白内障晶状体上皮细胞中色素上皮细胞衍生因子的表达

目的:观察色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在人类白内障晶状体上皮细胞中的表达,以探讨PEDF在白内障发病机制中的作用。方法:白内障超声乳化手术中,实施前囊膜环形撕囊时摘取晶状体前囊连同晶状体上皮细胞,采用免疫组化的方法检测PEDF和VEGF在晶状体上皮细胞中的表达。结果:老年性白内障晶状体上皮细胞虽然PEDF存在高强度表达,与VEGF相比,这种表达还是较弱。结论:老年性白内障晶状体上皮细胞存在PEDF和VEGF的表达,而且二者之间存在着一定的相互作用,由此推断PEDF和VEGF在老年性白内障的发病机制中处于重要的作用。     

核因子κB在年龄相关性白内障晶状体前囊膜的表达

目的研究核因子κB（NF-κB）在正常人、年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞中表达的差异,探讨NF-κB在年龄相关性白内障发病机制中的作用。方法收集白内障术中60例60眼年龄相关性白内障的前囊膜组织（白内障组）,选取正常供体5例10眼的透明晶状体前囊膜组织作为正常对照组。取白内障组30眼标本和正常对照组5眼标本用于免疫组织化学法检测NF-κBp65蛋白在晶状体前囊膜上皮细胞中的表达;另外白内障组30例标本及正常对照组的5例标本采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测NF-κBp65mRNA在晶状体前囊膜上皮细胞中的表达。结果正常晶状体前囊膜上皮细胞细胞质和细胞核中可见NF-κBp65蛋白的弱阳性表达,以细胞质为主;年龄相关性白内障晶状体前囊膜上皮细胞的细胞质和细胞核中NF-κBp65蛋白呈强阳性表达。白内障组NF-κBp65吸光度（A）值为0.1658±0.022,正常对照组为0.2889±0.043,差异有统计学意义（t=6.2109,P〈0.05）。白内障组NF-κBp65mRNA表达量为1.454±0.081,正常对照组为0.951±0.075,差异有统计学意义（t=12.9683,P〈0.05）。结论 NF-κB表达水平的升高与年龄相关性白内障的发病密切相关,其表达异常可能参与年龄相关性白内障的发生发展。     

晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响研究

目的 :为研究晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响。方法 :对 14例老年性白内障晶状体前囊上皮细胞进行角质蛋白 -8、波形纤维蛋白和纤维粘连蛋白表达的免疫组化研究。结果 :皮质性白内障晶状体上皮的波形纤维蛋白表达明显强于核性白内障 (P <0 0 5 ) ;角质蛋白 -8在皮质性白内障晶状体上皮的表达比核性白内障弱 ((P <0 0 1) ;纤维粘连蛋白在皮质性白内障晶状体上皮的表达明显强于核性白内障 ,而在正常晶状体上皮不表达。结论 :晶状体上皮细胞具有转分化为成纤维样细胞的双向化潜能。晶状体上皮获得转分化能力后而失去原来的细胞学特性。在老年皮质性白内障中 ,晶状体上皮细胞转分化成为成纤维样细胞 ,伴随波形纤维蛋白的过度表达和角质蛋白表达下降。同时合成包括纤维粘连蛋白在内的细胞外基质增多 ,而纤维粘连蛋白能促进晶状体上皮的增殖、迁移及粘附 ,因而晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成及后囊混浊的形成发挥重要作用。     

波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达

目的观察波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的变化.方法用卵白素-生物素过氧化物酶法对22例老年性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞进行波形纤维蛋白染色,采用包埋前免疫酶电镜技术处理6个晶状体前囊膜标本,并观察其超微结构;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westemnblot法分析4个晶状体表层组织(前囊膜、上皮细胞和表层皮质)中的波形纤维蛋白.结果老年性白内障晶状体上皮细胞的波形纤维蛋白表达减弱,与对照组比较差异有显著性(t=2.0948,P<     

骨桥蛋白及其受体CD44在白内障及正常晶状体上皮细胞中的表达

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及其受体CD44在白内障患者及正常晶状体上皮细胞中的表达规律及意义。方法采用免疫组织化学法检测22例前囊下白内障1、7例核性白内障、14例皮质性白内障患者和11例正常晶状体上皮细胞中OPN和CD44的表达,并进行阳性细胞计数和各组间比较。结果OPN与CD44在前囊下白内障晶状体上皮细胞中的阳性表达率为56.48%±4.14%和45.55%±5.52%,在皮质性白内障为4.36%±1.12%和3.05%±1.02%,在核性白内障和正常晶状体中表达为阴性。前囊下白内障组中OPN及CD44的阳性表达率与核性白内障、皮质性白内障及正常人晶状体比较,差异有显著性(P<0.01),经Spearman等级相关分析,前囊下白内障患者晶状体上皮细胞中OPN和CD44的阳性表达率呈正相关(r=0.866)。结论OPN及CD44在前囊下白内障及皮质性白内障晶状体上皮细胞中均表达为阳性,在前囊下白内障晶状体上皮细胞中表达明显增强,两者在前囊下白内障的形成过程中可能起重要作用。     

年龄相关性白内障晶状体前囊膜中核因子κB的免疫组化研究

目的:研究核因子κB蛋白在正常人、年龄相关性白内障的晶状体前囊膜上皮细胞中表达的差异,探讨NF-kB在年龄相关性白内障发病机制中的作用.方法:显微镜下随机收集年龄相关性白内障前囊膜组织30例为病例组及透明晶状体前囊膜组织5例为正常对照组,采用免疫组织化学方法检测NF-κB P65蛋白的表达.结果:正常晶状体前囊膜上皮细胞胞质和胞核中可见NF-κBP65蛋白阳性表达,以胞质为主;年龄相关性白内障晶状体前囊膜上皮细胞胞质和胞核染色呈阳性且以胞核为主.图像分析表明病例组NF-κB P65平均吸光度值高于对照组,差异有统计学意义(t=6.2109,P<0.05).结论:NF-κB表达水平升高与年龄相关性白内障发病密切相关,其表达异常可能参与年龄相关性白内障的发生与发展.     

p53和 bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的：研究p53,bcl-2基因在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达，探讨p53,bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡中的作用。方法：应用免疫组织化学方法，对30例老年性白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞进行p53,bcl-2基因蛋白表达的检测，计算p53,bcl-2基因蛋白表达阳性细胞百分率，结果：p53在正常晶状体上皮细胞中无蛋白表达，在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％－19．1％，bcl-2在2组中均无蛋白表达，结论：p53在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白高表达，p53可能促进了老年性白内障中晶状体上皮细胞的凋亡。     

晶体体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响研究

目的：为研究晶状体上皮细胞转化对老年性白内障形成的影响。方法：对14例老年性白内障晶状前囊上皮细胞进行角质蛋白－8、波形纤维蛋白和纤维粘连蛋白表达的免疫组化研究，结果：皮质性白内障晶状体上皮的波形纤维蛋白表达明显强于核性白内障（P＜0．05），角质蛋白－8在皮质性白内障晶状体上皮的表达比核性白内障弱（P＜0．01）；纤维粘连蛋白在皮质性白内障晶状体上皮的表达明显强于核性白内障，而在正常晶状体上皮不表达，结论：晶状体上皮细胞具有转分化为成纤维样细胞的双向化潜能，晶状体上皮获转分化能力后而失去原来的细胞学特性，在老年皮质性白内障中，晶状体上皮细胞转化成为纤维样细胞，伴随波形纤维蛋白的过度表达和角质蛋白表达下降，同时合成包括纤维粘连蛋白在内的细胞外基质增多，而纤维粘连蛋白能促进晶状体上皮的增殖，迁移及粘附，因而晶状体上皮细胞转化分对老年性白内障表成及后囊混浊的形成发挥重要作用。     

老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变

目的 观察正常人，老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构，探讨细胞凋亡在白内障发生中的作用。方法 收集正常人、老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体前囊膜送透射电镜扫描，取老年性白内障和糖尿病性白内障前囊膜各15例，用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法，检测晶状体上皮细胞的凋亡细胞。结果 老年性和糖尿病性白内障晶状体上细胞的超微结构在形态上为扁平状，胞浆出现空泡变性，胞核出现固缩，染色质边聚，浓缩等改变。糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的胞浆空泡变性更加严重。在光镜下老年性和糖尿病性白内障的晶状体上皮均有凋亡细胞。结论 老年性白内障和糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮的细胞凋亡密切相关。     

晚期糖基化终末产物受体在年龄相关性白内障及透明晶状体上皮细胞的表达

目的观察晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)在年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)及正常透明晶状体上皮细胞中的表达,初步探讨RAGE在ARC发病中的作用。方法收集36例ARC患者以及11例正常供体晶状体前囊膜,采用免疫组织化学方法检测RAGE的表达,分析不同混浊程度核性及皮质性白内障晶状体上皮细胞RAGE表达差异。结果 RAGE在ARC晶状体上皮细胞的表达为:强阳性3例,阳性13例,弱阳性4例,阳性率55.56%;而在正常透明晶状体上皮细胞的表达为:弱阳性1例,阴性10例,阳性率9.09%,差异有统计学意义(P<0.05)。RAGE在不同程度的核性白内障晶状体上皮细胞的阳性表达分别为:N11例、N28例、N33例;阳性表达差异无统计学意义(P>0.05);在不同程度的皮质性白内障晶状体上皮细胞的阳性表达分别为:C10例,C21例,C32例,C44例,C51例;阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RAGE在ARC晶状体上皮细胞中的高表达说明RAGE和AGE可能参与ARC的发生发展。     

老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及相关基因蛋白的表达

目的 探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法透射电镜下观察老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构；Tunel法检测凋亡细胞百分率；并对其晶状体上皮细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳；免疫组化法检测P53、bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达。结果 透射电镜下发现老年性白内障晶状体上皮细胞中有凋亡细胞；凋亡细胞百分率为8．4％～37．8％，琼脂糖凝胶电泳出现梯状条带；P53在老年白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％～19．1％，bcl-2无蛋白表达。结论 老年性白内障的发生可能与其晶状体上皮细胞凋亡有关。     

老年性白内障晶状体上皮细胞超微结构观察

目的 研究老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡关系。方法 用透射电镜对20例老年白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞的超微结构进行观察,拍照。结果 老年白内障组晶状体上皮细胞中发现了典型的凋亡小体,正常对照组未见凋亡细胞。结论 老年性白内障的发生与晶体上皮细胞的凋亡有关。     

人及小鼠白内障晶状体上皮细胞凋亡的超微结构

目的 探讨人老年性白内障及小鼠先天性白内障与其晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法 用透射电镜观察４例老年性白内障患者及２例先天性白内障小鼠晶状体上皮细胞凋亡的超微结构,并分别与同类正常晶状体上皮细胞超微结构进行比较。结果 老年性白内障患者及先天性白内障小鼠晶状体上皮细胞中均可见凋亡细胞,而正常晶状体未见凋亡细胞。结论 人老年性白内障及小鼠先天性白内障的发生均与其晶体上皮细胞的凋亡有关。     

Accelerated cataract formation and reduced lens epithelial water permeability in aquaporin-1-deficient mice

PURPOSE: To investigate the involvement of aquaporin (AQP)-1 in lens epithelial cell water permeability and maintenance of lens transparency in experimental models of cataract formation. METHODS: Comparative studies were performed on wild-type versus AQP1-null mice. Osmotic water permeability was measured in calcein-stained epithelial cells in intact lenses from fluorescence changes in response to osmotic gradients. Lens water content was measured by gravimetry using kerosene-bromobenzene density gradients, and from wet/dry weight measurements. Lens transparency was measured by contrast analysis of transmitted grid images. Cataract formation was induced in vitro by incubation in high-glucose solutions and in vivo by acetaminophen toxicity. RESULTS: Immunofluorescence showed AQP1 expression in wild-type mice in epithelial cells covering the anterior surface of the lens. AQP1 deletion did not alter baseline lens morphology or transparency, though basal water content was approximately 3% greater (P < 0.001). AQP1 deficiency reduced plasma membrane water permeability in lens epithelium by 2.8 +/- 0.3-fold (P < 0.0001). Loss of lens transparency was accelerated by more than 50-fold in AQP1-null lenses bathed in a 55-mM glucose solution for 18 hours. At 4 hours after acetaminophen administration in 3-methylcholantrene-treated mice, lens opacification was seen in none of the six wild-type mice and in six of six AQP1-null mice. CONCLUSIONS: Lens AQP1 facilitates the maintenance of transparency and opposes cataract formation.     

Downregulation of gene expression in the ageing lens: a possible contributory factor in senile cataract

PURPOSE: To study the molecular characteristics of lens epithelial cells from patients with senile cataract by cDNA microarray technique. METHODS: Lens epithelial cells adhering to anterior capsules taken during cataract surgery collected from 108 patients, aged 56-92 years (senile cataract group), were pooled. Pooled epithelial cells of normal, noncataractous lenses from one patient with ocular trauma, one patient with lens subluxation, and 25 cadaveric eyes, all under the age of 55 years, served as a control. Total RNA was extracted by conventional methods from the two groups of cells, and a fluorescent probe was prepared for each group. The probes were hybridized on 9700 known human cDNA clones. Hybridized clones were analysed using a scanning laser and the results were processed by GEMTools (Incyte Genomics) software. RESULTS: A total of 1827 clones hybridized with the two probes. Of these, 400 showed differences of more than two-fold in gene expression between the two probes. Relative to controls, gene expression in the senile cataract lenses was upregulated in 318 clones and downregulated in 82. Three genes-filensin, inwardly rectifying potassium channel (IRPC), and pigment epithelium-derived factor (PEDF) were strongly downregulated (by 41.3-, 6.8-, and 5.9-fold, respectively) in senile cataract. CONCLUSIONS: Cataractogenesis is associated with numerous changes in the genetic profile of the lens epithelial cells. Since filensin, IRPC, and PEDF genes are known to have important roles in the physiology and morphology of the transparent lens, substantial downregulation of their expression might contribute to the formation of senile cataract.     

老年性白内障的氧化损伤与酶组织化学观察

目的 研究老年性白内障晶状体上皮酶活性变化和氧化损伤对培养的牛晶状体上皮细胞酶活性的影响。方法 １．取老年性白内障晶状体和正常透明晶状体进行酶组织化学染色,观察ＳＤＨ,ＬＤＨ,Ｇ６ＰＤ,ＡＴＰａｓｅ活性的变化。２．观察培养牛晶状体上皮细胞氧化损伤后及维生素Ｃ治疗后ＳＤＨ,ＬＤＨ,Ｇ６ＰＤ活性的改变。结果 １．老年性白内障ＳＤＨ,ＬＤＨ,Ｇ６ＰＤ,ＡＴＰａｓｅ活性降低。２．培养的牛晶状体上皮细胞经过氧化损伤后ＳＤＨ,ＬＤＨ,Ｇ６ＰＤ活性显著降低,维生素Ｃ可使酶活性显著提高。结论 氧化损伤使能量产生减少,可能是白内障发生的原因之一,维生素Ｃ对氧化损伤具有部分保护作用。     

老年性白内障的氧化損傷與酶組織化學觀察

目的研究老年性白内障晶狀體上皮酶活性變化和氧化損傷對培養的牛晶狀體上皮細胞酶活性的影響.方法1取老年性白内障晶狀體和正常透明晶狀體進行酶組織化學染色,觀察SDH、LDH、G6PD、ATPase活性的變化.2觀察培養牛晶狀體上皮細胞氧化損傷后及維生素C治療后SDH、LDH、G6PD活性的改變. 結果1老年性白内障SDH、LDH、G6PD、ATPase活性降低.2培養的牛晶狀體上皮細胞經過氧化損傷后SDH、LDH、G6PD活性顯著降低,維生素C可使酶活性顯著提高.結論氧化損傷使能量産生减少,可能是白内障發生的原因之一,維生素C對氧化損傷具有部分保護作用.     

老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变

目的 观察正常人,老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨细胞凋亡在白内障发生中的作用。方法 收集正常人、老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体前囊膜送透射电镜扫描,取老年性白内障和糖尿病性白内障前囊膜各15例,用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法,检测晶状体上皮的凋亡细胞。结果 老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构在形态上为扁平状,胞浆出现空泡变性,胞核出现固缩,染色质边聚,浓缩等改变。糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的胞浆空泡变性更加严重。在光镜下老年性和糖尿病性白内障的晶状体上皮均有凋亡细胞。结论 老年性白内障和糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮的细胞凋亡密切相关。     

Lens Epithelial Cell Proliferation and Cell Density in Human Age—relat

Purpose: To discuss the potential effect of the lens epithelial cell proliferation inage-related cataract.Methods: In vitro cell proliferation was assayed by MTT method to evaluate the lensepithelial cell density, index, and proliferation capacity in normal lens and all kinds ofage-related cataract. Capsulotomy specimens from all kinds of patients who underwentcataract phacoemulsification extraction surgery were compared with the lens epithelialspecimens from non-cataract lenses of Eye Bank eyes.Results:Lens epithelial cell density of central anterior capsule(LECD) in female normallens was higher than that in male, LECD in nuclear cataract (> NⅢ) was higher thanthat in normal lens, but in the mature cortical cataract, LECD was lower. Mitotic indexof three kinds of age-related cataracts in vivo had no statistical difference, neither didcell proliferation capacity of cultivated cells in vitro.Conclusion: The individual difference of lens epithelial cell density and proliferationcapacity in vivo may be an