著性。与对照组相比,血清TC、TG增加,肝脏TC、TG含量显著性增加,在碘剂量≥2400μg/L差异具有显著性。肝脏SREBP-1C、FAS基因表达水平增加在碘剂量≥2400μg/L差异具有显著性。结论过量碘摄入导致肝脏发生脂肪变性,SREBP-1c、FAS基因表达上调可能是过量碘摄入导致肝脏脂肪变性的机制之一。     

蛋白酶体在乙醇诱发神经细胞毒性中的作用

目的探讨蛋白酶体在乙醇对神经细胞产生毒性中的作用。方法分别用50、10、150、200mmol／L的乙醇对PC12细胞进行48h染毒后,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测乙醇对PC12细胞的细胞毒性,用荧光底物法测定细胞蛋白酶体的活力,并与对照组比较。结果100mmol／L以上浓度的乙醇染毒48h对PC12细胞产生明显的毒性作用,且呈现良好的剂量-反应关系;蛋白酶体活力的测定表明,乙醇显著抑制蛋白酶体的活力,有剂量和时间依赖关系。结论乙醇可能通过抑制蛋白酶体的活力,干扰了某些蛋白质的正常代谢,从而产生了细胞毒性。