地塞米松干预下红色毛癣菌对特比萘芬敏感性的影响

目的:探讨地塞米松干预下分离自不同部位的红色毛癣菌对特比萘芬的敏感性。方法:收集不同部位红色毛癣菌共20株,其中体癣、股癣、手足癣和甲癣各5株,采用(NCCLS)M38-A方案微量稀释法,测定不含地塞米松与含不同浓度地塞米松影响下特比萘芬对红色毛癣菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果:当地塞米松的浓度为0.05%、0.1%、0.2%时,红色毛癣菌的MIC几何均值分别为0.081μg/mL、0.092μg/mL和0.109μg/mL,与空白组比较无显著性差异(P>0.05);当其浓度为0.4%、0.8%时,红色毛癣菌的MIC几何均值分别为0.196μg/mL、0.319μg/mL,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。分离自四个不同部位的红色毛癣菌MIC几何均值间无显著性差异(P>0.05)。结论:当地塞米松浓度为0.4%、0.8%时可显著降低红色毛癣菌对特比萘芬的敏感性;不同部位红色毛癣菌对特比萘芬敏感性无显著性差异。     

盐酸小檗碱联合抗真菌药物对红色毛癣菌的体外药敏实验

目的观察盐酸小檗碱联合不同浓度抗真菌药物对红色毛癣菌的体外抗菌活性。方法参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)颁布的M38-A2方案和相关文献对临床分离的30株红色毛癣菌进行体外药敏实验。其中盐酸小檗碱的MIC值定义为与生长对照相比,肉眼观察出现80%生长抑制的最低药物浓度。采用分数抑菌浓度(FIC)评定两药联合效果。FIC≤0.5,两药为协同作用;0.54,两药为拮抗作用。结果盐酸小檗碱和不同浓度伊曲康唑联合,主要为无关作用。盐酸小檗碱和不同浓度特比奈芬、伏立康唑联合,均为拮抗作用。16.0μg/mL氟康唑组与盐酸小檗碱联合时FIC≤0.5所占比例为83.33%,协同作用最强;2.0～8.0μg/mL卡泊芬净组与盐酸小檗碱联合时,FIC≤0.5所占比例最高,均为63.33%,协同作用最强,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论盐酸小檗碱与高浓度氟康唑、卡泊芬净联合,体外对红色毛癣菌有较强的协同作用。     

四味蒙药提取物体外抗真菌实验研究

目的观察四味蒙药的水提取物及醇提取物成分对皮肤癣菌的抑菌作用。方法采用药基琼脂稀释法测定四味蒙药的水、醇提取物对常见皮肤癣菌(包括红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌)的最小抑菌浓度(MIC)。结果四味蒙药的水、醇提取物分别在不同浓度时对三种受试菌种有不同程度的抑制作用,且大花葵水、醇提取物对皮肤癣菌的MIC为8.3mg/mL。结论四种单味蒙药对常见皮肤癣菌有体外抗菌活性,其中以大花葵水、醇提取物对皮肤癣菌作用最强。     

长脉冲Nd:YAG 1064nm激光对红色毛癣菌生长及超微结构的影响

目的:确定长脉冲Nd:YAG 1064 nm激光对临床分离红色毛癣菌Y生长及超微结构的影响。方法:长脉冲Nd:YAG 1064 nm激光以200 J/cm~2、400 J/cm~2、600 J/cm~2能量体外照射含有等菌量的红色毛癣菌Y菌落,观察照射后菌落生长的变化,同时将激光照射前后的菌落制备成标本,分别用扫描电镜及透射电镜观察其超微结构变化。结果:长脉冲Nd:YAG 1064 nm激光能量为400 J/cm~2时,可抑制红色毛癣菌Y菌落的生长,600 J/cm~2时,红色毛癣菌Y菌落停止生长。激光照射后的红色毛癣菌Y菌落,在扫描电镜下菌丝结构由光滑变为粗糙,延长变为皱缩、截短,膨大;透射电镜下菌体细胞壁及细胞器结构破坏。可见髓样小体及蛋白凝固体。600 J/cm~2处理组:菌体崩解、坏死。结论:长脉冲Nd:YAG 1064 nm激光可抑制或终止红色毛癣菌菌落的生长,改变菌体的超微结构。     

2%三氯醋酸治疗浅部真菌病的实验及临床研究

目的：寻找一种新的、安全有效、价格低廉、便于推广的抗浅部真菌病的药物。方法：采用2％三氯醋酸制剂进行体外抗真菌作用及最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MFC）测定，并用此药治疗60例浅部真菌病患者。全部患者均做真菌镜检和真菌培养。结果：鉴定出菌株46株，分别为红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌。三氯醋酸对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌的MIC范围分别为0.06-0.12mg/mL,0.30-0.60mg/mL,0.06-0.12mg/mL。2％三氯醋酸治疗浅部真菌病（手足癣、体股癣）60例，治愈率50％，有效率90％。结论：试验结果和临床观察显示三氯醋酸治疗浅部真菌病均有良好的疗效。     

真菌病

980096 微量稀释法测定皮肤癣菌最低抑菌浓度（MIC）的实验研究/刘维达（中国医科院、中国协和医大皮肤病研究所）…//临床皮肤科杂志.-1997,26（4）.-228～230 参照NC-CLS推荐的酵母菌药敏试验的标准化方法,测定了皮肤癣菌体外对伊曲康唑和氟康唑的敏感性。结果表明20株红色毛癣菌、4株须癣毛癣菌、石膏样小孢子菌和絮状表皮癣菌各3株,对西药的最低抑菌浓度（MIC）范围分别为≤0.06～4μg/ml和1～32μg/ml,均值分别为0.32μg/ml和7.76μg/ml。证明用微量稀释法测定显示了用药量少、重复性好、结果可靠等优点。表1参7 （张孝友）     

体外观察特比萘芬联合伊曲康唑对须癣毛癣菌甲侵袭的抑制作用

目的：体外观察特比萘芬联合伊曲康唑对须癣毛癣菌甲侵袭的抑制作用。为临床联合用药提供参考依据。方法：用浸泡过不同浓度的特比萘芬、伊曲康唑及两者混合药液的健康甲片，接种须癣毛癣菌作为甲模型，27℃孵育观察不同时间甲模型真菌生长抑制现象及超微结构变化，确定各药的MIC。结果：特比萘芬和伊曲康唑联合药液MIC较伊曲康唑为低；联合用药部分抑菌浓度指数（FICI）〉1但〈2。结论：特比萘芬联合伊曲康唑对须癣毛癣菌有一定抑制相加作用。     

常见皮肤癣菌代谢产物体外对人角质形成细胞免疫活性的影响

目的探讨常见致病真菌代谢产物对人角质形成细胞(HKC)产生细胞因子的影响。方法红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、犬小孢子菌和白念珠菌常规培养,提取培养上清液后按不同稀释度加入体外培养的HKC中,24h后观察细胞形态变化,ELISA法检测细胞上清液IL-8,IL-6及TNF-α的浓度。结果5个组均使细胞形态发生变化。在红色毛癣菌、白念珠菌、须癣毛癣菌组1∶10,犬小孢子菌组1∶1时,HKC上清液中的IL-8及IL-6均高于空白对照(P<0.01)。结论体外培养的真菌培养上清液对HKC的活性有明显的影响。浓度较高时可直接导致HKC的死亡;浓度低时可明显刺激HKC增加细胞因子的产生,其中红色毛癣菌作用最强。     

氮掺杂碳纳米酶联合近红外光抗真菌体外试验研究

目的：评价氮掺杂碳纳米酶（N-Carbon nanozyme）联合近红外光对白念珠菌和红色毛癣菌体外抗菌的效果。方法：将白念珠菌和红色毛癣菌标准菌株常规接种培养，分别分为四组：(1)空白对照组：真菌不作任何处理；(2)光照组：真菌予以2.5 W/cm2近红外光照射8 min；（3）材料组：真菌予以250 μg/mL的N-Carbon nanozyme处理30 min；（4）实验组：真菌予以250 μg/mL的N-Carbon nanozyme及2.5 W/cm2近红外光照射8 min。SYTO 9/PI染色判断白念珠菌和红色毛癣菌的菌体活性；扫描电镜观察和平板计数法判定白念珠菌抗菌形态和菌落形成单位（CFU）的数量。结果：实验组中SYTO9/PI染色示红色荧光染色信号显著增加；与空白对照组比较，光照组、材料组间菌落数均未见明显差异，而实验组可见菌落明显减少。生物扫描电镜显示白念珠菌的细胞形态发生明显的变化。结论：氮掺杂碳纳米酶联合近红外光对白念珠菌及红色毛癣菌均有明显的抑制作用。     

茶皂甙体外抗真菌作用和治疗皮肤癣菌病的疗效观察

本文报告茶皂甙的体外抗真菌作用和茶皂甙酊治疗体癣、股癣的疗效观察。体外试验显示茶皂甙有较强的抑制真菌作用,对红色癣菌、石膏样癣菌、断发癣菌、黄癣菌、紫色癣菌、絮状表皮癣菌的MIC为0.125～1g/L,对白念珠菌为0.25～0.0625g/L,应用茶皂甙酊治疗皮肤癣菌病的结果是十分有效的。     

黄连等6味中药提取物对皮肤癣菌的抗真菌活性研究

目的观察两种方法提取6味中药的成分对皮肤癣菌抑菌和杀菌作用,筛选抗真菌中药。方法采用药基琼脂稀释法测定两种方法提取6味中药的成分对常见皮肤癣菌的MIC和MFC;采用扫描电镜观察水提黄连、醇提蛇床子对红色毛癣菌抗真菌作用的形态学。结果醇提蛇床子MIC范围0.020～0.156mg/mL,均值0.04mg/mL;醇提白藓皮分别为0.04～0.156mg/mL,0.156mg/mL;醇提黄连为0.156～1.250mg/mL,0.313mg/mL。醇提蛇床子MFC范围为0.080～0.313mg/mL,均值0.156mg/mL;醇提黄连分别为1.250～≥2.500mg/mL,2.500mg/mL。水提黄连和醇提蛇床子与红色毛癣菌分别作用2,8和24h,均表现出菌丝与孢子的连续性破坏过程。结论醇提蛇床子、白藓皮和黄连对皮肤癣菌有较强抑制作用,醇提蛇床子对皮肤癣菌有较强杀菌作用。     

莪术挥发油体外抗念珠菌活性的研究

目的:研究莪术挥发油体外抗念珠菌的活性。方法:采用微量稀释法以莪术挥发油对62株念珠菌进行体外药敏实验,测定其最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MFC),同时以氟康唑及两性霉素B作为质控药物。结果:莪术挥发油对念珠菌属的平均MIC值为(760.87±376.56)μg/mL,其中对白念珠菌MIC和MFC值均为(734.13±379.36)μg/mL;对光滑念珠菌的MIC、MFC均为(833.59±415.07)μg/mL;对克柔念珠菌的MIC、MFC均为(1082.59±405.07)μg/mL;对热带念珠菌的MIC、MFC均为(606.25±207.53)μg/mL;对近平滑念珠菌的MIC、MFC均为(568.36±218.76)μg/mL;对季也蒙念珠菌的MIC、MFC均为757.81μg/mL。结论:莪术挥发油在体外对临床常见6种念珠菌均有不同程度的抑制作用,并且对各菌种的抑制作用无显著性差异(P>0.05);莪术挥发油抗念珠菌的作用方式可能为杀菌;NCCLS-M27-A方案可用于对中药抗念珠菌活性的评价。     

动物源性皮肤癣菌病32例患者病原菌体外药敏试验

目的了解动物源性皮肤癣菌病病原菌对常用抗真菌药物的敏感情况。方法收集2013年10月—2014年11月就诊于川北医学院附属医院皮肤科、确诊为动物源性皮肤癣菌病的32例患者的菌株。参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)的M38-A2方案,测定收集的临床菌株对灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬及氟康唑的最低抑菌浓度(MIC)值。结果灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑对犬小孢子菌的药敏试验MIC值范围分别为0.125 0～4.000 0μg/ml、 0.031 3～1.000 0μg/ml、0.002 0～0.031 3μg/ml和2.000 0～32.000 0μg/ml,对须癣毛癣菌复合体的药敏试验MIC值范围分别为0.062 5～1.000 0μg/ml、0.0313～0.500 0μg/ml、0.001 0～0.062 5μg/ml和4.000 0～32.000 0μg/ml,对石膏样小孢子菌的药敏试验MIC值范围分别为0.031 3～2.000 0μg/ml、0.062 5～1.000 0μg/ml、0.003 9～0.0625μg/ml和0.500 0～16.000 0μg/ml。结论灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑对犬小孢子菌、须癣毛癣菌复合体和石膏样小孢子菌的体外药敏试验提示,特比萘芬的抗真菌效果最好,其次为伊曲康唑和灰黄霉素,氟康唑抗真菌效果较差。     

亚硝酸钠对红色毛癣菌形态学的影响

目的:观察亚硝酸钠对红色毛癣菌生长的抑制作用.方法:应用美国临床实验室标准化委员会(CLSI)制订的M38-A方案,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量稀释法测定亚硝酸钠对红色毛癣菌的体外抑制率.将亚硝酸钠作用前、后的红色毛癣菌制成标本.分别在扫描电子显微镜(扫描电镜)和透射电子显微镜(透射电镜)下观察形态学变化.结果:浓度为160、80、40、20、10、5、2.5、1.25mmol/L时,亚硝酸钠对红色毛癣菌的抑制率分别为:73.62%±9.7%、71.93%±1.47%、73.53%±1.14%、70.80%±1.50%、68.67%±1.27%、41.76%±1.53%、29.59%±1.90%、16.98%±1.82%.随药物浓度减小,细胞抑制率逐渐降低,经单因素方差分析,差异有统计学意义(p<0.05).亚硝酸钠作用于红色毛癣菌后,扫描电镜下菌丝表面变粗糙,菌丝萎缩、皱瘪、粗细不一.出现多处破损、断裂和小的破坏性孔洞.透射电镜下细胞变形,呈不规则形;细胞壁粗糙,厚薄不均;细胞质结构模糊,细胞核凝固、破碎.结论:亚硝酸钠可以抑制红色毛癣菌的生长并使之发生形态变化.     

亚硝酸钠联合抗真菌药物对红色毛癣菌的体外药敏检测

目的探讨亚硝酸钠联合不同浓度抗真菌药物对红色毛癣菌的体外抗菌活性。方法实验参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)颁布的M38-A2方案和相关文献对临床分离的30株红色毛癣菌进行体外药敏实验。其中亚硝酸钠的MIC值定义为与生长对照相比,肉眼观察出现80%生长抑制的最低药物浓度。采用分数抑菌浓度(FIC)评定两药联合效果。FIC≤0.5,两药为协同作用;0.54,两药为拮抗作用。结果亚硝酸钠和伊曲康唑、特比萘芬以及伏立康唑不同浓度联合,0.54所占比例较高,主要为拮抗作用。亚硝酸钠与高浓度氟康唑、卡泊芬净联合,FIC≤0.5所占比例较高,最高可达100%,协同作用最强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚硝酸钠与高浓度氟康唑、卡泊芬净联合,体外对红色毛癣菌有较强的协同作用。     

HaCaT细胞对红色毛癣菌生长的抑制作用

目的 探讨角质形成细胞对红色毛癣菌生长的抑制作用.方法 将HaCaT细胞采用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2环境下,37 ℃孵育至80%融合时,弃去培养液,加入用无血清DMEM配制的菌丝段悬液共孵育(浓度0.1×105/mL～1.0×105/mL),并以菌丝段悬液作为阴性对照.分别于4 h、8 h、16 h和24 h制备共孵育后的菌丝段悬液,进行台盼蓝染色计数和菌落计数,对真菌生长状况进行评价并计算真菌生长抑制率.结果 在细胞和菌丝段共孵育4 h、8 h、16 h和24 h,台盼蓝染色法测得的菌生长抑制百分数分别为46.8%±8.0%、64.0%±5.5%、76.3%±7.7%和39.5%±4.9%;菌落计数法测得菌生长抑制百分数分别为39.7%±4.9%、58.0%±8.9%、68.3%±7.4%和39.9%±5.5%.结论 HaCaT细胞对体外培养的红色毛癣菌有一定的抑制作用.     

肉桂醛体外抗真菌作用初探

本文测定肉桂醛对部分常见真菌的体外抗菌谱.发现其对8种酵母及酵母样真菌的MIC值范围为1.95-62.51μg/ml,以克柔假丝酵母和热带假丝酵母最敏感;对皮癣菌及深部真菌的M工C范围为7.82-125.00μg/ml,以紫色癣菌最敏感.同时作了药物对10株白念菌的时间抑菌动态观察,抑菌曲线表明孵育8小时时,出现抑菌最低点.采用酮康唑对照,发现该药的MIC值普遍较酮康唑高.扫描和透射电镜也证实该药对白念菌、石膏毛癣菌和申克氏孢子丝菌有较强破坏作用,见菌外形改变及细胞壁破损.     

葡萄籽提取物原花青素对UVA照射HaCaT细胞表达AQP3、Caspase-14和BH mRNA的影响

目的通过研究UVA照射前后及不同浓度葡萄籽提取物原花青素(grape-seed proanthocyanins extract,GSPE)干预的HaCaT细胞表达水通道蛋白3(AQP3)、半胱氨酸蛋白酶14(Caspase-14)和博来霉素水解酶(BH) mRNA的变化,探索GSPE是否能够修复长波紫外线引起的皮肤屏障损伤。方法实验分为五个组:空白对照组、单纯光照组(选取UVA的能量密度为25 J/cm~2)、照光联合不同浓度GSPE干预组(10、50、100μg/mL),采用RT-PCR法分别检测各组AQP3、Caspase-14和BH mRNA的表达量。结果 25 J/cm~2的UVA可以提高AQP3 mRNA表达量。GSPE药物浓度大于10μg/mL时,随药物浓度增加,可以逐渐降低光照后高表达的基因水平,并呈浓度依赖性。UVA可下调BH和Caspase-14 mRNA表达量,而GSPE可以提高光照后降低的基因表达量,且呈浓度依赖性,逐渐使其恢复正常。结论合适浓度的GSPE可以调节UVA对HaCaT细胞AQP3、Caspase-14和BH mRNA表达的影响,并使其趋于正常,推测其具有修复长波紫外线引起的皮肤屏障功能损伤的作用。     

不同剂量ALA-PDT对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖的抑制作用

目的:确定5-氨基酮戊酸-光动力疗法对皮肤鳞状细胞癌A431细胞抑制的最佳剂量。方法:体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株,应用MTT法检测不同ALA浓度(0.5、1、2 mmol/L)、不同PDT光照剂量(5、10、20、40 J/cm~2)下A431细胞的增殖水平。结果:当ALA浓度为0.5 mmol/L时,光照剂量为5、10、20、40 J/cm~2对A431细胞的抑制率分别为6%、10%、15%、18%;当ALA浓度为1mmol/L时,光照剂量为5、10、20、40 J/cm~2对A431细胞的抑制率分别为30%、52%、80%、82%;当ALA浓度为2 mmol/L时,光照剂量为5、10、20、40 J/cm~2对A431细胞的抑制率分别为31%、54%、81%、82%。结论:ALA在浓度为1 mmol/L,光照剂量为20 J/cm~2时,ALA-PDT对A431细胞增殖抑制效果达到最佳。     

海南地区红色毛癣菌对5种抗真菌药敏感性检测

目的:检测本地区红色毛癣菌对常用抗真菌药物的敏感性,为临床诊疗提供依据.方法:依据CLSIM38-A2方案的微量稀释法,对本地区浅部感染分离的103株红色毛癣菌进行5种抗真菌药物体外敏感性测定,每株菌每个药物浓度均同时重复2孔.结果:体外药敏实验结果显示,红色毛癣菌对5种药物表现出良好的体外药物敏感性,其中特比萘芬(G...