一氧化氮合酶在膀胱癌中的表达及临床意义

目的：探讨一氧化氮（NO）在膀胱肿瘤中的作用及临床意义。方法：采用免疫组织化学方法对58例膀胱移行细胞癌标本（实验组）及14例良性膀胱组织标本（对照组）进行一氧化氮合酶（NOS）抗体染色，观察表达结果与肿瘤生物学特性之间的相关性。结果：诱导型NOS（iNOS)在实验组中的阳性表达率明显高于对照组（P＜0．01），其表达程度与肿瘤分级、分期无关（P＞0．05）；内皮型NOS（eNOS）在实验组和对照组血管内皮细胞都有表达，但前者表达较强；而在对照组中多呈不连续的表达。结论：NO在膀胱移行细胞癌的发生、发展中起重要的作用。     

一氧化氮合酶在膀胱癌中的表达及与肿瘤血管形成的关系

目的　探讨一氧化氮 (NO)在膀胱肿瘤中的作用及与肿瘤血管形成的关系。　方法　采用免疫组化方法对 5 8例膀胱移行细胞癌及 14例正常膀胱粘膜标本进行一氧化氮合酶 (NOS)抗体染色和微血管密度 (MVD)计数 ,观察表达结果与肿瘤生物学特性及与肿瘤血管形成的相关性。　结果　诱导型NOS(iNOS)在正常膀胱组织中无表达 ,而在膀胱癌组织中的阳性表达率为 81% ( 47/5 8) ,表达程度与肿瘤分级、分期无关 (P >0 .0 5 ) ;iNOS表达阳性组和阴性组的MVD分别为 ( 3 9.3± 19.5 )和( 2 9.3± 10 .5 ) /HP ,即iNOS的表达程度与肿瘤MVD成正比 (P <0 .0 1) ;内皮型NOS(eNOS)在膀胱肿瘤和正常膀胱粘膜的血管内皮细胞都有明显表达 ,而移行上皮细胞中未见表达。　结论　iNOS在膀胱移行细胞癌血管形成中有重要作用     

诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮在脑积水大鼠脑组织及脑脊液中的含量变化

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)在实验性大鼠脑积水中的病理生理作用。方法实验组SD大鼠36只,随机平分为3个组,用显微外科技术向枕大池内注入 25％白陶土混悬液,分别在第2、3、4周后行核磁共振检测,鉴定脑积水形成情况,之后24 h内取脑脊液和脑组织,用免疫组织化学方法测脑组织不同部位iNOS表达情况,硝酸还原酶法测脑脊液中 NO含量。对照组12只大鼠于枕大池内注入生理盐水,用同样方法检测。结果实验组共25只大鼠成功诱发脑积水。与对照组相比,实验组脑组织中iNOS表达率均升高,尤其是白陶土注射后第 4周脑室周围白质更为明显(40．65±4．06)％;实验组脑脊液中NO含量亦均增加,其中白陶土注射后第4周最高(51．37±6．48)μmol／L。结论 iNOS和NO可能参与了脑积水的病理生理过程。     

诱导型一氧化氮合酶在前列腺增生组织中表达的研究

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与前列腺增生(BPH)病理生理变化的关系。方法:用免疫组化法检测10例正常和30例有膀胱出口梗阻的BPH患者膀胱和前列腺组织中iNOS的表达。结果：BPH组前列腺组织中iNOS呈阳性染色，主要分布于前列腺的上皮细胞及上皮下组织中，间质平滑肌组织中均为阴性；对照组的膀胱壁、膀胱颈部和前列腺组织中均无iNOS阳性染色。结论：iNOS仅在BPH患者前列腺组织中有特异性表达，提示它参与了前列腺增生的病理生理过程。     

诱导型一氧化氮合酶与Cajal间质细胞在术后肠梗阻大鼠小肠中的表达及意义

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与Cajal间质细胞(ICC)在术后肠梗阻大鼠小肠中的表达及意义.方法 选取健康成年Wistar大鼠30只,按照随机数字表法将其分为对照组和肠梗阻组,每组15只,检测两组大鼠的胃肠道传输速率;应用免疫组织化学染色法对两组大鼠小肠iNOS和c-kit的分布和表达进行观察,应用实时荧光定量PCR检测两组大鼠小肠c-kit和iNOS mRNA的表达.组间比较采用t检验.结果 肠梗阻组有2只大鼠因麻醉药物过量或低温死亡,最终进入结果分析的肠梗阻组大鼠为13只.肠梗阻组大鼠胃肠道传输速率为42％±14％,低于对照组大鼠的64％±13％(t=6.56,P＜0.05).免疫组织化学染色法结果显示,肠梗阻组大鼠小肠c-kit阳性细胞数为8.9±2.9,明显少于对照组大鼠的14.4 ±5.0(t =3.97,P＜0.05);肠梗阻组大鼠小肠iNOS阳性细胞表达明显增加,达到13.6±4.9,而对照组大鼠小肠几乎无iNOS阳性细胞;实时荧光定量PCR检测结果表明,术后肠梗阻组大鼠小肠c-kit和iNOS mRNA相对表达量分别为1.6±0.8和2.2±1.2,而对照组分别为2.6±1.1和0.5 ±0.5,两组比较,差异有统计学意义(t =2.86,4.61,P＜0.05).结论 大鼠术后肠梗阻发生过程中存在ICC分布减少而iNOS表达明显增加的现象,两者的变化可能在术后肠梗阻发生机制中发挥了重要作用.     

缺氧诱导小鼠神经干细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的　探讨缺氧对小鼠神经干细胞 (NSC)中诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的诱导作用。方法　用含表皮生长因子的培养基原代培养NSC ;用免疫组织化学法检测在急性缺氧诱导下iNOS的表达 ;在每张免疫组织化学图像中随机选取 10个细胞 ,用图像分析系统分析经不同缺氧时间处理后平均灰度级变化 ,其灰度级均数间接反映酶表达强度的改变。结果　原代培养的细胞能连续增殖并分化为神经元及神经胶质细胞样细胞 ;行免疫组织化学检测 ,在一般培养条件下 ,NSC及分化细胞中iNOS呈阴性表达 ;经缺氧处理后呈阳性表达。图像分析缺氧诱导 10、3 0min与非缺氧组灰度级均数分别为 :15 8.7± 5 .95、12 8.4± 5 .73、2 0 0 .3± 5 .5 5。结论　用缺氧方法能诱导NSC表达iNOS ,其表达强度与缺氧时间呈正相关。第四军医大学西京医院全军神经外科研究所     

诱导型一氧化氮合酶及一氧化氮在肝动脉结扎大鼠肝损伤中的意义及高压氧治疗作用

目的探讨大鼠肝脏及血清诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮在肝动脉结扎损伤中的意义及高压氧的治疗作用。方法雄性SD大鼠96只,随机分成3组:对照组(手术对照,肝动脉未结扎)、肝动脉结扎组(结扎组)和肝动脉结扎 高压氧治疗组(高压氧组)。每组分为术后1 d、3 d、7 d、14 d时间点。高压治疗于术后2 h开始,吸纯氧60 m in,2/日,检测肝脏和血清中iNOS及NO水平,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),肝脏常规病理检查。结果结扎组肝组织iNOS、NO水平7 d达峰值,结扎组7、14 d与高压氧组及对照组相比均明显增高(P<0.01)。血清iNOS水平7 d、14 d结扎组明显高于高压氧及对照组,结扎组3 d血清NO水平达峰值,3 d、7 d、14 d均较高压氧组明显升高(P<0.05)。高压氧治疗各组血清ALT均较结扎组明显降低,病理示结扎组肝细胞浊肿明显,有坏死灶形成,高压氧治疗组肝细胞未见坏死。结论iNOS及NO参与了肝动脉结扎肝损害过程,高压氧治疗改善肝损害作用机制可能为抑制iNOS及NO。     

诱导型一氧化氮合酶与乳腺癌增殖和转移关系的研究

笔者应用免疫组化技术研究诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)与乳腺癌增殖指标碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、细胞周期素D1(CyclinD 1)、癌蛋白 (c erbB 2 )的关系 ,及与淋巴结转移、远处转移、5年生存情况的关系。结果示乳癌细胞内iNOS的表达与CyclinD1,c erbB 2 ,bFGF相关 ,并与远处、淋巴结转移有关。iNOS阳性患者 5年内生存率较阴性者低 (P 0 .0 5 )。提示iNOS促进c erbB 2和CyclinD1基因及bFGF表达 ,进而刺激乳腺癌细胞的增殖 ,并促进淋巴结及远处转移。     

诱导型一氧化氮合酶在膀胱移行细胞癌中表达与肿瘤血管生成的关系

一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ,ＮＯ)是生物体内一种结构简单的自由基。业已证实ＮＯ是活化巨噬细胞杀伤肿瘤细胞时产生的毒性效应分子之一 ,近年来的实验和临床研究表明ＮＯ还具有促进肿瘤发生、发展和转移的作用[1] 。诱导型一氧化氮合酶 (ｉＮＯＳ)是催化合成ＮＯ的主要酶。在头颈部鳞癌和结肠腺癌等实体肿瘤中已发现ｉＮＯＳ的表达或活性与肿瘤血管形成呈正相关[2 ,3 ] ,但在膀胱癌中ｉＮＯＳ是否与肿瘤血管形成有关 ,目前尚无相关报道。本研究试图通过检测膀胱移行细胞癌组织中ｉＮＯＳ和第Ⅷ因子相关抗原 (ＦⅧ Ａｇ)的表达 ,探…     

诱导型一氧化氮合酶与Th1/Th2型细胞因子在不明原因早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达

目的了解不明原因早期自然流产局部绒毛、蜕膜组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和辅助性T细胞(Th1)/Th2型细胞因子的表达,进一步探讨不明原因早期自然流产发病机制。方法Th1/Th2型细胞因子分别以白细胞介素(IL)-2和IL-10为代表,采用原位杂交及免疫组化方法对40例自然流产患者绒毛和蜕膜中iNOS、IL-2、IL-10的表达(试验组)进行检测,利用计算机CMIAS系统,表达指标以阳性数密度(N/S)计算,并与40例正常人工流产的绒毛和蜕膜组织(对照组)比较。结果试验组iNOS、IL-2、IL-10原位杂交显示绒毛、蜕膜组织分别为(0.082±0.026)、(0.0026±0.0007)、(0.036±0.011)vs(0.10±0.03)、0、(0.02±0.006),对照组分别为(0.022±0.007)、(0.0028±0.0007)、(0.042±0.011)vs(0.03±0.009)、0、(0.032±0.006);两组比较iNOS、IL-10差异有显著意义(P<0.05)。免疫组化结果显示与原位杂交结果一致。结论INOS和ThI/Th2型细胞因子与自然流产相关,可能是介导流产发生的重要因素之一。     

Endoscopic management of upper tract urothelial carcinoma in patients with a history of bladder urothelial carcinoma

PURPOSE: Endoscopic management of renal pelvis and ureteral urothelial carcinoma is gaining acceptance as a conservative treatment modality. Patients with a history of bladder urothelial carcinoma are at high risk for upper tract recurrence. We evaluate the role of endoscopic management of upper tract urothelial carcinoma in patients with a history of primary bladder urothelial carcinoma. MATERIALS AND METHODS: We retrospectively reviewed 90 patients with a history of primary bladder urothelial carcinoma who underwent endoscopic treatment of localized upper tract urothelial carcinoma between 1983 and 2004. RESULTS: Median patient age at diagnosis was 73 years (range 50 to 90). A total of 13 (14.4%) patients previously underwent cystectomy. With a median followup of 4.3 years (range 0.1 to 17), 105 upper tract urothelial carcinoma recurrences developed in 55 patients at a mean of 0.6 years (range 22 days to 5.9 years). Of these recurrences 76 were amenable to endoscopic management while 29 required nephroureterectomy. In 38 patients there were 91 bladder recurrences. At last followup 48 patients died, 17 of urothelial carcinoma at a median of 3.4 years (range 1 to 10). Cancer specific survival at 5 years for this cohort was 71.2%. Risk of death from urothelial carcinoma was significantly associated with stage (RR 3.23) and grade (RR 4.05) of upper tract urothelial carcinoma, imperative indication (RR 4.30), and treatment of bladder urothelial carcinoma with cystectomy (RR 3.34). CONCLUSIONS: Endoscopic management of upper tract urothelial carcinoma in patients with primary bladder urothelial carcinoma demonstrates a significant local recurrence rate. Furthermore, 5-year cancer specific survival is low. These patients represent a high risk cohort requiring strict ureteroscopic followup after endoscopic management is instituted.     

Prognostic significance of peritumoural inflammation in invasive urothelial bladder carcinoma

Summary Peritumoural inflammation consisting of lymphocytes, plasma cells and lymph follicles is present in two thirds of invasive urothelial bladder carcinomas. This type of inflammation is significantly rarer in advanced tumour stages (P3, P4) and its presence is a favourable prognostic factor. The mean survival time in patients with this type of inflammation is 26.1 months compared to only 14.8 months in patients without. All other forms of inflammation e. g. eosinophilic or polymorphonuclear leukocytes have no relation with prognosis. The significant prognostic value of lympho-plasmocytic inflammation may be considered as local expression of immunological host resistance.     

Prognostic significance of vascular and perineural invasion in urothelial bladder cancer treated with radical cystectomy

PURPOSE: Data on the prognostic significance of tumor invading lymphatic and blood vessels in bladder cancer are controversial, while little is known about perineural invasion in this tumor. We determined the prognostic value of these parameters in radical cystectomy specimens. MATERIALS AND METHODS: Slides of 283 radical cystectomy specimens obtained from 1986 to 1997 were examined retrospectively with respect to tumor invasion in lymphatic and blood vessels, and perineural spaces. This review was performed while blinded to lymph node tumor involvement or the postoperative disease course. The Kaplan-Meier probability analysis of tumor-free survival and the log rank test were used to determine the prognostic effects of vascular and perineural invasion. Multivariate analysis using the Cox proportional hazards model was also performed. RESULTS: Lymphatic, blood vessel and perineural tumor invasion were present in 54.1%, 13.1% and 47.7% of specimens, respectively. Tumor progressed in 46.3% of patients. On univariate analysis all 3 factors showed strong prognostic significance. However, on multivariate analysis only blood vessel invasion, invasion depth and regional lymph node status were independent prognostic factors (p <0.05). CONCLUSIONS: Lymph node metastases, pT classification and blood vessel invasion are independent prognostic parameters of tumor-free survival that should be used to guide patient treatment after radical cystectomy. Invasion of the blood and lymphatic vessels should be commented on separately in the pathology report.     

膀胱癌组织中染色体3q26.1小片段高频率缺失及其意义

目的 探讨人膀胱尿路上皮癌组织中染色体3q26.1小片段拷贝数改变及其临床意义.方法 采用微阵列比较基因组杂交(array comparative genomic hybridization,Array-CGH)技术分析35例膀胱癌组织(Ta～T118例,T2～T417例)基因组DNA(区段/基因)拷贝数改变.采用实时荧光定量PCR验证57例冻存膀胱癌组织(Ta～T125例,T2～T4 32例),34例甲醛固定石蜡包埋膀胱癌组织(Ta～T115例,T2～T419例),以及29例膀胱癌患者术前尿脱落细胞和15例健康志愿者尿脱落细胞中3q26.1小片段拷贝数的改变情况.结果 Array-CGH分析显示,膀胱癌组织中存在染色体3q26.1中一个小片段的高频率缺失,缺失率为77.1%(27/35).实时荧光定量PCR验证发现,57例膀胱癌冻存组织和34例膀胱癌固定包埋组织中该3q26.1小片段高频率缺失率分别为78.9%(45/57)和100.0%(34/34);膀胱癌患者术前尿脱落细胞中3q26.1小片段的相对拷贝数(中位数为0.0020)与正常对照组(中位数为0.0030)相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 染色体3q26.1小片段缺失是膀胱尿路上皮癌特征性的DNA分子水平异常改变.尿脱落细胞的3q26.1小片段缺失有可能成为膀胱癌的分子标志物.

Abstract：

Objective To investigate the copy number changes on chromosome 3q26. 1 in urothelial carcinoma of the bladder, and to explore its potential clinical significance. Methods The microarray-based comparative genomic hybridization (Array-CGH) approach was used to analyze the genome-wide copy number changes of 35 tumor tissue samples of bladder cancer. To confirm the loss of a small fragment in 3q26. 1 detected by Array-CGH, real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction (real-time PCR) was performed with 57 frozen tumor tissue samples and 34 formalinfixed paraffin-embedded (FFPE) tumor tissue samples. The urine sediment cells collected from 15 healthy volunteers and 29 bladder cancer patients were checked as above. Results The Array-CGH data showed that the copy number loss of a small fragment in 3q26. 1 was detected in 77.1% (27/35)of the tumor tissue samples investigated. Real-time PCR analysis validated this loss of a small fragment of 3q26.1 with high frequencies in both 57 frozen tumor samples and 34 FFPE tumor samples.The percentage of samples exhibiting loss was 78.9% (45/57) and 100. 0% (34/34) respectively.Furthermore, the relative copy number of the 3q26.1 small fragment was significantly lower in the urinary sediment cells of the patients (median=0. 0020), comparing with that of healthy controls (median=0. 0030) (P＜0.01). Conclusions Loss of the small fragment in 3q26.1 could be a characteristic genetic change of urothelial carcinoma of the bladder. It may serve as a potential molecular marker for bladder cancer.     

膀胱尿路上皮癌中DNMT1的表达及其临床意义

目的研究DNA甲基转移酶1（DNMT1）在膀胱尿路上皮癌（BUC）中的表达,探讨DNMT1与膀胱癌生物学行为之间的关系。方法采用RT—PCR法和Western-blot技术,检测60例膀胱尿路上皮癌及12例正常膀胱黏膜组织中DNMT1的表达;并结合临床资料进行分析。结果①膀胱癌组织中DNMT1蛋白和mRNA的表达水平分别为0．628±0．245和0．774±0．083,显著高于正常膀胱黏膜组织的0．126±0．028和0．175±0．101（P=0．000）;②DNMT1在膀胱癌中的表达水平与肿瘤的临床分期、分化程度、有无淋巴结转移等生物学行为显著相关。结论DNMT1在膀胱尿路上皮癌中过度表达,在膀胱癌的发生发展中起重要作用。     

膀胱癌组织中蛋白激酶C的表达

目的　探讨蛋白激酶C(PKC)在膀胱癌发病机制中的作用及其意义。方法　应用免疫组化方法检测 82 例膀胱癌组织和12例正常膀胱组织中PKC和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果　膀胱癌组织中PKC阳性率为56.1%,显著高于正常膀胱组织的25.0%(P<0.05)。PKC表达与肿瘤分级、分期无显著相关性,复发者 PKC表达显著高于无复发者。膀胱癌 PKC阳性表达者的PCNA指数显著高于阴性表达者。结论　PKC异常表达促使细胞过度增殖,进而参与膀胱癌发病过程的调控。     

TLR-4介导的免疫逃逸信号转导系统在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的：探讨TLR-4介导的免疫逃逸信号转导系统在膀胱尿路上皮癌免疫逃逸 膀胱癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化染色法检测60例膀胱尿路上皮癌和10例正 4、B7-HI、PD-1、Fas及FasL的表达。结果：TLR-4在正常膀胱组织中均有表达,而在膀胱尿路上皮癌中表达有所降低;B7-H1、PD-1、Fas、FasL在正常膀胱组织中无表达或表达极低,而在膀胱尿路上皮癌中的表达均明显增高,并且其表达与肿瘤的病理分级和临床分期密切相关,同时B7-H1表达与复发亦密切相关。结论：TLR-4介导的免疫逃逸信号转导系统可能与膀胱尿路上皮癌的免疫逃逸密切相关,在膀胱尿路上皮癌的发生发展中可能存在着TLR-4介导的免疫逃逸信号转导系统的活化和相关免疫抑制分子表达的上调。     

雄激素受体在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义

目的 观察雄激素受体(AR)在膀胱癌中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测AR蛋白在123例膀胱尿路上皮癌和18例正常膀胱黏膜中的表达.结果 AR蛋白的阳性表达主要定位于细胞核中,其在膀胱癌组织中阳性表达率为46.3%,在正常膀胱黏膜组织阳性表达率为5.6%,差异有统计学意义(P＜0.05).AR的表达率随着膀胱癌病理分级和临床分期的升高而增高(P＜0.05),而与年龄和性别无明显相关(P＞0.05),有淋巴结转移者AR表达率也显著升高(P＜0.05).结论 AR在膀胱癌组织中有广泛表达,且与膀胱癌的分化和浸润性进展密切相关,提示AR蛋白可能在膀胱癌的发生发展中起重要作用.