淫羊藿苷抑制正常黑素细胞黑素合成的研究

目的:观察中药单体淫羊藿苷对体外培养的正常黑素细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响。方法:选择高、中、低3个浓度的中药单体作用于体外培养的黑素细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率。采用间接免疫荧光染色法对药物作用的黑素细胞和对照的酪氨酸酶(tyrosinase熏TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinaserelatedprotein-1熏TRP-1)、TRP-2进行标记,然后采用激光共聚焦显微镜半定量分析淫羊藿苷作用后细胞内3种成分表达量的变化。结果:淫羊藿苷明显抑制酪氨酸酶活性和黑素的生成(P<0.01),且呈浓度依赖性,但淫羊藿苷抑制黑素生成的作用较氢醌弱(P<0.01);淫羊藿苷以浓度依赖的方式促进细胞的增殖,氢醌则抑制了细胞的增殖;淫羊藿苷对黑素细胞内TYR和TRP-2的表达没有明显影响,但是对TRP-1的表达却明显增加了。结论:淫羊藿苷能够抑制黑素合成和酪氨酸酶活性,这种抑制可能主要通过抑制酪氨酸酶活性起作用。     

脱水淫羊藿素同系物治疗男性勃起功能障碍的临床观察

目的：探讨脱水淫羊藿素（anhydroicaritin,AHI）同系物对中老年男性勃起功能障碍（ED）的作用.方法：抽取20例50~70岁中度ED患者,分成治疗组和对照组.分别观察、记录治疗前后IIEF、NPT、ICI、PSV的变化.结果：治疗组与对照组治疗前后勃起功能均有改善.结论：从淫羊藿和苦参中提取的脱水淫羊藿素同系物对中老年男性ED有治疗作用,疗效与枸橼酸西地那非试验数据无显著差异性（P〉0.05）.     

淫羊藿苷等6种中药单体抑制Cloudman S91黑素瘤细胞株黑素合成的研究

观察淫羊藿苷、白藜芦醇苷、红景天苷等6种中药单体对体外培养的CloudmanS91黑素瘤细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响。方法:选择系列浓度梯度的中药单体作用于体外培养的CloudmanS91黑素瘤细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率。结果:淫羊藿苷、白黎芦醇苷和红景天苷3种药物明显抑制酪氨酸酶活性和黑素的生成(P<0.05),且呈浓度依赖性,作用3d内呈时间依赖性。其中淫羊藿苷的作用与氢醌比较,差异无显著性(P>0.05),而白黎芦醇苷和红景天苷的作用明显弱于氢醌(P<0.01)。淫羊藿苷、白黎芦醇苷和红景天苷均促进细胞的增殖,其中淫羊藿苷对细胞增殖促进作用明显。结论:淫羊藿苷、白黎芦醇苷和红景天苷能抑制CloudmanS91黑素瘤细胞黑素合成和酪氨酸酶活性。     

淫羊藿在男科病中的应用与研究

淫广藿又名仙灵脾,并名"三枝九叶草",为小檗科,淫羊藿属(Epimedium)植物的泛称,为多年生草本,主产于陕西、辽宁、山西、湖北、四川、广西等地。本品性温,味辛甘。功效补肾壮阳,祛风湿,主治阳痿,腰膝酸软,风湿痹痛等症,是男科临床常用的中药之一。     

肾气丸加人参淫羊藿治精冷不育症的疗效观察

不孕不育症是临床常见的病症,据资料报道,约占生育年龄夫妇的8-17%,其中男女各占50%,在男性不育症中因精冷不孕育者为多数.精冷属于祖国医学中命门火衰,肾阳不足的范围之中,故此我们采用了温肾补阳的方法对22例精少、死精患者进行疗效观察,其结果报道如下.     

淫羊藿育宝汤对肾阳亏虚型不育症患者精液常规及性激素水平的影响

目的：探讨淫羊藿育宝汤对肾阳亏虚型不育症患者精液常规及性激素水平的影响.方法：选取符合纳入标准的病例169例,按随机方法分为中药组86例和对照组83例,观察两组治疗前后精液常规、性激素五项的变化.结果：两组治疗后各项精液常规比较,中药组明显优于对照组（P＜0.05）;两组治疗后各项激素检验比较,除对促卵泡刺激素、泌乳素无明显影响（P＞0.05）外,中药组对促黄体生成素、雌二醇、睾酮的含量明显高于对照组.随访6个月后,中药组有25例夫妇受孕成功,总有效率为86.05％,对照组仅9例夫妇受孕成功,总有效率为72.29％,两组有明显差异（P＞0.05）.结论：淫羊藿育宝汤可明显改善肾阳亏虚型不育症患者精液异常状况,提高性激素水平,提升授孕能力.     

阿维A抑制鼠黑素瘤B16细胞的增殖作用

目的:探讨阿维A(acitretin)、顺铂及两者联合应用对鼠黑素瘤B16细胞株(简称B16细胞)的作用.方法:分别采用阿维A(浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)、顺铂(浓度为2、4、8 mg/L)及两药联合处理B16细胞,对照组B16细胞培养不加上述药物.在显微镜下观察细胞形态变化,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,应用两药相互作用指数(CDI)分析阿维A与顺铂的作用.结果:不同浓度阿维A对B16细胞增殖均具有抑制作用,与对照组相比,吸光度(A)值均有不同程度下降(P<0.01);对照组细胞贴壁生长良好,用药组细胞皱缩、破裂;两药CDI均>0.85.即阿维A和顺铂联合应用对B16细胞的增殖抑制具有相互协同作用.结论:阿维A对B16细胞的增殖有抑制作用,与顺铂联合应用相互间可增强诱导B16细胞的凋亡作用.     

恶性黑素瘤全身皮肤转移一例北大核心CSCD

患者男,70岁,拾荒者。因在足跟黑色斑块6年,全身皮下结节2年于2012年5月24日就诊本院皮肤科。     

芹菜素对人恶性黑素瘤A375细胞周期的影响及机制研究

目的研究芹菜素对人恶性黑素瘤细胞系A375细胞周期的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 A375细胞经芹菜素干预后,MTT比色法检测芹菜素对细胞增殖的影响,PI单标流式细胞术检测芹菜素对细胞周期的影响,蛋白印迹法检测芹菜素对细胞周期相关蛋白Cyclin D1及p21表达的影响。结果芹菜素在体外能明显抑制A375细胞增殖,其抑制效应呈时间及浓度依赖性;芹菜素可影响A375细胞周期,经芹菜素干预的A375细胞,其细胞周期被阻滞于G1期;芹菜素可显著影响A375细胞周期相关蛋白的表达,芹菜素在下调A375细胞Cyclin D1表达的同时,明显上调p21蛋白的表达。结论芹菜素能拮抗人恶性黑素瘤A375细胞增殖,其机制可能与芹菜素影响A375细胞周期相关蛋白Cyclin D1/p21的表达进而调控A375细胞周期进程有关。     

全身转移性黑素瘤1例

患者女,60岁。头面、躯干、四肢大小不等黑红色结节,无痛痒3年,半年内泛发全身。皮肤科情况:头面、躯干、四肢见大小不等高粱粒至黄豆大小结节,呈皮色、暗红色及黑色。左膝关节上方见一直径约2cm×2cm大小肿块,其上见4～5个大小不等皮色至黑色结节,部分结节表面结痂。皮损组织病理示:真皮内弥漫性肿瘤样细胞浸润,此肿瘤样细胞核大、核仁明显,部分肿瘤样细胞呈巢状排列,肿瘤组织内见坏死。免疫组织化学染色显示肿瘤细胞LCA(-),CK20(-),S100蛋白及HMB45弥漫强阳性,Vimentin弥漫阳性。诊断:黑素瘤。     

黑素瘤细胞中脂肪酸结合蛋白7的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨黑素瘤细胞中脂肪酸结合蛋白7(FABP7)的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系。方法采用免疫组织化学方法分析临床45例良性痣(为皮内痣)、60例原位黑素瘤、60例转移性黑素瘤标本中FABP7的表达。取组织细胞进行体外培养,选择FABP7特异性小干扰RNA(siRNA)降低FABP7的表达,然后检测黑素瘤细胞的增殖及凋亡情况。结果良性痣细胞浆及细胞核中FABP7的表达均高于原位黑素瘤、转移性黑素瘤(P<0.05),原位黑素瘤和转移性黑素瘤细胞浆及细胞核中的FABP7表达差异无显著性(P>0.05)。下调FABP7表达可减少原位黑素瘤细胞31.0%及转移性黑素瘤细胞81.0%的增殖性,下调FABP7表达对原位黑素瘤及转移性黑素瘤细胞的凋亡率无明显影响。结论良性痣中FABP7表达比黑素瘤高,FABP7对体外培养黑素瘤细胞增殖有影响。     

反向寡脱氧核苷酸抑制细胞周期素D1表达及对黑素瘤细胞增殖的影响

目的探讨细胞周期素D1 反向寡脱氧核苷酸对恶性黑素瘤的潜在治疗作用。方法合成针对细胞周期素D1 mRNA翻译起始部位序列的20bp硫代磷酸反向寡脱氧核苷酸(AS ODN)。采用RT PCR检测AS ODN对黑素瘤(B16 细胞)细胞周期素D1 mRNA水平的影响 ;用流式细胞仪检测细胞周期素D1 蛋白表达及细胞周期分布 ;固绿染色计数、集落形成抑制试验体外观察AS ODN对B16 细胞增殖的影响。结果细胞周期素D1 mRNA反向链明显抑制B16 细胞细胞周期素D1 mRNA和细胞周期素D1 蛋白表达 ,降低S期细胞百分比 ,且明显抑制B16 细胞生长和集落形成。结论细胞周期素D1 反向寡脱氧核苷酸能有效抑制黑素瘤细胞增殖。     

白花蛇舌草总黄酮对黑色素瘤A375和B16细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察白花蛇舌草总黄酮（FOD）对体外培养黑色素瘤A375和B16细胞增殖和凋亡的影响。方法：体外培养黑色素瘤A375和B16细胞,使用不同浓度的FOD作用24 h、48 h,采用MTT比色法检测细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞凋亡的影响。结果：FOD抑制黑色素瘤A375和B16细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用呈明显的浓度和时间依赖性。结论：FOD能有效抑制黑色素瘤A375和B16细胞细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

恶性黑素瘤FHIT基因蛋白的表达与肿瘤细胞增殖、凋亡关系的研究

目的 研究恶性黑素瘤(maligmant melanoma,MM)脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的表达及与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系。方法 用免疫组化SP法检测57例原发性MM和20例正常人皮肤中FHIT蛋白和增殖细胞核抗原的表达水平,用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测其细胞凋亡指数。结果 ①MM中,FHIT蛋白的表达水平明显低于正常人皮肤(P<0.001),增殖细胞核抗原的表达水平和细胞凋亡指数显著高于正常人皮肤(P<0.001);②FHIT蛋白、增殖细胞核抗原蛋白表达水平及细胞凋亡指数与MM患者的年龄、性别和肿瘤发生的部位无明显相关,而与其Clark分级和淋巴结转移状态明显相关(P<0.01);③MM与正常人皮肤相比,其细胞凋亡指数与增殖细胞核抗原的比值显著降低(P<0.001);④FHIT蛋白表达与MM细胞活跃增殖和凋亡受抑之间存在一定相关性(P<0.01)。结论 FHIT基因可能参与了MM肿瘤细胞的增殖、凋亡的调节,其表达下降可能与MM的发生、发展过程有关。     

TRP-1编码基因反义核酸对黑素细胞增殖及功能的影响

目的 构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响。方法 将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑素瘤细胞。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRP-1mRNA水平的变化,免疫印迹法检测TRP-1蛋白水平的改变。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并用L-多巴测定酪氨酸酶活性的改变。结果 成功构建重组反义表达载体pcDNA3.1/TRP-1(-),转染细胞稳定表达TRP-1反义核酸。RT-PCR提示TRP-1mRNA水平显著下降,免疫印迹提示其TRP-1蛋白表达水平降低。流式细胞检测表明反义TRP-1转染细胞发生细胞周期G1期阻滞。转染组黑素细胞及黑素瘤细胞酪氨酸酶活性抑制率分别达46%和54%。结论 TRP-1在黑素细胞及黑素瘤细胞的增殖及功能方面发挥重要作用,TRP-1反义核酸转染细胞细胞周期受到阻滞,酪氨酸酶活性明显降低。     

恶性黑素瘤的端粒酶活性研究

目的检测恶性黑素瘤标本中的端粒酶活性,探讨端粒酶在黑素瘤发生机制中的作用。方法采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定法(PCR-ELISA),对黑素瘤标本进行端粒酶的定性和定量分析。结果90.0％的原发性黑素瘤和100％的转移性黑素瘤显示端粒酶阳性,仅14.3％的黑素细胞痣呈阳性,而正常皮肤中均为阴性。转移性黑素瘤、原发性黑素瘤、黑素细胞痣和正常皮肤的端粒酶活性水平的平均A值分别为0.729、0.405、0.118和0.044。各组端粒酶活性A值之间经统计学分析差异有显著性。结论大部分恶性黑素瘤患者中存在高水平的端粒酶活性,提示端粒酶可能在黑素瘤的发生机制中起重要作用,对黑素瘤的诊断有一定的临床意义。     

恶性黑素瘤患者T细胞化学趋化功能

目的　探讨恶性黑素瘤患者循环T细胞在体外对单核细胞化学趋化蛋白 1 (MCP 1 )的化学趋化功能及其与肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)及与肿瘤转移之间的关系。方法　用微量化学趋化装置和免疫组化方法测定患者T细胞对MCP 1的化学趋化功能和TIL计数。结果　原发性和转移性黑素瘤患者T细胞对MCP 1的化学趋化功能均明显低下 ,而基底细胞癌患者T细胞的化学趋化功能正常。免疫组化研究发现原发性恶性黑素瘤TIL数量与T细胞的化学趋化功能之间无关。结论　原发性和转移性恶性黑素瘤患者循环T细胞特异性地对MCP 1的化学趋化反应低下。这可能是由于这些细胞上的MCP 1受体表达或调节异常所致     

Cutaneous Malignant Melanoma Associated with Papillary Thyroid Cancer

As the survival from cutaneous malignant melanoma and its clinical concerns have been steadily increasing, the possibility has been raised of an increased risk of second primary cancers in the patients with malignant melanoma. Especially, recent studies have identified an association between cutaneous malignant melanoma and thyroid carcinoma. We here report on a case of cutaneous malignant melanoma that developed in a 61-year-old female patient who had hypothyroidism caused by papillary thyroid carcinoma. We suggest that the individuals who have cutaneous malignant melanoma may be predisposed to other primary cancers and especially thyroid carcinoma. Continuous monitoring of the thyroid function in melanoma patients is required because hypothyroidism can worsen due to malignant melanoma and this is probably associated with thyroid carcinoma.