超微量酶法检测血清总胆固醇的实验探讨

目的 用超微量血清在微孔板内进行酶法检洲总胆固醇(TC)，分析其线性范围、准确度、精密度、回收率，并与日立7600型全自动生化分析仪进行测定比较，以探讨超微量酶法检测总胆固醇结果的可靠性。方法 采用超微量酶法，酶标生化多功能分析仪比色测定。结果 本法的线性范围达15.1mmol／L，批内变异系数(CV)为1．29％～2．45％，日间变异系数(CV)为1．95％～2．67％，回收率为99％～105％，平均102．8％，与全自动生化分析仪比较具有良好的相关性,y=1．112x-0.339，r=0．9839。结论 本法操作简单，血清、试剂用量少，检测快速，准确性及重复性好，结果可靠，利于微量检测血清总胆固醇的推广应用。     

酚磺乙胺对酶法检测血清尿酸的影响

目的探讨酚磺乙胺对酶法检测血清尿酸(UA)干扰的临床研究。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)制定的EP7-A2文件,对酶法检测血清UA进行干扰筛选试验和剂量效应试验,通过酚磺乙胺对不同水平UA检测的干扰效应来确定酚磺乙胺对酶法检测UA的影响。结果干扰筛选试验:干扰配对试验组均值为207.33μmol/L,对照样品均值为496.86μmol/L,试验样品的干扰值95%CI为(-226.53±1.96)μmol/L,当干扰值95%CI最低值的绝对值大于预设的干扰试验的可接受标准时,说明酚磺乙胺对酶法检测UA存在严重的干扰。剂量效应试验:低值UA标本,干扰效应回归曲线方程为Y=-2.474e-6 X~3+0.002 4 X~2-0.777 X-3.614(F=1 596.39,R~2=0.995,P0.001),当酚磺乙胺水平在29.84mg/L以上时,干扰值的绝对值高于干扰试验的可接受标准;而高值UA样品,干扰剂量效应回归方程Y=-3.175e-6 X~3+0.003 33 X~2-1.294 X-9.832(F=1 582.615,R~2=0.996,P0.001),当酚磺乙胺水平在44.43mg/L以上,干扰值的绝对值高于干扰试验的可接受标准。结论酚磺乙胺对酶法检测血清UA存在负干扰,在低、高水平UA样品中,酚磺乙胺的水平分别在29.84mg/L和44.43mg/L时,负干扰程度未超过干扰试验的可接受标准。在临床工作中须采取措施以避免这种干扰。     

国产循环酶法检测同型半胱氨酸试剂盒的分析性能评价

目的对某国产循环酶法同型半胱氨酸试剂盒进行性能评价。方法依据CLSI-EP相关文件,在AU2700生化仪上对该试剂盒的精密度、线性范围、可报告范围、生物参考区间验证、干扰试验等方面进行性能评价;并与西门子化学发光法进行比对分析,计算相关系数和直线回归方程,根据回归方程计算同型半胱氨酸在医学决定水平处的预期偏倚和预期偏倚的95%可信区间并判断偏倚是否可以接受。结果批内精密度(CV)为0.94%、1.41%,批间CV为3.00%、2.60%;线性范围5.0~50.0μmol/L,最大稀释倍数为20,临床可报告范围5.0~1 000.0μmol/L;血红蛋白≤5g/L、三酰甘油≤7.8mmol/L、抗坏血酸≤1.7mmol/L、胆红素≤0.68mmol/L,对试验无明显干扰;两种分析仪结果间均呈良好的线性关系,其相关系数r均大于0.975,在医学决定水平处的系统偏倚临床可以接受。结论该国产同型半胱氨酸测定试剂盒在AU2700全自动生化仪上的分析性能良好,可应用于临床检测。     

抵抗素对大鼠肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶酶活性及mRNA表达的影响

目的探讨抵抗素对大鼠肝细胞糖异生代谢关键酶-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性及mRNA表达的影响,了解抵抗素对肝脏糖代谢的影响并初步探讨抵抗素在肝脏胰岛素抵抗形成中的作用及机制。方法正常大鼠的肝细胞,不加抵抗素与加不同剂量的抵抗素(10、50、100 nmol/L)培养24 h。乳酸脱氢酶偶联比色法检测不同剂量抵抗素对PEPCK活性的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PEPCK mRNA表达水平的变化。结果抵抗素浓度为10、50 nmol/L时,PEPCK活性[单位为mIU/(min.mg protein)]较空白对照组显著升高(31.8±2.4,32.0±2.3 vs 26.6±2.6,P<0.05),抵抗素浓度为100 nmol/L,PEPCK活性升高更明显(40.4±1.5 vs 26.6±2.6,P<0.01)。RT-PCR结果显示抵抗素浓度为10、50 nmol/L时,PEPCK mRNA表达水平(以β-actin校正)与空白对照组比较差异无统计学意义(P﹥0.05),抵抗素浓度为100 nmol/L,PEPCK mRNA表达水平显著升高(1.18±0.12 vs 0.74±0.08,P﹤0.01)。结论抵抗素浓度为10、50 nmol/L时,PEPCK活性显著升高,但对其mRNA表达水平无显著影响。抵抗素浓度为100 nmol/L时,PEPCK活性升高更明显,同时其mRNA表达水平也显著升高。表明该浓度的抵抗素至少部分通过促进PEPCK基因的表达实现对酶活性的调节。     

观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析以及改进措施

目的分析与观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸(TBA)的干扰因素分析以及改进措施。方法将血清TBA作为观察对象,选择部分生化常规试剂作为干扰项目,并分析不同生化试剂对循环酶法测定血清TBA的干预及原因,再针对干扰因素提出相应的改进措施。结果所选择的生化常规试剂中,总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)等生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的结果有明显干扰,存在的系统误差具有统计学意义(P0.05)。结论循环酶法测定血清TBA时与部分常规生化试剂相接触会产生交叉污染,从而对血清TBA的测定结果造成影响,因此在实际的循环酶法测定过程中,一定要对此些干扰因素提高重视,并通过切实、可行、有效的改进措施来规避污染,尽最大程度的保证血清TBA测定结果的准确性。     

观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析以及改进措施

目的分析探讨生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析。方法选取2015年1~3月该院收集的混合血清标本20份作为检测标本。该次研究所有的检测仪器为贝克曼DXC800全自动生化分析仪。该次研究所涉及的常规生化试剂有总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和尿酸(UA),TBA测定方法为酶循环法。观察特殊清洗前后生化试剂组合TBA测量结果。结果生化试剂处理前,TC/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,TG/TBA为(218.03±6.45)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,LDL-C/TBA为(184.01±5.16)μmol/L,UA/TBA为(474.11±10.24)μmol/L。经统计学检验,TG、LDL-C以及UA对TBA有影响(P0.05)。生化试剂处理后,TC/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,TG/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,LDL-C/TBA为(8.12±0.04)μmol/L,UA/TBA为(8.12±0.04)μmol/L。经统计学检验,特殊清洗处理后生化试剂对TBA无影响(P0.05)。结论生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸有干扰。因此,要提高改进措施如加强清洗及科学性的有序检测从而避免污染,保证检测结果准确性。     

生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰原因

目的探讨生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸(TBA)的干扰原因,探寻消除干扰的办法。方法以门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、钙等20个生化常规项目试剂作用作为观察对象,确认对TBA具有显著干扰的生化试剂,且经过设定特殊程序减小仪器的携带污染。结果测定混合血清当中20份TBA水平,其平均值为(8.16±0.012)μmol/L;在20个观察项目当中,尿酸试剂(UA)对于测定总胆汁酸(TBA)结果影响差异具有统计学意义(P0.05),存在系统误差;总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)项目试剂对于测定TBA结果影响差异具有统计学意义(P0.05),对于TBA测定具有明显干扰。结论全自动化生化分析仪测定TBA时存在项目之间的互相污染,因此设定有效、合理的特殊冲洗程序能够有效地对消灭携带污染对TBA测定干扰。     

血清葡萄糖检测试剂对无机磷测定结果的影响

目的探讨在使用全自动生化分析仪检测标本时,血清葡萄糖检测试剂对无机磷测定结果的影响因素及影响程度。方法通过实验设计,利用全自动生化仪的不同设置,分别测定样本针、试剂针、搅拌棒及比色杯的携带污染对血清无机磷测定结果的影响程度。结果血清葡萄糖试剂对无机磷测定结果的影响主要来自于试剂针的携带污染。结论应用全自动生化分析仪检测标本时,虽然具备高速、精确、自动化程度高等特点,但同时在部分检测项目间也存在着交叉污染,应根据实际情况设定仪器清洗程序和合理的分析顺序。     

免疫酶法与金标免疫斑点法检测人血清EB病毒抗体的临床应用比较

目的:比较免疫酶法与金标免疫斑点法检测血清EB病毒抗体的优缺点。方法:用免疫酶法与金标免疫斑点法分别检测440份血清的EB病毒抗体,其中已确诊为鼻咽癌的80份,正常对照360份。结果:80份鼻咽癌患者血清,免疫酶法阳性率98%,金标免疫斑点法阳性率96%,两者比较差异无统计学意义。检测健康人360份血清,两者阴性率(特异性)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫酶法灵敏性高、成本较低,适合普查筛选;而金标免疫斑点法特异性和诊断符合率较高,可作为怀疑病例的检查方法。     

3种测定血清胆红素方法的比较

目的 探讨更适用于临床实验室测定血清胆红素的方法.方法 通过重氮法、钒酸盐氧化法、酶法等3种方法的精密度、线性范围、相关性及干扰实验进行对比分析.结果 3种测定方法的批内批间CV均良好,线性范围除重氮法为300 μmol/L外,另两种方法均达到680 μmol/L.血红蛋白对重氮法的测定结果有较大的正干扰;对酶法有一定的正干扰;而钒酸盐法则为较小的正干扰.3种测定方法相关性良好,相关系数为0.999.结论 钒酸盐氧化法较适合应用于临床实验室.     

敲击试管对血清LDH和HBDH检测的影响

目的：了解对标本进行离心前敲击试管对血清心肌酶LDH和HBDH检测的影响。方法：抽取250名健康体检人员全血各4毫升，平均分装于两支真空试管，每管2毫升，一管作为对照，另一管作为实验，对照组不经敲击，实验组经敲击试管后离心分离血清于全自动生化仪上进行检测，比较两组实验结果。结果：实验组LDH和HBDH的检测结果明显高于对照组的结果。结论：敲击试管会造成血清LDH和HBDH检测结果的假性增高。     

两种不同方法检测血清肌酐结果的比较

目的探讨苦味酸法和酶法检测血清肌酐水平的差异。方法用酶法和苦味酸法分别检测136份血清标本肌酐的水平,以酶法检测的值分为四组。结果1组苦味酸法值高于酶法值(P<0.01);2、3组两种方法测得值基本相符(P>0.05);4组苦味酸法值低于酶法值(P<0.01)。结论苦味酸法适应范围窄,干扰多;酶法适应范围宽,特异性强,干扰小。不同测定方法应建立不同参考值。     

942例健康体检者循环酶法测定血清同型半胱氨酸结果分析

目前血清同型半胱氨酸（HCY）的测定方法及采用的测定仪器有很多,比如：高效液相色谱法（HPLC）、酶联免疫吸附法（ELISA）、放射免疫分析方法、荧光偏振免疫分析法等,然而这些检测方法或检测仪器、试剂太昂贵,或操作步骤繁杂,无法在临床广泛推广及应用;而使用全自动生化分析仪的循环酶法测定同型半胱氨酸（HCY）在临床实验室拥有最多。众所周知由于检测方法的不同,正常参考值会存在差异。     

两种测定血清碳酸氢盐方法检测结果的一致性

目的 参照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)的EP9-A2文件对两种测定血清碳酸氢盐(HCO3-)的方法-热导法和酶法进行方法学比对试验,比较二者结果的一致性.方法 收集56例临床血清标本,以酶法为比较方法(x),热导法为实验方法(y),同时测定血清碳酸氢盐(HCO3-)的浓度,分析两组结果的相关性和两种方法检测结果的一致性.结果 两种方法所得的结果相关性良好(r=0.983),两组结果的相对偏差小于允许偏差.结论 在严格按操作规程进行检测的前提下,使用两种测定血清碳酸氢盐(HCO3-)的方法结果基本一致,其偏差可为临床所接受.当同一实验室同一检验项目存在两种以上检测方法时,应进行方法比对,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性.     

血清丙氨酸氨基转移酶两种不同检测方法的比较分析

目的对干化学法和全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)进行方法学的评价。方法同一样本分别在实验室用OLYMPUS全自动生化及移动采血点用干式生化分析仪进行ALT测量,对两种方法的测定结果进行统计学分析。结果干化学试纸法与全自动生化分析仪法检测ALT结果差异无统计学意义(P>0.05),高度的一致,且批内变异系数小于5%,精密度高。结论干式生化分析仪具有检测结果准确、携带方便、操作简单等特点,适合用于街头献血者血液筛查。     

酶联免疫吸附法与免疫酶法检测血清EB-VCA-IgA的比较

目的探讨比较酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测血清EB-VCA-IgA浓度与免疫酶法(IE)检测VCA-IgA滴度间的关系,并探讨ELISA法在鼻咽癌血清学诊断中的价值.方法分别采用ELISA法和IE法检测59例鼻咽癌患者和60例健康体检者血清中VCA-IgA.结果ELISA法检测血清VCA-IgA浓度与IE法滴度间有关联.ELISA法诊断鼻咽癌的敏感性为84.7%、特异性为98.3%;IE法为88.1%、90.0%,二者无显著性差异.ELISA法检测VCA-IgA浓度在25例(Ⅰ+Ⅱ)期和34例(Ⅲ+Ⅳ)期临床分期组间有显著性差异(P＜0.05);在鼻咽癌患者有无转移组间无显著性差异.结论ELISA法检测血清VCA-IgA可以替代IE法,可更方便地获得精确可靠的定量结果.     

两种检测系统测定血清电解质的结果比较

<正>火焰光度法测定钾、钠因其不易自动化,在临床实验室已逐渐被自动化程度更高的离子选择电极法取代。随着医学检验技术的迅猛发展,大量新型的生化分析仪投入到临床中,在全自动生化分析仪上用酶法检测钾、钠,用化学法检测     

血清样品前处理对全自动酶免分析仪常见故障及检测结果信度的影响

目的探索一种安全规范、便捷可靠且易于推广的血清标本前处理方法。方法选取2013年4～6月如皋市人民医院健康体检者共计1 980份血液标本,以乙型肝炎病毒标志物为例,采取3种血清标本前处理方法干预后行全自动酶免分析仪测定,比较不同方法之间的仪器故障率及测定结果之间的可信性等。结果 （1）仪器故障率：方法①（常规处理方式）处理后全自动酶免分析仪检测过程中堵针率和吐板率均高于方法②（仪器建议标准处理方式）,以方法③（改良处理方式）处理标本后,上述常见故障率与方法②比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）上机测得各项目S/COV值（即标本A/cut off值）：方法①与方法②各检测指标测定结果比较,抗-Hbe无差异,HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg测定结果均存在差别;方法③与方法②比较,全部检测指标测定结果均无差异。（3）可疑结果电化学法验证：检测结果假阳性及假阴性率方面,对于HBsAg,常法①上述指标发生率分别为2.35%、0.58%,而标准法②及改良法③均未出现假阳性、假阴性结果;对于抗-HBs,常法①假阳性率和假阴性率分别是3.01%、1.22%;标准法②及改良法③均未出现假阳性、假阴性结果;可疑HBsAg、抗-HBs结果经χ2检验,方法①上述2项指标全自动酶免分析仪检测结果与电化学法比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,方法②、③测定结果差异则无统计学意义（P＞0.05）。结论改良之方法③是一种既便捷省时,又安全可靠的理想方法。     

探讨血清标本溶血对部分生化检验结果的影响

临床检验过程中易由于各种原因导致标本发生溶血而影响部分生化检验结果[1]。客观了解标本溶血对生化检验发生的影响,针对性采取预防措施,对提高检验结果的准确性和可靠性具有重要意义。现对我院体检中心体检的健康志愿者血清标本溶血前、后生化检验指标的变化情况进行回顾性分析,报道如下。