血液流变检测室内质量控制方案研究和应用

目的 制备全血质控物并应用于血液流变检测室内质量控制,建立血流变质控方案.方法 静脉采血,与输血用1号抗凝液（简称抗凝液）8：1混合;每100mL全血加入1640液25mL,混匀后无菌分装全无添加物灭菌真空管（简称真空管）,每管3mL,置2℃～4℃保存.调节血浆量制备高,中,低值制控物.粘度计应用清洁程序并通过本底实验后,分别重复测定10次3种全血质控物150s-1,60s-1,和10s-1全血粘度（表观）和血浆粘度及红细胞压积（Hct）和红细胞沉降率（ESR）,计算管间精度;测定正常人肝素抗凝血全血粘度,与中值质控物全血粘度曲线比较拟合度;分别以不同值全血质控液作监测,第1月为中值,其后为高值,第三个低值,测定以上6项数据,结果作Westgard多规则质控图.统计变异系数（CV%）和第1周与最后1周数据t检验.每周测质控液的全血和血浆血红蛋白（简称Hb）,计算溶血百分率.结果 高、中、低值全血质控液重复测各项目管间CV%均〈5%;每月测定值CV%均〈5%;每月每1周与最后1周数据t检验均无显著差异（P〉0.05）;溶血率〈1%;室内Westgard多规则质控结果满意.结论 该法制备全血质控物成本低、简便,可保存3个月,可进行高、中、低值监测,配合应用仪器清洁程序和本底试验,应用于血流变室内质控结果表明该方案切实可行.     

糖化血红蛋白液体质控物的制备及稳定性观察

目的 制备糖化血红蛋白(HbA1c)液体质控物.方法 收集每次标本测试完后剩余的新鲜乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝全血(HbA1c<6.0%、HbA1c>11.0%),用复合保护剂制备HbA1c检测用液体质控物,用高压液相硼酸盐亲和层析法和高压液相法观察其在室温(18～25 ℃)、4～8 ℃、-20 ℃时的稳定性.结果 用复合保护剂制备HbA1c检测用液体质控物具有与人全血性状相近,不需复溶,储存时间长,在室温(18～25℃)可保存1个月,在4～8 ℃至少可保存6个月、在-20 ℃的条件下至少可保存27个月.结论 该液体质控物不需复溶、稳定时间长.     

HLC-723G8分析仪的糖化血红蛋白质控品的研制与应用

目的用溶血法研制适合HLC-723G8分析仪的糖化血红蛋白(HbA1c)质控品,并评价其应用效果。方法选择临床标本2份,研制溶血比例,按照制备程序,保存于3种温度,评价自制质控品的稳定性及不同温度下的变化特点。结果自制质控品的溶血比例在80∶1～500∶1,中、高值累积10个月的不精密度分别为1.21%、0.83%,室温颜色变化最快,-20℃保存稳定性300d。结论自制HbA1c质控品按照溶血比例,可使HbA1c水平在HLC-723G8分析仪上顺利被检测到,质控品的稳定性符合国际对HbA1c室内不精密度2%的性能要求,值得临床参考使用。     

游离血红蛋白室内质控物的制备及应用

目的 制备游离血红蛋白(FHb)室内质控物,并对其性能进行评价。方法 ①选取5份已知血红蛋白(Hb)浓度的正常人类全血,用蒸馏水分别以1:500,1:1 000,1:2 000,1:4 000的比例进行稀释,充分混匀后配制成20份FHb溶液,检测其FHb浓度,并与其理论浓度进行比较。②选择高值、低值溶液各1份,作为日常室内质控物,混匀分装-20℃保存,常规条件下连续检测20天,计算两组的(-overx),s和CV值,绘制Levey-Jennings质控图; 之后每周测定一次,将数据依次标记在质控图上,直至更换试剂批号; 计算高值、低值两种质控物整个检测周期内的总体(-overx),s和CV值。结果 ①该20份标本的FHb浓度理论值和实测值((-overx)±s)分别为125.44±93.04 mg/L和125.22±93.08 mg/L,差异无统计学意义(t=0.706,P＞0.05)。②高值、低值质控物连续20天检测结果((-overx)±s)分别为303.55±3.70 mg/L和69.29±1.88 mg/L,CV值分别为1.22%和2.68%; 高值、低值质控物整个检测周期内结果均未失控,总体((-overx)±s)分别为302.56±3.99 mg/L和69.04±1.88 mg/L,CV值分别为1.32%和2.71%。结论 FHb室内质控物制备过程简单,质量可靠,稳定性好,适合在血站和临床实验室中应用和推广。     

自制尿液微量清蛋白质控品及其性能评价

目的应用乳胶增强免疫比浊法检测尿液微量清蛋白(UmALB)时,国内缺乏稳定的质控物,而进口质控物价格昂贵。本文探讨了自制尿液微量清蛋白质控品作为该法测定尿液微量清蛋白室内质控品的可行性。方法用试剂盒所附的标准液把两份尿液调节为低值和高值的两个水平尿液微量清蛋白质控品,防腐、分装、-20℃保存。使用RANDOX公司定值质控品做好室内质控,对尿液微量清蛋白质控品进行性能评价。结果两个水平的尿液微量清蛋白质控品的批内不精密度均小于2.5%,天间不精密度均小于3.5%;-20℃保存稳定期至少5个月(P>0.01);瓶间无显著性差异。结论 -20℃保存的低值、高值两个水平自制尿液微量清蛋白质控品能够符合室内质控品要求。     

降钙素原乳胶增强免疫比浊法与免疫荧光法的相关性

目的探讨乳胶增强免疫比浊法与免疫荧光法定量检测降钙素原(PCT)的分析性能。方法乳胶增强免疫比浊法采用美国贝克曼库尔特公司AU5800全自动生化分析仪,免疫荧光法采用mini VIDAS全自动荧光免疫分析仪,检测相应配套高值、低值质控品,计算日内及日间的精密度,检测相应试剂非同批号定值标准品的偏倚程度,对2组检测方法的相关性进行分析评价。结果乳胶增强免疫比浊法检测PCT高值质控品日内精密度及日间精密度分别为2.89%、3.84%,低值质控品日内精密度及日间精密度分别为1.81%、3.77%;免疫荧光法检测PCT高值质控品日内精密度及日间精密度分别为2.42%、3.83%,低值质控品分别为2.03%、3.43%;乳胶增强免疫比浊法检测PCT高值定值标准品与低值定值标准品的偏倚分别为3.30%、-2.49%,免疫荧光法检测PCT高值定值标准品与低值定值标准品的偏倚分别为2.88%、3.63%;乳胶增强免疫比浊法在检测范围内线性良好(Y=1.028 1 X-0.289 4,R2=0.994 7),免疫荧光法在检测范围内线性良好(Y=1.079 8 X+0.179 4,R2=0.992 8),2种方法相关性良好(Y=0.357 2 X+0.284 5,R2=0.994 2)。结论乳胶增强免疫比浊法检测PCT性能良好,灵敏度高,操作简便,且由于其成本低,更值得临床推广应用。     

离子交换高效液相层析法与酶化学法测定糖化血红蛋白的比对分析

目的对离子交换高效液相层析（IE-HPLC）法与酶化学法测定糖化血红蛋白（HbA1c）进行方法学比较。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）有关文件对IE-HPLC法与酶化学法测定HbA1c进行相关性比较、精密度评价。结果 IE-HPLC法与酶化学法测定HbA1c相关性良好（Y=0.962 2X＋0.045,r=0.994 0,P〉0.05）,预期相对偏差在低值（4.0%）时为2.66%;在中值（6.5%）时为3.09%;在高值（16.0%）时为3.50%。IE-HPLC法批内变异系数（CV）为1.23%~2.17%,批间CV为1.87%~2.99%;酶化学法批内CV为0.93%~1.72%,批间CV为1.65%~2.71%。结论 IE-HPLC法与酶化学法测定HbA1c的相关性、精密度均很好,具有可比性。酶化学法测定HbA1c可用于自动生化分析仪,适合检验科使用。     

尿清蛋白质控品的研制及室间质评的调查

目的制备尿清蛋白室内质控品,并进行室间质评调查。方法选取患者尿液样本,离心取上清液,加入乙二醇作为稳定剂,叠氮钠作为防腐剂,分装保存,观察稳定性和瓶间差,并进行室间质评调查。结果自制的尿清蛋白质控品除4℃保存的低值质控品外,CV均小于10%,有较好的稳定性,尤其在前3个月;此外,自制质控品的瓶间差较小,高值质控品瓶间差仅0.67%和0.81%,同时质控品的保存温度对瓶间差的影响很小。在全市的室间质评调查中低值质控品CV为63.3%(29.1%～70.3%);高值质控品CV为20.5%(15.9%～22.3%)。结论研制的尿清蛋白质控品的稳定性较好,易于制备,可应用于临床实验室的室内质控和室间质评。     

自制糖化血红蛋白质控品及其性能评价

目的探讨自制溶血液作为乳胶增强免疫比浊法室内质控品的可行性。方法选择糖化血红蛋白(HbAlc)值分别为低值和高值的两个水平肝素抗凝血各1份,按试剂说明书,配制成测定用溶血液,分装、-20℃保存。使用Roche公司质控品做好室内质控,对溶血液进行性能评价。结果两个水平的溶血液的批内不精密度均小于2.5%,批内天间不精密度均小于5%;-20℃保存稳定期可达3个月(P>0.05),瓶间差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制两个水平值的糖化血红蛋白质控品是可行的,能够满足实验室室内质控的要求。     

自制他克莫司室内质控品的制备及临床应用研究

目的完善他克莫司（FK506）室内质控品水平,弥补商用质控品监测盲区。方法观察1年内FK506检测结果,评估自制低值质控品用于临床的可行性;运用临床患者标本自制低值室内质控品（ZCON—L）和自制中值室内质控品（ZCON．M）,检测其日内、日间相对标准差（RSD％）,并与低值商用质控品（Leve11）、中值商用质控品（Leve12）比较,并绘制室内质控图;将ZCON—M和Leve12做统计学分析,评估自制质控品与商用质控品是否有差异;将ZCON—L、ZCON—M分别放于4、25和37℃环境内连续检测7d,观察不同温度环境对其影响;经无菌分装后的自制质控品置于-30℃保存,每周取1支复融后随日常工作检测,检测完毕后置4℃保存,经10个月连续检测,观察其稳定性。结果1年内9975人次的FK506检测中,约有28．4％处于商用质控品监测盲区;ZCON—L、ZCON—M的日内RSD分别为4．5％、5．3％,13问RSD分别为7．06％、5．37％,符合ARCHITECTi1000全自动免疫分析仪的性能指标及《中国药典》生物标本分析方法RSD〈15％的要求;ZCON—L、ZCON—M与Leve11、Leve12的相关性较好（r2=0．8352、0．8185）,并且在质控图中走势-致;ZCON—M与Leve12经t检验,二者之间差异无统计学意义（P〉0．05）;4、25和37℃环境温度在7d内对自制质控品影响较小;经连续10个月观察,ZCON—L、ZCON—M总RSD分别为7．56％、4．97％。结论自制FK506室内质控品稳定性好,与商用质控品无差异,与商用质控品联合应用于临床,可弥补商用质控的监测盲区,完善室内质量控制水平。     

自制C肽质控品及其性能评价

目的 应用化学发光法检测血液C肽时,实验室缺乏相应的质控品。探讨自制C肽混合血清质控品作为该法测定C肽室内质控品的可行性。方法 从糖尿病患者和健康体检血清中分别收集C肽低值血清(浓度在1.20 ng/ml左右)和高值血清(浓度在12.00 ng/ml左右),排除溶血、黄疸及脂浊血清,防止细菌污染,乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒指标均为阴性,然后分别进行混合、防腐、分装,-20℃保存。使用西门子公司化学发光C肽试剂盒进行测定,对自制C肽混合血清质控品进行性能评价。结果 低值、高值两个水平的血清C肽质控品的批内不精密度分别是4.46%和4.15%; 天间不精密度分别是6.00%,5.56%; -20℃保存稳定期至少6个月; 经单因素方差分析,每个月之间相比,低值和高值的F值分别是0.665,0.602,P值分别是0.471,0.568,均>0.05,差异无统计学意义; 瓶间无显著性差异。结论 -20℃保存的低值和高值两个水平自制C肽混合血清质控品能够符合室内质控品要求。     

自制糖化血红蛋白质控物的实验探讨

目的 自制糖化血红蛋白质控物,用于全自动生化分析仪测定糖化血红蛋白的内部质量控制,并评价其稳定性.方法 采集混合新鲜健康人全血,灭活,加入叠氮钠防腐,分装,低温保存.连续5个月在奥林巴斯AU5400生化分析仪上分析质控品的HbA1c的结果及其标准差和CV.结果 贮存于-70 ℃自制的糖化血红蛋白的质控品复溶后,在奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪上所测得的HbA1c值5个月均值都很稳定,每个月的CV值都小于5%,各个月的检测结果对比差异无统计学意义(P>0.05).这5个月的总的HbA1c值变异低于5%.结论 自制糖化血红蛋白质控物基本上符合临床使用的要求,是良好的室内质量监测的质控品.     

自制糖化血红蛋白质控品及其临床应用

目的 利用血液标本制备低、中、高3个浓度水平糖化血红蛋白A1c(HbA1c)质控品。方法 收集健康体检者静脉血标本，离心去除血浆后的红细胞经洗涤后加入0.01 mol/L pH 6.8磷酸盐缓冲液溶解红细胞，在血红蛋白液中加入终浓度555.6 mmol/L葡萄糖，37℃水浴48 h,当HbA1c达到预期值后，4℃透析24 h去除葡萄糖。异常水平质控品(水平2、水平3)分别用水平1与37℃温育生成的高值HbA1c混合而成。结果 葡萄糖浓度≤55.5 mmol/L时，37℃温育24～72 h, HbA1c几乎没有变化；葡萄糖终浓度为555.6 mmol/L,温育48 h即可达到预期值(13.0%～16.0%)。-20℃冰冻保存的质控品，开瓶复融后至少稳定14 d,瓶间均匀性CV均<2.0%,反复冻融8次对结果无影响，-20℃冰冻保存1年结果稳定。结论 采用健康体检者静脉血标本制备HbA1c质控品，稳定性良好、标本易得、方法简单，便于推广使用。     

QuanTscopics尿液有形成分质控液用于Cobio XS型尿液有形成分分析仪日常质控稳定性研究

目的了解Quan Tscopics尿液有形成分质控液开封分装后用于Cobio XS型尿液有形成分分析仪的稳定性。方法取1瓶Quan Tscopics尿液有形成分质控液分装于25支带有封盖的试管中,存放于2~8℃。每天取1支分装质控品检测。质控项目为白细胞(WBC)和红细胞(RBC)。取同批次未分装质控品同时检测作为对照,记录检测结果。结果 Quan Tscopics尿液有形成分质控液所有检测结果均在靶值范围内。分装后的高、低值WBC及低值RBC的变异系数(CV)均比未分装结果高20%~30%。分装的高值质控品的5 d平均值趋势分析未见明显变化。未分装的低值质控品在20 d后(有效期为24个月)有较明显的升高趋势。结论 Quan Tscopics尿液有形成分质控液稳定性良好,可用于Cobio XS型尿液有形成分分析仪。未分装的质控品虽个别项目后期检测结果有所升高,但在可接受范围内,不影响使用。不建议将其分装使用。     

果糖氨基酸氧化酶的原核表达及在糖化血红蛋白检测中的初步应用

摘要：目的：原核表达果糖氨基酸氧化酶（FAOX）,建立检测糖化血红蛋白A1c（HbA1c）的酶法并作初步评价。 方法：构建重组质粒pET32a(+)/FAOX,转化大肠埃希菌Rosetta(DE3),获得重组FAOX;以糖基化六肽为底物检测酶活性;初步建立检测HbA1c的酶法并进行方法学评价。 结果：重组FAOX在Rosetta(DE3)中高效表达,SDS-PAGE电泳分析显示其相对分子质量（Mr）约65 000;酶比活性为22 U/mg;建立的检测HbA1c酶法的批内、批间、日间CV均<5%;低值（5.1%）和高值（15.8%）HbA1c的回收率分别为98.1%和98.9%;总胆红素(＜220 μmol/L）、三酰甘油(＜10.8 mmol/L）和维生素C(＜500 mg/L）对酶法检测HbA1c无影响;与HPLC法和HA-8160型全自动糖化血红蛋白仪测定结果进行比较,相关系数分别为0.977和0.993。 结论：FAOX可在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中高效表达,用其建立的检测HbA1c的酶法可满足临床对HbA1c测定的要求。     

应用CLSI EP5-A2文件评价ADAMSTM A1c HA-8160全自动糖化血红蛋白仪的精密度

目的：对 HA-8160全自动糖化血红蛋白仪进行精密度性能评价。方法按照 CLSI EP5-A2文件要求,利用高值和正常两水平质控品对 HA-8160全自动糖化血红蛋白仪测定糖化血红蛋白（HbA1c）项目的精密度进行评价。结果HA-8160全自动糖化血红蛋白仪测定糖化血红蛋白（HbA1c）项目高值和正常两水平的批内精密度变异系数分别为0．97％和1．45％;批间精密度变异系数分别为0．62％和0．34％;日间精密度变异系数分别为0．63％和0．56％;总精密度变异系数分别为1．31％和1．59％。结论 HA-8160全自动糖化血红蛋白仪测定HbA1C 的精密度能够满足临床检测要求。     

自制尿液视黄醇结合蛋白质控品及其性能评价

目的 探讨胶乳增强免疫比浊法检测尿液视黄醇结合蛋白(RBP)室内质控品的制作及其性能评价。方法 分别收集肾病患者和体检健康人群的尿液标本,3 500r/min离心5min去除沉淀物,分别调节尿液RBP水平,体检健康人群的尿液为低值,肾病患者尿液为高值;然后防腐、分装、-20℃保存。使用尿液RBP商品试剂盒,应用胶乳增强免疫比浊法检测尿液RBP,分别进行批内和批间精密度检测,然后连续5个月对高值和低值的自制质控品每天各检测1次。数据处理使用SPSS13.0统计软件。最后对自制的尿RBP质控品进行性能评价。结果 两个水平的尿液RBP质控品的批内不精密度均小于5.0%,批间不精密度均小于6.0%;-20℃保存稳定期至少5个月,5个月间不精密度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 自制高低两个水平尿液RBP质控品能够满足室内质控品使用要求,对完善室内质控有重要临床价值。     

自制糖化血红蛋白质控品及其临床应用

摘要:目的利用 血液标本制备低、中、高3个浓度水平糖化血红蛋白A1c(HbA1c)质控品。方法收集健康体检者 静脉血标本,离心去除血浆后的红细胞经洗涤后加入0.01mol/LpH6.8磷酸盐缓冲液溶解红细胞，在血红蛋白液中加入终浓度555.6 mmol/L葡萄糖,37℃水浴48h,当HbAlc 达到预期值后,4℃透析24h去除葡萄糖。异常水平质控品(水平2、水平3)分别用水平1与37 C温育生成的高值HbA1c混合而成。结果葡 萄糖浓度≤55.5 mmol/L时,37℃温育24~72 h,HbA1c几乎没有 变化;葡萄糖终浓度为555.6 mmol/L,温育48 h即可达到预期值(13.0%~ 16.0%)。-20℃冰冻保存的质控品,开瓶复融后至少稳定14d,瓶间均匀性CV均<2.0%，反复冻融8次对结果无影响,-20℃冰冻保存1年结果稳定。结论采用健康体检者 静脉血标本制备HbAle质控品,稳定性良好、标本易得、方法简单,便于推广使用。     

2008至2009年度上海市糖化血红蛋白项目室间质评结果分析

目的分析上海市2008~2009年度糖化血红蛋白（HbA1c）项目室间质评结果,为提高HbA1c检测质量提供依据。方法收集2008~2009年参加上海市临床检验中心HbA1c室间质评医院的4次调查结果,对结果进行统计分析。结果 2008~2009年上海市开展糖化血红蛋白室间质评的医院数从2008年122家增加至2009年178家,合格率从2008年96.7%增加到2009年98.9%。部分的调查结果离散度〉10%[2008年第1次的低压液相（LPLC）1号样本（10.8%）、免疫比浊法2份人新鲜全血样本（15.4%和15.9%）;2008年第2次的免疫比浊法2号样本（10.5%）;2009年第1次的微粒色谱法2号样本（10.3%）;2009年第2次的微粒色谱法2号样本（11.0%）和免疫比浊法1号样本（10.0%）]。经过质控管理,至2009年第2次调查,整体的平均变异系数（CV）有明显改进,人新鲜全血样本各检测系统的结果无明显差异,除微粒色谱法外,符合率达到100%。结论通过加强质控管理,开展HbA1c标准化工作,推动HbA1c检测结果的准确、可比,为临床提供可靠的诊疗依据。     

自制人巨细胞病毒核酸室内质控物的重复性观察

摘要：目的：自制人巨细胞病毒（CMV）核酸室内质控物,并观察其重复性。 方法：收集新鲜CMV核酸阳性尿液标本制备质控物,加0.01 mg/mL 牛血清清蛋白（BSA）作为稳定剂,比较－80 ℃保存1年、－80 ℃保存6个月后－20 ℃保存的质控物荧光定量PCR检测结果。 结果：－80 ℃保存1年,不加稳定剂组12个月质控结果差异无统计学意义（F=1.202,P>0.05）,加BSA组与不加稳定剂组质控结果差异无统计学意义（F=0.205,P>0.05）,不加稳定剂组CMV拷贝数平均变异系数CV）为7.18%（范围5.30%~8.22%）,加BSA组CMV拷贝数平均CV为7.75%（范围4.08%~9.02%）。－80 ℃保存6个月后－20 ℃保存,与-80 ℃保存1年相比,质控结果差异无统计学意义（未加BSA：F=0.041;加BSA：F=0.462,P>0.05）,不加稳定剂组CMV拷贝数平均CV为7.19%（范围4.06%~9.26%）,加BSA组CMV拷贝数平均CV为8.05%（范围4.07%~10.0%）。 结论：自制CMV核酸质控物重复性较好,可用于室内质控;不建议用BSA作质控物稳定剂。