糖皮质激素对兔脑,肺和肝细胞糖皮质激素受体的调节

采用放射配基结合分析法，研究地塞米松对兔脑、肺、肝的糖皮质激素受体的调节作用。结果发现，静脉注射Ｄｅｘ５ｍｇ／ｋｇ后兔肺、肝胞液ＧＲ的结合量明显下降，与对照组比较Ｐ＜０．００１，脑胞液ＧＲ与对照组比较无显著差异。提示糖皮质激素对兔不同靶器官ＧＲ的调节存在不同特点。     

加味生脉散对热损伤大鼠糖皮质激素及其受体的影响

目的；探讨加味生脉散增强机体热耐力的作用机理。方法；以ＳＤ大鼠制备损伤模型，观察加味生脉散夺热损伤大鼠血浆糖皮质激素（ＧＣ）、促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）以及脑、肝胞洽谈以质激素受体（ＧＣＲ）的影响。结果；中味生脉散组大鼠脑、肝胞液ＧＣＲ的结合活性（Ｒｓ）（５３．１７±１４．０６，３３２．２３±５３．８３）炕于单纯员伤组（２８．２７±１０．２７，２１６．９０±５８．９７），同时并不降低血浆ＧＣ和Ａ     

地塞米松,甲状腺素对大鼠胎肺表面活性物质影响及机制的初步研究

本文用大鼠胎肺组织块无血清培养观察地塞米松（Ｄｅｘ）、甲状腺素（Ｔ４）对大鼠胎肺表面活性物质（ＰＳ）的作用特点。Ｄｅｘ效应在胚胎１８、１９天最显著，并随Ｄｅｘ浓度增加而增高，但高浓度Ｄｅｘ对胎肺糖皮质激素受体（ＧＣＲ）有向下调节作用。Ｔ４可促进ＰＳ增加，并与Ｄｅｘ有协同作用，对胎肺ＧＣＲ有向上调节作用。本文为临床合理应用Ｄｅｘ或联合Ｔ４预防新生儿呼吸窘迫综合征提供实验基础。     

被动型Heymann肾炎大鼠肾胞液糖皮质激素受体的动态变化

应用放射配体结合法检测不同病期被动型Ｈｅ６ｍａｎｎ肾炎（ＰＨＮ）病鼠肾、肝胞液糖皮质激素受体（ＧＲ），同时测定相应病期血浆皮质酮（Ｂ）浓度。结果：病鼠第２周末肾胞液ＧＲ最大结合容量（Ｒ０）较正常大鼠减少（Ｐ〈０．０５）；３周末进一步减少（Ｐ〈０．００５）；４周末Ｒ０已回升，与正常大鼠差异不显著（Ｐ〉０．０５）。这种动态变化与疾病的发生、发展及转归相一致。肾胞液ＧＲ的Ｒ０与蛋白量呈负相关（Ｐ〈０．０     

大鼠外周血白细胞糖皮质激素受体的测定

为了测定糖皮质激素受体的结合参数，以利于今后进步探讨ＧＲ改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以「＾３Ｈ」地塞公为配基，建立了大鼠外周血ＧＲ的放射配体结合测定方法。结果Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合呈一直线，表观结合容量和平衡解离常数分别为（３３８７±３２８）位点细胞和（２。３５±１．１３）ｎｍｏｌ／Ｌ（ｘ±ｓ，ｎ＝５），「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合有明显的甾体特     

支气管哮喘患者外周血白细胞中糖皮质激素受体的研究

采用３Ｈ－Ｄｅｘ放射配体结合分析法测定２２例正常人及２０例哮喘患者在糖皮质激素（ＧＣ）治疗前后外周血白细胞中糖皮质激素受体（ＧＣＲ）水平。结果：哮喘患者外周血白细胞ＧＣＲ（３９６６±１１０９位点／细胞）明显低于健康正常人（５２５４±１２８９位点／细胞）（Ｐ＜０．０５）；哮喘患者经ＧＣ治疗一周后，其白细胞中ＧＣＲ（２０９１±４９４）明显低于治疗前（Ｐ＜０．０５）；但哮喘患者ＧＣ敏感组白细胞中ＧＣＲ与ＧＣ耐受组之间无显著差异（Ｐ＞０．０５），并对其发生机制作了初步探讨     

高温对大鼠肝胞液糖皮质激素受体的影响

用放射配基结合分析法检测体温达４２℃的大鼠肝胞液中糖皮质激素受体（ＧＲ）的最大结合容量（８ｍａｘ）和Ｋｄ值的变化；问时测定了肝脏中ｃＡＭＰ、糖原及蛋白含量的变化。结果表明，过热大鼠肝细胞ＧＲ的Ｂｍａｘ明显减少，亲和力无刚显改变；而ｃＡＭＰ含量明显增加，肝蛋白和糖原含量明显减少。热应激前预先用阿的平处理大鼠后，除肝蛋白外．上述所测指标比热应激织明显增加，但ＧＲ的Ｂｍａｘ仍低于正常值（Ｐ＜０．０１），ｃＡＭＰ水平却明显超过正常值（Ｐ＜０．０１），而蛋白和糖原含量与对照组无明显差异。     

参附汤对失血性休克大鼠糖皮质激素及其受体的影响

深入探讨参附汤的药理作用机理。以急性失血性休克大鼠为实验对象，同步观察参附汤对血浆皮质酮及肝胞液，胸腺细胞糖皮质激素受体的影响。参附汤组大鼠肝胞液及胸腺细胞ＧＲ的结合位点都明显高于单纯失血组，参附汤组血浆皮质酮略高于失血组。参附汤可纠正失血性休克模型的ＧＲ的减少，以发挥其救治休克，回阳固脱的作用。     

甲巯咪唑和地塞米松对Graves甲亢患者白细胞糖皮质激素受体、血浆ACTH及皮质醇的影响

研究了３２例Ｇｒａｖｅｓ甲亢（甲亢）患者单用甲巯咪唑及联用地塞米松（Ｄｅｘ）治疗前后白细胞糖皮质激素受体（ＧＣＲ），血浆皮质醇（ＰＴＣ）和血浆ＡＣＴＨ的变化。开始甲巯咪唑４０ｍｇ／ｄ，两周后减至２０ｍｇ／ｄ，直至完全缓解。联用Ｄｅｘ组除甲巯咪唑外，开始加Ｄｅｘ６ｍｇ／ｄ，第５日减至４．５ｍｇ／ｄ，两周后减至２．２５ｍｇ／ｄ，直至完全缀解。结果发现，未治甲亢患者的白细胞ＧＣＲ水平显著降低，ＰＴＣ略降、ＡＣＴＨ轻度升高，提示甲亢时垂体－肾上腺轴机能处于代偿状态。单用甲巯咪唑组治疗后病情缓解，ＧＣＲ、ＡＣＴＨ及ＰＴＣ恢复正常。联用甲巯咪唑及Ｄｅｘ组治疗后，ＧＣＲ、ＡＣＴＨ及ＰＴＣ均显著降低，揭示ＧＣＲ呈下降调节，同时垂体－肾上腺轴受外源性Ｄｅｘ抑制。因此，甲亢患者使用糖皮质类固醇治疗时应注意调整剂量，以避免由于垂体－肾上腺轴受抑制在应激时发生肾上腺皮质功能不全。     

烫伤大鼠糖皮质激素受体减少与全身炎症反应综合征的关系

阐明实验大鼠烫作后糖皮质激素受体减少与烫伤后全身炎症反应综合征的关系。方法以ＳＤ大鼠制成烫伤模型，肌注ＧＲ的竞争性拮抗剂ＲＵ３８４８６阻断烫伤大鼠体内的ＧＲ，观察ＧＲ阻断对严重烫伤大鼠血浆磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性，肿瘤坏死因子含量、脂质过氧化代谢产物－丙二醛（ＭＤＡ）含量以脏脏器组织匀浆中ＴＮＦα、ＭＤＡ含量变化的影响。结果烫伤８ｈ，大鼠血浆ＰＬＡ２活性，ＴＮＦα和ＭＤＡ的含是以及肺、肝、肾组织     

Effects of Dexamethasone on glucocorticoid receptor expression in a human ovarian carcinoma cell line 3AO

Ourpreviousworkhasshownthatdexamethasone (Dex) ,asyntheticglucocorticoid ,inhibitshumancarcinomacell(3AO)proliferationandinducesdifferentiationinatime andconcentration dependentmanner 1　Butthemolecularmechanismbehindtheseobservationswasunclear Thepresentstudyinvestigatestheexpressionofglucocorticoidreceptor (GR)in 3AOcellsbyDexaswellastheDex inducedcellulareffectsthatweremediatedbyGR METHODSMaterialsRPMI 16 40mediumwasobtainedfromNissuiPharmaceuticalCo ,Ltd (Tokyo ,Japan) 1,2 ,4 …     

地塞米松对顺铂诱导人肺腺癌细胞株凋亡的抑制作用及其机制

目的 研究地塞米松（Dex）对顺铂（CDDP）引起的人肺腺癌细胞株SPCA/Ⅰ凋亡的抑制作用及其分子机制探讨。方法 体外培养SPCA/Ⅰ细胞,分别加入不同浓度Dex培养24 h后,加入不同浓度CDDP继续培养48 h,采用二甲基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡;用1 μmol/L Dex刺激SPCA/I细胞,分别于1 h、2 h、4 h、6 h、12 h采用RT-PCR技术,检测SPCA/I细胞中糖皮质激素诱导的蛋白激酶1基因（SGK-1）和丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1（MKP-1）基因的表达;用生物素标记的抗糖皮质激素受体（GR）抗体对SPCA/I细胞中GR行细胞免疫组化检测。结果 SPCA/I细胞经Dex刺激后,对CDDP所致的抑制细胞生长和凋亡呈抵抗作用（P<0.05）。 Dex刺激后的SPCA/I细胞表达SGK-1上调,在12 h时表达达高峰,未检测到MKP-1表达;细胞免疫组化显示SPCA/Ⅰ细胞经Dex刺激后GR表达上调,细胞内GR数目高于对照组（P<0.05）。结论 体外实验结果表明,Dex对CDDP引起的SPCA/I细胞凋亡有抑制作用。其分子机理可能是通过上调细胞内GR数目,增强通路下游SGK1的表达,从而产生抗凋亡作用。     

人参茎叶皂苷对失血性休克大鼠糖皮质激素受体的影响

目的 观察人参茎叶皂昔(ginsenosides，GSS)对失血性休克大鼠糖皮质激素受体(GR)的影响，并分析其作用机制，为研制及时抢救失血性休克患者的天然药物制剂提供实验依据。方法 雄性SD大鼠随机分为失血性休克组和对照组，失血性休克组分别每日ig200，100，50mg／kg GSS水溶液，对照组和模型组ig蒸馏水2mL，共10d。以[^3H]地塞米松为配体，用一点分析法测脑和肝胞液GR结合活性(Rs)、半定量RT—PCR方法测肝胞液GR mRNA水平、放免法测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(GC)浓度。结果 GSS组大鼠脑和肝胞液的GR结合活性高于单纯失血性休克组，其中以中剂量组最明显(P＜0．01)；GSS组大鼠肝胞液GR mRNA表达水平高于单纯失血性休克组；GSS组大鼠血浆ACTH和GC浓度和单纯失血性休克组没有明显差别。结论 GSS可减轻失血性休克大鼠GR结合活性的下降幅度，作用机制可能与其促进了GR mRNA表达有关，并可能存在一个最佳剂量。     

人参茎叶皂苷对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体的影响

目的:观察人参茎叶皂苷(ginsenosides,GSS)对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)的影响,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为:(1)正常对照组,室温下饲养,蒸馏水灌胃;(2)GSS治疗组,室温下饲养,GSS灌胃;(3)热损伤模型组,蒸馏水灌胃,制作热损伤模型;(4)热损伤模型GSS治疗组,GSS灌胃,制作热损伤模型。采用放射配体结合法检测大鼠脑、胸腺、肺和肝细胞液GR结合活性;逆转录聚合酶链反应法测定脑、肝细胞液GRmRNA的水平;放射免疫法测定血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin,ACTH)和皮质酮(corticosterone,CS)的浓度。结果:热损伤模型GSS治疗组大鼠脑、肺和肝细胞液GR结合活性以及脑和肝细胞液GRmRNA表达水平均明显高于单纯热损伤模型组(P<0.05或P<0.01);热损伤模型GSS治疗组大鼠血浆ACTH和CS浓度与单纯热损伤模型组比较则无明显差异。结论:GSS可缓解热损伤大鼠不同脏器GR结合活性的下降幅度,其作用机制可能与促进GRmRNA的表达有关。     

糖皮质激素对兔炎症过程中中性粒细胞粘附的影响

为了探讨糖皮质激素在分子水平抑制炎症过程中中性粒细胞粘附的作用机理，分别测定了兔中性粒细胞ＣＤ１８的表达以及中性粒细胞与ＩＣＡＭ－１包被磁珠的粘附率，并对两者进行相关性分析。     

地塞米松给药及撤药后糖皮质激素受体的表达

目的 观察地塞米松对体外培养人皮肤角质形成细胞--HaCaT细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid recep-tor,GR)α仅和β表达的调节以及撤药后GRα、GRβ基因表达的后续变化,并探讨其临床意义.方法 以含10-6mol/L地塞米松的DMEM(高糖)培养基孵育细胞,48 h后换不含地塞米松的培养摹继续孵育.在地塞米松给药后24、48 h以及撤药后24、48、72 h的不同时相点,采用RT-PCR和Western blot检测GRα、GRβ的表达变化,采用免疫荧光化学法观察GRα、GRβ的细胞内定位.结果 地塞米松给药后24、48 h,GRα的mRNA和蛋白质水平逐渐下降(P<0.05),呈时间依赖性,GRβ的mRNA和蛋白质水平均逐渐上升(P<0.05);撤药后24、48、72 h,GRα和GRβ的上述变化不同程度地向原有水平回复.结论 地塞米松下调GRα并上调GRβ,可部分解释持续外用糖皮质激素制剂后出现的激素耐受现象;下调的GRα和上调的GRβ在地塞米松撤药后呈现向其原有水平恢复的趋势,提示临床上外用激素治疗应避免长期使用.     

大鼠肺泡巨噬细胞Bcl-2相关抗凋亡蛋白-1表达变化及其调节糖皮质激素受体功能的研究

目的：在模拟大鼠肺泡巨噬细胞炎症合并糖皮质激素治疗的条件下，阐明Bcl-2相关抗凋亡蛋白-1（BAG-1）的表达变化及其对糖皮质激素受体（GR）功能的调节作用。方法：Western blot检测脂多糖（LPS）和地塞米松（Dex）作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1表达变化；免疫共沉淀法检测核蛋白中BAG-1与GR相互结合作用；相对荧光素酶法检测GR转录激活活性。结果：LPS和Dex作用后，细胞总蛋白中BAG-1L表达增加，BAG-1S表达无变化；核蛋白中只能检测到BAG-1L，表达量在LPS作用24h内逐渐增加；细胞核内BAG-1L与GR在LPS和Dex作用后存在着相互结合，同时GR转录激活活性逐渐降低，其变化与核蛋白中BAG-1L表达变化呈负相关。结论：LPS和Dex作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1L表达增加，与GR结合后共同转核，并抑制GR活性。该机制可能是感染条件下糖皮质激素抵抗的重要因素。     

脂多糖作用大鼠肺泡巨噬细胞糖皮质激素受体表达及活性变化

目的探讨脂多糖作用大鼠肺泡巨噬细胞24 h内,糖皮质激素受体表达及活性变化特点.方法将原代培养的大鼠肺泡巨噬细胞分为脂多糖致伤组和地塞米松治疗组,采用RT-PCR和Western Blot在mRNA水平和蛋白质水平测定肺泡巨噬细胞糖皮质激素受体;EMSA测定肺泡巨噬细胞核蛋白中糖皮质激素受体活性.结果脂多糖作用后,糖皮质激素受体mRNA表达下调,24 h恢复正常水平;糖皮质激素受体蛋白质表达降低,4 h降至最低,24 h维持在低水平表达;糖皮质激素受体活性在1 h降到最低,24 h未恢复至正常水平.地塞米松治疗组在治疗后期不能有效维持糖皮质激素受体活性.结论脂多糖(100 ng/ml)作用大鼠肺泡巨噬细胞后,糖皮质激素受体蛋白表达降低,可能与mRNA表达降低及蛋白降解加速有关;糖皮质激素受体活性被显著抑制,出现糖皮质激素抵抗.     

Rapamycin Sensitizes Glucocorticoid Resistant Acute Lymphoblastic Leukemia CEM-C1 Cells to Dexamethasone Induced Apoptosis through both mTOR Suppression and Up-Regulation and Activation of Glucocorticoid Receptor*

Objective To explore the role of glucocorticoid (GC) receptor (GR) in rapamycin’s reversion of GC resistance in humanGC-resistant T-acute lymphoblastic leukemia (ALL) CEM-C1 cells. Methods CEM-C1 cells were cultured in vitro and treated with rapamycin at different concentrations with or without 1 μmol/L dexamethasone (Dex). 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) test was performed to assess cell proliferation. The cell cycle and cell apoptosis were analyzed by flow cytometry. The expression of GRα mRNA was determined by real-time quantitative RT-PCR. The expression of GR, p-70S6K, Mcl-1, and Bim proteins was detected by Western blot. Results When incubated with rapamycin at different concentrations, CEM-C1 cells showed significant growth inhibition in a time- and concentration-dependent manner. The growth inhibition was synergistically increased when CEM-C1 cells were treated with rapamycin plus 1 μmol/L Dex. CEM-C1 cells treated with rapamycin alone showed no apparent apoptosis, and were arrested at G0/G1 phase. After the treatment with Dex plus rapamycin, CEM-C1 cells demonstrated apparent apoptosis and increased the cell cycle arrested at G0/G1 phase. Rapamycin combined with Dex up-regulated GRα, phosphorylated GR(p-GR), and pro-apoptotic protein Bim-EL in CEM-C1 cells, but inhibited the expression of p-p70S6K, a downstream target protein ofmTOR (mammalian target of rapamycin). Conclusion After the treatment with rapamycin plus Dex, Dex resistant CEM-C1 cells induce growth inhibition and apoptosis. The underlying mechanism may involve inhibition of the mTOR signaling pathway and also be associated with up-regulation of GR expression and activation of GC-GR signaling pathway.     

生脉散组分配伍对热损伤大鼠糖皮质激素受体的影响

目的：研究生脉散组分配伍对热损伤大鼠糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的影响。 方法：雄性SD大鼠32只随机分为正常对照组、模型组、人参总皂苷组和生脉散组分配伍组（简称组分配伍组）,每组8只,连续灌胃1周进行预处理。除正常对照组外,其余各组大鼠于末次给药30min后复制大昂热损伤模型。随后立即断头处死动物,收集血清和肝、肺、肾脏组织。酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immkinosorbent assay,ELISA）检测血清皮质酮（corticosterone,CS）的浓度,放射免疫检测法（radioimmunoassay,RIA）检测血清促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone,ACTH）的浓度;放射性配体受体结合法（radioligand receptor binding assay,RRA）检测肝、肺、肾细胞液GR结合容量。 结果：模型组肝、肺、肾胞液GR明显低于正常对照组（P〈0.01）。组分配伍组肝和肺胞液GR结合容量明显高于模型组（P〈0．01）,肾胞液GR结合容量与模型组比较,差异无统计学意义。组分配伍组肝胞液GR明显高于人参总皂苷组（P〈0．01）,肺和肾胞液GR结合容量与人参总皂苷组比较有上升的趋势．但差异无统计学意义。正常大鼠CS及ACTH水平与模型组、组分配伍组和人参总皂苷组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）,模型组CS及ACTH水平与各给药组比较,差异无统计学意义。 结论：生脉散组分配伍可增强人参总皂苷上调热损伤大鼠GR水平的作用。