益气活血药对心肌梗死后大鼠小肠黏膜屏障及肠道菌群的影响

目的观察益气活血药对心梗后大鼠肠道黏膜屏障、肠道菌群及封闭蛋白的影响。方法采用结扎左冠状动脉前降支制备SD大鼠的心肌梗死模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、益气活血药组、酒石酸美托洛尔组,连同假手术组,每组10只。实验分为7天和28天两个时间节点。术后第2天开始灌胃给药,益气活血方组8.2 g/(kg·d)、酒石酸美托洛尔组5 mg/(kg·d),模型组和假手术组给予等量蒸馏水灌胃。分别于灌胃7天和28天后采集大鼠小肠(回肠)组织及食糜。HE染色观察小肠(回肠)黏膜结构,测量绒毛高度、隐窝深度,并计算绒毛高度/隐窝深度(Villus height/Crypt depth,V/C)比值;实时荧光定量PCR方法观察小肠有益菌(双歧杆菌、乳杆菌)和有害菌(大肠杆菌、和肠球菌)的变化;免疫组化方法检测封闭蛋白表达的变化。结果在7天和28天两个时间节点中,与假手术相比,模型组绒毛高度下降(P0.01),隐窝深度变浅(P0.01),V/C比值减小(P0.01),Occludin蛋白表达明显减少(P0.01),有益菌数量均明显减少(P0.01),有害菌数量明显增加(P0.01);与模型组相比,各给药组绒毛高度明显升高(P0.01),隐窝变浅(P0.05),V/C比值明显增大(P0.01),益气活血药组有益菌数量显著增加(P0.01),有害菌数量显著减少(P0.01),两用药组趋势相同,两者数量无统计差异,益气活血药组Occludin蛋白的表达增加(P0.01)。结论本实验发现心梗大鼠小肠形态及功能受到影响,益气活血药干预可改善心梗后大鼠肠道形态结构,提高小肠的消化与吸收能力,调节小肠菌群。     

五味子多糖对化疗性肠道黏膜炎小鼠的保护作用

目的:观察五味子多糖对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道黏膜炎的治疗作用及探讨其作用机制。方法:使用5-FU造模,将小鼠随机分为正常组,模型组,多糖高、中、低剂量组(20,10,5 mg·kg-1)。观测小鼠腹泻和体重情况;将小鼠处死后,通过测量小肠绒毛高度、隐窝深度、以及计算绒毛高度/隐窝深度比值进行形态学评价;通过酶联免疫(ELISA)法测定小肠组织白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:给药第4天,与模型组相比,高、中剂量多糖组体重比率明显提高(P0.01);高、中剂量多糖组大便得分显著低于模型组(P0.05,P0.01)。五味子多糖显著抑制5-FU引起的小肠肠绒毛高度缩短、隐窝深度值更大、绒毛高度/隐窝深度比减少(P0.01);明显降低TNF-α,IL-1β,IL6水平(P0.01)。结论:五味子多糖能改善5-FU引起的肠道黏膜炎症状,其作用机制可能与通过抑制TNF-α,IL-1β,IL6等炎症因子的水平有关。     

党参多糖改善5-氟尿嘧啶诱导小肠黏膜炎的实验研究

目的:观察党参多糖对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道炎症的治疗作用及探讨其作用机制。方法:将小鼠随机分为正常组、对照组、高、中、低剂量党参多糖组。对照组和多糖组用5-FU造模,多糖组给予口服党参多糖干预。观测小鼠每天的大便和体重情况;将小鼠处死后,取小鼠空肠,切片后测量其绒毛高度、隐窝深度、计算其绒毛高度/隐窝深度比值,测定小肠组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量水平。结果:3组多糖组第4天相比对照组体重百分比下降受抑制,且有显著差异(P0.05或P0.01)。高、中剂量组第4天相比对照组大便得分具有显著差异(P0.05)。与对照组相比,多糖组显著抑制5-FU引起的小肠肠绒毛缩短、隐窝深度加深、绒毛高度/隐窝深度比值减少(P0.01)。多糖组TNF-(IL-1β、IL-6水平显著低于对照组(P0.01)。结论:党参多糖对5-FU引起的肠道黏膜炎有显著的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制TNF-(IL-1β、IL-6等炎症因子的水平产生抗炎作用有关。     

五子衍宗丸复方多糖对5-氟尿嘧啶诱导小肠黏膜炎的影响及其机制研究

目的:通过建立5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导雄性Balb/c小鼠肠粘膜炎模型,观察五子衍宗丸复方多糖(WYPCP)的疗效及探讨其作用机制。方法:将雄性Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、五子衍宗丸复方多糖高剂量组(HWYPCP)、中剂量组(MWYPCP)、低剂量组(LWYPCP)。模型组、HWYPCP组、MWYPCP组、LWYPCP组给予腹腔注射5-FU造模;HWYPCP组、MWYPCP组、LWYPCP组给予WYPCP干预。观察小鼠体重分数、大便得分;将小鼠处死后,取其空肠,测量空肠绒毛长度、隐窝深度、空肠绒毛长度/隐窝深度比值;检测空肠组织的TNF-α、IL-6、IL-1β的炎症细胞因子含量。结果:与模型组相比,HWYPCP组、MWYPCP组体重分数显著性增加(P0.01),小鼠大便得分显著性降低(P0.05);HWYPCP组、MWYPCP组能显著性抑制5-FU引起的空肠绒毛萎缩变短、隐窝深度增加、绒毛长度/隐窝深度比下降(P0.05或P0.01),及显著性抑制其TNF-α、IL-6、IL-1β炎症细胞因子含量增加(P0.05或P0.01)。结论:WYPCP能明显抑制5-FU引起的肠黏膜炎,保护肠绒毛及隐窝,其作用机制可能是通过抑制5-FU引起的肠组织中TNF-α、IL-6、IL-1β炎症细胞因子水平升高有关。     

大黄对盲肠切除导致肠道损伤大鼠肠粘膜屏障的保护作用

目的：探讨大黄对盲肠切除导致肠道损伤大鼠肠粘膜的保护作用。方法：30只雄性SD大鼠随即分为3组。每组10只,第一组为普通肠内营养组（EN组）,第二组为（EN＋大黄组）,第三组为空白组,EN组和（EN＋大黄组）分别行盲肠切除＋胃造瘘置管手术联合使用阿莫西林＋甲硝唑,EN组于木后7d给予能全力;大黄＋EN组在能全力基础上添加大黄0．25g／只。观察肠道形态学,肠道粘膜通透性,测定血浆D．乳酸及肠黏膜occludin蛋白。结果：EN组肠黏膜明显萎缩,其绒毛高度、黏膜厚度、隐窝深度及绒毛表面积均显著低于其他各组（P〈0．05）,血浆D．乳酸值明显升高（P〈0．05）,小肠粘膜occludin蛋白含量则明显降低（P〈0．05）。结论：大黄对盲肠切除大鼠的肠上皮屏障有明显的改善作用,可以有效地维持肠上皮的形态,结构及屏障功能。     

肾气丸对衰老大鼠小肠干细胞及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的调节作用

目的:探讨肾气丸对衰老大鼠小肠干细胞及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的调节作用。方法:使用SD大鼠,根据不同发育阶段分为6月龄成年对照组、22月龄衰老模型组及肾气丸低、高剂量组。采用HE染色观察小肠基本形态及测量相应指标,采用免疫组织化学法检测各组大鼠小肠PCNA、Bmi 1、β-catenin、GSK-3β的表达情况。结果:与成年组比较,衰老模型组绒毛长度、绒毛宽度、隐窝深度、绒毛/隐窝值(V/C值)均显著降低,PCNA、Bmi 1、β-catenin表达显著降低,而GSK-3β表达显著升高。与衰老模型组比较,肾气丸各组绒毛长度、绒毛宽度、隐窝深度、绒毛/隐窝值(V/C值)均显著升高,PCNA、Bmi 1、β-catenin表达显著均升高,GSK-3β表达显著降低。结论:肾气丸可改善衰老大鼠小肠干细胞增殖功能并上调Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。     

溃结宁膏穴位敷贴对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织闭合蛋白影响的实验研究

目的观察溃结宁膏穴位敷贴对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的作用并探讨其作用机制。方法选用SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、敷贴组、SASP组,并建立溃疡性结肠炎大鼠模型,造模结束后,敷贴组给予溃结宁膏穴位敷贴,治疗结束后,观察大鼠宏观表征改变,计算疾病活动指数(DAI);Western blotting法检测大鼠结肠组织Claudin-1、Claudin-2、Claudin-8蛋白的表达。结果 1)治疗结束后,与模型组比较,敷贴组和SASP组的大鼠宏观表征改变有一定程度的改善(P 0.01);2)与空白组比较,其余3组的Claudin-2蛋白表达上升(P 0.01),Claudin-1、Claudin-8等蛋白的表达下降(P 0.01);与模型组比较,敷贴组和SASP组上述蛋白指标均显著改善(P 0.05);与SASP组比较,敷贴组各项指标差异不明显(P 0.05)。结论溃结宁膏穴位敷贴可以一定程度上降低实验大鼠Claudin-2蛋白的水平,同时使得Claudin-1、Claudin-8的蛋白表达上升,从而达到减轻肠道炎症反应,促进结肠黏膜愈合,重建肠黏膜机械屏障的完整性的目的。     

五子衍宗丸对化疗性肠黏膜炎小鼠的保护作用及其机制研究

目的观察五子衍宗丸(WYP)对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道炎的保护作用并探讨其作用机制。方法将小鼠随机分为正常组、对照组、雷莫司琼(RAM)组、五子衍宗丸高剂量(HWYP)组、五子衍宗丸中剂量(MWYP)组、五子衍宗丸低剂量(LWYP)组,对照组、WYP组和RAM组使用5-FU造模。观测小鼠腹泻和体质量情况;将小鼠处死后,取小鼠空肠组织,通过测量小肠绒毛高度和隐窝深度进行形态学评价,检测小肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,测定组织细胞凋亡率。结果给药第5天,WYP组、RAM组5-FU引起的体质量减轻、腹泻;缓解5-FU对小肠绒毛、隐窝的损伤;与RAM组相比,HWYP组、MWYP组小鼠空肠隐窝深度更小(P 0.05)。与对照组相比,WYP组、RAM组TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著更低(P 0.05或P 0.01)。给药后1 d(24 h)或第3天,与对照组比,MWYP组凋亡率均显著降低(P 0.01)。结论五子衍宗丸能显著改善5-FU引起的肠道黏膜炎症状,对空肠隐窝的保护作用优于雷莫司琼,其作用机制可能与其抑制TNF-α、IL-1β、IL-6水平和抗细胞凋亡的作用有关。     

清肠化湿方对溃疡性结肠炎湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子表达的影响

目的探讨清肠化湿方对溃疡性结肠炎(UC)湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子和紧密连接蛋白Claudin-2、Claudin-5的影响。方法 60只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组,模型组,美沙拉嗪组,低、中、高剂量中药组。除空白组外,其余小鼠置于高温、高湿环境,喂养高糖高脂饲料,饮用2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)蒸馏水1周造成UC湿热证模型。低、中、高剂量中药组分别予浓度8.125、16.250、32.500 g/(kg·d)清肠化湿方灌胃,美沙拉嗪组小鼠予美沙拉嗪溶液灌胃,空白组和模型组给予相同体积的生理盐水灌胃。灌胃7天,观察小鼠的一般情况、体重、粪便性状及隐血情况,进行DAI评分,记录小鼠每小时排出的湿粪粒数以及湿粪重量,测量小鼠结肠长度。HE染色观察结肠病理情况; Western Blot法检测结肠NLRP6、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(Caspase-1)、紧密连接蛋白(Claudin-2)、Claudin-5表达水平;ELISA法检测血清白细胞介素-18(IL-18)、IL-1β含量;Real-time PCR法检测结肠NLPR6、caspase-1、Claudin-2、Claudin-5 mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分升高(P0.01),结肠长度变短(P0.01);结肠黏膜病理受损严重;NLRP6、Claudin-5蛋白表达降低(P0.05),Caspase-1、Claudin-2蛋白表达增加(P0.05,P0.01);血清中炎症因子IL-1β含量增高(P0.05);NLRP6、Claudin-5 mRNA表达降低(P0.01),Caspase-1、Claudin-2 mRNA表达增加(P0.05,P0.01)。与模型组比较,美沙拉嗪组、中剂量中药组DAI评分降低(P0.01),结肠长度增长(P0.01)、病理情况改善;中剂量中药组NLRP6、Claudin-5蛋白表达上调(P0.05),各治疗组Caspase-1蛋白表达减少(P0.05),美沙拉嗪组及中、高剂量中药组Claudin-2蛋白表达减少(P0.01);美沙拉嗪组及低、中剂量中药组血清IL-1β含量降低(P0.05,P0.01),美沙拉嗪组、高剂量中药组NLRP6 mRNA表达上调(P0.01,P0.05),各治疗组Caspase-1 mRNA表达下调(P0.05),美沙拉嗪组及中、高剂量组Claudin-2 mRNA表达下调,中、高剂量组Claudin-5 mRNA表达上调(P0.05)。结论清肠化湿方能够调节NLRP6蛋白及相关炎症因子、紧密连接蛋白表达水平,从而减轻肠道炎症反应,缓解肠黏膜损伤。     

滋补脾阴方药对脾阴虚大鼠肠黏膜屏障的调控作用

目的观察脾阴虚状态下肠黏膜屏障的改变及滋补脾阴方药的调控作用。方法将SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组(简称C组)6只和模型组(简称M组)14只。采用饮食不节与劳倦过度结合耗伤阴液法建立脾阴虚大鼠模型。脾阴虚造模后将M组随机分为脾阴虚组(简称S组)和滋补脾阴方药组(简称Z组)。每周收集粪便进行16S rRNA测序。采用qPCR技术检测空肠Claudin-1、Occludin、ZO-1 mRNA水平;Western Blot法检测空肠Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表达;ELISA法检测肠道炎症因子水平。结果在门水平上,S组较C组厚壁菌门比例增加(P0.05),拟杆菌门下降(P0.05),Z组较S组厚壁菌门减少(P0.01),拟杆菌门增加(P0.01);在属水平上,S组较C组乳杆菌属和Paraprevotella属比例升高(P0.05,P0.01),瘤胃球菌属和粘放线菌属下降(P0.01,P0.05);Z组比较于S组乳杆菌属比例明显减少(P0.0001),瘤胃球菌属和粘放线菌属增加(P0.05,P0.01),Paraprevotella属呈下降趋势(P0.05)。与C组比较,S组空肠Claudin-1 mRNA和蛋白表达下降(P0.05,P0.01),Occludin mRNA和蛋白表达降低(P0.01),ZO-1 mRNA和蛋白表达呈降低趋势(P0.05);与S组比较,Z组Claudin-1 mRNA和蛋白水平升高(P0.01),Occludin mRNA和蛋白表达增加(P0.05),ZO-1 mRNA和蛋白水平呈上升趋势。S组空肠IFN-γ和IL-17含量较C组增加(P0.001),sIgA、TGF-β、IL-4与IL-10水平下降(P0.01,P0.001);Z组较S组IFN-γ、IL-17含量减少(P0.001,P0.01),sIgA、TGF-β、IL-4与IL-10含量升高(P0.01,P0.001)。结论滋补脾阴方药能够调节肠道菌群中厚壁菌门、拟杆菌门、瘤胃球菌属、乳酸杆菌属与粘放线菌属比例,增加Claudin-1、Occludin mRNA和蛋白表达,并调节Th1/Th2、Th17/Treg细胞分泌的细胞因子水平,改善脾阴虚大鼠肠黏膜生物屏障、机械屏障及免疫屏障的异常变化。     

肠激安方对IBS-D大鼠肠道通透性的影响

目的:观察肠激安方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠肠道通透性的影响,探讨肠激安方治疗IBS-D的作用机制。方法:SD雄性乳鼠,随机分为5组,分别为正常组,模型组,匹维溴铵组(0.018 g·kg~(-1)),肠激安高、低剂量组(33.48,16.74 g·kg~(-1)),除正常组外,均采用"母婴分离+醋酸刺激+束缚应激"三因素结合的方法建立IBS-D模型。给药后,采用透射电镜观察大鼠肠黏膜超微结构;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血浆D-乳酸水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠结肠紧密连接蛋白闭锁蛋白(Occludin),闭合蛋白-1(Claudin-1)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Occludin,Claudin-1,紧密连接蛋白-1(ZO-1)mRNA表达。结果:与正常组比较,IBS-D模型组大鼠肠黏膜上皮细胞损伤,微绒毛排列较稀疏,紧密连接间隙增宽,有的不甚明显;血浆D-乳酸水平明显升高(P0.05),结肠中Occludin,Claudin-1 mRNA及蛋白表达降低(P0.05),ZO-1 mRNA表达降低(P0.05)。药物治疗后,与模型组比较,各给药组大鼠肠黏膜细胞损伤修复;匹维溴铵组、肠激安方高剂量组血浆D-乳酸水平明显降低(P0.05),肠激安方低剂量组血浆D-乳酸水平有降低趋势,但不具有统计学差异。各给药组大鼠结肠中Occludin,Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平,ZO-1 mRNA表达水平升高(P0.05)。结论:肠激安方对IBS-D的治疗作用可能是改善肠道通透性实现的。     

从AMPK介导的自噬研究淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠小肠屏障功能的调节作用

目的:从AMPK介导的自噬探讨淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠小肠屏障功能的调节作用。方法:SD大鼠按其不同发育阶段分为6月龄成年对照组,24月龄衰老组及淫羊藿总黄酮低、中、高剂量(10、20、60 mg/kg)组。用D-乳酸试剂盒检测各组血清D-乳酸含量;采用免疫组化检测各组小肠Claudin-1、Occludin、p-AMPK表达情况;Western blot检测小肠自噬相关蛋白Lc3Ⅱ、Beclin1表达情况。结果:与成年组比较,衰老组血清D-乳酸含量显著升高,小肠Claudin-1、Occludin、p-AMPK、Lc3Ⅱ、Beclin1表达显著降低(P0.01);与衰老组比较,淫羊藿总黄酮中、高剂量组血清D-乳酸水平显著降低,小肠紧密连接蛋白与自噬相关蛋白的表达显著升高(P0.01)。结论:淫羊藿总黄酮可能通过上调AMPK介导的自噬,增加肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达,从而改善衰老大鼠肠道黏膜屏障功能障碍。     

黄芪甲苷、人参皂苷Rg1对慢性萎缩性胃炎大鼠Hedgehog信号通路的调控影响

目的探讨黄芪甲苷、人参皂苷Rg1对慢性萎缩性胃炎大鼠Hedgehog信号通路的影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组、Purmorphamine组及叶酸组,运用幽门弹簧法制备萎缩性胃炎模型。应用HE染色评价胃黏膜病理损伤,应用Western Blot、RT-PCR和量子点介导的免疫荧光化学法分别检测各组大鼠胃组织Hedgehog信号通路的蛋白和基因表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠Shh、Ptch、Gli-1基因及蛋白含量均显著降低(P0.05),SUFU蛋白表达明显升高(P0.01),Cyclin D1表达减弱(P0.01)。与模型组相比,人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组及叶酸组Shh蛋白表达明显升高(P0.05),各给药组均能显著升高Ptch蛋白含量(P0.05)。人参皂苷Rg1高剂量组、Purmorphamine组Gli-1蛋白表达明显升高(P0.05),黄芪甲苷高剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组和Purmorphamine组SUFU蛋白表达明显减弱(P0.05)。黄芪甲苷高剂量组和Purmorphamine组Cyclin D1蛋白表达增强(P0.05)。结论黄芪甲苷、人参皂苷Rg1对Hedgehog信号通路关键因子有一定的激活作用,进而改善慢性萎缩性胃炎大鼠的胃黏膜病变。     

四妙丸上调高尿酸血症大鼠小肠ABCG2表达促进肠道尿酸排泄的作用

目的：研究四妙丸对高尿酸血症大鼠小肠三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)表达和肠道尿酸排泄的影响。方法：48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、苯溴马隆组(4.7 mg·kg^-1)和四妙丸高、中、低剂量组(2 260.6、1 130.3、565.2 mg·kg^-1),每组8只。以氧嗪酸钾和次黄嘌呤制备高尿酸血症模型,连续21 d。第8天予相应药物干预,1次/d,持续14 d。第21天处死大鼠,检测血尿酸、肠道尿酸、血肌酐、血尿素氮等指标,以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠小肠ABCG2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小肠ABCG2 mRNA表达,免疫组化法检测小肠ABCG2蛋白表达和定位。结果：与正常组比较,模型组血尿酸、血肌酐、血尿素氮显著升高(P<0.01);与模型组比较,四妙丸各剂量组和苯溴马隆组大鼠血尿酸水平均显著降低(P<0.01),四妙丸中、低剂量组肠道尿酸明显升高(P<0.05,P<0.01),苯溴马隆组血肌酐显著升高(P<0.01),...     

红芪多糖对糖尿病胃轻瘫大鼠小肠组织c-kit、Cx43基因和蛋白表达的影响

目的观察红芪多糖(HPS)对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠小肠组织酪氨酸激酶受体c-kit、缝隙连接蛋白Cx43基因和蛋白表达的影响,探讨其对DGP大鼠肠动力障碍的作用机制。方法采用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素联合高糖高脂饲料不规则喂养方式复制DGP模型,将72只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和HPS高、中、低剂量组,每组12只。阳性对照组予莫沙必利药液0.7 g/(kg·d)灌胃,HPS高、中、低剂量组分别予HPS药液0.2、0.1、0.05 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组分别予等体积纯净水灌胃,每日1次,连续8周。HE染色观察小肠病理学结构改变;RT-PCR和Western blot分别检测小肠组织c-kit、Cx43mRNA和蛋白的表达。结果 HE染色结果显示,模型组大鼠小肠正常结构被破坏,大量炎性细胞浸润;各给药组大鼠情况改善,可见正常肠绒毛、中央乳糜管等结构,炎性细胞浸润减少,其中以HPS高剂量组改善明显。与空白组比较,模型组大鼠小肠组织c-kit、Cx43 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠小肠组织c-kit、Cx43mRNA和蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01),HPS高剂量组作用最显著。结论 HPS通过上调c-kit、Cx43mRNA和蛋白的表达提高小肠动力,改善DGP模型大鼠肠动力障碍。     

电针“足三里”穴对重症急性胰腺炎大鼠小肠闭锁蛋白和核因子-κB表达的影响

目的:探讨电针"足三里"穴调控急性胰腺炎大鼠肠道炎性反应的作用机制。方法:将54只雄性SD大鼠随机分为重症急性胰腺炎(SAP)模型组、电针组、假手术组,每组18只。通过逆行胆胰管注射3.5%牛磺胆酸钠制作SAP模型。模型制作成功后电针组在双侧"足三里"穴给予电针治疗30min。假手术组及模型组大鼠在同一时间固定30min不予治疗。各组大鼠均于造模后3h、6h、12h分批处死,观察胰腺以及小肠病理学改变,并用免疫组化SP法检测小肠上皮组织闭锁蛋白(occludin protein)以及核因子-κB(NF-κB p65)表达水平。结果:各时间点胰腺病理评分假手术组、电针组均低于模型组(P0.05);小肠上皮组织occludin蛋白表达假手术组与电针组均高于模型组(P0.05);小肠上皮组织NF-κB p65表达假手术组与电针组均低于模型组(P0.05)。结论:电针"足三里"穴可以降低SAP模型大鼠小肠上皮组织NF-κB p65表达,提高小肠上皮组织occludin蛋白表达,从而减轻胰腺损伤。     

香砂六君子汤对脾胃虚弱型萎缩性胃炎大鼠胃窦黏膜组织白细胞介素-6、10及热休克蛋白70表达的影响

目的 观察香砂六君子汤对脾胃虚弱型慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃窦黏膜组织白细胞介素(IL)-6、IL-10及热休克蛋白70(HSP70)基因及蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法 受试大鼠按随机数字表法分为空白组和造模组,采用综合法复制脾胃虚弱型CAG动物模型,将成模大鼠随机分为模型组、阳性对照组和香砂六君子汤高、中、低剂量组。空白组和模型组大鼠予10 m L/(kg·d)蒸馏水灌胃,香砂六君子汤高、中、低剂量组分别予24、12、6 g/(kg·d)香砂六君子汤药剂灌胃,阳性对照组予0.30 g/(kg·d)维霉素药剂灌胃,连续120 d。检测各组大鼠胃窦黏膜组织IL-6、IL-10含量,实时荧光定量PCR检测胃窦黏膜组织IL-6、IL-10和HSP70 m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测HSP70蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况较差,大鼠胃窦黏膜组织IL-6 m RNA表达、IL-6含量显著升高(P0.05,P0.01),IL-10 m RNA表达、IL-10含量显著降低(P0.05,P0.01),HSP70基因和蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,香砂六君子汤高剂量组大鼠一般生存状况明显改善,大鼠胃窦黏膜组织IL-6 m RNA表达、IL-6含量显著降低(P0.05,P0.01),IL-10 m RNA表达、IL-10含量显著升高(P0.05),香砂六君子汤高、中剂量组HSP70基因和蛋白表达显著升高(P0.05)。结论 香砂六君子汤对脾胃虚弱型CAG大鼠胃窦黏模具有保护作用。     

健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠水通道蛋白8的影响

目的观察健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠肝组织AQP8表达的影响。方法将健康SPF级雄性Wistar大鼠90只,随机分为空白组、模型组、健脾活血祛湿方高、中、低剂量组及秋水仙碱组,运用改良CCl4-酒精综合法造肝硬化腹水大鼠模型。用荧光定量PCR检测肝组织AQP8m RNA表达水平,免疫组织化学和Western Blotting法检测AQP8蛋白表达。结果模型组AQP8m RNA表达较空白组明显减少(P0.01),健脾活血祛湿方高剂量组AQP8m RNA表达较模型组显著(P0.01),秋水仙碱组与健脾活血祛湿方中、低剂量组AQP8m RNA表达与模型组差异有统计学意义(P0.05);免疫组化结果显示模型组AQP8少量表达,与空白组比较,AQP8蛋白表达量有显著差异(P0.01),健脾活血祛湿方高剂量组与模型组与比较,AQP9蛋白表达量显著增高(P0.01);健脾活血祛湿方高剂量组与模型组与比较,AQP8蛋白表达量显著增高(P0.01);Western Blotting结果显示健脾活血祛湿方高剂量组表达较模型组明显升高(P0.01),健脾活血祛湿方中剂量组AQP8表达较模型组略有升高,但无统计学意义(P0.05),健脾活血祛湿方低剂量组AQP8表达低于模型组。秋水仙碱组与模型组比较有差异有统计学意义(P0.05)。AQP8基因及蛋白表达升高程度与中药使用剂量有关。结论 AQP8可能在肝硬化腹水的形成及消退中起着重要作用,健脾活血祛湿方可明显提高肝硬化腹水大鼠水通道蛋白AQP8表达,可能是该方起到治疗肝硬化腹水作用的分子生物学基础之一,可以作为治疗肝硬化腹水的新靶点。     

归芪聪志汤对VD模型大鼠海马神经元Claudin-1,TGF-β表达的影响

目的:研究归芪聪志汤对血管性痴呆(varscular dementia,VD)模型大鼠学习记忆和海马神经元紧密连接蛋白1(Claudin-1)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠120只,按随机数字表选10只大鼠作为假手术组,其余大鼠制备VD模型,选成功模型大鼠随机分为5组,分别为模型组、阳性组和归芪聪志汤低、中、高剂量组。归芪聪志汤低、中、高剂量组给药量分别为9.9,19.8,39.6 g·kg-1·d-1。阳性组给予脑复康吡拉西坦胶囊0.3 g·kg-1·d-1。假手术组、模型组给予等量水。每日1次。连续灌胃治疗28 d后,Morris水迷宫予以行为学检测,实时荧光定量PCR(Real-time PCR),免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组海马组织Claudin-1,TGF-β基因和蛋白表达。结果:灌胃治疗28 d后,与假手术组比较,VD模型组大鼠的平均逃避潜伏期明显延长、跨原平台次数明显减少(P0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),大鼠海马的TGF-βmRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠逃逸潜伏期均缩短,跨原平台次数均增多(P0.01),大鼠海马的Claudin-1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.05),大鼠海马的TGF-βmRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),归芪聪志汤中剂量组与脑复康吡拉西坦胶囊组优于其他组(P0.05)。结论:归芪聪志汤能够显著改善VD大鼠的学习记忆能力,可能与调节脑组织细胞间黏附作用、抑制炎性因子表达等有关。