Box-Behnken设计-效应面法优化延胡索乙素聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒处方和体外释药行为研究

目的 Box-Behnken设计-效应面法（Box-Behnken design-response surface method,BBD-RSM）优化延胡索乙素（THP）聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA]纳米粒（THP-PLGA-NPs）处方,并进行体外评价。方法 纳米沉淀法制备THP-PLGA-NPs,以包封率、载药量、多分散系数（polydispersity index,PDI）和粒径大小为评价指标,单因素结合BBD-RSM筛选最优处方,采用甘露醇作为冻干保护剂制备成冻干粉,将最优处方进行表征及体外释放实验。结果 最佳处方为PLGA用量为491.8 mg、油水体积比1：5.2、乳化剂质量分数为1.12%。THP-PLGA-NPS包封率为（185.07±1.06）%,载药量为（4.73±0.21）%,粒径为（181.32±7.14）nm,分别与模型预测值接近。体外释药具有明显的缓释特征,释药过程符合Higuchi模型：M_t/M_∞=0.112 4 t^1/2+0.078 0,r=0.987 9。结论 Box-Behnken实验设计可用于THP-PLGA-NPS处方的筛选,且优化后的纳米粒具有缓释作用。     

氟尿嘧啶中空微囊制备工艺和释药行为的研究

 目的 研究一种制备壳状中空微囊的新方法,并考察致孔剂对微囊释药行为的影响。方法 在囊材聚乙烯醇(PVA中加入致孔剂聚乙二醇(PEG,采用悬浮界面交联法制备氟尿嘧啶(5-flurouracil,5-FU壳状中空微囊,通过考察其粒径、包封率、载药量优化处方工艺。通过考察体外释药性能,研究致孔剂对微囊释药行为的影响。结果 该新工艺制备的微囊为壳状中空结构,其平均粒径为22 μm,载药量、包封率分别为15.6%、84.8%。加入致孔剂的中空微囊,24 h体外累积释药量达93.2%。结论 悬浮界面交联法能够制备具有壳状结构的PVA中空微囊,可在壳膜层中加入致孔剂,增加物质传输能力。此法制备的微囊具有很好的缓释效果。     

正交设计喷雾干燥工艺制备麦冬皂苷肠溶微球

目的：探索喷雾干燥工艺制备麦冬皂苷肠溶微球的最优工艺参数。方法：以外观形态、包封率、收率等为指标,采用正交设计对喷雾干燥工艺参数进行优选。结果：最优工艺参数：进风温度90 ℃,加料速度10 mL·min^-1,雾化器转速50 r·min^-1。结论：麦冬皂苷肠溶微球质量符合预期要求；影响微球成型的主要因素为进风温度；喷雾干燥技术制备中药微球有利于工业化生产。     

硫酸-紫外法与苯酚-硫酸法测定千两茶中总多糖的比较

目的： 比较苯酚-硫酸法与硫酸-紫外法在测定千两茶多糖含量上的差异。 方法： 千两茶粉经水提醇沉,Sevage法除蛋白后,采用苯酚-硫酸法和硫酸-紫外法测定茶多糖含量。 结果： 苯酚-硫酸法标准曲线方程为Y=4.755 0X-0.029 5（R²=0.990 4）,硫酸-紫外法标准曲线方程为Y=4.770 0X-0.065 1（R²=0.993 1）,均在0.02~0.1 g·L^-1有良好的线性关系。所测茶多糖质量分数分别为2.00%,3.21%,其差异有统计学意义。 结论： 硫酸-紫外法作为一种多糖检测新手段,可简便测定多糖含量。     

苦参碱白蛋白亚微粒的制备和体外性质研究

 目的制备肝靶向性苦参碱白蛋白亚微粒,并对其理化性质和体外释药特性进行考察。方法采用复凝聚法制备苦参碱白蛋白亚微粒,以亚微粒包封率为考察指标,均匀设计法优化处方工艺,对优化工艺产品采用透射电镜、激光粒度分布与Zeta电位分析仪、差示扫描量热法和X-射线衍射法分析理化性质,超滤离心法考察其体外释药动力学特征。结果分析结果证明,亚微粒已经形成,其外观形态均匀圆整,平均包封率为(84.25±0.95)%,平均载药量为(6.94±0.05)%,平均粒径为(312.6±12.5)nm。体外释药具有双相动力学特征,方程:100-Q=0.476e^-0.351t+0.3253e^-0.0322t,r_α=0.9985,r_β=0.9987。结论实验建立的制备工艺简单可行,理化性质稳定,可用于肝靶向苦参碱白蛋白亚微粒的制备。     

骨炎一号微球的制备及其体外释药性能的研究

目的:制备骨炎一号微球,并考察其体外释药性能。方法:采用复乳-溶剂挥发法制备骨炎一号微球,用电子扫描显微镜观察微球表面形态,并测定微球的平均粒径、粒度分布、载药量、包封率,采用小杯法测定骨炎一号微球的体外释药情况,并计算其累积释药量。结果:制得的骨炎一号聚乳酸微球的形态圆整,微球的平均粒径为8.59μm,粒径在1-12μm的占总数的90%以上,载药量为48.39%,包封率为19.32%。骨炎一号微球在108h的累积释药量约为78.4%,t_1/2为40.8h,Higuchi方程为Y=0.1326 X-0.4782,r=0.9951。结论:得到了比较满意的骨炎一号微球制备工艺,且其体外释药性能符合长效制剂特征。     

星点设计-效应面优化去甲斑蝥素壳聚糖肝动脉栓塞微球的制备

 目的 应用星点设计-效应面优化去甲斑蝥素壳聚糖肝动脉栓塞微球的制备工艺,以提高微球性质的可预测性,并对微球的部分特性进行表征以及对微球的体外释药行为进行考察。方法 以微球收率、载药量、包封率、平均粒径和跨距为指标,计算各指标的归一值,并利用几何均数得出总评归一值 (overall desirability, OD),去甲斑蝥素和壳聚糖的重量百分比 (X1)、油水比例 (X2) 、壳聚糖浓度 (X3) 3个主要因素的各水平进行多元线性回归和二项式拟合,并进行模型预测分析及方法验证。结果 OD值的二项式拟合方程较好 (r2>0.92,P<0.05),以最优处方制备的微球平均粒径为123 μm,载药量为10.09%。预测值与实测值偏差均较小。结论 星点设计-效应面能更好的优化微球的处方工艺,增加模型的实用性。     

SPG膜乳化法制备丹参酮ⅡA聚乳酸-羟基乙酸微球的工艺优化

目的：优选SPG膜乳化法制备丹参酮Ⅱ_A-聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）微球的工艺条件。方法：采用SPG膜乳化法制备丹参酮Ⅱ_A-PLGA微球。在单因素试验基础上,以载药量、包封率及多分散系数（PDI）的综合评分为因变量,通过响应面法考察PLGA质量浓度、流动相流速、聚乙烯醇（PVA）质量浓度及油水相体积比等自变量对处方工艺的影响。结果：最佳处方工艺为PLGA质量浓度44.29 g·L^-1,流动相流速825.68 r·min^-1,PVA质量浓度2.5 g·L^-1,油水相体积比1：7.86;制备的丹参酮Ⅱ_A-PLGA微球表面光滑圆整且粒径均一,平均粒径2.338 μm,PDI指数0.328,载药量1.20%,包封率89.57%,与预测值相对误差较小。结论：采用SPG膜乳化法制备微球的工艺简单、方便,可用于提高丹参酮Ⅱ_A的生物利用度。     

TPGS表面修饰岩白菜素固体脂质纳米粒的制备与口服生物利用度研究

目的 制备D-α-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯（TPGS）修饰岩白菜素固体脂质纳米粒（TPGS surface-modified bergenin solid lipid nanoparticles,TPGS-Ber-SLN）,并考察其体外释药和口服药动学行为。方法 采用高压均质法制备TPGS-Ber-SLN。以包封率、载药量和粒径为考察指标,通过单因素考察结合Box-Behnken设计-效应面法（Box Behnken design- response surface methodology,BBD-RSM）优化TPGS-Ber-SLN处方,并制备成冻干粉末。X射线粉末衍射法（X-ray powder diffraction,XRPD）和差式扫描量热法（differential scanning calorimetry,DSC）分析岩白菜素在TPGS-Ber-SLN冻干粉末中的存在状态,透析袋法考察TPGS-Ber-SLN在不同介质中释药情况。以岩白菜素原料药为参考,比较TPGS-Ber-SLN在体内药动学行为及口服生物利用度。结果 TPGS-Ber-SLN最佳处方工艺：岩白菜素用量为40 mg,单硬脂酸甘油酯用量525 mg,泊洛沙姆188质量浓度为17.5 mg/mL,TPGS质量浓度为0.2 mg/mL,均质次数为9次。TPGS-Ber-SLN的平均包封率、载药量、粒径及ζ电位分别为（83.16±1.09）%、（4.97±0.13）%、（229.46±19.07）nm和（-15.67±0.23）mV,体外释药过程符合Weibull模型。口服药动学结果显示,TPGS-Ber-SLN的t_max延长至（2.07±0.43）h,t_1/2延长至（4.21±0.78）h,C_max和生物利用度分别提高至3.91倍和5.34倍。结论 TPGS-Ber-SLN显著改变了岩白菜素的药动学行为,增加了口服吸收生物利用度。     

溴化双十二烷基二甲基铵修饰的载汉防己甲素聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒制备及体外评价

目的 制备溴化双十二烷基二甲基铵(DMAB)修饰的载汉防己甲素(Tet)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒(DMAB-Tet-PLGA-NPs),考察其制备的影响因素,优化制备工艺,并对其理化性质、细胞毒性及细胞摄取进行研究。方法 采用乳化分散溶剂挥发法制备DMAB-Tet-PLGA-NPs,运用均匀设计试验优化制备工艺,通过包封率、载药量、累积释药量等指标考察其载药特性;采用MTT比色法考察DMAB-Tet-PLGA-NPs对人肺腺癌细胞株A549的细胞毒性;采用定量定性法评价DMAB-Tet-PLGA-NPs细胞摄取率。结果 制备的DMAB-Tet-PLGA-NPs平均粒径为(205.40±2.66)nm,表面带正电,呈规则的球形及椭圆形。药物包封率和载药量分别为(50.780±3.253)%和(2.130±0.035)%。体外释放实验显示DMAB-Tet-PLGA-NPs缓慢释药,48 h累积释药量64.56%。MTT实验表明DMAB-Tet-PLGA-NPs细胞毒性呈剂量及时间依赖性。定性定量细胞摄取实验证实DMAB-Tet-PLGA-NPs能较好地被细胞摄取。结论 DMAB-Tet-PLGA-NPs粒径大小均一,包封率高,体外释药表现出较好的缓释效果,易被细胞摄取,对A549细胞的活性有明显的抑制作用。     

补心软脉颗粒的提取纯化工艺优选

目的:优选补心软脉颗粒的提取纯化工艺。方法:以红景天苷转移率和浸膏得率为综合评价指标,选取加水量、提取时间和提取次数为考察因素,采用正交试验法优选补心软脉颗粒中红景天等5味药材饮片的水提取工艺;以总黄酮醇苷转移率为指标,采用单因素试验考察银杏叶的醇提工艺;以红景天苷的转移率和除杂率为指标,采用单因素试验考察补心软脉颗粒水提液的醇沉工艺。结果:优选的水提工艺为红景天等5味加8倍量水提取3次,每次0.5 h;优选的醇提工艺为银杏叶加10倍量70%乙醇提取2次,每次1 h;优选的醇沉工艺为水提液浓缩至相对密度1.10～1.15,缓缓加入95%乙醇至含醇量70%,边加边搅拌,冷处静置24 h。结论:该优选的提取纯化工艺简便易行,为补心软脉颗粒的大生产提供实验依据。     

冬虫夏草西洋参复合物的遗传毒性研究

目的通过遗传毒性研究,评价冬虫夏草西洋参复合物的毒理学安全性。方法按照Ames实验、小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠精子畸形实验方法进行研究,并对实验结果进行判定。结果冬虫夏草西洋参复合物对雌、雄小鼠的急性毒性最大耐受剂量均大于12.0 g/kg;Ames实验中5个剂量组回变菌落数均未超过自发回变组的2倍,且无剂量-反应关系;复合物3个剂量组骨髓细胞微核实验中雌鼠微核率分别为0.32%、0.36%、0.40%,雄鼠微核率分别为0.30%、0.32%、0.40%;小鼠精子畸形实验中精子畸形率分别为2.4%、2.3%、2.3%,微核率和精子畸形率与对照组比较均无显著性增加(P0.05)。结论冬虫夏草西洋参复合物对小鼠无毒,且未显示遗传毒性。     

黑面神枝叶中表儿茶素的含量测定及水提工艺优化

目的：测定黑面神枝叶中表儿茶素含量并优化水提取工艺条件。方法：采用HPLC法测定黑面神枝叶中表儿茶素含量,并运用正交试验考察浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数对表儿茶素含量的影响。结果：表儿茶素在0.006 6~0.264 0 g·L^-1线性关系良好,回归方程Y=59 283X+53.986,r=0.999 9,平均回收率达98.2%,RSD 1.03%。水提最佳工艺条件：药材加20倍量水浸泡45 min,80 ℃温浸提取2次,每次1 h。结论：HPLC法测定黑面神枝叶中表儿茶素含量操作简便,专属性强,经正交试验优化后含量有所提高,为黑面神的进一步开发奠定基础。     

多指标正交试验优选仙灵骨葆胶囊中丹参、补骨脂提取工艺

目的:优选仙灵骨葆胶囊中丹参、补骨脂提取工艺.方法:采用正交试验的方法,以丹参中丹酚酸B、丹参酮Ⅱ_A、补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素的含量为指标,多指标综合评分法处理数据,优化提取工艺中乙醇浓度、溶剂倍数、提取时间、提取次数4个因素.结果:丹参、补骨脂最佳合提工艺为加入8倍量70%乙醇,提取2次,每次1.5 h.结论:优选的丹参、补骨脂提取工艺稳定可行.     

正交试验优选地龙水提取工艺

目的:优选地龙的水提取工艺条件。方法:以次黄嘌呤含量为指标,HPLC测定指标成分含量,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察加水量、提取次数、提取时间对次黄嘌呤含量的影响,优选地龙的水提取工艺。结果:各因素对水提取工艺的影响顺序为提取次数>提取时间>加水量;最佳水提取工艺为地龙药材加10倍量水回流提取1次,提取时间1 h。结论:优选的水提取工艺稳定可行。     

天麻乙酸乙酯提取物对行为绝望小鼠的抗抑郁作用

目的:研究天麻乙酸乙酯提取物(EtoAc extracts of Gastrodia elata,EEG)的抗抑郁作用.方法:雄性小鼠随机分为空白对照组,氟西汀组(20 mg·kg-1),氯丙咪嗪组(20 mg·kg-1),EEG低、高剂量组(0.063,0.126 g·kg-1),每组连续ig给药7d后,观察小鼠在悬尾实验(tail suspension test,TST),强迫游泳实验(forced swimming test,FST)中不动时间的变化情况以及小鼠在开场实验中自主活动的变化情况.结果:EEG高剂量(0.126 g·kg-1)能明显缩短小鼠悬尾不动时间,EEG高、低剂量(0.126,0.063 g·kg-1)均能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间.EEG高、低剂量对小鼠在开场实验中的自主活动次数没有明显影响.结论:天麻乙酸乙酯提取物对“行为绝望”小鼠有抗抑郁作用.     

金铁锁种子质量检验方法与分级标准

目的 制定金铁锁种子质量检验方法,建立金铁锁种子分级标准。方法 参照《农作物种子检验规程》（GB/T 3543.3—1995）,建立金铁锁种子真实性、净度、千粒质量、含水量、生活力、发芽率检验方法,通过K-均值聚类分析36个不同产地金铁锁种子,制定质量分级标准。结果 金铁锁种子净度分析样品应不少于10 g,送检样品应不少于100 g;种子真实性鉴定应采用外观形态观察法及外观形态测量法;种子质量测定应采用千粒法;种子含水量测定采用（130±2）℃恒温烘干4 h;生活力测定采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法,最佳条件为30 ℃下0.01% TTC染色6 h;发芽率测定应采用滤纸发芽床,经2.5% NaClO浸泡10 min后,于20 ℃恒温光照培养,发芽计数时间为4~16 d。不同来源合格金铁锁种子可分为3个等级,以发芽率和生活力为质量分级标准的主要指标、千粒质量和净度为参考指标。结论 本研究制定的金铁锁种子质量分级标准和等级评定方法科学、可行,可为金铁锁种子质量评价提供参考。     

超声辅助碱溶酸沉法提取铁苋菜总黄酮的工艺优选

目的: 优选超声辅助碱溶酸沉法提取铁苋菜总黄酮的工艺条件。 方法: 以芦丁为对照成分,采用紫外-可见分光光度法测定铁苋菜总黄酮含量。以总黄酮得率为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察料液比、碱性提取液pH、温度、酸沉pH和时间对铁苋菜总黄酮提取工艺的影响。 结果: 铁苋菜总黄酮最佳提取工艺为料液比1:20,碱提液pH 11,温度60 ℃,酸沉pH 2.5,超声时间90 min,提取数1次;铁苋菜总黄酮提取量24.11 mg·g^-1,提取率达87.76%。 结论: 优选的提取工艺稳定可行、提取率高,为铁苋菜资源的开发利用提供实验依据。     

正交试验法优选淫羊藿-川芎药对的配伍提取工艺

该研究采用L₉(3⁴)正交试验法,考察溶剂倍数、提取时间、提取次数、醇浓度等因素的影响,以淫羊藿苷,阿魏酸,朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,宝藿苷I,藁本内酯的转移率为评价指标,采用HPLC多波长切换梯度洗脱技术和多指标综合加权评分法(权重系数为0.47:0.16:0.07:0.07:0.08:0.06:0.09),以SPSS 16.0软件分析,优选淫羊藿-川芎药对的最佳提取工艺为饮片浸泡1 h,以12倍量50%乙醇回流提取60 min.验证试验表明该工艺稳定可行,为淫羊藿-川芎的配伍及相关制剂研究提供了实验依据.     

银杏叶提取物胃漂浮滞留缓释片的制备及其体外释放度评价

目的:制备银杏叶提取物胃漂浮滞留缓释片,考察其体外释放度。方法:以漂浮时间、起漂时间为指标,采用单因素试验考察缓释骨架材料、起漂剂、十八醇用量及HMPC用量;以累积释放率、起漂时间及漂浮时间的综合评分为指标,选取HPMC K4M,PVPP,泡腾剂、十八醇的用量为考察因素,采用正交试验优选银杏叶提取物胃漂浮滞留缓释片的处方与制备工艺,并考察其体外释药机制。结果:最佳处方为HPMC K4M,PVPP,银杏叶提取物、十八醇及泡腾剂的质量分数分别为30%,2%,20%,48%,4%;MCC为稀释剂以补足质量。银杏叶提取物胃漂浮滞留缓释片的释药动力学模型符合Higuchi方程。结论:制备的胃滞留漂浮片外观及可压性良好,具有良好的缓释性能,释药机制为扩散和溶蚀的双重作用。