脱细胞异体真皮的临床应用体会

脱细胞异体真皮补片是同种异体真皮,经专利生物工程技术脱细胞处理后,脱除了引起排斥反应的抗原细胞成分,同时保留了细胞外基质和三维空间框架结构,抗原性很低,仅剩细胞外基质框架,生物相容性好,无排斥反应,无菌、无毒、无刺     

脱细胞异体真皮基质与自体薄皮片复合移植修复皮肤缺损

脱细胞异体真皮基质(ADM)与自体薄皮片复合移植15例21处修复皮肤缺损。结果显示植皮区光滑平整,瘢痕增生不明显;病理学检测提示复合皮血管化明显,胶原排列有序,表皮与真皮连接结构重建充分,未见急性免疫排斥反应。表明ADM与自体薄皮片复合移植是一种修复皮肤缺损的良好方法。     

同种异体人脱细胞真皮基质的细胞相容性

目的研制一种新型的同种异体人脱细胞真皮基质(Acellulardermalmatrix,ADM)的细胞相容性,为寻找理想的真皮代替品提供依据。方法用高渗盐除去人皮肤的表皮细胞层,经戊二醛交联后以低含量NaOH消蚀除去真皮中的细胞成分,得到脱细胞真皮基质,利用体外细胞培养法检测其相容性。结果皮肤中所有细胞成分都被消除,胶原纤维稍松散,结构完整,排列正常。ADM无细胞毒性,培养的NIH3T3细胞能在其上贴附、增殖。结论经高渗盐—NaOH消蚀法能完全去除皮肤中的细胞成分而不损坏胶原纤维的三维结构,制备过程简单,有较好的细胞相容性,具有临床应用价值。     

脱细胞异体真皮基质与自体薄皮片复合移植修复皮肤缺损

脱细胞异体真皮基质(ADM)与自体薄皮片复合移植15例2l处修复皮肤缺损。结果显示植皮区光滑平整，瘢痕增生不明显；病理学检测提示复合皮血管化明显，胶原排列有序，表皮与真皮连接结构重建充分，未见急性免疫排斥反应。表明ADM与自体薄皮片复合移植是一种修复皮肤缺损的良好方法。     

脱细胞真皮基质作为填充材料的初步研究

目的探讨脱细胞真皮基质材料应用于整形美容领域的可能性。方法 2008年11月-2009年8月,对脱细胞真皮基质进行溶血试验、皮下埋植和肌肉埋植试验,分别于术后1、2、4周取样并评价其与血液接触反应,以及在体内的降解情况,同时与对照材料相比较,对脱细胞真皮基质的安全性和使用功能性进行初步的研究。结果脱细胞真皮基质具有良好的血液相容性和组织相容性,不引起机体的排斥反应;不同厚度的真皮基质具有不同的降解率,可根据使用需要进行叠加。结论脱细胞真皮基质可作为生物组织补片,具有应用于整形美容领域和组织修复的潜力。     

同种异体人脱细胞真皮基质的细胞相容性

目的：研制一种新型的同种异体人脱细胞真皮基质(Aeellular dermal matrix，ADM)的细胞相容性，为寻找理想的真皮代替品提供依据。方法：用高渗盐除去人皮肤的表皮细胞层，经戊二醛交联后以低含量NaOH消蚀除去真皮中的细胞成分，得到脱细胞真皮基质，利用体外细胞培养法检测其相容性。结果：皮肤中所有细胞成分都被消除，胶原纤维稍松散，结构完整，排列正常。ADM无细胞毒性，培养的NIH3T3细胞能在其上贴附、增殖。结论：经高渗盐—NaOH消蚀法能完全去除皮肤中的细胞成分而不损坏胶原纤维的三维结构，制备过程简单，有较好的细胞相容性，具有临床应用价值。     

异种脱细胞真皮替代睑板材料重建眼睑的可行性

背景:眼睑后层重建是眼睑重建的重点和难点,其中睑板替代物更是研究的焦点。异种脱细胞真皮作为一种新型的组织工程材料,在国内外烧伤整形领域,正得到广泛的研究和应用。目的:观察异种(猪)脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性极其组织病理学变化。方法:剥取健康小白猪全层皮肤20cm×20cm,制备异种(猪)脱细胞真皮基质。同时制备兔睑板全层缺损模型并植入脱细胞真皮基质,观察大体情况,并分别于第1,2,3周取移植交界处眼睑组织光镜下观察组织学的改变。结果与结论:大体观察未见明显排斥反应及眼睑的变形;光镜下1周时可见局部炎症细胞浸润,2周时炎症细胞减少,3周时正常纤维组织长入,逐渐分割代替植入的胶原纤维,炎症反应消失。提示异种脱细胞真皮免疫原性低,并可引导新生胶原的生长,是一种良好的睑板替代物。     

脱细胞异体真皮基质与人脂肪干细胞的生物相容性

背景:脱细胞异体真皮基质具有优良的生物相容性和组织细胞诱导功能.目的:评价人脂肪干细胞与脱细胞异体真皮基质的生物相容性.方法:取健康成年人吸脂术后的脂肪组织分离脂肪干细胞,并行原代与传代培养,传至第3 代,将细胞与脱细胞异体真皮基质联合体外培养3,7 d,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架材料上的黏附、生长及增殖情况,并计算细胞在材料上的黏附率;XTT比色法检测细胞的生长增殖情况.结果与结论:脂肪干细胞在支架材料上分布均匀,24 h内细胞开始伸展、黏附,二三天完全伸展变形,以梭形为主,呈网状排列;随着培养时间延长,支架上的细胞逐渐增多;人脂肪干细胞细胞与脱细胞异体真皮基质混合培养后平均黏附率为95.03%,并保持正常的生长增殖速度,表明支架对细胞具有良好的黏附性;脱细胞异体真皮基质材料与人脂肪干细胞复合后相容性良好.     

异种脱细胞真皮替代睑板材料重建眼睑的可行性

背景：眼睑后层重建是眼睑重建的重点和难点,其中睑板替代物更是研究的焦点。异种脱细胞真皮作为一种新型的组织工程材料,在国内外烧伤整形领域,正得到广泛的研究和应用。目的：观察异种（猪）脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性极其组织病理学变化。方法：剥取健康小白猪全层皮肤20cm×20cm,制备异种（猪）脱细胞真皮基质。同时制备兔睑板全层缺损模型并植入脱细胞真皮基质,观察大体情况,并分别于第1,2,3周取移植交界处眼睑组织光镜下观察组织学的改变。结果与结论：大体观察未见明显排斥反应及眼睑的变形;光镜下1周时可见局部炎症细胞浸润,2周时炎症细胞减少,3周时正常纤维组织长入,逐渐分割代替植入的胶原纤维,炎症反应消失。提示异种脱细胞真皮免疫原性低,并可引导新生胶原的生长,是一种良好的睑板替代物。     

反复冻融配合超声振荡洗涤制备猪脱细胞真皮基质

目的:改进猪脱细胞真皮基质制备方法,并与传统制备方法进行比较,为临床大面积烧伤患者治疗提供更安全、更廉价的异体皮源。方法:实验于2003-10/2007-03在北京积水潭医院烧伤研究所完成。①实验材料:实验动物为3月龄清洁中华香猪,由北京积水潭医院动物室提供。实验符合动物伦理学标准。②实验方法:取25kg实验室环境养殖的健康中华香猪,麻醉处死去毛后取躯干部位全层皮肤,仔细剃除毛发,去除脂肪。采用反复冻融,配合超声振荡和化学去污剂处理的复合方法,获得脱细胞猪真皮基质。③实验评估:利用常规病理检查和电子显微镜检查其有无明显细胞碎片残留,测试其机械强度、亲水性和细胞毒性,通过动物埋藏实验确定其组织相容性,并以戊二醛交联的脱细胞异体皮,戊二醛交联的脱细胞猪皮,以及新鲜人皮作对照,结果:①常规病理检查可见真皮结构完整,无明显破坏;上皮细胞清除彻底,无明显细胞碎片残留,电子显微镜检查见脱细胞猪皮的胶原结构完整,未发现破坏痕迹,无明显细胞残留。②各组中脱细胞猪皮基质的极限应力强度和新鲜人皮接近,无明显统计学差别(P>0.05);戊二醛交联的脱细胞猪皮强度最低,戊二醛交联的脱细胞异体皮的强度最高,且与新鲜人皮相比也有明显统计学差别(P<0.01)。③戊二醛交联的脱细胞异体皮亲水性最强,其余三者相似。④脱细胞猪皮基质浸提液中细胞生长旺盛,7d后脱细胞猪皮基质两次测试相对增殖度值分别为:182,169。按照6级分级标准,脱细胞猪皮基质毒性级别为0级,在国家标准允许范围内。⑤脱细胞猪皮基质植入1,3周,边界不清,炎性反应与吸收均不明显,新生血管与成纤维细胞长入,植入12周,植入物与组织融为一体,新生血管与成纤维细胞填充真皮支架。结论:所制备的猪脱细胞真皮基质产品真皮基质完整,细胞毒性低,物理性能与人皮接近。     

The application of acellular dermal matrix allograft in functional position of patients with post-barns plastic operation

AIM: To investigate the effect of allogeneic acellular dermal matrix(ADM) on cograft in joint functional positions of patients with post-burn plastic operation. METHODS: 9 patients vrith hypertrophic scar and joint dysfunction after severe burns were used After pre-treating with trypsin and TritonX-100, 13 reticulated ADM were overlapped with autogenous ultrathin split-thickness skin grafts (USTS), and were transplanted to the scar excision wounds in the joints of four limbs at the same time. The neighbouring autogenous thin split-thickness skin grafts(TSTS) were used as control RESULTS: The composite skin grafts as well as the controls were all survived The rejection and hypertrophic scars were not found during (1-5) years follow-up studies. The appearance, fiber and function of composite skin grafts were near to normal skins. CONCLUSION: The ADM could be used to joint functional positions of patients with post-burn hypertrophic scan and could produce satisfactory plastic results as dermal substitute.     

无细胞异体真皮基质在烧伤后整形患者功能部位的应用

AIM:To investigate the effect of allogeneic acellular dermal matrix(ADM) on cograft in joint functional positions of patients with post burn plastic operation. METHODS:9 patients with hypertrophic scar and joint dysfunction after severe burns were used. After pre treating with trypsin and TritonX 100, 13 reticulated ADM were overlapped with autogenous ultrathin split thickness skin grafts(USTS), and were transplanted to the scar excision wounds in the joints of four limbs at the same time. The neighbouring autogenous thin split thickness skin grafts(TSTS) were used as control.RESULTS:The composite skin grafts as well as the controls were all survived. The rejection and hypertrophic scars were not found during (1- 5) years follow up studies. The appearance, fiber and function of composite skin grafts were near to normal skins. CONCLUSION:The ADM could be used to joint functional positions of patients with post burn hypertrophic scars and could produce satisfactory plastic results as dermal substitute.     

Xenogeneic acellular dermal matrix as a dermal substitute in rats.

Acellular dermal matrix (ADM) has been used as a dermal substitute for the treatment of deep burns, but the availability of cadaver skin for the production of ADM is limited. The usefulness of porcine ADM as a xenogeneic dermal substitute in rats was studied. With the use of Dispase II (Boehringer Mannheim, Indianapolis, Ind) and Triton X-100 (US Biochemicals, Cleveland, Ohio), xenogeneic ADM was prepared from commercially available, cryopreserved porcine skin, and allogeneic ADM from the rats was also prepared. Four full-thickness injuries 225 mm2 in size were created on the dorsum of each rat. One of these wounds was treated with xenogeneic ADM and 1 was treated with allogeneic ADM, and immediately a 0.005-in thick split-thickness skin graft was placed over the ADM. The other 2 wounds were covered with 0.005- or 0.017-in thick split-thickness skin grafts alone. The wounds were evaluated macro- and microscopically 10, 14, 20, and 30 days after grafting. At 30 days after grafting, contraction of the wounds that contained xenogeneic ADM was significantly greater than that of the wounds that contained allogeneic ADM. Graft take was poor in the wounds that contained xenogeneic ADM at 14 days after surgery and moderately good in those that contained allogeneic ADM. The use of thick autografts resulted in the best wound healing, whereas the use of thin autografts resulted in considerable wound contraction. Allogeneic ADM diminished this contraction, but wound healing was significantly worsened when xenogeneic ADM was used.     

脱细胞真皮基质黏膜组织补片在外耳道成形术中的应用

目的:探讨脱细胞真皮基质黏膜组织补片(acellular dermal matrix,ADM)应用于外耳道成形术以及其临床疗效。方法:2004年6月至2007年6月在我院因外耳道狭窄行外耳道成形术或(和)乳突根治术的10例患者(10耳),所有病例予以修复材料ADM修复,观察和总结其术后效果。结果:10例患者10耳随访6个月～2年,10耳均未出现排斥反应,8耳外耳道宽敞,1耳外耳道轻度狭窄放置扩张管后未狭窄,1例外耳道基底细胞癌复发。结论:ADM的组织相容性好,厚薄适宜,手术操作简便,是一种应用于外耳道成形术中安全有效的修复材料。     

改建脱细胞真皮基质作为软骨细胞移植载体修复兔软骨缺损

背景:脱细胞真皮(Acellular Dermal Matrix,ADM)具有良好的柔韧性、易丁修剪,制成微粉状皮内或皮下注射后,可见到成纤维细胞的移入及胶原的沉积,目前己被广泛应用于整形修复临床实践.目的:验证脱细胞真皮经改建后作为软骨细胞移植载体的可行性.设计、时间及地点:对比观察,于2003-08/2007-02在北京大学医学部和北京积水潭医院完成.材料:新生小牛的真皮层由北京元亨圣马生物研究所提供;体质量250 g的SD健康成年大白鼠24只,雌雄不限.3月龄的新西兰大白兔36只.方法:①取新生小牛背部真皮组织,进行脱细胞处理,分别用戊二醛和水溶性交联剂进行交联;再用生长因子对其进行纤维表面修饰.②取SD大白鼠,于大鼠脊柱两侧各设计3个长方形皮瓣,分别植入两组交联后的脱细胞真皮基质.术后2,6,12周取出植入物.③取新西兰大白兔,分为实验组和对照组,从其左侧关节面取原代软骨,分离软骨细胞并接种于复合后的ADM上进行培养.将实验组兔右侧后肢造成软骨缺损,植入含有自体软骨细胞的ADM,再将生物胶滴加于载体表面;对照组兔右侧后肢造成软骨缺损后分层缝合伤口.分别于第4,12,24周取材,对照组每次取2只,实验组每次取5只.主要观察指标:①交联效果的比较.②兔软骨缺损修复结果.结果:①经戊二醛交联后的ADM植入大鼠皮下后有强烈的炎症反应,并有组织出血坏死:而经水溶性交联剂交联的ADM的组织相容性较好.②在植入接种有自体软骨细胞的ADM24周后大白兔股关节的软骨缺损修复完好,附和的细胞能够存活且有增殖,ADM本身基本降解.结论:经脱细胞及纤维改建和交联及生长因子修饰的ADM孔隙均匀,组织相容性好,适于细胞黏附及长期生长.ADM胶原支架在兔体内可基本降解,未见排异反应,移植24周后见骨缺损修复.     

组织工程皮肤的构建及组织形态学观察

背景:应用于临床的组织工程皮肤具有血管化速度慢、力学强度差以及无法永久性保留等局限,因此,需要对相关技术环节进行改进以制备一种合适的永久性皮肤替代物。目的:建立一种构建有活性的双层组织工程皮肤的方法,并对其组织形态学进行观察。方法:以Ⅳ型胶原和成纤维细胞联合修饰的同种脱细胞真皮基质为支架,与表皮干细胞复合后依次经浸没式培养和气液分离界面培养构建组织工程皮肤,利用光镜和扫描电镜对其组织学特点进行观察和分析。结果与结论:以表皮干细胞和同种脱细胞真皮基质制备的组织工程皮肤具有表、真皮双层结构,其中表皮由多层不同分化程度的表皮细胞组成,真皮为天然三维孔隙结构,胶原纤维完整,且表皮层与真皮层紧密连接,形成整体结构,可满足全层皮肤替代物的基本组织学要求。     

NaOH消蚀法制备脱细胞真皮基质修补腹壁疝

背景:与其他疝修补材料相比,脱细胞真皮基质具有易血管化、抗感染、从而可用替代传统补片用于感染腹壁缺损重建等特点。目的:观察NaOH消蚀法制备的脱细胞真皮基质作为修补材料应用于腹疝的应用价值。方法:以全厚猪皮制成脱细胞真皮基质,45只SD雄性大鼠制备腹壁疝模型,随机数字表法分为腹壁疝组:直接缝合皮肤,Marlex网组和脱细胞真皮基质组:分别应用大小为3.5cm×4.0cm的Marlex网和脱细胞真皮基质缝合皮肤;观察修复后1周时有无腹壁疝发生,脱细胞真皮基质组修复后1,2,3,5,10周分别取材,其中每周各组取4只用于苏木精-伊红染色,光镜观察。修复后第5周Marlex网组和脱细胞真皮基质组各取6只用于抗张力试验。结果与结论:术后1周脱细胞真皮基质组与Marlex网组腹壁疝发生率均显著低于腹壁疝组(P<0.001)。脱细胞真皮基质的胶原纤维无明显变化,即有少量成纤维细胞植入,术后2周可见新生血管,术后5周脱细胞真皮基质内部血管密度基本稳定。将单独脱细胞真皮基质片与Marlex网行抗张力试验,Marlex网的抗张力显著高于脱细胞真皮基质(P<0.001)。但植入体内5周后,脱细胞真皮基质筋膜组织的抗张力高于Marlex-筋膜组织(P<0.05)。提示复合消蚀制备的脱细胞真皮基质可以作为良好的疝修补材料。     

脱细胞真皮基质黏膜组织补片在咽部修复中应用的手术配合

目的 总结脱细胞真皮基质黏膜组织补片(acellular dermal matrix,ADM)应用在修复咽部组织缺损中的手术配合要点.方法 对7例咽部恶性肿瘤患者行喉全切除或喉咽全切除术,将ADM缝在椎前筋膜上重建喉咽后壁,用胸大肌肌皮瓣重建喉咽前壁和侧壁,重建密闭腔道.结果 7例患者术后未发生排异反应,无咽瘘,创面均黏膜化,切口全部一期愈合.结论 ADM来源方便,组织相容性好,厚薄适宜,手术操作简便,可联合胸大肌肌皮瓣或其他颈部组织修复咽部环周缺损,是一种新的安全有效的修复材料.手术前的精心准备,术中熟练的配合是确保手术成功的关键.