富马酸二甲酯对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨富马酸二甲酯(DMF)在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的保护作用及可能的机制。方法将小鼠随机分成3组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和DMF预处理组(DMF组)。IR组及DMF组制备肾脏IR模型,再灌注24h后收集血清及肾组织,测定血清肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)值;评定肾脏组织形态学改变;检测肾脏组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力;Western-blot检测各组肾组织内核因子E2相关因子2(Nrf2)及血红素氧化酶-1(HO-1)蛋白含量。结果IR组SCr及BUN显著高于S组[(143.17±14.18)μmol/L,(26.52±3.56)mmol/L vs.(24.50±5.54)μmol/L,(8.25±2.14)mmol/L,P0.01];DMF组SCr及BUN均低于IR组[(81.83±9.39)μmol/L,(18.62±2.75)mmol/L vs.(143.17±14.18)μmol/L,(26.52±3.56)mmol/L](P0.01);和IR组比较,DMF组的组织形态学损伤较轻(P0.01);DMF组过氧化损伤指标MDA水平低于IR组[(3.55±0.48)μmol/g vs.(5.48±0.70)μmol/g](P0.01),而抗氧化酶SOD水平高于IR组[(35.02±4.13)kU/g vs.(23.80±4.36)kU/g](P0.01)。Western-blot及免疫组化结果显示DMF组Nrf2和HO-1蛋白表达水平高于IR组(P0.05)。结论 DMF对小鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路进而提高肾脏抗氧化应激能力有关。     

胱抑素C在缺血／再灌注急性肾损伤大鼠尿液中的变化及意义

目的：检测肾缺血/再灌注大鼠尿液胱抑素C含量,探讨其在缺血/再灌注急性肾损伤早期评估中的作用。方法：选取雄性SD大鼠,随机分为4组,建立缺血/再灌注急性肾损伤动物模型,缺血时间4组分别为0、10、20、30min,测定各组大鼠术前及再灌注24h后尿液胱抑素C,血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）浓度,计算24h肌酐清除率（Ccr）,取各组再灌注24h后肾组织作组织学检查,行肾小管坏死半定量评分。结果：各组大鼠基线肾功能差异无统计学意义,再灌注24h后与基线值相比,肾缺血0min组及10min组BUN、Scr及Ccr无显著改变;肾缺血20min组BUN、Scr无显著改变,但Ccr显著降低;肾缺血30min组BUN[（45.3±14.6）vs（13.8±1.6）mmol/L]、Scr[（160.8±22.2）vs（36.9±7.9）μmol/L]显著升高,Ccr显著降低[（1.87±0.3）vs（0.56±0.1）ml/min]。20min组及30min组肾小管坏死评分与0min组相比显著升高。再灌注24h后与基线值相比,肾缺血0min组尿液胱抑素C水平无显著改变,肾缺血10min[（0.79±0.11）vs（0.25±0.02）μg/L]、20min[（1.23±0.35）vs（0.30±0.05）μg/L]及30min组[（1.33±0.51）vs（0.28±0.03）μg/L]尿液胱抑素C水平显著升高。结论：尿液胱抑素C测定可望成为缺血/再灌注急性肾损伤的早期诊断标记物。     

臭氧氧化预处理在肾缺血再灌注损伤中对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察臭氧氧化预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响.方法 38只8周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为4组.（1）假手术组（n＝8）：仅切除右肾;（2）缺血再灌注组（n＝10）：切除右肾、游离左肾后夹闭左肾动、静脉45 min再开通;（3）臭氧氧化预处理组（n＝10）：与缺血再灌注组建模方法一致,但在建模前15 d起每天1次经直肠灌注法吹入氧气和臭氧的混合气体5~5.5 mL;（4）氧气预处理组（n＝10）：与臭氧氧化预处理组建模方法一致,但经直肠仅吹入氧气（13 mg/kg）.建模后24 h检测各组大鼠血清肌酐、血尿素氮和血清一氧化氮浓度;48 h后采用免疫组织化学法和逆转录PCR法检测各组大鼠肾组织eNOS表达;蛋白质印迹法检测肾组织胞浆eNOS含量.结果 建模后24 h,缺血再灌注组大鼠血清肌酐为（117±20）μmol/L,血尿素氮为（32.8±7.6）mmol/L,血清一氧化氮为（58±12）μmol/L,均高于假手术组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.臭氧氧化预处理组血清肌酐为（63±16）μmol/L,血尿素氮为（17.4±5.2）mmol/L,低于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义（均P〈0.05）;血清一氧化氮为（84±14）μmol/L,均高于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.臭氧氧化预处理组肾组织学Paller评分（41±6）低于缺血再灌注组（62±9）,eNOS灰度值（163±15）高于缺血再灌注组（126±18）,差异有统计学意义（均P〈0.05）.假手术组大鼠肾组织内有微量eNOS mRNA表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS mRNA表达增强,均高于假手术组（均P〈0.05）,臭氧氧化预处理组eNOS mRNA表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组（均P〈0.05）.假手术组无明显eNOS蛋白表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS蛋白表达增强,均高于假手术组（均P〈0.05）,臭氧氧化预处理组eNOS蛋白表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组（均P〈0.05）.结论 臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与其诱导eNOS合成增多、一氧化氮产生增多有关.     

低氧诱导因子1α高表达对小鼠急性缺血性肾损伤的影响

目的 探讨低氧预处理诱导低氧诱导因子1α（HIF-1α）高表达对小鼠肾缺血再灌注损伤（IRI）的影响及其可能机制。 方法 雄性C57BL/6N小鼠35只，随机分为健康对照组、氯化钴（CoCl2）组和8%O2组，每组10只；预处理12 h后，以上3组各取5只，分为缺血再灌注（IR）组、CoCl2＋IR组、8%O2＋IR组；另设5只作为假手术对照组。采用夹闭双侧肾蒂30 min的方法建立肾缺血动物模型，观察CoCl2和8％O2预处理对小鼠IR 24 h后肾功能、肾组织病理和相关肾损伤指标的影响及与CoCl2和8％O2诱导HIF-1α及其保护性靶基因血红素氧化酶1（HO-1）表达之间的关系。 结果 CoCl2＋IR组小鼠的肾功能[BUN (35.2±12.2) mmol/L，Scr (34.0±9.7) μmol/L]和8%O2＋IR组小鼠的肾功能[BUN (31.8±9.1) mmol/L，Scr (41.6±10.6) μmol/L]均较IR组[BUN (65.8±2.6) mmol/L，Scr (229.5±11.2) μmol/L]显著改善（P < 0.01）；与此相一致，CoCl2＋IR组和8%O2＋IR组的病理学改变、细胞凋亡程度和波形蛋白的表达均明显低于IR组。另外，CoCl2组和8%O2组中HIF-1α及其靶基因HO-1的表达明显高于健康对照组。 结论 低氧预处理可上调体内HIF-1α表达，对小鼠IRI肾脏具有良好保护效果     

左卡尼汀减轻大鼠肾缺血再灌注损伤及其机制的研究

目的 研究左卡尼汀对大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制.方法 将Wistar大鼠分为3组:L组大鼠制成IRI模型,于夹闭肾动静脉前5 min及松开动脉夹后30 min,分2次经尾静脉注射左卡尼汀,各500mg/kg;I组大鼠制成IRI模型,仅注射生理盐水;C组仅分离双侧肾动、静脉,注射生理盐水.分别于再灌注后3、6和24 h处死各组大鼠.处死前经下腔静脉取血,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮( BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量.获取肾组织样本,进行病理学观察;应用逆转录聚合酶链反应检测肾组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测细胞核中Nrf2含量;免疫组织化学法检测肾组织中Nrf2的表达及定位.结果 再灌注后3h时,L组与I组血清Cr和BUN均高于C组(P＜0.01);再灌注后6h时,L组血清Cr和BUN高于C组(P＜0.01),而低于I组(P＜0.01);再灌注后24 h时,L组血清Cr和BUN仍低于I组(P＜0.05).再灌注后6和24 h时,L组与I组SOD水平低于C组(P＜0.05),MDA水平高于C组(P＜0.05).再灌注后各时间点,L组SOD水平均高于I组(P＜0.05),MDA水平均低于I组(P＜0.05).再灌注后24 h时,L组肾组织病理改变较I组轻.再灌注后6h时,I组Nrf2、HO-1、γ-GCS的mRNA相对含量均高于C组(P＜0.05),而L组各基因mRNA的相对含量高于I组(P＜0.05).L组细胞核内Nrf2的相对含量高于I组(P＜0.05).结论 左卡尼汀可减轻大鼠肾脏IRI,其机制可能与激活Nrf2-ARE通路,进而增强下游抗氧化基因的表达有关.     

尿毒清颗粒预防对比剂肾病的临床研究

目的：探讨用尿毒清颗粒预防对比剂肾病（CIN）的临床效用。方法：将拟行择期冠状动脉造影和/或经皮冠状动脉介入术治疗的患者150例,随机分为尿毒清组（75例）及对照组（75例）。尿毒清组患者于术前1 d至术后3 d服用尿毒清颗粒。入院时及术后连续3 d查肾功能。比较两组组间和组内血清肌酐（Scr）的差别。结果：两组患者的主要基线指标差异无统计学意义。两组患者术后3 d Scr最高值均比术前基线Scr值增高[（91.4±40.2）μmol/L vs（71.7±27.4）μmol/L,P〈0.01;（103.7±35.4）μmol/L vs（77.1±21.7）μmol/L,P〈0.01],差异均有统计学意义。CIN的发病率尿毒清组为3例（4.0%）,对照组为10例（13.3%）。与对照组相比,尿毒清组术后3 d Scr最高值降低[（91.4±40.2）μmol/L vs（103.7±35.4）μmol/L,P〈0.05],术前、术后Scr差值降低[（19.7±16.8）μmol/L vs（26.5±20.4）μmol/L,P〈0.05],CIN发生率降低（4.0%vs 13.3%,P〈0.05）,差异均有统计学意义。结论：尿毒清颗粒可以降低动脉内使用对比剂后3 d Scr的最高值和CIN发生率,有一定的预防CIN的作用。     

缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法SD大鼠32只,雌雄不拘,随机分为4组（n=8）,假手术组（Ⅰ组）;对照组（Ⅱ组）建立肾缺血再灌注（I/R）模型;不同时间缺血后处理组（Ⅲ组和Ⅳ组）,建立I/R模型,Ⅲ组于缺血后再灌注10s,停灌10s,反复3次;Ⅳ组缺血后再灌注2min,停灌2min,反复3次。测定再灌注24h时血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）浓度、超氧化物岐化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）浓度,光镜下进行肾组织病理形态学观察,采用免疫组化法测定肾组织血红素氧合酶-1（HO-1）表达。结果再灌注24h时,与Ⅰ组比较,其余3组血清Cr、BUN和MDA浓度升高,SOD活性和HO-1表达降低（P〈0.01）;与Ⅱ组比较,Ⅲ组和Ⅳ组血清Cr、BUN、MDA浓度和HO-1表达降低,SOD活性升高（P〈0.05或0.01）;Ⅲ组和Ⅳ组各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。Ⅲ组和Ⅳ组病理改变明显轻于Ⅱ组。结论缺血后处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与上调HO-1的表达和清除氧自由基有关。     

1,25（OH）2D3延缓慢性肾衰竭进展的临床随机对照研究

目的：观察1,25（OH）2D3联合血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（angiotensin Ⅱ receptor blocker,ARB）延缓慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）进展的疗效.方法：选取40例血清肌酐（Scr）水平处于104-265.2 μmol/L,24 h尿蛋白定量≥1 g,临床排除继发性肾脏病,前期随访肾功能无明显恶化的患者,将其随机分为对照组（缬沙坦80 mg/d）及骨化三醇组（缬沙坦80 mg/d＋骨化三醇0.25 μg/晚）,随访6个月,随访时间点为0,2,4,6月,比较治疗前后患者24 h尿蛋白定量、Scr、钙磷及甲状旁腺激素水平的变化.结果：至随访终点时,与对照组相比,两组患者Scr、血钙、PTH水平差异有统计学意义[（158.95±24.30）μmol/L vs（186.05±46.18）μmol/L,P〈0.05],[（2.27±0.21）mmol/L vs（2.10±0.20）mmol/L,P〈0.01],[（145.22±42.30）pg/ml vs（193.44±55.04）pg/ml,P〈0.01];两组患者蛋白尿、血磷水平差异无统计学意义[（2.16±0.69）g vs（2.48±0.79）g,P〈0.05],[（1.41±0.30）mmol/L vs（1.49±0.34）mmol/L,P〈0.05];但与0月比较,骨化三醇组蛋白尿水平下降明显[（2.16±0.69）g vs（3.36±1.10）g,P〈0.01].结论：1,25（OH）2D3联合ARB能有效延缓慢性肾衰竭的进展,其疗效较单纯使用ARB药物为佳.     

缺血后处理对鼠在体肺缺血-再灌注损伤炎症反应作用的实验研究

目的 探讨缺血后处理对大鼠在体肺缺血-再灌注损伤中炎症反应的影响。 方法 将40只SD大鼠随机分成假手术组 （S组）、缺血-再灌注30 min组 （I/R-30组）、缺血-再灌注120 min组 （I/R-120组）、缺血后处理30 min组 （IPO-30） 和缺血后处理120 min组 （IPO-120）,每组8只。S组完成左侧开胸手术操作,肺门过阻断带,但肺门未阻断;I/R组拉紧肺门阻断带阻断左肺门,造成左肺缺血1 h,然后松开阻断带再灌注30 min和120 min （即I/R-30组和I/R-120组）;IPO组在1 h的缺血之后再灌注开始前先进行10 s的缺血及10 s的再灌注（共3个循环,持续1 min）,然后是与I/R组同样的30 min和120 min的长时间持续灌注（即IPO-30组和IPO-120组）。测定各组肺组织中白细胞介素10（IL-10） 及血浆可溶性细胞间粘附分子1 （sICAM-1） 的水平。观察肺组织的病理形态变化并进行弥漫性肺泡损伤（DAD） 评分。 结果 I/R-30组和I/R-120组血浆中sICAM-1水平比S组显著升高［（2.140±0.250） μg/L vs. （0.944±0.188） μg/L,P=0.003; （2.191±0.230） μg/L vs. （0.944±0.188） μg/L,P=0.003］,肺组织中IL-10水平亦明显高于S组［（15.922±0.606） pg/mg pro vs. （7.261±0.877） pg/mg pro,P=0.037; （17.421±1.232） pg/mg pro vs. （7.261±0.877） pg/mg pro,P=0.042］,组织损伤明显。缺血后处理干预后,IPO-30组和IPO-120组血浆sICAM-1水平与相应I/R组各时间点相比显著降低 ［（1.501±0.188） μg/L vs. （2.140±0.250） μg/L,P=0.038; （1.350±0.295） μg/L vs. （2.191±0.230） μg/L,P=0.005］,而IL-10水平显著升高［（20.950±1.673） pg/mg pro vs. （15.922±0.606） pg/mg pro,P=0.008; （25.334±1.173） pg/mg pro vs. （17.421±1.232） pg/mg pro,P=0.006］,DAD评分显著降低［6.8±1.4 vs. 11.5±1.9,P=0.007;7.5±1.6 vs. 13.2±1.7,P=0.005］,肺组织损伤较I/R组显著减轻。 结论 缺血后处理可能通过抑制炎症反应从而减轻肺缺血-再灌注损伤。     

细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1(HO-1)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠,体重220～280g,制备Langendorff离体心脏灌注模型,选取模型制备成功的离体心脏18个,随机分为3组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和PEP-1/HO-1处理+缺血再灌注组(HO-1组).IR组K-H液平衡灌注30 min后,采用停灌40 min再灌注50 min的方法制备缺血再灌注模型.HO-1组在停灌前用含50 μmol/L融合蛋白PEP-1/HO-1的K-H液平衡灌注15 min,S组采用K-H液持续灌注120 min.再灌注50 min时,收集冠脉流出液,测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;取心肌组织,采用Western blot法测定HO-1蛋白表达水平,采用硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性.结果 HO-1组心肌组织HO-1蛋白表达水平较IR组升高(P＜0.01).与S组比较,IR组和HO-1组冠脉流出液CK和LDH活性及心肌组织MDA含量升高,心肌组织SOD活性降低(P＜0.01);与IR组比较,HO-1组冠脉流出液CK和LDH活性及心肌组织MDA含量降低,心肌组织SOD活性升高(P＜0.01).结论细胞穿透肽PEP-1可将HO-1蛋白成功导入心肌组织,并减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

舒洛地特对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用与机制探讨

目的 观察舒洛地特对糖尿病大鼠肾脏组织核因子NF-κB活性及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响,探讨舒洛地特对糖尿病肾病的保护机制.方法 高脂高糖喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立Wistar大鼠糖尿病模型,并按随机数字表法分为非治疗组(DM)及舒洛地特治疗组( DMS).非糖尿病大鼠作为正常对照组(NC).12周后杀检,测定血糖、血肌酐、尿素氮、三酰甘油、胆固醇;免疫比浊法测定24h尿白蛋白;光镜下观察肾小球形态和结构,计算平均肾小球体积;免疫组化法检测肾组织MCP-1表达;Western印迹方法测定NF-κB活性.结果 与NC组比较,DM组及DMS组血糖、三酰甘油、胆固醇均显著升高(均P＜ 0.01);DMS组与DM组比较,以上指标差异无统计学意义.与NC组相比,DM组及DMS组血肌酐、尿素氮、24 h尿白蛋白显著升高(均P＜0.01).与DM组比较,DMS组血肌酐[(39.1±0.88) μmol/L比(41.0±2.16) μmol/L,P＜0.05]、尿素氮[(9.12±1.06) mmol/L比(9.87±0.19) mmol/L,P＜0.05]、24h尿白蛋白[(19.92±0.96) mg/24 h比(25.99±0.52) mg/24 h,P＜ 0.01]均显著降低.与NC组比较,DM组平均肾小球体积显著增加[(7.47±1.11)×105 μm3比(4.22±1.09)×105μm3,P＜ 0.01];DMS组平均肾小球体积[(6.64±0.71 )×105 μm3,P＜0.05]较DM显著降低,但仍显著高于对照组(P＜0.01).与NC组相比,DM组肾组织MCP-1表达显著升高[( 12.17±1.94 )/HPF比(1.19±0.70)/HPF,P＜0.01];与DM组比较,DMS组肾组织MCP-1表达[(9.22±1.61 )/HPF,P＜0.01]显著降低,但仍高于NC组(P＜0.01).与NC组相比,DM组肾组织NF-κB活性显著升高[(0.89±0.07)比(0.24±0.03),P＜0.01];与DM比较,DMS组肾组织NF-κB活性[(0.27±0.01),P＜0.01]显著降低,与NC组比较,差异无统计学意义.结论 舒洛地特对糖尿病肾病具有防治作用,抑制NF-κB活性及MCP-1表达可能是其作用机制之一.     

8％乳化异氟醚预处理对缺血／再灌注损伤大鼠肾脏氧化应激反应的影响

目的 观察8％乳化异氟醚（emulsified isoflurane,EI）预处理对缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/RI）大鼠肾脏氧化应激反应的影响.方法 健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠32只,右肾切除后采用随机数字表法分为4组（每组8只）：假手术组（Sham组,仅分离左侧肾蒂,不阻断肾血流）、肾脏I/RI组（夹闭左侧肾蒂45 min后恢复再灌注）、EI预处理组（静脉泵注8％ EI 4 ml·kg-1h-130 min,停药15 min后夹闭左侧肾蒂,余同I/RI组）、脂肪方乳剂（lipid emulsion,LE）预处理组（静脉泵注30％ LE 4 ml· kg-1·h-1 30 min,停药15 min后夹闭左侧肾蒂,余同I/RI组）.于肾脏再灌注3h时采集腹主动脉血测血清肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）;取肾组织测超氧化物歧化酶活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,光镜下观察肾脏病理学变化,并行肾小管Paller评分.采用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织总超氧化物歧化酶活性,采用硫代巴比妥酸法测定肾组织MDA含量.结果 各组大鼠血清Cr、BUN、肾组织MDA含量及肾小管Paller评分：I/RI组[Cr（98±7） μmol/L,BUN（14.5±4.7） mmol/L,MDA（2.05±0.31） μmol/g,Paller（33.5±5.6）分]、EI组[Cr（62±6） μmol/L,BUN（9.3±2.3） mmol/L,MDA（1.61 ±0.28） μmol/g,Paller（18.5±4.5）分]、LE组[Cr（94±15） μmol/L,BUN（13.9±4.5） mmol/L,MDA（1.91±0.35） μmol/g,Paller（32.2±3.8）分]与Sham组[Cr（24±6）μmol/L,BUN（6.5±1.6） mmol/L,MDA（1.32±0.19） μmol/g,Paller（1.6±0.9）分]比较,显著升高（P＜0.05）;肾组织超氧化物歧化酶活性：I/RI组[（78±12）×10^3 U/g]、EI组[（97±7）×10^3 U/g]、LE组[（79±13）×10^3 U/g]与Sham组[（117±10）×10^3 U/g]比较,显著降低（P＜0.05）.分别与I/RI组和LE组比较,EI组血清Cr、BUN、肾组织MDA含量及肾小管Paller评分均降低（P＜0.05）,肾组织超氧化物歧化酶活性均升高（P＜0.05）.I/RI组和LE组上述各指标     

前列地尔对兔肾缺血再灌注时细胞凋亡的保护作用

目的 观察前列地尔对兔肾缺血再灌注损伤时肾小管上皮细胞凋亡的保护作用.方法 建立兔肾缺血再灌注损伤动物模型,将实验兔随机分为3组:即对照组、缺血再灌注组和前列地尔组,每组10只.检测兔血清肌苷(Cr)、尿素氮(BUN)浓度及肾组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)含量及肾组织中凋亡细胞.结果 与对照组比较,缺血再灌注组和前列地尔组在再灌注后Cr、BUN水平均大幅度上升(P＜0.05);但前列地尔组动物在再灌注60min后Cr水平(231.32±17.57)μmol/L明显低于缺血再灌注组(390.61±20.42)μmol/L(P＜0.05);肾小管上皮细胞bcl-2、bax、Caspase-3表达与对照组比较,缺血再灌注组明显增强(P＜0.05);前列地尔组与缺血再灌注组比较表达减弱,但仍强于对照组(P＜0.05).前列地尔组、缺血再灌注组与对照组比较凋亡细胞数增多,前列地尔组与缺血再灌注组比较凋亡细胞数减少.MDA、SOD与MPO的活性与对照组比较,缺血再灌注组与前列地尔组明显增强(P＜0.05);前列地尔组与缺血再灌注组比较,该两者活性明显减弱(P＜0.05).结论 前列地尔在肾脏缺血再灌注损伤时能有效的保护肾功能其作用机制可能是通过减少细胞脂质过氧化,从而降低bcl-2、bax、Caspase-3等凋亡基因的表达.

Abstract：

Objective To study the alprostadil effects of alprostadil on apoptosis by renal ischemia-reperfusion injury (IR[) in rabbits. Methods The rabbit IRI models were made, and randourly divided into three groups: control group, IR[group and prostavasin intervention group. The creatinine (Ct) and blood urea nitrogen (BUN) were determined. Malondialdehyde ( MDA), superoxide dismutase (SOD),myeloperoxidase ( MPO), bcl-2, bax, Caspase-3 and apoptosis were assayed at 60 min after reperfusion.Results The Cr and BUN levels in plasma in IRI group and Prostavasin intervention group were increased obviously after reperfusion. The Cr levels at 60 min after repeffusion in alprostadil intervention group (231.32 + 17. 57 ) μmol/L were significantly lower than in IRI group ( 390. 61 ± 20. 42 ) μ mol/L, ( P ＜0. 05 ). The levels of bcl-2, bax, Caspase-3 in the renal tissue in IRI group were significantly higher than in control group ( P ＜ 0. 05 ), and those in alprostadil intervention group were lower than in IRI group, but markedly higher than in control group (P ＜ 0. 05 ). The number of apoptotic cells in alprostadil intervention group and IRI group was increased as compared with control group, and that in alprostadil intervention group was reduced as compared with IRI group. The contents of MDA, SOD and MPO in renal tissue of IRI group and Prostavasin intervention group were significantly higher than in control group ( P ＜ 0. 05 ), and those in IRI group were significantly lower than in alprostadil intervention group (P ＜0. 05 ). Conclusion Alprostadil could be used to protect renal ischemia-reperfusion injury probably by decreasing oxygen free radicals generation, inhibiting neutrophils aggregating and activating in the renal tissues, thereby inhibiting the expression of bcl-2, bax, Caspase-3.     

钴原卟啉诱导血红素氧合酶-1高表达减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨钴原卟啉(CoPP)诱导血红素氧合酶-1(HO-1)高表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机理.方法 以Wistar大鼠为实验对象,CoPP组分别于左肾血流阻断前48 h和24 h腹腔注射CoPP 2.5 mg/kg,然后阻断左肾血流47 min,恢复左肾血流的同时切取大鼠右肾,采用免疫组织化学染色和免疫印迹法检测其HO-1的表达.在再灌注24 h后,处死大鼠,取其下腔静脉血和左肾,测定血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度,观察肾组织学变化,检测肾组织中HO-1的表达.IRI组除不用CoPP处理外,其余同CoPP组.CoPP组和IRI组另有部分大鼠的血流阻断时间延长至80 min,恢复血流后不处死,观察14 d,记录其存活情况.结果 IRI组血清Cr及BUN分别为(134.37±24.26)μmol/L和(30.10±3.09)mmol/L,明显高于CoPP组的(48.92±12.92)μmol/L和(13.99±5.00)mmol/L(P＜0.05).IRI组肾小管细胞大片坏死,管型形成,与之相比,CoPP组肾小管坏死范围稍小,但肾小管病变范围仍较广泛,肾小管上皮细胞多处于水变性阶段,"缺血样"肾小球减少,管型形成较少.缺血前及再灌注24 h后,CoPP组的肾组织中HO-1均为高表达,主要位于肾间质的毛细血管处,IRI组再灌注24 h后也见肾组织中HO-1为高表达.术后14 d内,IRI组的6只大鼠中有4只死亡,而CoPP组的5只大鼠全部存活,两组大鼠存活率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缺血前使用CoPP可减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,该保护作用可能是通过CoPP诱导肾脏高表达HO-1来实现的.     

铁死亡在重症急性胰腺炎引起的急性肾损伤中的作用及其机制

目的:探讨铁死亡在重症急性胰腺炎(SAP)诱发急性肾损伤(AKI)的作用及其机制。方法:胰腺炎建模后24 h,将36只SD大鼠(购自青岛大学医学部实验室动物中心)采用完全随机分组法分为3组( n＝12)：假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1干预组(SAP＋...     

冬虫夏草对自发性高血压大鼠肾脏Klotho表达和肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 观察自发性高血压大鼠（SHR）肾脏Klotho表达和肾小管上皮细胞的凋亡情况以及冬虫夏草对其的影响,探讨冬虫夏草在高血压肾损伤肾小管上皮细胞凋亡中的保护作用机制。 方法 按随机数字表法将20只22周龄雄性SHR分为模型组（SHR）、冬虫夏草组、氯沙坦组、冬虫夏草＋氯沙坦组,以5只22周龄雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠为对照组。测定尿蛋白量（24 h）、NAG、Scr、BUN水平,并观察肾脏病理改变;RT-PCR法观察肾组织Klotho、p53和p21 mRNA表达;Western印迹法检测肾组织Klotho、p53、p21和活性caspase-3蛋白表达;原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡。 结果 与SHR组相比,冬虫夏草组、氯沙坦组、冬虫夏草＋氯沙坦组尿蛋白量（24 h）[（52.16±29.3） mg、（49.97±32.5） mg、（54.67±30.09） mg比（96.52±36.94） mg]、尿NAG[(44.13±9.11)、(42.75±8.33)、（41.96±7.88） U/L比（54.07±6.57） U/L]、Scr[（45.25±9.55）、（43.76±8.65）、（45.18±7.28） μmol/L比（53.84±10.21） μmol/L]和BUN[（8.25±1.03）、（8.40±1.58）、（8.32±0.98） mmol/L比（8.91±1.24） mmol/L]均显著减少（均P ＜ 0.05）,肾脏病理损害减轻,同时肾脏Klotho表达显著上调（P ＜ 0.01）,而p53、p21及活性caspase-3表达均显著下调（均P ＜ 0.01）,肾小管上皮细胞凋亡显著减少（分别为7.56%±0.52％、7.93%±0.37％、7.37%±0.36％比13.32%±0.64％,均P ＜ 0.01）,各药物干预组间差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论 冬虫夏草可能通过上调Klotho表达,抑制p53、p21的表达和caspase-3的活化,减少肾小管上皮细胞凋亡,从而对高血压肾损伤起一定的保护作用。     

小肠远端缺血预处理对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察小肠远端缺血预处理对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将40只Wistar大鼠被随机分为4组:假手术组(Sham)、单纯远端缺血预处理组(RJPC)、单纯缺血再灌注组(IR)和远端缺血预处理+缺血再灌注组(RIPC+IR).远端缺血预处理方式采用于小肠系膜根部游离动脉血管并夹闭5 min后开放5 min,反复3次.缺血再灌注模型采用于肝蒂阻断肝脏供血45 min,阻断范围占整个肝脏的70%,开放复流3 h.检测血液中谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)、肝脏苏木素-伊红(HE)病理、心血管指标.结果 复流3 h后,RIPC+IR组的ALT、LDH、心血管指标[平均动脉血压(MAP)、外周血氧饱和度(SaO2)]为(434.26±133.42)U/L、(2536±181)U/L、(83.1±7.3)mm Hg(1 mm Hg＝0.133 kPa)和(97.4±0.5)%,明显好于IR组(953.64±114.12)U/L、(5734±296)U/L、(67.1±7.4)mm Hg和(93.1±0.6)%(P<0.05).RJPC+IR组肝脏HE病理改变程度比IR组小.门静脉中IR组血清NO浓度(15.54±2.34)μmoL/L低于RIPC+IR组(18.10±1.82)μmol/L(P<0.05),外周血中,IR组血浆ET浓度(672.4±63.1)ng/L高于RIPC+IR组(451.7±63.6)ng/L(P<0.05),门静脉中IR组血清ET浓度(612.5±48.2)ng/L高于RIPC+IR组(401.5±51.2)ng/L(P<0.05).结论 小肠RIPC可以减轻肝脏缺血再灌注损伤,具有简便、易操作的特点,NO及ET可能在其中发挥了重要作用.     

特利加压素对肝硬化患者肝部分切除术后肝肾功能保护作用的效果分析

目的 探讨特利加压素对肝硬化患者肝部分切除术后肝肾功能保护作用的临床疗效.方法 通过对57例行非规则性肝切除术的原发性肝癌合并肝硬化患者的临床资料进行分析,按照其手术后是否应用特利加压素,将其分为试验组(A组)27例和对照组(B组)30例,试验组术后当天开始应用特利加压素,对照组术后不使用特利加压素,观察两组手术前后肝功能指标(ALT、AST、TB)、腹腔引流液、尿量及肾功能指标(Cr、BUN)的变化.结果 与术后第1天比较,两组患者术后第3、5、7天血ALT、AST及腹腔引流液均有显著降低(P＜0.05),尿量均有显著增加(P＜0.05),术后第7天肌酐均显著降低(P＜0.05),但对照组上述观察指标改善不如试验组明显.组间比较,试验组患者的血ALT于术后第5天、第7大明显低于对照组,分别为(144.9±76.3)U/L、(100.5±61.5) U/L和(267.2 ±91.2) U/L、(199.3 ±70.5) U/L,差异均有统计学意义(P＜0.05),试验组术后第3、5、7天AST(211.1 ±99.8) U/L、(80.4±54.6) U/L、(50.6±46.5) U/L、尿素氮(6.6±1.9) mmol/L、(6.5±1.7) mmol/L、(6.3 ±2.1)mmol/L、肌酐(74.3±10.9) μmol/L、(71.5±8.9)μmol/L、(58.7±4.1) μmol/L、腹腔引流液(247.6±60.3) ml、(58.8±54.3) ml、(40.2±31.8) ml低于对照组AST(298.7±131.2) U/L、(201.1 ±93.4) U/L、(114.7±70.3) U/L、尿素氮(7.3±1.9) mmol/L、(7.2±1.8) mmol/L、(7.1±1.7) mmol/L、肌酐(79.5 ±15.1)μmol/L、(76.9±16.2) μmol/L、(69.4 ±11.4) μmol/L、腹腔引流液(275.2±88.1) ml、(191.7±71.6) ml、(93.2±50.2) ml,尿量(2232.3±409.8) ml、(2270.5±395.8)ml、(2179.0 ±301.4)ml多于对照组尿量(1921 ±510.4) ml、(2019.1±411.2) ml、(1978.7±323.7) ml,两组之间差异均有统计学意义(P＜0.05).试验组有2例(7.4％)患者并发肝肾功能不全、肝肾综合征等并发症,而对照组有11例(36.7％).结论 应用特利加压素对肝硬化肝部分切除术患者的肝肾功能有一定的保护作用,并可减少术后腹腔积液及预防肝肾综合征的发生.     

重组人红细胞生成素预处理对肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤中PI3K-Akt-GSK-3β通路的调控作用

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）-糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）通路对人肾小管上皮细胞（HK-2）缺血再灌注（IR）损伤过程中细胞凋亡的调控及重组人红细胞生成素（rHuEPO）的保护作用。 方法 正常培养的HK-2细胞,分为7组：正常对照组、IR组、LY294002干预组（PI3K-Akt阻断剂,10 μmol/L）、LiCl干预组（GSK-3β阻断剂,20 μmol/L）、rHuEPO干预组（20 U/L）、rHuEPO+LY294002干预组、rHuEPO+LiCl干预组。Western印迹法检测Akt（Ser473）、GSK-3β（Ser9）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-3）活性; MTT法检测细胞活力;Annexin V和PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡。 结果 IR损伤诱导HK-2细胞凋亡率上调（15.20%±1.43％）、Akt活性水平下降、GSK-3β及caspase-3酶活性水平上调,与正常对照组相比,差异有统计学意义（P < 0.05）。与IR组相比,LY294002干预使细胞凋亡率进一步上调（18.20%±2.06％）、Akt活性水平下调、GSK-3β及caspase-3酶活性上调,LiCl干预使细胞凋亡率下调（12.30%±0.85％）、Akt活性水平上调、GSK-3β及caspase-3酶活性下调,差异均有统计学意义（P < 0.05）。rHuEPO干预与IR组相比,细胞凋亡率下降（11.10%±1.62％）、Akt活性水平升高而GSK-3β及caspase-3酶活性下调,差异有统计学意义（P < 0.05）。与rHuEPO干预相比,rHuEPO+LY294002双干预细胞凋亡率升高（13.40%±1.94％）、Akt活性水平下降而GSK-3β及caspase-3酶活性上调,rHuEPO+LiCl双干预细胞凋亡率下调（7.50%±1.31％）、Akt活性水平上升而GSK-3β及caspase-3酶活性下降,差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 IR损伤可引起肾小管上皮细胞凋亡,Akt活性降低及GSK-3β活性升高,影响caspase-3依赖的外源性凋亡途径可能是其凋亡机制之一。rHuEPO可通过增强Akt活性,降低GSK-3β及caspase-3酶活性,从而减轻细胞凋亡,对HK-2 IR损伤有一定的保护作用。     

血红素氧合酶-1在感染性休克大鼠肾功能损伤中的作用

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在感染性休克大鼠肾功能损伤中的作用.方法 健康清洁级SD大鼠80只,月龄3～4月,体重260～330 g,雌雄不拘,随机分为4组(n=20):对照组(C组)、感染性休克组(S组)、感染性休克+ZnPP-Ⅸ组(SZ组)和ZnPP-Ⅸ组(Z组).C组静脉注射生理盐水0.5 ml,2 h后腹腔注射50 mmol/L碳酸氢钠溶液1 ml;S组静脉注射LPS 10 mg/kg,2 h后腹腔注射50 mmol/L碳酸氢钠溶液1 ml;SZ组静脉注射LPS 10 mg/kg,2 h后腹腔注射ZnPP-Ⅸ10 μmol/kg;Z组静脉注射生理盐水0.5 ml,2 h后腹腔注射ZnPP-Ⅸ10 μmol/kg.于腹腔注射碳酸氢钠溶液或ZnPP-Ⅸ后4 h时,检测碳氧血红蛋白浓度(COHb)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的浓度和尿α1-微球蛋白(α1-M)浓度、N-乙酰-a-D-氨基葡萄糖酐酶(NAG)活性、视黄醇结合蛋白(RBP)浓度、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性、肾组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、HO-1 mRNA、HO-2 mRNA、HO-1和HO-2的表达水平.结果 与C组比较,S组和SZ组血清Cr、BUN的浓度、尿α1-M、RBP、NAG、γ-GT水平、COHb、肾组织MDA、HO-1 mRNA、HO-1水平升高,肾组织SOD活性降低(P<0.05),Z组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,SZ组血清Cr、BUN的浓度、尿α1-M、RBP、NAG、γ-GT水平和肾组织MDA含量升高,肾组织SOD活性、COHb和肾组织HO-1 mRNA、HO-1水平降低(P<0.05);4组大鼠肾组织HO-2 mRNA、HO-2表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 肾组织HO-1对感染性休克大鼠的肾功能可产生一定的保护作用.