MTA1 mRNA表达与乳腺癌浸润转移的关系

目的:探讨转移相关基因1(metastasis associated gene 1,MTA1) mRNA在乳腺癌浸润与转移中的作用.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测55例乳腺癌、癌旁组织中MTA1 mRNA表达.结果:MTA1 mRNA在乳腺癌中阳性表达率为52.7%(29/55),在癌旁乳腺组织的阳性率为23.6%(13/55),两者比较差异有统计学意义(P＜0.05),MTA1 mRNA在乳腺癌组织中的阳性检出率与临床分期、淋巴结转移数目(＞4)、病理分级和c-erbB-2阳性相关(P＜0.05),与年龄、ER、PR无明显关系(P＞0.05).结论:MTA1对乳腺癌浸润、转移可能有促进作用,有可能成为预测乳腺癌浸润与转移的参考指标.     

胎盘瘦素mRNA表达水平及其与胎儿生长发育的相关性研究

目的 :探讨胎儿体内瘦素的来源 ,胎盘组织瘦素mRNA的表达水平与胎儿生长发育的关系。方法 :收集 5 2例正常产妇的胎盘组织 ,依据其新生儿出生体重分为 :大于胎龄儿 (LGA) 14例 ,适于胎龄儿 (AGA) 2 1例 ,小于胎龄儿 (SGA) 17例。采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术结合荧光定量分析 ,检测胎盘组织瘦素mRNA表达水平 ,分析胎盘组织瘦素mR NA表达水平与胎盘重量、新生儿体重、新生儿Ponderal指数、孕妇体重、孕妇体重指数 (BMI)、性别的关系。结果 :LGA胎盘组织瘦素mRNA的表达水平高于AGA(P <0 .0 0 1) ,AGA胎盘组织瘦素mRNA的表达水平高于SGA(P <0 .0 5 ) ,胎盘组织瘦素mRNA表达水平与胎盘重量 (r =0 .5 4 )、新生儿体重 (r=0 .5 9)、新生儿Ponderal指数 (r =0 .5 6 )呈正相关 ,与孕妇体重 (r =0 .2 1)和孕妇体重指数 (r =0 .18)无明显相关。男婴和女婴胎盘组织瘦素mRNA表达水平的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :胎盘组织表达和分泌的瘦素是胎儿体内瘦素的来源之一。胎盘瘦素mRNA表达水平与胎儿生长发育有关。     

Real time RT-PCR定量检测AFP mRNA表达水平方法的建立

目的　建立realtime逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测AFPmRNA表达水平方法。方法　提取BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,构建重组质粒 ,建立realtimeRT PCR检测AFPmRNA表达水平方法。结果　重组质粒的阳性克隆效率为 81.8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插入PMD 18T载体内 ,得到realtimeRT PCR动力学曲线。结论　成功建立了realtimeRT PCR定量检测AFPmRNA表达水平方法。     

MAGE-12 mRNA在肺癌中的表达及其意义

目的　探讨肺癌组织中MAGE 12mRNA的表达及其意义。方法　采用RT PCR技术 ,检测了MAGE 12在 5 0例临床病人肺癌标本中mRNA水平的表达。结果　 5 0例临床肺癌标本中有 17例表达 (17 5 0 ,3 4% ) ,且肺鳞癌 (15 3 3 ,45 5 % )与肺腺癌 (2 17,11 8% )有显著差异 (P <0 0 5 )。结论　MAGE 12基因在肺癌有较高的表达率 ,基于MAGE 12基因及其产物作为新的疫苗可能是一个有前途的治疗肺癌的免疫治疗方法     

乳腺癌患者外周血CK-19 mRNA检测的临床意义

目的探讨外周血CK-19mRNA表达与乳腺癌的关系，评价其在乳腺癌诊断上的价值。方法应用RT-PCR技术检测200例乳腺癌患者外周血中CK-19mRNA表达情况，并以66例乳腺良性疾病和60例正常健康女性作为对照。结果200例乳腺癌患者48例外周血CK-19为阳性，66例乳腺良性疾病患者中3例阳性，而同时检查的60位健康者，他们的外周血CK-19均为阴性；不同年龄病人的CK-19检测阳性率对比，彼此之间差异无统计学意义；肿瘤不同分期CK-19阳性率对比差异有统计学意义。结论RT—PCR法检测CK-19mRNA可作为乳腺癌诊断的指标。     

VEGF蛋白及mRNA在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA在乳腺癌发生、发展过程中的临床意义.方法:运用免疫组化EnvisionTM和半定量RT-PCR的方法检测56例乳腺癌和30例乳腺纤维腺瘤组织中VEGF蛋白及mRNA的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系.结果:VEGF蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率为75.0 ％(42...     

MAGE基因mRNA在非小细胞肺癌中的表达

目的：检测MAGE-1、-2、-3、-4基因mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况。方法：采用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法对28例NSCLC患者的肺癌组织进行MAGE-1、2、-3．-4mRNA表达的检测。结果：28例肺癌标本中MAGE-1、-2、-3、-4的阳性表达率分别为35．7％(10／28)、42．9％(12／28)、53．6％(15／28)、35．7％(10／28);4种基因至少有一种表达的几率是89.3％(25／28);两种或两种以上同时表达几率是57．1％(16／28)。非肺癌患者肺组织4种MAGE基因表达均为0％。结论：非小细胞肺癌中MAGE-1、-2、-3、-4基因高表达,非肺癌肺组织无表达．提示MAGE基因可用于肺癌的主动免疫治疗。     

乳腺癌特异基因1在乳腺癌表达的意义

目的 检测乳腺癌特异基因1(BCSG1)在乳腺癌中的表达，评价其表达与乳腺癌临床病理因素的相关性。方法 利用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR法)检测28例乳腺癌、7例乳腺增生症及5例乳腺纤维瘤中BCSG1的表达。结果 28例乳腺癌中有BCSG1表达12例(42．9％)，其中Ⅲ／Ⅳ期乳腺癌的表达率为69.2％(9／13例)，乳腺良性病变中BCSG1无一例表达。BCSG1的表达与乳腺癌分期密切相关(P=0．02)，与患者年龄、月经、肿瘤部位以及雌激素受体、孕激素受体、核增殖抗原、C—erbB2的表达等无相关性。结论 BCSG1可能是与肿瘤恶性进展有关的肿瘤标记物，是乳腺癌发生过程中的中晚期事件，为判定乳腺癌预后的新指标。     

乳腺癌维甲酸受体表达的临床研究

目的:探讨维甲酸受体琢、茁和酌在乳腺癌中的表达与乳腺癌发展的关系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT鄄PCR)方法检测维甲酸受体琢、茁和酌(RAR琢、茁和酌)在49例乳腺癌中的表达。结果:乳腺癌组织中RAR琢、茁和酌的mRNA表达分别为41/49(84%),23/49(47%)和43/49(87.76%)。乳癌组织中RAR茁丢失明显高于RAR琢和RAR酌(P<0.001)。RAR茁的丢失与肿瘤大小,肿瘤分化程度,淋巴结转移和肿瘤分期有关。结论:RAR茁的丢失可能与乳腺癌的发展有关并影响维甲酸治疗进展期乳腺癌的疗效。     

乳腺癌中Id3基因mRNA的表达及其与临床病理的关系

目的 观察乳腺癌组织中的分化/DNA结合抑制因子3(Id3)mRNA的表达情况,并探讨其与临床病理及其他分子指标的关系.方法 应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应对48例乳腺癌组织、20例乳腺纤维腺瘤组织及乳腺癌 MCF-7 细胞系中 Id3 mRNA 进行检测.以免疫组化 SABC 法检测 Id3 蛋白在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤组织中的表达及与乳腺癌中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的关系.结果 经实时荧光定量PCR法检测,乳腺癌组织、乳腺纤维腺瘤组织中的2-CT值分别为5.775 7±1.566 4、1.109 6±0.014 5.乳腺癌组织的 Id3 mRNA 阳性表达率均显著高于乳腺纤维腺瘤组织(P<0.05),Spearman等级相关分析表明其与VEGF表达呈正相关(rs=0.379,P=0.008),而与患者的年龄、淋巴结转移、肿块大小、组织学分级、pTNM 分期等临床病理因素无关(P＞0.05).结论 Id3 在乳腺癌中高表达,与 VEGF 表达呈正相关,可能与血管形成有关.     

巢式RT-PCR技术检测肺癌76例微量癌细胞转移分析

目的 :建立检测肺癌患者外周血及淋巴结微转移癌细胞的敏感的分子检测方法 ,并探讨其临床应用的意义。方法 :采用巢式逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术特异引物扩增 CK19- m RNA,以检测肺癌患者外周血及淋巴结中 CK19- m RNA的表达情况。分析CK19- m RNA扩增结果与患者临床指标的关系。结果 :76例肺癌患者外周血标本中 39例CK19- m RNA阳性 ,阳性率为 5 1 .3% ,2 7例肺良性病变中仅 1例阳性 ,阳性率为 3.7% ,1 5例健康对照者均为阴性。全部患者 1 5 7枚淋巴结中 CK19- m RNA检测出阳性率为 38.9%( 61 / 1 5 7) ,常规病理方法检出阳性率为 1 4.6% ( 2 3/ 1 5 7) ,两种方法比较 ,有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ,且 HE染色阴性的 1 34枚淋巴结中 ,经 RT- PCR法证实存在癌转移的阳性率为 2 8.3% ( 38/ 1 34) ,两组比较有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 :巢式 RT- PCR是一种特异性和敏感性均较高的癌细胞微量转移检测方法 ;可能有助于肺癌细胞微转移的早期诊断。     

胰岛素样生长因子-1在乳腺癌外周血中的表达及意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达及其与乳腺癌发生发展的关系.方法:应用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对70例乳腺癌患者的外周血胰岛素样生长因子-1的表达进行测定,以乳腺良性疾病患者及健康志愿者外周血测定作为对照.结果:IGF-1 mRNA在乳腺癌患者、乳腺良性疾病患者及...     

乳腺癌患者外周血CK19基因表达的检测及临床价值分析

目的探索外周血CK19基因表达的检测及在乳腺癌诊断中的应用价值。方法应用逆转录结合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乳腺癌MDA-MB453细胞株血液标本模型和280例临床标本的CK19表达,同时检测三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)表达作为PCR方法的监控指标。结果逆转录结合FQ-PCR检测MDA-MB453细胞株血液标本模型的灵敏度为107个血细胞中含1个乳腺癌细胞的水平。280例外周血临床标本的CK19表达,乳腺癌组(38/120)与非乳腺癌组(20/80)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组(38/120)与正常对照组(2/80)比较,差异有统计学意义(P<0.01);乳腺癌淋巴结转移组(21/53)与未见淋巴结转移组(17/67)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌术后2年以上者,复发组(3/9)与未复发组(6/31)比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。GAPDH表达均阳性。结论CK19是上皮细胞性癌细胞的较特异指标,诊断乳腺癌的特异性不强,但可用作病理学检查的补充,或结合其他特异性指标共同诊断乳腺癌微转移和复发,具有一定的价值。     

非小细胞肺癌患者纵隔淋巴结和外周血中MUC1基因的检测及意义

目的探讨非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)患者纵隔淋巴结和外周血中黏蛋白-1基因(MUC1mRNA)作为肺癌微转移标志的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,首先检测30例肺良性病变患者的外周血及其67枚纵隔淋巴结,以及30枚病理报告为NSCLC的纵隔淋巴结的MUC1mRNA,以证实RT-PCR技术的敏感度和特异度;然后检测158例NSCLC患者的外周血和97例手术患者的病理报告阴性的296枚纵隔淋巴结的MUC1mRNA的表达,以了解和比较NSCLC患者的外周血和纵隔淋巴结肺癌微转移情况。结果在30例肺良性病变患者外周血中未检测到MUC1mRNA,158例NSCLC患者有49例在外周血中检测到MUC1mRNA,阳性率为31.0%,两者差异显著(P<0.01);经χ2检验,Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者的外周血中MUC1mRNA阳性率无明显差异(P>0.05),Ⅰ期或Ⅱ期与Ⅲ期间差异显著(P<0.05),与Ⅳ期间差异明显(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ期间差异显著(P<0.05)。对Ⅲa期以下的97例手术患者,术中所取的296枚病理报告为阴性的淋巴结进行MUC1mRNA检测,结果显示112枚为MUC1mRNA阳性,阳性率37.8%;30例肺良性病变的67枚淋巴结中有1枚MUC1mRNA阳性,假阳性率为1.5%,与前者比较阳性率的差异有统计学意义(P<0.01)。结论用RT-PCR法对患者淋巴结和外周血中MUC1mRNA的检测具有较高的敏感度和特异度,可作为肺癌微转移的一个诊断标准,同时与预后相关。     

FEC化疗方案对p53依赖的凋亡上调调控因子mRNA在乳腺癌中表达的影响

目的研究FEC化疗方案对p53依赖的凋亡上调调控因子（PUMA）mRNA在乳腺癌组织中的表达及其影响。方法选择病理确诊为乳腺癌的癌组织标本30例,设为化疗前组（A组）;A组患者行新辅助化疗后手术过程中所取癌组织标本30例设为化疗后组（B组）;乳腺增生病变20例设为对照组（C组）。采用RT—PCR法检测三组乳腺标本中PUMAmRNA的表达;采用统计学分析A、B、C三组PUMAmRNA的表达特点以及A组30例乳腺癌患者PUMAmRNA的表达和年龄、肿瘤大小、组织学类型、TNM分期、淋巴结转移情况等临床病理特征的联系。结果化疗前组（A组）和对照组（C组）组中PUMAmRNA的表达差异无统计学意义,FEC方案化疗后（B组）乳腺癌组织中PUMAmRNA的表达上调。PUMAmRNA的表达和淋巴结转移呈负相关,和其他临床病理特征无显著相关。结论乳腺癌的发生并不是由于PUMA表达的缺失所致。FEC方案通过促进PUMAmRNA表达的上调,从而诱发细胞凋亡的增加,发挥治疗作用。PUMA低表达导致的细胞凋亡减小,可能是乳腺癌侵袭性增加并且发生转移的机制之一。     

MUC4 mRNA在胰腺癌患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的研究MUC4 mRNA在人胰腺癌患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义.方法采用逆转录实时PCR法检测20例胰腺癌、12例慢性胰腺炎患者及8例健康志愿者外周血单个核细胞中MUC4 mRNA的表达.结果MUC4 mRNA在慢性胰腺炎患者及健康志愿者外周血单个核细胞中无表达,20例胰腺癌患者中有12例表达,其阳性表达率(60%)明显高于慢性胰腺炎组及健康对照组(P均＜0.01).MUC4 mRNA阳性表达率有随胰腺癌临床分期增加而逐渐增高的趋势,在临床TNM Ⅲ～Ⅳ期中的阳性表达率(76.92%)明显高于Ⅰ～Ⅱ期(28.57%)(P＜0.05).结论胰腺癌患者外周血MUC4 mBNA的表达与临床分期具有高度相关性,可用于胰腺癌的早期诊断和鉴别诊断.     

肺癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA表达的检测及临床意义

目的探讨CK19 mRNA、CEA mRNA能否作为判断肺癌血源性微转移的参考指标.方法取67例肺癌患者及37例健康体检者外周血,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述两个指标的表达.结果肺癌组外周血中CK19 mRNA阳性率(57.6%)及CEA mRNA阳性率(52.2%)均显著高于健康对照组的2.7%和5.4%(均P＜0.01),两个指标联合检测能将对肺癌微转移诊断的灵敏度提高至76.1%;CK19 mRNA的表达与临床分期相关(P＜0.01),CEA mRNA的表达与组织类型相关(P＜0.05).结论 CK19 mRNA和CEAmRNA可作为判断肺癌血源性微转移的参考指标,两者联检可提高诊断价值.     

外周血差异显示编码3mRNA定量检测在前列腺癌患者诊断与治疗监测中的初步应用

目的探讨外周血差异显示编码3（DD3）mRNA定量检测在前列腺癌诊断和治疗监测中意义。方法用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）方法对35例未治疗前列腺癌、58例内分泌治疗后前列腺癌、59例良性前列腺增生患者和10例健康男性志愿者外周血DD3mRNA含量进行定量检测,并对DD3mRNA诊断及疗效监测价值进行评价。结果未治疗前列腺癌组外周血DD3mRNA含量明显高于治疗后前列腺癌组、前列腺增生组和健康男性志愿者组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。未治疗前列腺癌患者随着临床分期增加,外周血DD3mRNA含量也增高,差异具有统计学意义（P〈0．01）。当临界值为846拷贝／ml时,DD3mRNA曲线下面积为0．822（95％CI：0．725～0．919）,灵敏度、特异度分别为74．3％、89．8％。结论外周血DD3mRNA定量检测是前列腺癌诊断的良好指标,可作为内分泌治疗过程疗效监测的指标。     

乳腺癌患者外周血CEA mRNA的表达

目的　检测乳腺癌患者外周血CEAmRNA的表达 ,建立取材于外周血早期诊断乳腺癌转移的方法。方法　用巢式RT -PCR检测乳腺癌患者和乳腺良性肿瘤患者的外周血中CEAmRNA的表达。结果　 5 6例乳腺癌患者CEAmRNA有 2 1例表达 ,阳性率为 3 7.5 0 % ;42例乳腺良性疾病者CEAmRNA没有一例表达。两组有高度显著性差异 (χ2 =2 0 .0 4 ,P <0 .0 1 )　结论　巢式RT -PCR检测CEAmRNA阳性结果提示其具有形成转移的倾向 ,并可作为判断预后的辅助参考指标