逍遥散对慢性应激损伤大鼠促肾上腺皮质激素 释放激素表达的影响

目的:观察逍遥散对慢性应激损伤大鼠下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)表达的影响。方法:以逍遥散(5.265 g.kg-1)和糖皮质激素受体(GR)阻滞剂RU-38486(12.5 g.kg-1)为干预药物,应用慢性不可预知应激对大鼠进行为期3周的造模,在造模的同时给药。于第22天处死大鼠取材。采用原位杂交法测定各组大鼠下丘脑室旁核区CRHmRNA的表达。结果:逍遥散可显著下调慢性应激损伤大鼠下丘脑室旁核CRH阳性表达。结论:逍遥散可通过下调慢性应激损伤大鼠下丘脑室旁核区CRH mRNA表达而部分恢复慢性应激大鼠HPA轴负反馈功能。     

逍遥散抗慢性应激损伤研究进展

中药复方在治疗情志病方面具有简便廉验、副作用小的独特优势。逍遥散作为治疗郁证相关病证的经典代表名方,具有较高的研究和应用价值。近年开展的相关实验和临床研究为逍遥散广泛应用于治疗各科心身疾病提供了丰富的实验和理论依据。     

慢性束缚应激大鼠脑区BDNF的变化及逍遥散对其调节作用

目的:研究慢性束缚应激时大鼠海马与杏仁体BDNF的变化,以及逍遥散对其影响。方法:以慢性束缚应激塑造肝郁证候模型,运用免疫组织化学、Western blot分析及RT-PCR等方法,从蛋白和基因水平,定位与定量相结合,检测BDNF表达水平。结果:在慢性束缚应激条件下,BDNF的表达发生变化,海马和杏仁核往往结果相反。结论:可能是它们由不同的机制控制所引起,而逍遥散对其有一定程度的逆转作用。     

逍遥散与慢性应激焦虑海马JNK通路的关系

慢性应激所致焦虑症越来越受到广泛关注,然而,慢性应激焦虑的病因、发病机制尚不完全清楚。中医对于情志致病早有记载,逍遥散作为经典方剂,在临床上屡试不爽,多有学者对其进行实验研究和理论探讨。本文结合JNK信号转导通路对神经元凋亡的调控,提出三者之间可能存在的关系,为进一步的研究提供理论支持。     

逍遥散对慢性应激复合阿尔茨海默病体外损伤模型的干预作用

目的建立慢性应激复合阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）体外损伤模型,并探究逍遥散含药脑 脊液（XYS）及空白脑脊液（Cerebro-Spinal Fluid,CSF）对该模型的干预作用。方法以叠氮化钠（NaN3）和皮质 酮对原代海马神经元进行药物干预建立模型,通过CCK8 实验筛选干预条件,利用线粒体膜电位和神经元存活 率评价模型特征。将神经元分为正常组,复合模型组,5%、10%、20%逍遥散含药脑脊液组,5%、10%、20% 空白脑脊液组,米非司酮组,并进行相应干预。以MAP-2 荧光强度、APP 和GR 蛋白表达为指标评价逍遥散 对该模型的干预作用。结果确定模型建立方法为先以30 mmol·L-1 的叠氮化钠干预12 h,再更换为 100 μmol·L-1 的皮质酮干预24 h。该模型特征符合预期,建立的方法稳定可靠。与正常组比较,复合模型组神 经元存活率、光密度比值、GR 表达均明显降低（P < 0.01）,APP 表达明显增加（P < 0.01）。与复合模型组比 较,5%空白脑脊液组和5%逍遥散含药脑脊液组APP 蛋白表达降低（P < 0.05,P < 0.01）;10%空白脑脊液组 神经元存活率增加且APP 蛋白表达降低（P < 0.05）;20%空白脑脊液组光密度比值增加（P < 0.05）,神经元存 活率增加且APP 蛋白表达降低（P < 0.01）;10%、20%逍遥散含药脑脊液组和米非司酮组神经元存活率及光密 度比值均明显增加（P < 0.01）,APP 蛋白表达明显降低（P < 0.01）;各用药组的GR 蛋白表达均明显增加（P < 0.01）。与相应浓度的空白脑脊液组比较,5%逍遥散含药脑脊液组APP 蛋白表达降低且GR 蛋白表达增加（P < 0.05）;10%、20%逍遥散含药脑脊液组神经元存活率增加（P < 0.05,P < 0.01）,光密度比值增加（P < 0.01）, APP 蛋白表达降低（P < 0.05）且GR 蛋白表达明显增加（P < 0.01）。结论逍遥散可有效缓解慢性应激复合阿尔 茨海默病体外模型的海马神经元细胞损伤,减少APP 蛋白表达,增加GR 蛋白表达,且其药理作用具有一定的 剂量依赖性,浓度为20%的高剂量逍遥散含药脑脊液组药效较佳。     

逍遥散对慢性应激损伤模型大鼠海马区Cacnb4基因表达的影响

目的:本研究用逍遥散干预慢性应激损伤模型大鼠,观察其海马区Cacnb4基因的表达情况。方法:以60只Wistar大鼠随机分为空白对照组、慢性应激模型组、逍遥散治疗组3组,每组20只。造模方法采用Cart多相性慢性应激大鼠模型并加以改进,逍遥散治疗组在造模同时给予逍遥散2m L/(只·d),连续造模21 d,于第22天处死大鼠并取材。采用RT-PCR一步法及免疫组化检测方法测定各组大鼠海马区域Cacnb4基因及其蛋白表达情况。结果:慢性应激模型组大鼠海马Cacnb4mRNA及其相应蛋白表达均显著上调,中药复方逍遥散可从基因及蛋白水平同时纠正这种上调的表达变化。结论:电压依赖型钙离子通道β4辅助亚基的表达变化参与了慢性应激损伤过程,逍遥散对慢性应激所致神经细胞损伤可能通过调节这一基因发挥保护性作用。     

逍遥散治疗应激性疾病研究概述

通过对逍遥散临床应用和实验研究的总结发现,逍遥散在治疗应激性疾病方面有较好疗效,应激性刺激作用可以导致头痛、不寐、高血压、焦虑、抑郁、帕金森吞咽障碍等各种疾病,只要辨证准确,逍遥散对这类疾病都有很好的临床疗效。逍遥散对大脑内SP物质、β-内啡肽、色甘酸、5-羟色胺、脑源性神经营养因子、多巴胺、去甲肾上腺素、促肾上腺皮质激素释放激素、精氨酸血管加压素等含量均有调节作用,而且具备调节下丘脑-垂体-肾上腺轴和肾素-血管紧张素-醛固酮系统的作用,随着研究人员对逍遥散的深入研究,其治疗疾病的范围还将扩展。     

慢性应激损伤对大鼠海马GABRD基因表达的影响及逍遥散干预机制的研究

目的:用逍遥散干预慢性应激损伤模型大鼠,观察其海马区GABRD基因的表达情况。方法:以45只Wistar大鼠随机分为空白对照组、慢性应激模型组、逍遥散治疗组3组,每组15只。造模方法采用Cart多相慢性应激大鼠模型并加以改进,逍遥散治疗组在造模同时给予逍遥散2 mL/只·d,连续造模21 d,于第22天处死大鼠并取材。运用Agilent表达谱芯片筛选各组差异基因,并选取GABRD基因,采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学染色法对各组大鼠海马区域GABRD基因mRNA及其蛋白表达情况加以验证。结果:Agilent表达谱芯片结果显示慢性应激模型组大鼠海马GABRD下调,逍遥散干预后有上调趋势,但无统计学意义。RT-PCR及免疫组化法验证结果显示:慢性应激模型组大鼠海马GABRD mRNA及其相应蛋白表达均显著下调,中药复方逍遥散可从蛋白水平纠正这种下调的表达变化。结论:γ-氨基丁酸A受体δ亚型表达变化参与了慢性应激损伤的过程,逍遥散可能通过调控这一基因的表达而发挥对慢性应激损伤所致一系列神经、精神紊乱症状的保护性调节作用。     

慢性应激肝郁脾虚模型大鼠行为学变化及逍遥散调节作用

目的:研究分析慢性应激肝郁脾虚模型大鼠行为学变化及逍遥散的调节作用。方法:采用捆绑束缚方式建立大鼠模型,60只大鼠随机平均分为3组,正常对照组、模型组、模型+逍遥散组。观察各组大鼠一般状态、体质量、摄食量和旷场、高架十字实验行为学指标变化。结果:模型组大鼠在慢性束缚应激初期呈积极抵抗状态,继而抑郁,甚或呈绝望状态;旷场实验模型大鼠5 min内移动总路程、中央区移动距离均减少;高架十字试验5 min内模型组大鼠在开放臂内停留时间和进入次数较正常组减少,进入封闭臂次数减少而停留时间增加。说明慢性应激可引起动物探究性自主活动能力下降,随着应激时间的延长,动物的行为表现逐渐出现郁闷、淡漠、抑郁、焦虑状态,同时伴随着大鼠体质量和摄食量较正常组明显下降;逍遥散则对模型大鼠的上述改变具有一定的调节作用。结论:逍遥散可在一定程度上改善慢性应激肝郁脾虚模型大鼠的抑郁或焦虑状态,调节其体质量、摄食量及行为学的异常变化。     

逍遥散对慢性应激小鼠巨噬细胞功能的影响及机制

目的:研究逍遥散对慢性应激小鼠巨噬细胞杀伤活性的影响及机制。方法:采用束缚手段制备慢性应激动物模型,分别以不同剂量逍遥散灌胃干预,给药10 d后检测指标,采用MTT法检测巨噬细胞杀伤活性,采用Griess试剂盒检测细胞内NO水平,采用ELISA试剂盒检测血清中皮质醇(Cor T)和ACTH水平。结果:与空白组相比,应激模型组小鼠巨噬细胞杀伤活性、NO含量均显著降低(P0.01),并且血清Cor T、ACTH显著升高(P0.01),与应激模型组相比,逍遥散中剂量和高剂量组巨噬细胞杀伤活性及细胞内NO含量明显或显著升高(P0.05或P0.01),低、中、高剂量逍遥散对应激小鼠血清中Cor T均有明显或显著抑制作用(P0.05或P0.01),中、高剂量逍遥散对ACTH均有明显或显著抑制作用(P0.05或P0.01)。结论:逍遥散可提高慢性应激小鼠巨噬细胞杀伤活性,这除了与其直接的免疫调节作用有关外,也与其对神经递质的调节作用有关。     

逍遥散对慢性应激下AD复合模型大鼠行为学和海马组织的干预作用北大核心CSCD

目的研究慢性应激对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的影响,并探讨逍遥散对慢性应激下AD模型的干预作用。方法将大鼠随机分组,除空白组(K)外,假手术组(J)海马区注射PBS溶液,AD组在海马区注射NaN_3复制AD模型,慢性应激组(M)采用多种慢性应激刺激制备模型,而复合模型组(F)、逍遥散组(XYS)则采用慢性刺激加海马区注射NaN_3复制慢性应激下AD模型。观测行为学指标,检测血清皮质酮含量并观察各组海马组织CA1区形态学变化。结果与K组比较,M、F组自由活动受到显著影响(P<0.01),J组和AD组无统计学差异;与F组比较,逍遥散可显著改善复合模型的记忆损伤与自由活动情况(P<0.01,P<0.05)。与K组比较,F、M和AD组皮质酮含量显著升高(P<0.01);与F组比较,XYS组皮质酮含量显著降低(P<0.01)。HE染色结果显示,与K组比较,AD、M与F组的海马组织均出现了病理变化;与F组比较,逍遥散可显著改善其病理变化。结论慢性应激与NaN_3均可损伤大鼠的记忆功能,并且慢性应激能显著加重AD的记忆损伤,而逍遥散可能通过降低皮质酮含量与改善海马组织的损伤来缓解慢性应激下AD的记忆障碍。     

逍遥散对慢性应激损伤大鼠NR受体亚型表达的影响

目的:本研究用逍遥散和糖皮质激素受体(GR)阻滞剂干预慢性应激损伤大鼠,观察其海马区NR受体亚型表达情况。方法:以逍遥散(5.265g/kg)和GR受体阻滞剂RU-38486(12.5g/kg)为干预药物,应用慢性不可预知应激对大鼠进行为期3周的造模,在造模的同时给予实验药物,3周后停止刺激,于第22天处死大鼠取材。采用荧光免疫组织化学法,测定各组大鼠海马区NR表达。结果:GR受体阻滞剂RU-38486与中药复方逍遥散可显著下调慢性应激损伤大鼠海马区NR阳性表达。结论:逍遥散可以通过促进慢性应激损伤大鼠海马区NR表达下调,从而达到部分恢复慢性应激大鼠下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴负反馈功能的作用,起到缓解诸应激症状的疗效。     

逍遥散调节慢性束缚应激大鼠代谢组学的实验研究

目的 通过检测慢性束缚应激大鼠血浆和逍遥散干预引起的大鼠内源性代谢物的变化,确定与之相关的“代谢组学特征”的小分子标志化合物,探讨慢性束缚应激大鼠代谢网路改变和逍遥散作用机制。方法 选用雄性SD大鼠36只,随机分为3组。即：正常对照组、模型组及逍遥散治疗组,其中每组又分为7、21天组,每组6只。以慢性束缚方法制作应激大鼠模型,每天束缚3 h。自造模第1天开始,逍遥散治疗组每日在束缚前1 h灌服逍遥散,给药量为3.854 g/kg,灌胃容积为1 mL/100 g体重。正常对照组、模型组灌服等体积的蒸馏水。分别于第8、22天采集血浆后取上清300 μL,在27 ℃的条件下,在Varian UNITYINOVA 600MHz 超导傅立叶变换核磁共振波谱仪上分别调用弛豫编辑脉冲序列(CPMG)、扩散编辑脉冲序列 (LED),采用预饱和方式抑制水峰,自由感应衰减（FID）信号经过32k点傅立叶变换得到一维NMR谱图。以TSP为化学位移参考峰的位置,调用VNMR软件中的程序将1H谱中从4.5～0.5 ppm (CPMG) 以及6.0～0 ppm (LED)范围内的谱峰,按每段为0.04 ppm,进行分段积分。将积分数据归一化之后,将积分值进行中心化和定标,用SIMCA-P 10.0软件包进行主成分分析（PCA）,必要时进行判别分析（PLS-DA）。结果 (1)正常组与模型组之间代谢产物有明显的不同,两组比较,存在代谢网路的改变。模型组与治疗组各对照组间基本能分开,不同组别之间代谢产物存在差异、代谢网路有所不同,给予逍遥散后可以干预代谢物或代谢途径而致代谢终产物的改变。(2)慢性束缚应急大鼠血清中代谢产物乳酸（1.4、4.16）、胆碱（3.24）、N-乙酰半乳糖胺（NAC）、饱和脂肪酸（1-3）升高,而不饱和脂肪酸（1.99、4.5）、血糖（3.4）、HDL（0.83）等化合物含量降低。逍遥散可使乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸下降,血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物含量升高,有明显的代谢终产物的调节效应。结论 慢性束缚应激大鼠代谢表型为乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸含量上升,血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物含量降低。其代谢产物标志物可能是乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸、血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物。慢性束缚应激发生的代谢终产物的改变以脂类物质更明显。逍遥散对代谢终产物有明显的调节效应,但主要干扰何种代谢物或代谢途径而改变代谢终产物还需进一步研究确认。     

慢性束缚应激大鼠海马BDNF TrkB NT3的变化及逍遥散对其影响

目的:观察慢性束缚应激时大鼠海马BDNF、TrkB、NT3的变化及逍遥散对其影响.方法:用束缚的方法建立了应激模型,用心脏灌流的方法固定海马,切片后用免疫组织化学结合图像分析的方法观察了海马CA1区BDNF、TrkB、NT3变化情况.结果:发现海马中BDNF和NT3的阳性细胞数和积分光密度下降,TrkB阳性细胞数和积分光密度明显上升.逍遥散能不同程度的抑制海马中BDNF和NT3阳性细胞数和积分光密度的下降以及TrkB阳性细胞数和积分光密度的上升.结论:BDNF、TrkB、NT3在慢性应激中发挥了重要作用,逍遥散可能正是通过它们的变化,作用于HPA轴引起机体免疫功能变化的.     

慢性束缚应激大鼠海马BDNF TrkB NT3的变化及逍遥散对其影响

目的：观察慢性束缚应激时大鼠海马BDNF、TrkB、NT，的变化及逍遥散对其影响。方法：用束缚的方法建立了应激模型。用心脏灌流的方法固定海马，切片后用免疫组织化学结合图像分析的方法观察了海马CA1区BDNF、TrkB、NT，变化情况。结果：发现海马中BDNF和NT3的阳性细胞数和积分光密度下降，TrkB阳性细胞数和积分光密度明显上升。逍遥散能不同程度的抑制海马中BDNF和NR阳性细胞数和积分光密度的下降以及TrkB阳性细胞数和积分光密度的上升。结论：BDNF、TrkB、NT3在慢性应激中发挥了重要作用，逍遥散可能正是通过它们的变化，作用于HPA轴引起机体免疫功能变化的。     

逍遥散对慢性应激大鼠海马组织HSPA1A基因表达的影响

目的:探讨并比较中药复方逍遥散和抗抑郁药百忧解(盐酸氟西汀)对慢性应激大鼠海马组织中HSPA1A基因表达的干预作用.方法:将SPF级Wistar大鼠120只随机分为空白组、模型组、逍遥散组、百忧解组,除空白组外,采用足底电击、冰水游泳、禁食24h、禁水24h、束缚4h等应激源对大鼠进行慢性应激刺激.空白组和模型组每只大...     

针刺预处理对脑缺血再灌注大鼠中枢杏仁核CRF样蛋白表达的影响

目的:采用免疫组织化学技术,探讨肾俞、百会穴针刺预处理对脑缺血再灌注后不同时间段大鼠中枢杏仁核CRF的表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠130只,随机分成5组;以双侧肾俞、百会穴电刺激为针刺预处理方式,以颈动脉引流法行全脑缺血再灌注造模;脑组织恒冷箱连续冠状切片,免疫细胞化学ABC反应,图像分析系统行杏仁中央核群促肾上腺皮质激素释放因子样阳性免疫面积、平均吸光度检测。结果:各组CRF表达在不同时间段出现显著性变化。术后/针后6h,与空白对照比较,各组CRF表达显著升高(P<0.05);术后/针后24h,除空白对照组外各组CRF表达均出现明显回落,组间仍存在显著差异(P<0.05);术后/针后72h,脑缺血再灌注组及针刺预处理脑缺血再灌组CRF表达仍高于正常水平且两组间差异明显(P<0.05),而针刺预处理对照组及假手术对照组均已回落至正常水平(P>0.05)。结论:脑缺血再灌注损伤可导致中枢杏仁核CRF样蛋白的强烈表达;肾俞、百会穴针刺预处理对脑缺血再灌注所致的中枢杏仁核CRF的异常表达具有明显的调控作用。     

逍遥散调节慢性应激肝郁脾虚模型大鼠下丘脑弓状核ob-R、α-MSH变化机制

目的:研究中药复方逍遥散(《太平惠民和剂局方》)疏肝解郁、健脾以调节食欲的作用机制。方法:以每天持续3 h慢性束缚应激方法制备动物模型。SD健康雄性大鼠随机分为正常组、7 d模型组、21 d模型组和逍遥散组4组,正常组予常规饲养,模型组和逍遥散组每天选择随机时间点进行束缚应激,7 d模型组束缚应激7 d,21 d模型组束缚应激21 d,逍遥散组在连续束缚应激21 d同时予逍遥散灌胃。观测各组大鼠体重、摄食量、行为学、血清D-木糖含量变化;免疫荧光双染、RT-q PCR方法观测下丘脑ARC中瘦素受体(Leptin Receptor,ob-R)、α-促黑素细胞激素(α-melanocyte Stimulating Hormone,α-MSH)基因与蛋白表达水平。结果:与正常组比较,束缚应激21 d模型大鼠体重、摄食量和血清D-木糖含量明显降低,行为学实验表明模型大鼠自主活动能力下降、对新异环境探究行为明显减少,而逍遥散则具有相应的调节作用。综合表明,每天3 h连续21 d捆绑束缚可制备慢性应激肝郁脾虚样动物模型,慢性束缚应激大鼠下丘脑弓状核(Arcuate Nucleus,ARC)中ob-R、α-MSH表达水平增加,逍遥散可下调其表达。结论:逍遥散调节下丘脑ARC中ob-R和α-MSH表达变化,可作为其疏肝健脾,调节机体食欲和能量代谢影响脾胃功能的作用靶点之一。     

慢性束缚应激大鼠海马CA1区L-ENK的变化及逍遥散的调节作用

目的：研究慢性束缚应激时大鼠海马CA1区L-ENK的变化以及逍遥散的调节作用.方法：用特制束缚架连续束缚7d与21d,每天3h的方法制作大鼠束缚应激模型,用免疫组织化学方法结合图像分析检测中枢（海马CA1区、齿状回、大脑皮层）L-ENK的变化.结果：大鼠海马CA1区L-ENK免疫反应阳性细胞的平均光密度、积分光密度、平均总面积、面密度和数密度等在造模7d时都有不同程度的增强,到造模21d时大鼠海马CA1区L-ENK有极显著性增强;7d与21d两模型组、四君子汤组及金匮肾气丸组大鼠CA1区L-ENK免疫反应积分光密度与逍遥散组比较显著增强,而逍遥散组和正常对照组相比则没有明显差异;可见逍遥散组对大鼠海马CA1区L-ENK的积分光密度有显著的影响.结论：逍遥散、四君子汤和金匮肾气丸对慢性束缚应激时海马CA1区有不同程度的调节作用,而以逍遥散作用为优.     

逍遥散对慢性束缚应激所致肝郁脾虚证大鼠饥饿素的影响

目的观察逍遥散对慢性束缚应激所致肝郁脾虚证大鼠饥饿素(Ghrelin)的影响,探讨逍遥散的作用机制。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、逍遥散组,每组8只;正常组不进行任何处理,模型组和逍遥散组通过连续21 d慢性束缚应激建立肝郁脾虚证候模型,逍遥散组于每天上午束缚前灌服逍遥散混悬液3.854 g/kg,正常组和模型组灌服生理盐水2 m L。比较各组大鼠的一般情况、饮水量及摄食量、体质量变化情况,用ELISA方法测定大鼠血浆及胃底部组织中Ghrelin的浓度。结果束缚21 d后,模型组大鼠体质量、摄食量、饮水量较正常组降低,增加减缓。与模型组相比,逍遥散组体质量、摄食量、饮水量均增加,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。模型组的血浆及胃底部Ghrelin含量比正常组低(P0.05),而逍遥散组的胃底部Ghrelin含量比模型组高(P0.05),与正常组相近;模型组的血浆Ghrelin含量低于逍遥散组(P0.01)。结论肝郁脾虚证模型大鼠血浆及胃底部组织中Ghrelin含量下降,逍遥散能提高Ghrelin水平,对肝郁脾虚证有明显调节作用,对Ghrelin的调节作用可能是逍遥散治疗肝郁脾虚证的可能机制之一。