Ｂ（ Ａ） ０４ 亚型血清学与分子生物学鉴定及与其他 ＡＢ 亚型的鉴别要点

目的 对 ３ 例血清学定性为 Ａ ｗｅａｋ Ｂ 亚型的血标本进行 ＡＢＯ 基因检测，探讨其分子遗传学特点，并探讨 Ｂ（ Ａ） 亚型与 ＣｉｓＡＢ、Ａ 亚 Ｂ 型的鉴别要点。 方法 用 ＰＣＲ?ＳＳＰ 对常规血清学方法定型困难的 ３ 例标本进行 ＡＢＯ 基因分型，并对其 ＡＢＯ 基 因第 ６、７ 外显子扩增后进行直接测序及单倍型测序，确定其基因型。 结果 ３ 例标本血型血清学结果均为 Ａｗｅａｋ Ｂ 型，存在不 规则抗 Ａ 抗体。 基因分型均为 Ｂ（Ａ）０４ 型，其 Ｂ 等位基因在第 ７ 外显子存在 ｎｔ６４０Ａ＞Ｇ 突变，标本 １ 为 Ｂ（Ａ）０４ ／ Ｏ０２，标本 ２、３ 为 Ｂ（Ａ）０４ ／ Ｏ０１。 结论 当血清学检测结果正反定型不一致时，应采用分子诊断技术进行辅助诊断，并采用配血相合输血策 略，可确保临床输血安全。     

血清学与分子生物学技术鉴定产生抗-Dib抗体的Di(a+b-)血型1例

目的通过血清学实验和分子生物学技术鉴定出1例产生抗-Dib抗体的Di(a+b-)稀有血型。方法采用血清学方法对患者进行血型鉴定、直抗试验和不规则抗体筛查及鉴定试验,采用DNA测序方法鉴定患者的Diego血型基因。结果患者体内存在抗高频抗原抗体,分子水平确定其为Di(a+b-)稀有血型,因此其抗体为抗-Dib抗体。结论分子生物学鉴定血型基因有助于抗高频抗原抗体的鉴定。     

一例p表型的血清学分析

目的分析患者血型血清学特点,明确患者血型及血型抗体特异性,为患者寻找配合型血液。方法采用血型血清学方法进行红细胞ABO、p血型鉴定;采用盐水法、微柱凝胶法、Liss-IAT法进行不规则抗体筛查和抗体特异性鉴定。结果患者血型为B型,p表型,血清中检出抗-PP1PK。结论患者为罕见p表型,血清中含有抗-PP1PK。     

Tn多凝集红细胞合并抗-cE联合抗体致疑难鉴定1例

目的探讨1例ABO血型正反定型不符及不规则抗体筛查阳性的原因。方法通过ABO血型鉴定、酶处理、ABO基因测序、Rh分型、直接抗球蛋白试验、吸收放散实验及抗体鉴定试验对患者ABO血型及不规则抗体疑难原因进行分析。结果患者红细胞上Tn抗原暴露,血清中检出抗-cE联合抗体。结论运用不同血型血清学方法和分子生物学方法,能准确鉴定出患者血型和血清中存在的多种同种抗体。     

6例抗-Mur报告分析

目的输血前检测中对抗-Mur进行血型血清学特异性鉴定,分析其在输血中的临床意义。方法采用盐水法与微柱凝胶法分别筛查和鉴定红细胞血型不规则抗体,采用吸收放散试验鉴定抗体特异性,并检测抗体的Ig类型。结果 6例患者血清中均检出抗-Mur。结论闽南地区抗-Mur出现频率较高,抗-Mur常规抗体筛查检测、Miltenberger系列表型筛查可为输血安全提供保障。     

IgG型抗-Fy~b合并抗-H案例分析

目的通过一系列免疫血清学试验进行不规则抗体鉴定,查找引起血型正反定型不符的原因。方法用试管法做血型正反定型试验和不规则抗体筛查试验,用抗球蛋白法进行不规则抗体筛查、鉴定以及交叉配血试验、抗体吸收试验、热放散试验(56℃)等,以明确患者血清中存在的抗体种类和性质。结果患者血型为AB型,血清中检测出Ig G型抗-Fyb合并抗-H冷抗体,造成血型正反定型不符,与O型红细胞交叉配血不相合。结论血型检测时,反定型有必要加O型红细胞,输血前有必要进行不规则抗体筛查,以检测ABO血型系统以外的抗体。若结果阳性,应当明确抗体性质和种类,交叉配血时归避相应抗原,不可盲目输注O型红细胞,以保证临床输血安全。     

严重药物不良反应分子标志物 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 在山东汉族人群中的分布

目的 调查山东汉族人群 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率和等位基因频率，指导患者 临床用药，并评估进行临床基因筛查的必要性。方法 调查山东省骨髓库具有 ＨＬＡ Ａ、ＨＬＡ Ｂ 位点高分辨数据的汉族人群样 本，统计 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率和等位基因频率，并按照志愿者籍贯进行分组，归为 １４ 个地市。结果 山东汉族人群中，ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２、ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率分别为 ８．６５％、３．０３％和 ７．３％。日照、东营、临沂地区 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１ 等位基因携带率达 １０％以上；枣庄、滨州和济南地区 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带 率达 ８％以上；聊城、济南、淄博地区 ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 等位基因携带率分别为 ３．９６％、３．８４％和 ３．７７％。结论 山东地区汉族人群 患者在使用别嘌醇和卡马西平药物之前进行 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 基因筛查是有必要的，ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 等位基因 携带率虽较低，但有条件的地区可以在开展用药前进行基因筛查，以减少严重药物不良反应的发生。     

RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL型红细胞短期内引起高效价抗-D的同种免疫研究

目的 通过对1例RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞后诱发同种抗-D免疫的研究分析,探讨RhD阴性患者输注DEL型策略。方法 采用血清学方法进行ABO及Rh系统血型抗原检测、不规则抗体筛查及鉴定,高分辨熔解曲线和基因测序分析检测DEL型的RHD基因分型。结果 受血者为O型,RhD阴性。供血者为RHD 1227G>A突变的“亚洲型”DEL,R h表型为Ccee。受血者输血后抗体筛查阳性,并鉴定为抗D和抗C,抗D效价512,抗C效价128。结论 RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞会引起抗-D同种免疫。因此对于RhD阴性献血者应加强DEL型的筛查,必要时可以增加RHD基因检测以保障输血安全。     

Rh血型抗-G抗体的综合鉴定方法的建立及初步应用

目的建立Rh血型抗-G抗体的鉴定方法,并初步应用于含有抗-D和抗-C抗体的Rh阴性人员的抗-G抗体分析。方法首先采用卡式法初筛Rh血型,并通过间接抗人球蛋白试验确认Rh血型,其中抗体筛查检测血清中不规则抗体,谱细胞分析法确定抗体特异性,最后采用吸收放散试验对获得阳性抗体进行验证和鉴别。结果经多次吸收和放散法分析,可有效鉴别抗-G抗体。采用该法鉴定临床一例患者,其血型为AB型Rh阴性(ccdee),血清中不规则抗体可以与AB型RhD阳性红细胞凝集,也能凝集AB型RhD阴性含有C抗原的红细胞,经特异性吸收放散试验后发现该患者血清中不规则抗体为Ig-G抗-D和抗-G。结论多次吸收和细胞放散实验是在缺少稀有、特异性红细胞时,鉴定抗-G抗体的简便实用方法。     

血型不规则抗体筛查用于预防和降低临床无效输血的发生

目的预防或/和降低临床无效输血的发生。方法评估本院2011年6月-2012年1月的1 500名患者的输血效果,对其中发生输血无效的患者,应用增强检测方法:降低抗体筛查细胞浓度,增加待检血清与抗体筛查细胞比例,应用增强剂,增加抗球蛋白法孵育时间,采用吸收/放散法检测作红细胞血型不规则抗体鉴定检测。结果未作血型不规则抗体筛查鉴定前,本院的输血无效率为9.80%(147/500);经血型不规则抗体鉴定检测,147名输血无效患者中有37人的血清中检测到不规则抗体,其中17名患者再次输血时给与相配合的红细胞输注,未发生无效输血。结论血型不规则抗体的筛查和鉴定有助于预防和降低红细胞输注无效。     

抗-JK~a抗体致疑难配血病例分析

河南大学附属郑州颐和医院收治抗-JK~a抗体引起不规则抗体阳性及疑难配血患者1例。常规用微柱凝胶卡式法对患者进行ABO、Rh(D)血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、不规则抗体筛查及鉴定、吸收放散试验以及Kidd血型分型,最后用多种方法交叉配血,筛选出相合血液制品进行临床输注。患者血型为O型Rh(D)阳性,直接抗人球蛋白试验结果阴性,不规则抗体鉴定出特异性抗JK~a抗体,Kidd分型结果Jk(a-b+)。鉴定不规则抗体特异性可以为患者筛选合适的供血者,确保临床输血安全。     

类孟买B血型报告1例

目的探讨类孟买血型鉴定方法和输血治疗方案。方法采用试管法进行血型鉴定,采用不规则抗体筛查试验检测血浆中不规则抗体,后续检测H抗原采用抗H-单克隆抗体进行检测,采用吸收放散试验及唾液血型物质进行B抗原的鉴定,最后结合家系调查,来最终确定患者血型。结果试管法血型鉴定结果发现患者血浆与O细胞凝集为3+,不规则抗体筛查试验发现三系抗筛细胞均阳性,采用O细胞吸收患者血浆后做反定型,发现反定型B细胞和O细胞无凝集,说明有不规则抗-H的存在,进一步检测患者红细胞上也确定无H抗原存在,吸收放散试验结合唾液血型物质实验证实红细胞上有B抗原的存在,结合家系调查结果,我们最终确定该例患者为类孟买B血型。结论成功鉴定类孟买血型是输血治疗前的关键措施。     

一例罕见B(A)血型的基因鉴定

目的对1例血清学血型鉴定困难的患者进行基因鉴定,分析引起血型鉴定困难的原因及突变基因。方法采用微柱凝胶法和试管法进行血清学血型鉴定、抗球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者ABO基因第6、7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点。结果患者血清学血型鉴定正反结果不一致,其红细胞与单克隆抗A抗体反应呈弱阳性(++),与单克隆抗B及抗H抗体反应均为强阳性(++++);其血清与A1型红细胞呈现弱凝集,但不凝集B和O型红细胞;患者直接及间接抗球蛋白试验均为阴性、血清抗体筛查为阴性。经测序发现,患者ABO基因存在多个变异,其第6外显子区存在261del和c.297AG二处杂合变异,第7外显子区存在c.526CG、c.640AG、c.646TA、c.657CT、c.681GA、c.703GA、c.771CT、c.796CT、c.803GC、c.829GA、c.930GA共11处杂合变异,以A101等位基因为标准序列进行比较,对照Blood Group Antigen Gene Mutation Database进行ABO等位基因突变分析,判断患者血型为B(A)04/O06血型。结论患者的B变异的基因型及弱AB的表型是引起血型鉴定正反不一致的主要原因,DNA基因分型有助于解决疑难样本的血型鉴定。     

人类ABO血型基因型检测及其多态性分布的研究

目的：建立一种快速ＡＢＯ血型基因检测的方法。方法：通过ＡＢＯ血型基因中几个不同位点的差异设计出特异性引物，采用ＰＣＲ－ＳＳＰ技术特异性地扩增Ａ、Ｂ、Ｏ基因，以此对２４０名献血者进行了ＡＢＯ血型的基因型多态性分析。结果：ｐ基因频率０．２２９２，ｑ基因频率０．２１２５，ｒ基因频率０．５６８３。结论：该方法简单、快速，可鉴定出６种ＡＢＯ血型基因型ＡＢ、ＡＡ、ＡＯ、ＢＢ、ＢＯ、ＯＯ。     

120例不规则抗体阳性患者特异性抗体分析

目的分析南昌地区疑难配血患者中血型不规则抗体特异性。方法选择2012年1月至2016年12月南昌地区医院送检疑难交叉配血标本不规则抗体筛选试验阳性120例,采用盐水法、聚凝胺法、抗人球蛋白法进行不规则抗体筛查和抗体特异性鉴定。结果 120例筛选阳性标本中,检出自身抗体12例,特异性不规则抗体94例,分布于Rh、MNS、Kidd及Lewis血型系统,其中Rh血型系统最多见,达63.34%。结论南昌地区疑难配血中不规则阳性以Rh血型系统为主,不规则抗体筛查、鉴定及配合输注,对于保证患者输血安全具有重要意义。     

卡式全自动血型仪在献血者不规则抗体筛查中的应用

目的比较卡式全自动血型仪法与传统血清学法对不规则抗体筛查的应用效果。方法分别采用卡式全自动血型仪法与传统血清学方法对2013年10月1日至2014年4月30日东莞市无偿献血者45 709份标本进行不规则抗体筛查,对筛查阳性的标本采用抗球蛋白法进行鉴定,比较两种方法检出不规则抗体的性能,并对献血者不规则抗体分布进行分析。结果卡式全自动血型仪检出不规则抗体阳性95例,检出率为0.208%,传统血清学法检出不规则抗体16例,检出率0.035%,差异有统计学意义(P0.05);卡式全自动血型仪法阳性检出符合率为56.547%,高于传统血清学法阳性检出符合率28.571%(P0.05);RhD阴性献血者不规则抗体阳性率为2.242%,高于RhD阳性献血者不规则抗体率0.198%(P0.05)。结论卡式全自动血型仪法鉴定献血者红细胞不规则抗体的阳性检出率高于传统血清学法,对RhD阴性献血者更应进行不规则抗体的筛查,献血者红细胞不规则抗体类型以IgM型无临床意义的抗体为主。     

抗-C、抗-E复合抗体临床输血策略探讨

目的以研究血型免疫反应为基础,探讨ccDee型患者的临床输血方案。方法血型鉴定、Rh抗原分型采用盐水介质法;不规则抗体筛查及抗体特异性鉴定采用盐水介质法和微柱凝胶卡法;交叉配血采用盐水法和凝聚胺介质法。结果患者血型为A,ccDee;血清中检出抗-C联合抗-E抗体;选择A型Rh(ccee)悬浮红细胞交叉配血相合。结论对区域性献血者进行稀有血型普查,建立各型稀有血型供者资料库,并与相邻区域建立联动机制,是保障稀有血型患者临床治疗用血的重要手段,具有不可替代的临床意义。     

血清学和分子生物学鉴定罕见p表型——附1例报告

目的鉴定并分析P1P~k血型系统p表型的血清学特征和血型基因变异机制。方法对1例献血者血液样本作血清学及DNA序列分析:采用盐水介质试管法完成ABO、RhD、P1P~k血型鉴定、直接抗球蛋白试验;采用盐水介质试管法、间接抗球蛋白法及微柱凝胶法完成不规则抗体筛查、抗体鉴定及抗体效价测定试验;采用聚合酶链式反应直接测序法(PCR-SBT)进一步对先证者基因组DNA作P1P~k血型相关的A4GALT基因PCR扩增和DNA序列分析。结果先证者血清学检测:O型、RhD阳性;血清中检出抗-PP1P~k(抗-Tj~a),IgM室温效价及IgG效价为64和128;血清学鉴定试验:确认为罕见的p表型。DNA测序:先证者A4GALT基因编码区存在c.559GC及c.903CG纯合突变。结论先证者体内存在IgM和IgG混合性质的高效价抗-PP1P~k,A4GALT基因c.559GC突变(p.Gly187Arg变异)可能是其形成p表型及产生抗-PP1P~k抗体的分子基础。     

1252T>G致新的弱D型血清学和分子生物学研究

目的分析研究1例新的弱D型个体的血清学和分子生物学特点。方法采用盐水法鉴定Rh D/C/c/E/e抗原,并采用间接抗球蛋白法(IAT)进一步鉴定Rh D抗原,采用盐水法和抗人球蛋白法进行抗体筛查;采用商用基因检测试剂盒对标本进行CDE基因检测;对其RHD基因10个外显子序列进行测序分析比对。结果血清学检测显示该标本为D变异型,RHCE血型为C+c+E-e+,抗体筛查为阴性。CDE基因试剂盒检测为DCcee,RHD外显子序列测序分析发现第10外显子存在1 252 TG碱基突变,其余外显子序列则与正常RHD基因一致。结论该标本存在RHD1 252 TG碱基突变,为新的弱D型。     

盐水反应性抗Mur引起配血不合1例

患者应某 ,女 ,92ｙ ,育有 4个子女 ,1998年曾输ＡＢ型血80 0ｍｌ。 2 0 0 1年 3月因结肠肿瘤需手术治疗 ,术前血红蛋白仅 6 4ｇ/Ｌ ,与献血员戈某盐水配血时主侧凝 ,次侧不凝。1　材料与方法1 1　血型检定　病人血型ＡＢ型Ｒｈ阳性 ,结果见表 1表 1　患者血型定型ＲＢＣ与下列抗体反应抗Ａ抗Ｂ抗Ｄ血清与试剂红细胞反应ＡｃＢｃＯｃ4+4+4+0 0 01 2　Ｍｕｒ抗原鉴定　经上海市血液中心鉴定 :病人应某Ｍｕｒ抗原阴性 ,献血员戈某Ｍｕｒ抗原阳性。1 3　不规则抗体筛选及鉴定　患者血清与谱细胞 1～ 10 (上海市血液中心产品 )反应 ,Ｍｕｒ抗原…