大鼠肾脏缺血再灌注后IL-6变化及姜黄素预处理的影响

目的：观察大鼠肾脏缺血再灌注（IRI）的不同时间组炎性细胞因子白细胞介素-6（IL-6）在肾组织和血液中的含量变化及姜黄素预处理的影响。方法：采用大鼠肾缺血再灌注（IR）模型（将大鼠右肾切除,夹闭左肾蒂,60min后松开使左肾再灌注）,用双抗体夹心ELISA法动态检测肾组织和血液中IL-6含量,以及用生化分析仪测定BUN、Scr等指标变化。取肾脏称重,计算肾系数：肾重/体重,同时观察肾脏病理学变化。结果：肾组织中IL-6含量在单纯缺血组、R4h和R24h组均明显低于对照组（P〈0.05）,而R1h组与对照组水平差异无统计学意义,但与缺血组比较,其增高差异有统计学意义（P〈0.01）。血清IL-6水平在R1h组明显高于单纯缺血组（P〈0.01）。姜黄素干预可使R4h和R24h组的IL-6含量较未处理组增高（P〈0.01）,同时使R4h组BUN、Scr及肾系数也明显增高（P〈0.01或P〈0.05）,使R24h组的Scr明显降低（P〈0.01）,但BUN及肾系数无明显变化。结论：在再灌注的早期,肾组织和血液中IL-6的含量升高,随后下降接近于单纯缺血水平。姜黄素预处置使IL-6增多的同时加重早期肾缺血再灌注损伤（IRI）,姜黄素早期使肾功能障碍加重的作用是否与IL-6增加有关,值得进一步探讨;随着再灌注时间延长,姜黄素治疗作用逐渐显示。姜黄素与IL-6之间具体的作用机制有待进一步研究。     

姜黄素对缺血再灌注大鼠肾脏一氧化氮水平的影响

目的探讨姜黄素对缺血再灌注大鼠肾组织一氧化氮（NO）水平的影响。方法制作大鼠肾脏缺血及缺血再灌注（IR）模型,将48只大鼠随机分为假手术组、缺血组、IR1h组、IR6h组各8只;姜黄素中药干预组16只（不同再灌注时间1h、6h各8只）。用药组于肾动脉夹闭前30min给予姜黄素注射液20mg／kg尾静脉输入,开夹再灌注时又给予原药量的1／2;对照组同时给予等量0．9％氯化钠溶液尾静脉输入。另取仅作麻醉、开腹、不阻断肾血流的8只大鼠作为假手术组。不同时间摘取肾脏及颈动脉断开取血,用硝酸还原酶测定血液及肾组织匀浆的NO2%-和NO^3-含量。HE染色观察肾脏损伤程度。结果缺血时及IR后NO表达均明显增强（P〈0．05）,姜黄素干预组上述异常均明显减轻。单纯缺血组肾系数和SCr较假手术组比无明显变化,仅BUN高于对照组,而IR1h、IR6h组肾系数、BUN和SCr水平均高于假手术组,且随再灌注时间延长而显著增加（P〈0．01）。结论姜黄素能降低早期缺血再灌注大鼠血液及肾组织NO水平,其可能在减轻缺血与缺血再灌注组大鼠肾脏高滤过和肾脏肥大、改善肾脏结构和功能中发挥一定作用。     

吡咯烷二巯基氨甲酸对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及机制

目的 探讨吡咯烷二巯基氨甲酸(PDTC)对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及可能的机制.方法 选择成年、健康及雄性的Wistar大鼠56只,随机分为缺血再灌注损伤(IRI)组,PDTC组及对照组.IRI组:24只,建立大鼠肾缺血再灌注模型;PDTC组:24只,缺血再灌注前15 min经鼠尾静脉注射PDTC 150 mg/kg,其余步骤同IRI组;对照组:8只,不给予缺血再灌注处理.IRI组和PDTC组分别于再灌注后2、6和24 h检测大鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;检测肾组织中自细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织的病理变化.取对照组的各项数据作为正常对照.结果 IRI组大鼠再灌注后各时间点的血Cr、BUN、IL-8及TNF-α含量、NF-κB和iNOS mRNA表达水平均高于对照组和PDTC组(P<0.05).再灌注后6 h时,PDTC组大鼠肾组织中IL-8和TNF-α含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).再灌注后24 h时,PDTC组大鼠各项生化指标与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).PDTC组大鼠肾损伤的病理变化较IRI大鼠明显减轻.结论 PDTC通过抑制NF-κB,有效减少IL-8,TNFα和iNOS的产生,对肾缺血再灌注有良好的保护作用.     

红景天甙对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨红景天甙对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）的预防和保护作用。方法将32只健康成年SD大鼠随机分成正常对照组、假手术组、缺血再灌注组和红景天甙组4组，每组8只。缺血再灌注组和红景天甙组分别制作肾脏缺血再灌注模型，红景天甙组予以红景天甙预处理。检测血中尿素氮（BUN）和肌酐（Scr）及肾脏中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二酰二醛（MDA）和钠钾ATP酶（Na^＋-K^＋ATPase）含量，并用光镜和电镜观察肾脏组织形态学变化。结果红景天甙组血清BUN和Scr水平、肾皮质MDA含量较缺血再灌注组显著降低（P〈0．01），而肾皮质中SOD和Na^＋-K^＋ATPase含量与缺血再灌注组相比显著升高（P〈0．01）；肾组织光镜和电镜观察均见缺血再灌注组肾小球和肾小管上皮细胞损伤明显，而红景天甙组肾小球及肾小管仅见轻微损伤。结论红景天甙能有效降低大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI），对肾脏IRI有明显的预防和保护作用，为临床上肾脏IRI提供新的预防和治疗思路。     

茶多酚对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨茶多酚（teapolyphenols,TP）预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,IRI）的保护作用及其机制。方法：雄性SD大鼠42只,随机分为假手术组、IRI组和TP预处理组。IRI组及TP组手术建立肾IRI模型,TP预处理组在此基础上加用TP治疗。IRI组及TP预处理组在缺血1h恢复灌注开始时刻、2h后、24h后分别检测血清肌酐（Scr）、血清超氧化物岐化酶（SOD）、血清丙二醛（MDA）、肾组织SOD和肾组织MDA水平,并观察肾组织的病理变化。结果：TP预处理组肾组织病理变化轻于IRI组;与假手术组相比较,IRI组的Scr水平升高（P〈0.05）,肾组织及血清中的SOD降低及MDA水平增加（P〈0.05）。而TP预处理组的Scr、MDA和肾组织的MDA均比IRI组低（P〈0.05）,而血清SOD水平及肾组织中的SOD水平升高（P〈0.05）。结论：TP对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能是通过抗氧化作用实现的。     

外源性硫化氢抑制TLR2和TLR4表达并减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的观察外源性硫化氢(H₂S)供体硫氢化钠(NaHS)能否抑制Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达、减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)。 方法24只6~8周龄雄性SD大鼠随机分为3组：假手术(Sham)组、肾脏缺血再灌注(I/R)组、NaHS+I/R组。采用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min后再灌注24 h的方法诱导肾IRI。夹闭左肾动脉前，NaHS+I/R组给予NaHS(300 nmol/min)连续输注10 min，Sham组和I/R组则给予等体积生理盐水。分别留取各组腹主动脉血及肾组织标本。Western印迹法检测肾组织TLR2、TLR4蛋白的表达；免疫组织化学法检测肾组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达；比色法检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。HE染色观察肾脏组织学改变；TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。 结果与Sham组比较，I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均增加(P<0.05)，BUN、Scr亦明显升高(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较高(P<0.05)，肾组织凋亡细胞增加(P<0.05)。与I/R组比较，NaHS+I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均减少(P<0.05)，BUN、Scr亦明显下降(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较低(P<0.05)，肾组织凋亡细胞减少(P<0.05)。 结论外源性H₂S可以抑制TLR2、TLR4途径，减少炎症因子释放及细胞凋亡，减轻大鼠肾脏IRI。     

缺血后处理对大鼠缺血再灌注肾损伤后尿NGAL蛋白表达的影响

目的:评估缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)对大鼠缺血再灌注肾损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的保护作用,及其对尿中性粒细胞明胶酶脂质相关运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)表达的影响。方法:雄性SD大鼠144只,体重180~200 g,随机分为3组(n=48):缺血再灌注组(IRI组):夹闭双侧肾蒂45 min后恢复灌注;缺血后处理组(IPO组):在IRI组基础上进行短暂反复6遍再灌注10 s/缺血损伤10 s处理后恢复灌注;假手术组(sham组):仅开腹,游离双侧肾脏,分离肾蒂不夹闭;每组于术前及术后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集血、尿液及肾组织标本,苦味酸法检测大鼠血清肌酐(Scr),自动生化分析仪检测大鼠血尿素氮(BUN),ELISA法检测尿NGAL表达改变,显微镜下观察肾组织病理学改变。结果:肾组织病理检查结果示:12 h、24 h、48 h IPO组大鼠肾损伤程度较相应时间IRI组均明显减轻,与肾功能(Scr、BUN)结果一致(P0.05);与sham组相比:IPO及IRI组大鼠尿NGAL均在术后2 h开始升高,12 h到达峰值,除再灌注0 h、2 h外,IPO组各时间点尿NGAL表达均明显低于IRI组(P值均0.05)。结论:IPO对大鼠缺血再灌注肾损伤肾功能有保护作用,并可降低IRI所致的尿NGAL蛋白表达水平,NGAL可能成为肾IRI新的治疗靶点。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和缺氧诱导因子1α在肾脏缺血再灌注损伤中的改变及意义

目的:探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在肾脏急性缺血再灌注损伤保护方面的调控机制研究。方法:选取生后3~4周龄的雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、急性缺血再灌注损伤组(IRI组)、二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理组(IRI+DMOG组),每组6只。Sham组右侧肾脏切除,仅游离左侧肾动脉,但不钳夹;IRI组右侧肾切除,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min,之后松开动脉夹,恢复肾脏血流(术前24 h给予DMOG组等量的生理盐水腹腔注射);IRI+DMOG组IRI术前24 h给予腹腔内注射DMOG 40 mg/kg(用生理盐水溶解)。采用免疫组织化学方法和Western Blot方法检测各组肾组织的HIF-1α和NGAL蛋白表达水平,用Real Time PCR的方法检测Hmox-1和NGAL mRNA的表达水平。检测各组的肾功能(BUN、Scr、Cystatin C)、评价各组肾脏的形态学改变及肾小管间质损伤评分。TUNEL法检测各组肾组织的细胞凋亡情况。对各组结果的比较分析采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果:DMOG处理后的大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤时NGAL和HIF-1α的表达上调;并对大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤发挥保护作用。结论:在肾脏急性缺血再灌注损伤时,NGAL可能受HIF-1α调控发挥保护作用。     

缺血预处理对缺血再灌注损伤大鼠肾组织TLR2表达的影响

目的观察缺血预处理对缺血／再灌注损伤大鼠肾组织Toll样受体2（TLR2）表达的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为3组：假手术对照组（SHAM组）、单纯缺血再灌注组（I／R组）和缺血预处理组（IPC组）,每组8只。于术后24h留取各组大鼠血标本和肾组织。检测各组大鼠血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）,肾组织切片行HE染色后观察其病理学改变,酶联免疫吸附法（ELISA）检测肾组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,实时荧光定量多聚酶链反应检测肾组织TLR2mRNA表达,Westernblot检测肾组织TLR2蛋白表达。结果与SHAM组相比,I／R组大鼠SCr和BUN升高,肾组织TNF-α含量和TLR2蛋白表达升高,差异均有统计学意义（P〈0．01）;与I／R组相比,IPC组大鼠SCr和BUN降低,肾组织TNF-α含量和TLR2蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论缺血预处理可能通过抑制大鼠。肾组织TLR2表达及其信号通路,下调TNF-α的表达,发挥其肾脏保护作用。     

大鼠肾下腹主动脉阻断后再灌注自由基变化对肾功能影响实验研究

目的 探讨大鼠肾下腹主动脉阻断后再灌注自由基变化对肾功能的影响及其作用机制.方法 Wistar大鼠42只,随机分为对照组,缺血5 h组,缺血5 h分别再灌注2、4、8、12 h组,每组7只.检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及血浆和肾组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,光镜观察各组大鼠肾脏及下肢肌肉形态学变化.结果 缺血及再灌注组大鼠BUN水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),在I/R4 h组达到最高,随后下降;各组间Cr差异无统计学意义.大鼠血浆MDA水平在对照组与I组,L/R 2 h组,I/R4 h组,I/R 8 h组,I/R 12 h组组间比较差异有统计学意义(P<0.05),血浆MDA水平在I/R 4 h组达到高值,随后下降.大鼠血浆SOD水平在对照组与I/R 4 h组,I/R 8 h组组间比较差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肾组织匀浆SOD水平在I/R4 h组与对照组,I组,I/R 2 h组,I/R 8 h组.I/R 12 h组组间比较差异有统计学意义(P<0.05),SOD水平在I/R 4 h组达到低值,随后升高.光镜观察缺血组肾脏及下肢肌肉组织可见轻度损伤,再灌注组肾脏及下肢肌肉组织损伤程度较缺血组重.结论 大鼠肾下腹主动脉阻断后再灌注可造成肾功能异常,与缺血再灌注所激发的自由基合成及释放增多有关.     

缺血后处理对小鼠肠缺血再灌注致肾损伤时Nrf2蛋白表达的影响

目的 评价缺血后处理对小鼠肠缺血再灌注致肾损伤时核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达的影响.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠36只,9～12周,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理+缺血再灌注组(IPO组).采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min恢复灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型,IPO组于缺血45 min时再灌注30s,缺血30s,重复3次后恢复灌注.于再灌注2h时采集颈动脉血样,然后处死小鼠,取肾组织,测定血清BUN、Cr和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平,检测肾组织Nrf2和HO-1蛋白表达、MDA含量、SOD活性、TNF-α、IL-6和IL-10的含量.显微镜下观察肾组织病理学结果,并行病理学损伤评分.结果 与S组比较,I/R组血清BUN、Cr和NAGL浓度升高,肾脏组织Nrf2及HO-1蛋白表达上调,MDA含量升高,SOD活性降低,肾脏组织病理学损伤评分升高(P＜0.05);与I/R组比较,IPO组血清BUN、Cr和NAGL浓度降低,肾脏组织Nrf2及HO-1蛋白表达上调,MDA含量降低,SOD活性升高,肾脏组织病理学损伤评分降低(P＜0.05).各组肾脏组织TNF-α、IL-6和IL-10含量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺血后处理可减轻小鼠肠缺血再灌注致肾损伤,其机制可能与促进Nrf2蛋白表达,从而上调HO-1蛋白表达有关.     

NGAL对大鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用及机制研究

目的:观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutropil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,IRI)后肾功能的保护作用及机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(I/R组)及缺血再灌注联合NGAL治疗组(I/R+N组),通过夹闭双侧肾动脉法建立大鼠I/R-AKI模型,NGAL干预组于造模前30min、再灌注0、0.5、1 h予外源性重组NGAL蛋白(12.5 ug/ml)预处理,检测三组大鼠再灌注24 h的血清肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)表达,HE染色观察三组大鼠肾组织病理改变,电镜观察自噬小体形成,Western-blotting检测肾组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达改变。结果:与对照组及I/R+N组相比,I/R组再灌注24 h后的Scr及BUN均显著升高(P0.05);病理可见I/R组术后小管排列稀疏、紊乱,上皮细胞坏死脱落,肾小管刷状缘消失;I/R+N组病变与之相似,但程度相对较轻;Western-blotting结果示:I/R+N组自噬相关蛋白LC3表达较对照组及I/R组显著增强(P0.05),电镜可见相应条件下自噬小体形成。结论:NGAL可通过增强自噬改善缺血再灌注肾损伤肾功能减退。     

静脉注射含饱和氢气生理盐水减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 研究静脉注射含饱和氢气生理盐水对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 健康、雄性的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只.假手术组(SO组)小鼠仅接受中线开腹、双侧肾蒂游离及关腹操作;缺血再灌注组(IR组)小鼠用无损伤动脉夹同时钳夹双侧肾蒂,阻断45 min,制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水,5 ml/kg;实验组小鼠制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射含饱和氢气生理盐水,5 ml/kg.各组小鼠于肾脏再灌注6 h时检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr);检测肾组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;观察肾脏组织形态学变化并检测肾小管上皮细胞的凋亡情况;观察肾组织中巨噬细胞的浸润情况;检测各组小鼠肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-17 mRNA的水平.结果 实验组血清BUN和Scr水平明显低于IR组(P<0.05).实验组肾组织病理改变较IR组明显减轻,其肾小管损伤评分明显低于IR组(P<0.01),肾小管上皮细胞凋亡明显轻于IR组(P<0.05).实验组肾组织内MDA含量低于IR组(P<0.05).实验组小鼠肾组织内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润较IR组减少(P<0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17mRNA的水平均低于IR组(P<0.05).结论 静脉注射含饱和氢气生理盐水能够在一定程度上减轻肾脏IR损伤,其机制可能与抑制肾脏IR后炎症反应有关.     

纤维蛋白原Bβ15-42肽对大鼠肾脏缺血再灌注损伤凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察纤维蛋白原Bβ15-42肽(fibrinogen-derived peptide Bβ15-42,FgBβ15-42)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, IRI)凋亡及相关蛋白的影响。方法:将24只SD大鼠随机分成假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注模型组(I/R组)、FgBβ15-42肽治疗组(Fg+I/R组),每组8只。Sham组：分离肾动脉后关闭腹腔;I/R组：采用双侧肾动脉夹闭的方法制作肾脏IRI模型;Fg+I/R组：于肾脏缺血30 min后立即尾静脉注射FgBβ15-42肽3.6 mg/kg。采用血肌酐测定试剂盒和尿素氮测定试剂盒分别检测血清中肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾组织病理变化,并半定量分析肾组织病理损伤程度;TUNEL凋亡试剂盒检测肾组织细胞凋亡;Western blot检测肾组织Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白表达。结果:与Sham组比较,I/R组Scr、BUN增加(P<0.05);肾小管上皮细胞水肿、肾小管管腔变小、刷状缘消失、部分上皮细胞脱落,间质可见炎症细胞浸润...     

蛋白激酶B介导的APPL1在肾缺血再灌注损伤致肾脏慢性纤维化的机制研究

目的观察蛋白激酶B(Akt)介导下pH域磷酸络氨酸结合域和亮氨酸拉链基元1(APPL1)对肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)小鼠肾纤维化的保护机制。方法取雄性C57BL/6小鼠24只,随机分为2组:普通小鼠假手术组(WT-C组)、普通小鼠肾缺血再灌注组(WT-I/R组);取APPL1基因敲除小鼠48只,随机分为4组:APPL1基因敲除假手术组(AK-C组)、APPL1基因敲除肾缺血再灌注组(AK-I/R组)、APPL1基因敲除+Akt抑制剂处理组(AK-L组)、APPL1基因敲除+生理盐水处理组(AK-S组)。除WT-C组和AK-C组外,其余组均制备肾IRI模型。AK-L在造模成功后腹腔给予Akt抑制剂(LY294002)6 mg/kg,后每隔24 h再腹腔注射相同剂量LY294002到第7天,AK-S组注射生理盐水。再灌注24 h时每组随机取6只小鼠,检测BUN和Scr浓度,进行肾小管损伤评分,测定肾组织APLL1表达和Akt磷酸化水平。再灌注14 d时每组随机处死6只小鼠,评估肾纤维化程度,测定肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白、α-平滑肌动蛋白、APLL1的表达和Akt磷酸化水平。结果再灌注24 h时血清BUN和Scr的浓度、肾小管损伤评分比较,WT-C组与AK-C组之间差异无统计学意义(P0.05);与WT-C组、AK-C组比较,WT-I/R组、AK-I/R组、AK-L组和AK-S组升高(P0.05),AK-L组最高(P0.05)。再灌注14 d时,肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白和α-平滑肌动蛋白的表达及和肾纤维化程度比较,WT-C组与AK-C组之间差异无统计学意义(P0.05);与WT-C组和AK-C组比较,WT-I/R组、AK-I/R组、AK-L组和AK-S组纤维化指标表达升高及肾纤维化程度升高(P0.05),AK-L组最高(P0.05)。再灌注24 h和14 d时,与WT-C组比较,WT-I/R组肾组织APPL1表达上调及Akt磷酸化水平升高(P0.05);再灌注24 h时,与AK-C组比较,AK-I/R组和AK-S组Akt磷酸化水平升高(P0.05),与AK-I/R组比较,AK-L组Akt磷酸化水平降低(P0.05)。结论 Akt介导下APPL1对肾IRI小鼠的肾慢性纤维化有保护作用。     

丙泊酚对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨丙泊酚预处理对急性肾缺血再灌注损伤(acute renal ischemia reperfusion injury ,ARIRI)的保护作用及其机制.方法 采用完全随机研究设计(randomized controlled trial,RCT),健康近交系清洁级的雄性SD大鼠63只,随机分为3组:假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、丙泊酚预处理组(C组),每组21只SD大鼠.采用切除右侧肾,用无损伤微动脉夹夹闭左侧肾蒂60分钟后解除阻断,建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型.用24号套管针股静脉穿刺置管,实验过程中各组使用微量注射泵注入不同注射液.分别于手术前15分钟、再灌注后2小时、24小时留取血和肾组织标本同时处死大鼠,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及观察这三个时点肾组织的病理学改变.结果 丙泊酚预处理组各个时点的肾组织病理学变化均轻于缺血再灌注组.缺血再灌注组中血清BUN、Cr、MDA和TNF-α水平增加均高于丙泊酚预处理组(p＜0.05),丙泊酚预处理组血清SOD、IL-6水平均高于缺血再灌注组(p＜0.05).结论 丙泊酚预处理组血清BUN、Cr、MDA、TNF-α、SOD、IL-6水平与缺血再灌注组均有统计学差异.结果 表明丙泊酚能减少氧自由基释放,抑制和减少炎症反应,在急性肾缺血再灌注损伤能起到保护肾脏的作用.     

米力农注射液对肾缺血再灌注损伤大鼠PDE3/cAMP/PKA信号通路及肾功能的影响

目的:探究米力农注射液对肾缺血再灌注损伤(IRI)大鼠磷酸二酯酶3(PDE3)/环腺苷酸(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路及肾功能的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松(5 mg/kg)组、米力农低(125μg/kg)、中(250μg/kg)、高(500μg/kg)剂量组,每组12只,除假手术组外,其余各组建立IRI大鼠模型,分组处理后,检测大鼠肾功能指标血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平;以苏木精-伊红染色(HE)检测大鼠肾组织病理形态;以试剂盒检测大鼠肾组织SOD、MDA及cAMP水平;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α,IL-6;以蛋白免疫印迹法检测肾组织PDE3、PKA蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠肾组织球囊黏连,肾小管结构水肿膨胀,肾上皮细胞变性、坏死,形成空泡,显示严重的病理损伤,Scr、BUN、血清TNF-α、IL-6水平、肾组织MDA水平及PDE3蛋白表达升高(P0.05),肾组织cAMP、SOD水平及PKA蛋白表达明显降低(P0.05)。与模型组相比,米力农低、中、高剂量组及地塞米松组大鼠肾组织病理损伤减轻,Scr、BUN、血清TNF-α、IL-6水平、肾组织MDA水平及PDE3蛋白表达降低(P0.05),cAMP、SOD水平及PKA蛋白表达升高,且米力农各组呈剂量依赖性(P0.05)。结论:米力农注射液可下调PKA表达激活cAMP/PKA信号,从而抑制炎症反应,降低氧化应激,加快肾组织缺血再灌注损伤的修复。     

肾脏缺血再灌注损伤过程中天然免疫分子高迁移率族蛋白B1释放变化

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中的表达变化.方法 建立小鼠IRI模型,再灌注0、3、6 h或24 h后取外周血及左肾,测定血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,免疫组织化学及Western blot检测肾组织全蛋白和胞质蛋白HMGB1的表达,并观察病理学变化(HE)及细胞凋亡.结果与假手术组比较,再灌注0 h时小鼠血清Cr和BUN无明显升高,而再灌注3、6、24 h后呈阶梯性显著性升高.假手术组肾组织HMGB1几乎均表达于细胞核内,而肾脏缺血损伤后HMGB1即开始在(主要是肾小管上皮细胞)胞质或胞外表达,且HMGB1在细胞核外的表达量在再灌注3 h时最强,之后缓慢减弱,而24 h内细胞总蛋白HMGB1表达量未见明显变化.再灌注0、24 h病理损伤渐进性加重,而凋亡细胞显著性增加.结论 HMGB1在肾IRI早期表达总量恒定而表达部位发生改变,且表达部位的改变先于肾功能的变化,HMGB1可能作为重要早期炎症因子在IRI启动中发挥作用.     

HIF-PHI减轻炎症反应预防小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨低氧诱导因子—脯氨酰羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor, HIF-PHI)预处理小鼠能否减轻炎症反应, 减少细胞凋亡, 缓解肾脏缺血再灌注损伤。方法将雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI+HIF-PHI组, 每组6只, 其中IRI+HIF-PHI组提前1周隔天灌胃罗沙司他20 mg/kg。建立肾脏缺血再灌注模型后, 检测各组小鼠血清肌酐(sCr)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化并进行损伤评分;原位末端标记法(TUNEL)评估肾组织细胞凋亡;实时定量逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应检测肾脏组织内低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平;免疫荧光及免疫组化分别检测HIF-1α, 炎症因子TNF-α和IL-1β表达情况。结果与IRI组相比, IRI+HIF-PHI组小鼠sCr水平明显降低(P<0.01), 肾组织损伤情况明显改善, 肾小管损伤半定量评分更低(P...