滇白珠提取物抗细菌活性的筛选

目的 :筛选滇白珠抗菌成分 ,为更全面的评价和开发滇白珠提供依据。方法 :成分提取用萃取、层析等常规方法。抗菌力测定用纸片扩散法。结果和结论 :在滇白珠不同部位、不同极性的22个提取物中有3个提取物有较显著的抑制金黄色葡萄球菌作用 ,且根与茎的提取物作用一致 ;2个提取物有一定的抑制大肠杆菌和绿脓杆菌作用 ,说明滇白珠根水提物、乙酸乙酯和正丁醇萃取物均有一定的抑菌作用。首次证明滇白珠非挥发部分也有抗细菌作用。     

HPLC测定民族药滇白珠抗炎镇痛活性部位(ARF)中4种活性成分的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定民族药滇白珠抗炎镇痛活性部位(ARF)中4种活性成分methyl benzoate-2-O-β-D-xylopyranosyl (1-2)[O-β-D-xylopyranosyl (1-6)]-O-β-D-glucopyranoside (MSTG-A),methyl benzoate-2-O-β-Dglucopyranosyl(1-2)[O-β-D-xylopyranosyl(1-6)]-O-β-D-glucopyranoside(MSTG-B),gaultherin及绿原酸的含量测定方法,为滇白珠药材的深入研究及其质量控制提供方法依据,并为后期滇白珠的制剂与临床应用奠定基础。方法:采用COSMOSIL 5C18-PAQ色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0. 2%冰乙酸水溶液为流动相梯度洗脱,柱温25℃,流速1 m L·min~(-1),检测波长294 nm。结果:MSTG-A,MSTG-B,gaultherin,绿原酸分别在0. 014 06～0. 450 00,0. 007 81～0. 250 00,0. 003 13～0. 100 00,0. 000 94～0. 030 00 g·L~(-1)线性关系良好(r≥0. 999 7);方法精密度、重复性、稳定性良好;平均加样回收率分别在100. 81%,99. 19%,96. 12%,102. 56%,其RSD分别为1. 4%,0. 7%,0. 7%,2. 4%。滇白珠ARF部位中MSTG-B,MSTG-A,gaultherin,绿原酸质量分数分别为23. 608,41. 973,8. 282,2. 673 mg·g~(-1)。结论:该方法操作简便、准确、重复性好,适用于滇白珠抗炎镇痛活性部位中4种活性成分的含量测定,为滇白珠药材的深入研究、质量控制与综合评价提供参考依据,并为后期滇白珠药材的制剂与临床应用奠定基础。     

民族药滇白珠资源研究

目的 :系统调查滇白珠的民间用法、资源分布规律、生长环境和生物学特性 ,为客观评价和合理开发民族药滇白珠奠定基础。方法 :采取查阅文献和标本与实地考察和专家咨询相结合的方法。结果和结论 :滇白珠广布江南各省 ,云南是集中分布区 ,而昆明、楚雄和大理是主产区 ,主产地气候温暖潮湿 ,滇白珠在其生长环境中不是优势种 ,有时与芳香白珠等 4种同属植物混生。滇白珠生于海拔 400～3500m的山地 ,适应不同光照条件 ,喜光 ,多数生于向阳陡坡 ,少数生于密林下。主要以根茎进行无性繁殖。民间主要用于治疗风湿性关节炎 ,也用于眩晕、闭经、风寒感冒、咳嗽、哮喘、劳伤吐血、湿疹、水臌、跌打损伤、经闭、阿米巴痢疾、急慢性前列腺炎等疾病。今后应着重在治疗风湿性关节炎和止痛方面进行药理和临床研究 ,为开发成中药新药提供依据。     

滇白珠药材的TLC法定性鉴别

目的：建立滇白珠药材的TLC法定性鉴别。方法：采用TLC法对滇白珠药材进行定性鉴别。结果：各供试品色谱中,在与槲皮苷对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点色谱清晰,附近无杂质斑点干扰。结论：本方法专属性强,可更好地控制药材质量。     

基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap MS和特征分子网络技术快速鉴定滇白珠水提物化学成分

目的 采用高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（HPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）结合特征分子网络（feature-based molecular networking,FBMN）技术,对滇白珠Gaultheria leucocarpa var. crenulata水提物化学成分进行快速分析。方法 采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,在正、负离子模式下,采集滇白珠水提物MS/MS数据,并在全球天然产物社会分子网络（Global Natural Products Social Molecular Networking,GNPS）网站（http://gnps.ucsd.edu）上创建FBMN。根据Compound Discoverer软件及GNPS数据库匹配结果,结合化合物的精确相对分子质量、特征碎片离子、色谱保留时间,参考对照品、文献及Pubchem、Massbank数据库,快速鉴定滇白珠水提物的化学成分。结果 共从滇白珠水提物中鉴定出130个成分,并区分了同分异构体,包括黄酮类40个、苯丙素类22个、糖苷类19个、有机酸类10个、生物碱类10个、酚类7个、萜类6个、酯类5个、氨基酸类4个、糖类3个、核苷酸类2个、醛类2个,其中5-O-咖啡酰奎宁酸、4-熊酰奎宁酸、邻苯二甲酸二丙酯这3个成分为根据FBMN结果推测解析。结论 FBMN弥补了传统分子网络在鉴定同分异构体方面的不足,HPLC-Q- Exactive Orbitrap MS结合FBMN能快速、准确、全面地鉴定滇白珠水提物化学成分,可为其进一步开发与应用提供依据。     

滇白珠抗风湿性关节炎活性成分研究

目的:对滇白珠的各提取液进行抗大鼠佐剂性关节炎活性筛选,为临床应用滇白珠治疗风湿性关节炎提供实验基础.方法:制备滇白珠的水提取总液、乙醇提取总液、醋酸乙酯提取液、正丁醇提取液、乙醇提取总液剩余部分液.滇白珠的正丁醇部分,在大孔树脂中用不同溶液洗脱,得到水洗脱部分、30%乙醇洗脱部分和95%,乙醇洗脱部分.采用大鼠佐剂性关节炎模型,观察滇白珠不同部分提取液对大鼠关节肿胀的影响.结果:滇白珠的水提液组(A)、酸酸乙酯提取液组(C)和正丁醇提取液组(D)可明显减轻大鼠关节肿胀程度,正丁醇提取液组(D)作用最强(P<0.05,P<0.01).进一步研究显示,滇白珠正丁醇提取液中水洗脱液和30%乙醇洗脱液均有抗大鼠佐剂性关节炎作用,而30%,乙醇洗脱液作用更明显(P<0.05,P<0.01).结论:滇白珠正丁醇提取液30%乙醇洗脱部分有明显的抗大鼠佐剂性关节炎作用.     

滇白珠糖浆治疗痰瘀交阻型眩晕临床观察

目的 观察滇白珠糖浆治疗痰瘀交阻型眩晕的临床疗效.方法 50例患者给予滇白珠糖浆治疗,疗程14d.结果 临床总有效率为100%;临床主要症状明显改善,急性发作期疗效尤其显著.结论 滇白珠糖浆治疗痰瘀交阻型眩晕有较好疗效,且无明显副作用.     

一测多评法测定透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的含量

目的: 建立透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的一测多评含量测定方法。方法: 采用高效液相色谱,以中药透骨香为研究对象,以儿茶素为内参物,建立其与白珠树苷、滇白珠苷A的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评。同时采用外标法测定28批透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的含量,验证一测多评法的准确性。结果: 建立的校正因子重复性良好,采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异。结论: 以外标法测定儿茶素,利用相对校正因子实现对白珠树苷和滇白珠苷A测定是准确的、可行的,一测多评法可以用于特定的不同类型成分间的测定。     

滇白珠叶油抗菌活性的实验研究

目的:探索民族药滇白珠叶油的抗菌活性。方法:利用药物浓度稀释培养对照观察法确定最小抗菌浓度。结果:滇白珠叶油有类似水扬酸甲酯的抗菌作用,对大肠杆菌的抗菌浓度为0.3125%,对金黄色葡萄球菌的抗菌浓度为5%。结论:滇白珠叶油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抗菌作用,但对前者的抗菌效果是后者的16倍。     

滇白珠及其同属药用植物研究进展

综述民族药滇白珠及同属药用植物的资源、化学、药理、临床、产品开发等方面的研究。国内外对同属15种药用植物,特别是平铺白珠树和芳香白珠进行过研究。今后应着重在治疗风湿性关节炎方面进行药理和临床研究,以便开发成中药新药。     

HPLC测定滇白珠药材中槲皮素的含量

滇白珠为杜鹃花科植物滇白珠Gaultheria yun-nanensis(Franch.)Rehd的根,其植物亦称满山香、透骨草、老鸦泡、透骨香[1,2],产于我国云南、四川、贵州、湖北、湖南、广东、广西、江西等地区,质量标准在《贵州省中药材、民族药材质量标准》、《中药大辞典》和《中国民族药志》中均有记载。它具有祛风除湿、活血化瘀、通络止痛、清热解毒等功效,用于治疗风湿性关节炎、关节肿痛、跌打损伤、慢性气管炎和风寒感冒等[3,4]。曾从滇白     

滇白珠提取物对胃肠功能以及止泻作用研究

目的:观察滇白珠提取物对胃肠运动功能、吸收功能影响以及止泻作用。方法:采用新斯的明造成小鼠胃排空和小肠推进亢进,乙酰胆碱造成大鼠离体回肠痉挛性收缩,利血平造成小鼠小肠吸收功能障碍,蓖麻油造成小鼠腹泻,观察滇白珠提取物对胃肠运动亢进模型动物胃肠运动,小肠吸收D-木糖水平以及腹泻次数的影响。结果:滇白珠提取物能够显著减少小鼠胃排空(增加胃内残留率)和小肠推进率;显著抑制大鼠离体回肠痉挛性收缩;显著提高小肠吸收D-木糖水平(增加尿液中D-木糖的排出量);显著减少小鼠腹泻次数。结论:滇白珠提取物具有显著抑制胃肠运动亢进,改善小肠吸收功能以及止泻作用。     

不同来源滇白珠中木脂素苷的含量测定

目的 :测定滇白珠中木脂素苷的含量 ,探讨评价滇白珠质量的方法。方法 :高效液相色谱法。色谱柱为KromasilC18(0 .4cm× 2 5cm) ,流动相为甲醇 乙腈 水 (30∶5∶6 5 ) ,波长 220nm ,外标法。结果 :进样量与峰面积线性关系良好 (D₁,D₂ ,D₄ 分别为r₁=0.9997,r₂ =0.9999和r₄=0.9999)。D₁平均回收率为 98.9% ,RSD 2.6%。不同产地药材木脂素苷 (LD)含量不同 ,贵阳、广西金秀县和昆明LD平均测定值分别是 :208.8,158.2,154.8mg·(100g)^-1。小范围采集样品LD含量基本稳定 ,其变化幅度明显小于不同分布地区的差异。嫩茎比枯老茎LD总含量高1倍 ,采收时留嫩去老方可保证疗效。结论 :此方法简便、可靠 ,可以作为评价滇白珠质量的参考方法。     

HPLC-DAD测定不同来源滇白珠根中木脂素苷含量

目的:测定不同来源滇白珠根中木脂素苷含量,进一步探讨滇白珠质量标准的制定。方法:HPLC-DAD联用检测技术。色谱柱:Kromasil C18,流动相为甲醇-乙腈-0.1%TFA(25∶5∶70);检测波长220nm,流速0.7ml/min,柱温为25℃,外标法定量。结果:进样量与峰面积线性关系良好(D2、D3均为r=0.9999)。D2平均回收率为100.8%,RSD 2.4%。比较不同产地药材木脂素苷D2、D3含量,遵义样品D2含量最高,而广西几乎不含D2,但D3含量最高。不同月份药材木脂素苷D2、D3含量呈一定趋势变化,其中10月和3月的木脂素苷D2、D3含量较其他月份高。结论:此方法简便、可靠,可以作为评价滇白珠质量的参考方法。     

民族药滇白珠的体外抗氧化活性研究

目的:研究滇白珠(G.leucocarpa var.yunnanensis)地上部分乙醇提取物的不同极性萃取部位和大孔树脂柱层析的不同浓度甲醇洗脱部位的抗氧化活性。方法:采用清除DPPH(2,2-二苯基苦味酰基苯肼基)和ABTS[2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐]自由基的方法对滇白珠乙醇提取物的不同极性萃取部位和大孔树脂柱层析的不同浓度甲醇洗脱部位进行清除自由基能力的综合评价。结果:乙酸乙酯部位的抗氧化能力最强,与阳性对照相近。100%甲醇流出部位的抗氧化能力能力最强,强于阳性对照。结论:滇白珠地上部分具有较好的体外抗氧化活性。     

金骨莲胶囊HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的建立金骨莲胶囊HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别方法对其进行质量一致性评价,为该制剂的质量控制提供参考。方法采用ACE Excel 5 C18-PFP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱进行检测;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;体积流量为0.8 mL/min;柱温为40℃;检测波长为210 nm;进样量为10μL;建立12批金骨莲胶囊指纹图谱。对12批金骨莲胶囊指纹图谱进行相似度评价、层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)和主成分分析(PCA),并结合正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)寻找不同批次金骨莲胶囊的差异成分。结果建立的金骨莲胶囊HPLC指纹图谱共标定了19个共有峰,其中2、8、11号峰归属于汉桃叶,5、7、10、12、15号峰归属于大血藤,16、17、19号峰归属于透骨香,1号峰为5味药材共有,3号峰归属于八角枫和大血藤,13号峰归属于大血藤和透骨香,4、9、14、18号峰归属于大血藤和汉桃叶,6号峰归属于大血藤、汉桃叶和透骨香。通过与对照品对比指认出2、3、6、7、9、12、13、15、16号峰分别为富马酸、没食子酸、原儿茶酸、红景天苷、绿原酸、香草酸、表儿茶素、鹅掌楸苷、滇白珠苷A。12批金骨莲胶囊指纹图谱相似度均在0.910以上,HCA、PCA 2种分析方法均把样品分为了3类,结合OPLS-DA筛选出了导致各批次之间产生差异的7个差异性标志物,分别为15(鹅掌楸苷)、14、6(原儿茶酸)18、16(滇白珠苷A)、19、9(绿原酸)号色谱峰。结论该分析方法简单可行、具有良好精密度、重复性和稳定性,建立的指纹图谱可为金骨莲胶囊的质量评价提供参考。     

基于多种分析模式构建壮药滇桂艾纳香HPLC指纹图谱

目的:建立滇桂艾纳香药材HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长280nm。建立滇桂艾纳香指纹图谱,并对其进行相似度评价、聚类分析和主成分分析。结果:建立了10批滇桂艾纳香药材的指纹图谱共有模式,标定了15个共有峰,指认了原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸和芦丁4个指标性成分。10批药材相似度均>0.9;聚类分析结果将药材聚为3类,主成分分析筛选出影响药材质量的5个主要组分。结论:所建立的指纹图谱及其分析模式稳定可靠,可为滇桂艾纳香的质量控制提供参考。     

桔梗皂苷类成分及其质量分析

综述中药桔梗的皂苷类成分及其质量分析方法.桔梗的皂苷类成分已近40种,由于不同的研究者及中文译者未按照结构特点和统一的命名原则命名,给我们全面了解和把握桔梗皂苷类成分以及后续的研究工作带来了很大混乱.现依据皂苷元母核化学结构的变化规律将桔梗的皂苷类成分归纳为桔梗酸类、桔梗二酸类和远志酸类3种主要类型.已报道桔梗皂苷类成分的质量分析有重量法、HPLC-ELSD法以及RP-HPLC法等,但由于这类成分结构复杂多样,性质不稳定,目前还缺少权威、可靠的质量控制方法.为此,我们建议将桔梗皂苷类成分水解成皂苷元后,再测定其中2～3种皂苷元的含量作为该药材的质量控制指标.     

离体培养滇重楼根茎中甾体皂苷类化学成分的研究

该研究采用LC-MS与HPLC技术对离体培养条件下3种不同产地滇重楼根茎中甾体皂苷类化学成分进行定性、定量分析,探究在离体培养条件下滇重楼根茎中能否合成包含2020年版《中国药典》中质量控制指标性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ和Ⅶ在内的甾体皂苷类化学成分。从3种不同产地云龙长新(S1)、大理凤仪(S2)和洱源牛街(S3)离体培养滇重楼根茎中鉴定出滇重楼皂苷A、D、E,原重楼皂苷Ⅱ,重楼皂苷G、H,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,薯蓣次皂苷A,Tg, isomer of Th, saponin Th, reclinatoside, proto-paris D,pseudoproto-dioscin, 23-O-glc-(23S,25R)-spirost-5-en-3β,23α-diol-3-O-rha-(1→2)-[ara(1→4)]-glc或27-O-glc-(23S,25R)-spirost-5-en-3β,27α-diol-3-O-rha-(1→2)-[ara(1→4)]-glc共20个甾体皂苷类化学成分。其中,从离体培养S1滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.109 1%、0.165 2%、0.051 03%,总量为0.325 3%;从离体培养S2滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.192 2%、0.074 23%,总量为0.266 5%;从离体培养S3滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.207 7%、0.186 9%,总量为0.394 6%。上述结果表明在离体培养条件下滇重楼根茎中可以合成包含2020年版《中国药典》中质量控制指标性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ在内的甾体皂苷类化学成分,但总量尚未达到2020年版《中国药典》不得少于0.60%的规定。因此,该研究滇重楼离体培养方案可行,但离体培养条件还需进一步改善。     

产地和季节对滇白珠木脂素苷含量的影响

目的研究产地和季节对滇白珠木脂素苷(LG)含量的影响,为开发提供依据.方法高效液相色谱法.色谱柱为Kromasil C18(0.4 cm×25 cm),流动相为甲醇-乙腈-水(30565),波长220 nm,外标法.结果LG含量在滇白珠内分布规律是根＞茎＞叶,只有楚雄林下样品茎高于根.采自海南、广东、云南、贵州、重庆等省市的9个地点的样品中,根中LG含量(mg/g)最高的是海南2.15,其次是贵州2.00,云南楚雄和昆明样品仅1. 42和1.44.根中LG含量在9月(果期)以前仅1. 438 mg/g,比11月低24.4%.结论海南和贵阳样品LG含量最高,但结合生物量考虑,选云南大理和广西金秀的资源更合理.不同季节滇白珠LG含量变化规律是花期(6～7月)和果期(8～9月)根中含量较低,因此采根应避免花果期.而茎则花果期含量较高,故采茎应选花期.如采收全株8月最适宜.