人参皂苷Rg1对大鼠阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征引起的肺损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探究人参皂苷Rg1对大鼠阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)引起的肺损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响及机制.方法 60只SD大鼠分为对照组(control组)、慢性间歇性缺氧组(CIH组)、人参皂苷Rg1低剂量组(CIH+GRg1-L)和人参皂苷Rg1高剂量组(CIH+GRg1-H),每组15只.使...     

人参皂苷Rg_1对去卵巢大鼠面神经损伤修复的作用研究

目的:研究人参皂苷Rg1对去卵巢大鼠面神经损伤的修复作用。方法:取成年切除卵巢SD大鼠48只,随机分为假手术(等量生理盐水)、模型(等量生理盐水)、神经生长因子(NGF,10mg·kg-1)、人参皂苷Rg(110mg·kg-1)组。从复制模型开始各组灌胃相应药物,观察大鼠行为变化;光镜、透射电镜观察大鼠面神经核细胞形态学变化;免疫组化检测BDNF蛋白的表达。结果:人参皂苷Rg1组大鼠面神经元核细胞形态略有改善。模型、NGF、人参皂苷Rg1组大鼠面神经损伤3d后面神经核BDNF蛋白表达升高,7d后有所下降,14d后又升高。光镜、透射电镜观察到人参皂苷Rg1组再生神经纤维厚度优于模型组(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1能促进去卵巢大鼠面神经损伤的面神经元修复,可能与其促进BDNF蛋白表达有关。     

人参皂苷Rg1在大鼠体内的代谢与排泄研究

目的 考察静注和口服给予大鼠人参皂苷Rg1溶液后的体内代谢与排泄情况.方法 以Wistar大鼠为模型动物,分别iv和ig给予一定量的人参皂苷Rg1溶液,然后按时收集其排泄物(尿液与粪便),预处理后用HPLC检测.结果 iv给予大鼠人参皂苷Rg1溶液后,有47.46%的原型药和代谢产物通过粪便排出体外;而51.31%的药物以原型或代谢产物的形式通过尿液排出体外;ig给予大鼠人参皂苷Rg1溶液后,绝大部分Rg1都被代谢,排泄物中仅有9.04%的原型药物,且仅有13.6%的人参皂苷Rg1被吸收进入人体再通过尿液排出,还有82.82%的原型药物和代谢产物直接通过粪便排出.结论 人参皂苷Rg1在胆汁中排泄明显,其口服吸收差,生物利用度低,且极易被代谢.     

人参皂苷Rg1对铅所致大鼠海马CA1区长时程增强损伤的影响(英文)

目的研究人参皂苷Rg1对铅引起的大鼠海马CA1区长时程增强(LTP)的损伤是否有修复作用。方法 Wistar大鼠从出生至断奶通过母乳摄入铅(母鼠每天饮用0.2%醋酸铅溶液20 mL),在出生后的20 ～25 d记录其海马CA1区兴奋性突触后电位并诱导长时程增强。结果人参皂苷Rg1 (50μmo.lL-1)灌流对照组和铅暴露组大鼠海马脑片20min均能诱导出LTP,铅暴露组大鼠的LTP幅度较对照组低。在铅暴露组大鼠的海马脑片上,高频刺激(HFS,1 s, 100 Hz)诱导的LTP较对照组显著降低, 50μmol.L-1人参皂苷Rg1灌流20 min,HFS诱导的LTP幅度提高47.1%。结论人参皂苷Rg1能够提高基础的突触传递,并能部分修复铅损伤的HFS-LTP。     

人参皂苷Rg1对培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖影响的机制研究

目的研究人参皂苷Rg1对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖影响的可能机制。方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,分为药物干预组、对照组,药物干预组以1×10-6mol.L-1人参皂苷Rg1孵育48h,对照组未加药物常规培养;分别用骨髓CFU-F体外培养法、胸腺嘧啶核苷参入法及MTT法测定大鼠BMSC的增殖情况,同时测定BMSC的GATA转录因子1～3的表达及其与DNA结合活性。结果人参皂苷Rg1刺激后BMSC的GATA1和GATA2 mRNA表达与对照组相比分别上调1.42±0.31(P<0.01)和2.70±0.73(P<0.01)倍,并且人参皂苷Rg1刺激后BMSC的GATA与DNA结合活性明显增高。结论人参皂苷Rg1可促进大鼠BMSC增殖,其机制可能是通过上调GATA1和GATA2的表达以及其与DNA的结合活性来实现。     

人参皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的:研究人参皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响。方法:采用大鼠右侧大脑中动脉阻断(middle cerebral artery occulusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,缺血前给予人参皂苷Rg1 25、501、00 mg.kg-1灌胃,7 d。末次给药1h后制备MCAO模型,缺血2 h,再灌注22 h后,分别用Longa’s法T、TC染色法评价大鼠的神经功能状态及脑梗死面积;用TUNEL法测定缺血再灌后神经细胞凋亡的程度;用Western blot法测定大脑缺血侧脑组织中与凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2的蛋白表达。结果:人参皂苷Rg1(50、100 mg.kg-1)可明显减少MCAO再灌注后脑梗死面积,改善神经功能症状,与模型组比较具有显着性差异(P<0.05或P<0.01);脑缺血2 h再灌22 h后,模型组大鼠缺血侧细胞凋亡程度、Caspase-3蛋白表达明显增加,同时Bcl-2的蛋白表达降低。给予人参皂苷Rg1(50,100mg.kg-1)后,缺血侧细胞凋亡程度、Caspase-3蛋白表达降低,而Bcl-2的蛋白表达增加,与模型组相比具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡具有明显的保护作用,其机理可能与人参皂苷Rg1影响Caspase-3、Bcl-2的表达有关。     

甘油水溶液对人参皂苷Rg1在大鼠体内生物利用度的影响

目的 以三七总皂苷为样品,考察不同浓度的甘油水溶液对人参皂苷Rg1在大鼠体内的药动学参数和生物利用度的影响.方法 静脉注射(i.v.)和十二指肠给药(i.d.)后,采集血样,HPLC-UV法测定大鼠血浆中人参皂苷Rg1的浓度,绘制药-时曲线并计算药动学参数及生物利用度.结果 大鼠十二指肠注射给予PNS-甘油水溶液(Rg1剂量175.68mg·kg-1,甘油浓度分别为:20%、40%、60%、80%)、PNS-水溶液(Rg1剂量439.2mg·kg-1)后,人参皂苷Rg1的达峰时间Tmax分别为(0.25±0.00)h、(0.438±0.125)h、(0.375±0.144)h、(0.313±0.125)h、(0.5±0.00)h,AUC(0~t)分别为(9.099±1.452) 、(18.727±2.058) 、(4.625±1.102) 、(2.756±1.022)、(6.012±0.647)μg/(min·mL),其绝对生物利用度分别为4.13%、8.51%、2.10%、1.25%、1.09%.结论 各浓度甘油溶液均能较大提高三七总皂苷中人参皂苷Rg1的绝对生物利用度,其中浓度为40%的效果最佳.     

HPLC法测定大鼠血清中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1的含量

目的 建立测定大鼠血清中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1含量的方法.方法 采用Kromasil 100-5C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙睛-0.2％磷酸水溶液,梯度洗脱;紫外检测波长203 nm,流速1 ml/min,柱温25℃.结果 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1均在0.2～5...     

人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血大鼠PARP-1和TNFR1表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血大脑皮质多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)-1和肿瘤坏死因子受体(TNFR)1表达的影响。方法 90只健康SD大鼠随机均分为假手术组,单纯缺血组,人参皂苷Rg1低、中、高组,阳性对照组。于术前5 d至取材当日,假手术组与单纯缺血组分别腹腔注射生理盐水45 mg/kg,人参皂苷Rg1分别给10、20、40 mg/kg,阳性对照组尼莫地平1 mg/kg。采用大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血模型,神经功能缺损评分和TTC染色验证模型是否成功;采用免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法检测大脑皮质缺血后PARP-1、TNFR1的表达。结果单纯缺血组较假手术组可见明显神经功能缺陷症状及大面积苍白色梗死区域;人参皂苷Rg1各组和阳性对照组神经功能评分和脑梗死体积百分比高于假手术组,低于单纯缺血组(P<0.05);人参皂苷Rg1各组与阳性对照组差异无统计学意义。人参皂苷Rg1低组每高倍视野PARP-1、TNFR1阳性细胞数高于假手术组和阳性对照组;中、高组高于假手术组,低于单纯缺血组(P<0.05)。单纯缺血组皮质PARP-1、TNFR1较假手术组阳性表达条带显著增强;人参皂苷Rg1低组PARP-1、TNFR1阳性表达高于假手术组;中组高于假手术组,低于单纯缺血组;高组低于单纯缺血组(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其机制可能与下调大脑组织PARP-1、TNFR1的表达,对抗脑细胞坏死有关。     

人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注损伤大鼠脑线粒体功能的影响

目的观察人参皂苷Rg1对缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及其对线粒体功能、抗氧化酶系的影响.方法采用大鼠右侧大脑中动脉阻断(MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型.缺血前灌胃人参皂苷Rg125,50,100 mg·kg-1,给药7 d.末次给药1 h后制备MCAO模型,缺血2 h,再灌注24 h后,用Longa's法、TTC染色法、干燥失重法评价大鼠神经功能状态、脑梗死面积及脑水肿程度;电镜下观察线粒体超微结构,检测海马线粒体呼吸酶、ATPase、抗氧化酶活性及MDA含量的变化.结果人参皂苷Rg1(50,100 mg·kg-1)明显减少MCAO再灌后脑梗死面积、脑水肿程度及改善神经功能症状,减轻线粒体损伤,升高线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和Na+/K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性,降低MDA含量.结论人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其可能的作用机制之一是保护线粒体功能及抗氧自由基.     

L-丙氨酸对INS-1E细胞胰岛素分泌功能的影响

目的:探讨L-丙氨酸对胰岛B细胞株INS-1E细胞分泌胰岛素(INS)的刺激作用及其葡萄糖依赖性。方法:INS-1E细胞经传代培养2d后,在Krebs-Ringer缓冲液中于37°C培养箱预培养30min,再在含相同浓度葡萄糖、不同浓度L-丙氨酸(观察剂量依赖性)和不同浓度葡萄糖、相同浓度L-丙氨酸(观察葡萄糖依赖性)的改良Krebs-Ringer缓冲液培养60min,留取上清液进行胰岛素测定。结果:L-丙氨酸在0.1～20mmol/L范围促进了葡萄糖(16.7mmol/L)诱导的INS-1E细胞的胰岛素分泌,随剂量增大而增强;在1.1～25mmol/L葡萄糖范围内,随着葡萄糖浓度的增加,INS分泌量逐渐增加。在1.1～3.3mmol/L葡萄糖的情况下,10mmol/LL-丙氨酸未显示增加胰岛素分泌的作用;在6.7～25mmol/L葡萄糖范围内,10mmol/LL-丙氨酸显著促进了葡萄糖诱导的胰岛素分泌。结论:在高血糖状态下,随着L-丙氨酸浓度的增加,INS-1E细胞分泌胰岛素量逐渐增加。L-丙氨酸促进INS-1E细胞分泌胰岛素的作用依赖于一定水平的葡萄糖。     

丁苯酞对神经干细胞向神经细胞分化的促进作用

目的 研究丁苯酞通过PI3K-AKT信号通路促进神经干细胞向神经细胞分化的作用。方法 分离培养SD大鼠胚胎脑皮质层的神经干细胞,采用分化专用完全培养基培养后,通过光镜下观察和Nestin蛋白免疫荧光法进行鉴定。设置对照组和实验组,其中实验组添加丁苯酞辅助分化,分为丁苯酞低剂量组（1 μmol·L^-1）、中剂量组（5 μmol·L^-1）和高剂量组（10 μmol·L^-1）,作用24 h后,CCK-8法检测神经干细胞的细胞活力,碱性磷酸酶染色法检测神经干细胞的分化能力,免疫荧光法检测神经细胞分化程度,RT-qPCR法检测转录因子SOX2、PAX6和NeuN的mRNA表达水平,Western-blot及RT-qPCR检测PI3K-AKT信号通路的表达。结果 丁苯酞干预后神经干细胞活力提高,分化能力提高,碱性磷酸酶试验呈强阳性,转录因子SOX2、PAX6和NeuN的mRNA表达水平增高,PI3K-AKT信号通路蛋白和mRNA表达水平均增高,且呈现剂量依赖性。结论 丁苯酞可以促进神经干细胞向神经细胞分化,其作用机制可能与PI3K-AKT的激活有关。     

维拉帕米与1－荷包牡丹碱合用对体外KB细胞增殖的影响

低剂量１－荷包牡丹碱和无毒剂量的维拉帕米合用对细胞增殖的抑制作用比单用１－荷包牡丹碱时增强，其半抑制浓度ＩＣ５０值下降到单独应用１－荷包牡丹碱的１／８。联合用药后的细胞集落形成率比单独用１－荷包牡丹碱下降１／３～２０。结果提示维拉帕米能增强荷包牡丹碱对体外ＫＢ细胞的抗癌活性。     

三氧化二砷对人肾母细胞瘤细胞作用及机制的研究

目的研究三氧化二砷（arsenictrioxide,As203）对体外人肾母细胞瘤（Nephroblastoma／Wilms’tumor,WT）SK—NEP-1细胞作用及CyclinDl表达的影响。方法采用不同浓度的三氧化二砷作用体外培养人肾母细胞瘤WT细胞,应用MTT比色法检测细胞增殖的影响;RT-PCR法检测CyclinDlmRNA的表达。结果MTT检测对照组及不同药物浓度组增殖抑制率分别为（10．22±0．70）％、（20．76±3．46）％、（31．09±2．95）％、（40．04±2．30）％、（53．04±3．02）％、（64．61±0．95）％;RT-PCR法检测CyclinDlmRNA的表达,对照组及不同药物浓度组的灰度值分别为：1．25±0．07、1．03±0．08、0．90±0．09、0．73±0．08、0．48±0．09、0．26±0．07。以上检测各组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷可明显抑制WT细胞增殖,其机制可能与CyclinD1表达水平降低有关。     

来源于干细胞的树突细胞激活免疫细胞对同源白血病干细胞的杀伤作用

目的:探讨白血病干细胞(LSC)来源的树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共同培养对自身LSC的杀伤作用.方法:提取慢性粒细胞白血病加速期(CML-AP)患者的骨髓单个核细胞(BMMC),再应用CD34+CD38CD44+标记BMMC,流式分选仪分选出LSC并扩增、诱导出DC.取同源的单个核细胞诱导出CIK.用流式细胞技术检测DC和CIK细胞免疫表型、DC的p-糖蛋白(P-gp)耐药蛋白表达.荧光原位杂交(FISH)技术检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达,乳酸脱氢酶释放法测定效应细胞对靶细胞的杀伤效应.结果:CIK与DC共培养后,CD40、CD80、CD83及人类白细胞抗原(HLA-DR)的构成均高于共培养前;CD3、CD3CD8、CD3CD56的成熟表型表达率高于共培养前,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).干细胞来源DC的P-gp表达阳性率为(60.61±12.38)％.3种效靶比对应的杀伤率差异有统计学意义(P＜0.01),随着效靶比的增加,细胞杀伤作用增强.结论:白血病干细胞来源DC功能正常,与CIK共培养对自身LSC有杀伤作用.     

非病毒载体携带Cbfa1诱导成人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究

目的:观察核心结合因子a1(Cbfa1)对成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向成骨细胞定向分化的诱导作用。方法:经密度梯度离心法和贴壁筛选法获得hBMSCs。非病毒载体FuGene HD携带Cbfa1转染hBMSCs后7、14d,经Real-time PCR分析hBMSCs成骨细胞标志基因表达,包括Cbfa1、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原;培养1、2和3周,ALP染色、钙结节染色检测成骨分化。结果:培养的hBMSCs阳性表达CD73,阴性表达CD34。第3代细胞增殖曲线呈"S"形,符合对数生长曲线。Cbfa1转染hBMSCs表现出与成骨细胞相似的形态,成骨细胞标志基因ALP、OC、OPN和Ⅰ型胶原的表达均明显上调,ALP染色阳性,并且有明显的钙结节形成。结论:非病毒载体携带Cbfa1转染hBMSCs可诱导其向成骨细胞分化。     

瘦素对THP-1细胞泡沫化过程中ACAT-1表达的影响

目的：研究单核或巨噬细胞转分化和泡沫细胞形成过程中瘦素对人酰基辅酶A1胆固醇酰基转移酶(ACAT-1)表达的影响。方法：在体外模拟动脉粥样硬化(AS)形成过程中，运用放射性同位素标记底物法、逆转录聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平。结果：单核或巨噬细胞转分化过程中ACAT-1酶活性、蛋白及mRNA水平均升高。巨噬细胞转变为泡沫细胞过程中ACAT-1表达水平无明显变化。高瘦素血症可明显增强单核或巨噬细胞转分化和泡沫细胞形成过程中ACAT-1表达。结论：高瘦素血症可能通过增强ACAT-1表达导致动脉粥样硬化提前发生。     

Effect of Guanethidine on the Ultrastructure of the Small,Granule-containing Cells in Cultures of Rat Sympathetic Ganglia1

Abstract: Sympathetic chain ganglia of newborn rats were cultured in Rose chambers with and without guanethidine. After one week, the cultures were examined by light microscopy for formaldehyde-induced catecholamine fluorescence and by electron microscopy after fixation in 5% glutaraldehyde and 1% osmium tetroxide. Guanethidine sulphate (2 mg/l) caused an increase in the number of the small, intensely fluorescent (SIF) cells in the ganglion explants. Electron microscopic examination of guanethidine-containing cultures revealed an increased number of small, granule-containing (SGC) cells, which corresponded in size and shape to the SIF cells. Round vesicles (about 100 nm in diameter) and elongated vesicles (about 80 nm in cross section and about 200 nm in length) containing an electron-dense core were observed in the cytoplasm of the SGC cells both in control and guanethidine-containing cultures. The granular vesicles were most frequent in the periphery of the cytoplasm. In ganglia cultured with guanethidine, most SGC cells observed contained a greatly reduced number of granular vesicles as compared to SGC cells of the control cultures.     

神经节苷脂对人脂肪基质细胞分化为神经细胞的神经递质关键酶TH、CHAT、GAD的影响

目的:探讨神经节苷脂(GM1)对人脂肪基质细胞(ADSCs)分化为神经细胞的神经递质关键酶酪氨酸羟化酶(TH)、胆碱乙酰转移酶(CHAT)和谷氨酸脱羧酶(GAD)的影响。方法:分离培养人ADSCs,以神经诱导培养基(NIM)及加入不同剂量(50、100、200、400μmol.L-1)的GM1分别进行不同时间的诱导分化,并以免疫组化法检测TH、CHAT和GAD的表达情况。结果:TH的表达随诱导时间延长逐渐增强,同一时间点内NIM+400μmol.L-1GM1组表达最高,且与其余各组比较均有显著性差异(P<0.05)。CHAT和GAD的表达也均随诱导时间延长逐渐增强,但同一时间点内不同组间比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:GM1具有增强TH的表达而促进ADSCs向多巴胺能神经元分化的作用,且呈剂量依赖性。