四种瓷烤冠基底金属对人牙龈成纤维细胞P70S6k表达的影响

背景:研究已证实,部分烤瓷冠基底金属在体外具有抑制人牙龈成纤维细胞增殖作用,并诱导其凋亡,但烤瓷冠基底金属抑制细胞的具体机制尚不清楚.目的:观察4种烤瓷冠基底合金在体外对人牙龈成纤维细胞P70S6k表达的影响.设计、时间及地点:以人牙龈成纤维细胞P70S6k的表达量为观察对象,对比观察实验.于2009-07/10在辽宁医学院科技楼免疫组化及免疫印迹实验室完成.材料:镍铬合金、纯钛、金合金、钴铬合金由深圳美冠达牙科有限公司提供.选择年龄12-18岁,因正畸需拔除的健康第一前磨牙的牙颈部牙龈缘组织进行原代培养,取其5代对数期的细胞进行指标测定.方法:将镍铬合金、纯钛、金合金、钴铬合金加入DMEM培养液中制备出合金浸提液,以10%浓度加入培养的人牙龈成纤维细胞培养液中.阴性对照组为含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液.主要观察指标:各组合金浸提液干预72 h后采用免疫印迹分析检测人牙龈成纤维细胞P70s6k表达量.结果:免疫印记结果显示,P70S6k表达的平均灰度值在阴性对照组、金合金组、纯钛组之间差异无显著性意义(P>0.05),金合金组与纯钛组、镍铬合金与钴铬合金组之间差异也无显著性意义(P>0.05).而镍铬合金、钴铬合金与阴性对照组、金合金、纯钛组之间差异均具有显著性意义(P<0.01).结论:金合金、纯钛对人牙龈成纤维细胞的增殖活性影响不明显,而镍铬、钴铬合金组对人牙龈成纤维细胞的增殖活性有抑制作用.     

本期专题：口腔金属烤瓷合金材料的生物学性能

1 4种烤瓷冠基底合金浸提液影响人牙龈成纤维细胞中Bcl-2和Bax的表达——见2012年16期2943页。     

3种金属烤瓷修复体对牙龈组织的影响

目的 选取三种不同种类金属基底PFM进行修复,进而比较和评价不同种类金属基底PFM对牙龈组织的影响和各自的修复效果.方法 将60例在本院口腔科门诊欲行金属烤瓷修复体修复的患者随机分为3组,对其采用3种金属基底烤瓷修复体(PFM)修复,分别为镍铬合金,含钛镍铬合金,金合金.在修复后的6个月,观察牙龈变化:观测牙龈指数(GI),采用滤纸吸着法采集并测定龈沟液本,记录各项观测指标.结果 ①镍铬合金和含钛镍铬合金的两项指标均显著高于其对照组;金合金与对照组无显著性差异;②金合金的两项指标显著低于含钛镍铬合金和镍铬合金(P＜0.05),而含钛镍铬合金和镍铬合金无显著性差异(P＞0.05).结论 不同种类金属基底PFM对牙龈组织均有刺激性,金合金的临床应用效果好于含钛镍铬合金、镍铬合金.     

四种烤瓷冠基底金属浸提液干预人牙龈成纤维细胞尿纤溶酶原激活剂和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达

背景:修复材料的生物相容性是决定临床修复效果的重要因素之一。目的:通过比较4种金属浸提液对人牙龈成纤维细胞尿纤溶酶原激活剂和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂表达的差异探索其生物相容性。方法:选用活体牙龈,原代培养人牙龈成纤维细胞,采用镍铬、钴铬、纯钛及金钯合金4种金属浸提液进行干预,以未进行干预的细胞作为对照。结果与结论:ELISA检测结果显示镍铬和钴铬合金浸提液干预后细胞尿纤溶酶原激活剂表达增加;免疫荧光实验结合电镜观察发现镍铬和钴铬合金浸提液干预的细胞胞质荧光染色深,分布均匀,遍布整个细胞,提示细胞Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂表达增加。而纯钛和金钯合金浸提液对细胞尿纤溶酶原激活剂和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达无影响。说明纯钛和金钯合金的生物相容性优于镍铬和钴铬合金。     

镍铬合金烤瓷、贵金属烤瓷和金沉积烤瓷修复对基牙牙周组织的影响:1年随访比较

背景:近年来,临床上应用的以烤瓷材料为全冠的种类较多,不同烤瓷基底材料对基牙牙周组织造成的不利影响逐渐显露,修复后出现的牙龈红肿、出血等牙周组织炎症问题越来越受到重视.目的:观察镍铬合金烤瓷、贵金属烤瓷和金沉积烤瓷冠3种不同烤瓷材料冠桥修复体对基牙牙周组织的影响.方法:根据患者意愿对78例患者的254颗牙分别制作镍铬合金烤瓷、贵金属烤瓷和金沉积烤瓷冠,修复后1年进行复查,临床对比检查修复前后牙龈颜色、牙龈出血指数、菌斑指数、牙周探诊深度的变化.结果与结论:镍铬合金烤瓷冠修复1年后有21颗牙龈发生变色,贵金属烤瓷和金沉积烤瓷冠对牙龈色泽影响很少或没有;镍铬合金烤瓷、贵金属烤瓷后牙龈出血指数与术前比较差异有显著性意义,而金沉积烤瓷修复后牙龈出血指数与术前比较差异无显著性意义; 3组术前、术后的菌斑指数、牙周探诊深度无明显差异.结果提示3种修复体中金沉积烤瓷冠修复对牙周组织的影响最小,贵金属烤瓷冠次之,镍铬合金烤瓷冠对牙周组织的影响最大.     

三种基底烤瓷冠临床应用效果的比较

目的:比较和探讨镍铬合金、含钛的镍铬合金、高金合金烤瓷冠的临床应用效果。方法:分别制作三种不同基底烤瓷冠各50个,让患者佩戴,观察三者带入时和带入3年后烤瓷冠的颜色、边缘密合度、颈缘染色及冠的折裂、折断的情况。结果:镍铬合金与含钛的镍铬合金烤瓷冠在颜色、边缘密合度、颈缘染色方面差异无统计学意义(P>0.05),高金合金烤瓷冠无颈缘染色,在颜色和边缘密合度方面优于另外二者(P<0.05)。三者在折裂崩瓷方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高金合金烤瓷冠比另外两者有更好的临床效果。     

5种不同金属基底烤瓷冠的临床效果比较

目的比较金沉积基底、铸造纯钛金属基底、铸造高金合金基底、铸造TILITE合金基底、铸造镍铬合金基底烤瓷冠的临床应用效果。方法选取157例分别采用金沉积基底(35例)、铸造纯钛金属基底(32例)、铸造高金合金基底(30例)、铸造TILITE合金基底(30例)、铸造镍铬合金基底(30例)烤瓷冠修复的患者,评估其戴入时烤瓷冠的颜色及冠边缘的密合度。结果金沉积基底、纯钛金属基底及高金合金基底烤瓷冠的颜色及冠边缘的密合度无差异(P>0.05)金沉积基底、纯钛金属基底及高金合金基底烤瓷冠的颜色及冠边缘的密合度均优于TILITE合金、镍铬合金基底烤瓷冠(P<0.01)。结论与铸造TILITE合金基底、铸造镍铬合金基底烤瓷冠相比,金沉积基底、纯钛金属基底、高金合金基底烤瓷冠的临床效果更佳。     

5种不同金属基底烤瓷冠的临床效果比较

目的 比较金沉积基底、铸造纯钛金属基底、铸造高金合金基底、铸造TILITE合金基底、铸造镍铬合金基底烤瓷冠的临床应用效果.方法 选取157例分别采用金沉积基底(35例)、铸造纯钛金属基底(32例)、铸造高金合金基底(30例)、铸造TILITE合金基底(30例)、铸造镍铬合金基底(30例)烤瓷冠修复的患者,评估其戴入时烤瓷冠的颜色及冠边缘的密合度.结果 金沉积基底、纯钛金属基底及高金合金基底烤瓷冠的颜色及冠边缘的密合度无差异(P＞0.05)金沉积基底、纯钛金属基底及高金合金基底烤瓷冠的颜色及冠边缘的密合度均优于TILITE合金、镍铬合金基底烤瓷冠(P＜0.01).结论 与铸造TILITE合金基底、铸造镍铬合金基底烤瓷冠相比,金沉积基底、纯钛金属基底、高金合金基底烤瓷冠的临床效果更佳.     

细胞培养法评价自制镍铬烤瓷合金的细胞毒性

背景:具有良好抗腐蚀性能的镍铬铸造烤瓷合金正在临床广泛应用,但不容忽视的是其释放出的镍离子、铍离子具有明显的毒副作用.因此,改进合会的组成成分,提高其理化性能和生物相容性是目前研究的热点.目的:检测自制镍铬烤瓷合金的体外细胞毒性,并与口腔科常用的镍铬合金、纯铁金属的细胞毒性进行比较.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-05/12在中国医科大学中心实验室完成.材料:细胞选用对数生长期的小鼠成纤维细胞(L-929细胞).自制镍铬烤瓷合金由中国科学院金属研究所提供,纯钛由日本松风公司提供,镍铬合金由贺利氏古莎齿科有限公司提供.方法:实验分为自制镍铬烤瓷合金、纯钛组、镍铬合金组,阳性对照组,阴性对照组.取96孔培养板,每板选出5组孔,每组重复孔12个,每孔中均加入浓度为1.0×108L-1的细胞悬液100μ L.在自制镍铬烤瓷合金、纯钛组、镍铬合金组孔中分别加入各种材料浸提液100μL,阳性对照组孔中加入铅浸提液100 μ L,使材料浸提液浓度最终为50%,在阴性对照组孔内加入RPMI 1640培养液100 μ L.主要观察指标:分别于培养1,2,3,4,5 d时采用四唑盐比色法测定各组吸光度值,计算相对增殖率.结果:3种金属材料组与阴性对照组之间的吸光度值差异均无显著性意义(P＞0.05),与阳性对照组之间的吸光度值差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).纯钛组细胞增殖率＞100%,细胞毒性为0级,自制镍铬烤瓷合金组和镍铬合金组的细胞增殖率为86.36%～99.49%,细胞毒性为1级,阳性对照组在培养3d后细胞毒性增长至2级.结论:自制镍铬烤瓷合金仪具有极微弱的细胞毒性,符合口腔材料临床应用的要求.     

钴铬合金烤瓷冠与镍铬合金烤瓷冠的临床应用效果对比

目的对比钴铬合金烤瓷冠与镍铬合金烤瓷冠的临床应用效果。方法选取2011年9月至2014年6月期间接收治疗的100例单个上前牙烤瓷冠修复的患者。采用随机数表法将100例患者分为钴铬合金烤瓷冠组和镍铬合金烤瓷冠组,各50例,分别给予相应烤瓷冠治疗。对比两组患者修复后18个月内的颜色、外形、牙龈状况、龈缘返青、颈缘适应性和炎症反应情况。结果钴铬合金烤瓷冠组患者修复后发生颜色改变和变形的患者少于镍铬合金烤瓷冠组患者,钴铬合金烤瓷冠组患者修复后颜色一致的患者多于镍铬合金烤瓷冠组患者,差异均具有统计学意义(P0.05)。钴铬合金烤瓷冠组患者修复后颈缘适合性优于镍铬合金烤瓷冠组患者,炎症反应的发生率低于镍铬合金烤瓷冠组患者,差异均具有统计学意义(P0.05)。钴铬合金烤瓷冠组患者修复后牙龈状况、龈缘返青情况均显著优于镍铬合金烤瓷冠组患者,差异均具有统计学意义(P0.05)。且随着时间的推移,患者口腔内烤瓷冠的颜色、外形、牙龈状况、龈缘返青、颈缘适应性和炎症反应情况均加重。结论钴铬合金烤瓷冠较镍铬合金烤瓷冠具有较好的生物相容性,具有较好的临床效果。     

间充质干细胞条件培养基对HPV18型阳性人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的观察人脐带间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)对HPV18型阳性人子宫颈癌HeLa细胞(HPV18 HeLa细胞)凋亡相关基因的调控作用,以及对HPV18 HeLa细胞凋亡的影响。方法制备MSC-CM,设置空白组、低剂量组和高剂量组,配制相应浓度分别为0%、20%和60%的MSC-CM处理HPV18 HeLa细胞,使用CCK-8法、克隆形成实验检测细胞活力和克隆形成能力;磷脂结合蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法凋亡染色和流式细胞术检测细胞凋亡的变化;实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因mRNA表达量。结果与空白组相比,在低剂量组或高剂量组的MSC-CM作用下,HPV18 HeLa细胞的生长活性和克隆形成能力均降低,细胞凋亡率升高(P均<0.05),且高剂量组作用效果均比低剂量组明显(P均<0.05)。与空白组相比,HPV18 HeLa细胞在低剂量或高剂量组MSC-CM的作用下,HPV18 HeLa细胞中p53、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9、Bax的mRNA表达量升高,而B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的mRNA表达量降低(P均<0....     

沉默RAGE对人卵巢癌细胞株增殖、凋亡能力及周期分布的影响

目的 研究沉默晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycosylation end products,RAGE)对人卵巢癌细胞株增殖、凋亡能力及周期分布的影响.方法 人上皮性卵巢癌SKOV-3细胞经过慢病毒载体构建,分为空白组、过表达组和沉默组.进行细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期实验,We...     

超声辐照载羟基喜树碱微泡对肝癌SMMC-7721 细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的 研究超声辐照载羟基喜树碱微泡对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,并探讨其诱导细胞凋亡的分子机制.方法 SMMC-7721细胞随机分为6组,即对照组、空白脂质微泡+超声组、载羟基喜树碱微泡组、羟基喜树碱组、羟基喜树碱+超声组及载羟基喜树碱微泡+超声组.采用Annexin V-FITC/PI双染法和TUNEL法检测细胞凋亡状况;免疫细胞化学法检测Bel-2、Bax蛋白表达.结果 载羟基喜树碱微泡+超声组用Annexin V-FITC/PI检测细胞早期凋亡率为(12.18±1.38)%;TUNEL法显示染成棕黄色的凋亡细胞,细胞中晚期凋亡率为(34.25±1.83)%;免疫细胞化学法检测Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达升高,Bel-2/Bax比值明显下降.以上结果与其他组的检测结果相比,差异具有统计学意义.结论 超声辐照载羟基喜树碱微泡能明显诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,其机制可能与降低Bcl-2/Bax比值有关.     

大蒜素对LM-8细胞Bcl-2及Bax表达的影响

背景:有研究证实,大蒜素对LM-8细胞增殖及凋亡有影响.目的:观察大蒜素干预C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达,以及LM-8细胞的形态学变化与Bcl-2及Bax变化的关系.设计:随机分组,非盲法,细胞水平体外实验.单位:实验于2006-09/2007-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室完成.材料:实验所用C3H小鼠LM-8骨肉瘤细胞株购自解放军第四军医大学实验动物中心.大蒜素为武汉汇海公司产品,是从大蒜球茎中分离出的硫化物.Cell Counting Kit-8试剂购于上海同仁化学研究所,Bcl-2和Bax抗体及SP试剂盒购于福州迈新生物技术开发公司.方法:以含体积分数为0.1新生牛血清的1640完全培养基,培养LM-8细胞,制作细胞爬片.SP免疫细胞组织化学技术检测细胞爬片中Bcl-2和Bax蛋白表达;倒置显微镜下观察5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度大蒜素作用前后LM-8细胞形态变化;将LM-8细胞调整至7.5×107L-1接种于96孔板,用1.0,5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度的大蒜素处理细胞,设立不加任何处理因素的对照组及不含细胞和药物的培养基空白组,孵育24,48,72 h后取出培养板,加入CCK-8测定吸光度值,计算LM-8细胞生长抑制率:以5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度大蒜素干预LM-8细胞24,48,72 h,消化离心收集细胞,以流式细胞仪分析细胞凋亡率的变化.主要观察指标:LM-8细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达;LM-8细胞形态及增殖、凋亡情况.结果:①Bcl-2和Bax蛋白表达:大蒜素可以降低Bcl-2表达,增强Bax表达,经15.0mg/L大蒜素作用72h,Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率及Bcl-2/Bax表达与对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.01).②LM-8细胞的形态:经不同质量浓度大蒜素干预后均出现明显凋亡表现.③LM-8细胞的增殖:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的增殖,当大蒜素浓度从1.0 mg/L增加到15.0 mg/L,LM-8细胞72 h时生长抑制率由(23.87±3.26)%增至(58.32±5.38)%,在72 h其药物半数抑制率浓度是11.09 mg/L.④LM-8细胞的凋亡:5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度的大蒜素作用72 h后可诱导LM-8细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P＜0.05).结论:①大蒜素可抑制LM-8细胞增殖,该效应与大蒜素的浓度和时间有关.②大蒜素可诱导LM-8细胞凋亡,作用呈浓度依赖性.③大蒜素抑制LM-8细胞增殖和诱导LM-8细胞凋亡的机制可能与下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达有关.     

丝裂霉素C影响增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡

背景:丝裂霉素C已逐渐开始应用于治疗增生性瘢痕领域中,但针对丝裂霉素C通过细胞凋亡作用于增生性瘢痕分子机制报道很少.目的:探讨丝裂霉素C对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响.方法:应用2.5,12.5,50,100和200 mg/L 丝裂霉素C作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,采用流式细胞仪检测成纤维细胞的周期分布和凋亡情况;通过Western blot法检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达水平.结果与讨论:丝裂霉素C可使增生性瘢痕成纤维细胞的生长阻滞于G0/G1期,并且能够诱导增生性瘢痕成纤维细胞发生凋亡,有着明显的浓度依赖性.经2.5~200 mg/L丝裂霉素C作用24 h后,增生性瘢痕成纤维细胞中Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白表达降低(P < 0.05).说明丝裂霉素C可能通过增加增生性瘢痕成纤维细胞Bax表达,降低Bcl-2表达,促进成纤维细胞凋亡的增加.     

塞来昔布对戊四氮点燃小鼠脑神经细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:观察塞来昔布对戊四氮点燃小鼠癫癎发作及脑神经细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:C57BL/6小鼠30只随机分为对照组、模型组和给药组各10只,给药组予塞来昔布灌胃,对照组和模型组予生理盐水灌胃,模型组和给药组以戊四氮点燃法制备小鼠癫癎模型,通过行为学检测观察塞来昔布对小鼠癫癎发作的影响,免疫组织化学法测定塞来昔布对小鼠脑神经细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果:模型组小鼠脑组织Bcl-2和Bax蛋白阳性细胞数显著高于对照组(P0.01),Bcl-2/Bax比值显著低于对照组(P0.01);给药组Bax蛋白阳性细胞数显著低于模型组(P0.01),Bcl-2蛋白阳性细胞数及Bcl-2/Bax比值显著高于模型组(P0.01)。结论:塞来昔布能下调戊四氮点燃小鼠脑组织Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平,提高Bcl-2/Bax比值。     

三种比色法评价4种牙科金属材料对L-929细胞的毒性

背景：采用不同方法评价材料的细胞毒性可能会得出不同的实验结果。目的：采用3种比色法评价镍铬合金、钴铬合金、3铬13及纯钛等牙科金属材料对小鼠成纤维细胞（L-929细胞）的细胞毒性。方法：以镍铬合金、钴铬合金、3铬13及纯钛4种牙科金属材料的浸提液分别作用于体外培养的L-929细胞24,72h。以体积分数10％小牛血清＋高糖DMEM培养液培养的L-929细胞为阴性对照组,以0.7％丙烯酰胺＋体积分数10％小牛血清＋高糖DMEM培养液培养的L-929细胞为阳性对照组,分别采用MTT、CCK-8及结晶紫3种比色法检测上述材料的细胞毒性。结果与结论：①4种材料浸提液中培养的细胞形态正常,胞内结构清晰,随着培养时间延长细胞大量增殖,与阴性对照组细胞形态无明显差异。阳性对照组细胞数量明显减少,形态完整性受破坏,形成大量细胞碎片。②培养24h时,CCK-8比色法检测中钴铬合金组的细胞相对增殖率低于阴性对照组沪〈0．05）,MTT及结晶紫比色法检测中钴铬合金组的细胞相对增殖率与阴性对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）;培养72h时,MTT比色法检测中4种牙科金属材料组细胞相对增殖率低于阴性对照组（P〈0．01）,CCK-8及结晶紫比色法检测中4组的细胞相对增殖率与阴性对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）,但材料细胞毒性均为0—1级。表明上述4种牙科金属材料细胞毒性均在临床应用的允许范围内,具有良好的生物安全性。     

奥扎格雷钠对心肌缺血心肌细胞的抗凋亡作用

目的探讨奥扎格雷钠通过抑制缺血大鼠心肌细胞Bax蛋白的表达,调节Bcl-2／Bax水平,从而抑制大鼠缺血心肌细胞的凋亡。方法将健康的Wistar大鼠40只随机均分为5组,空白组,模型组,预防组,治疗组和联合硝酸甘油治疗组．2周后除空白组外其余各组制作心肌缺血模型,检测心肌细胞Bcl-2及Bax蛋白表达。结果心电图：各组造模成功后5分钟时心电图ST段及造模成功时心电图ST段比较,各组均有显著性差异（P〈0．05）。免疫组化结果：预防组中的Bcl-2和Bax与模型组、治疗组、联合治疗组中的比较有显著性差异（P〈0．05）。结论奥扎格雷钠可以减少心肌缺血大鼠中心肌细胞Bax蛋白的表达,调节Bcl-2／Bax水平。     

皮肤溃疡伤口中Bax和Bcl-2蛋白含量的变化及其与溃疡发生的关系

目的观察 Bax和 Bcl- 2蛋白在溃疡、溃疡边缘和正常皮肤组织中的表达特征及其对溃疡形成的影响 . 方法 24例被测标本中包括不同类型的溃疡组织 8例 , 其对应的溃疡边缘和正常皮肤组织各 8例 . 用常规病理技术和免疫组化方法确定这两种蛋白在溃疡组织和正常皮肤中的定位和表达量的变化规律 . 结果在正常皮肤组织中 , Bax蛋白的阳性颗粒较少 , 在表皮细胞内稍有表达 , 而 Bcl- 2蛋白则主要定位于表皮细胞和部分成纤维细胞中 . 在溃疡组织中 , Bax蛋白存在于表皮基底层细胞和部分成纤维细胞的胞浆中 , 而 Bcl- 2蛋白在表皮基底层细胞内有表达 . 从正常皮肤到溃疡组织 , Bcl- 2含量逐渐下降 , 而 Bax的蛋白表达呈升高趋势 . 结论在正常皮肤和溃疡组织中 , Bax和 Bcl- 2蛋白不同分布和表达变化规律显示 , Bcl- 2和 Bax两种蛋白可能与溃疡创面处细胞凋亡增加相关 , 从而导致伤口愈合迟缓和溃疡的发生 .