HPLC法测定枳术丸中4种有效成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定枳术丸中白术内酯Ⅰ等4种成分的含量。方法采用反相高效液相方法分离检测柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷和白术内酯Ⅰ。色谱柱:symmtryC18(250mm×4.6mm,5μm);以甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱)为流动相;测定波长:283nm和224nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:30℃;进样量:10μL。结果测定3批枳术丸中,柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷及白术内酯Ⅰ含量分别为10.77±0.61、1.16±0.13、9.41±0.09、0.38±0.02mg·g-1,并且4种成分得到完全分离,柚皮苷平均回收率为98.81%(RSD=1.11%,n=6);橙皮苷平均回收率为100.63%(RSD=1.90%,n=6);新橙皮苷平均回收率为99.32%(RSD=1.44%,n=6);白术内酯Ⅰ平均回收率为99.65%(RSD=1.53%,n=6)。结论该方法准确、可靠、重复性好,可作为枳术丸质量控制方法。     

HPLC法同时测定湘产枳壳中5种成分含量的研究

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定湘产枳壳中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和橙皮内酯的含量。方法:采用Venusil XBP C18(4. 6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0. 1%磷酸水为流动相(80∶20),流速1. 0ml/min,柱温35℃,变波长检测。结果:芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯分别在100～2000ng、420～8400ng、32. 12～642. 4ng、260～5200ng、42. 75～855ng内呈良好线性关系,平均回收率分别为98. 7%、101. 0%、100. 7%、100. 6%、98. 6%,且精密度、重复性、稳定性良好;各批次样品中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯的含量范围分别为0. 48%～0. 84%、4. 44%～8. 50%、0. 19%～0. 95%、3. 03%～10. 19%、0. 16%～0. 30%;聚类分析分为3类,即11号样品为一类,2号与10号样品为一类,其余样品为一类;橙皮苷含量在各批次样本中波动较大。结论:本研究建立了湘产枳壳中5种成分的HPLC含量测定方法,该方法简便,准确度高,可为湘产枳壳质量控制提供科学依据。     

枳术颗粒质量标准研究

目的建立枳术颗粒(枳实、白术、荷叶)的质量控制方法。方法采用薄层色谱法鉴别本制剂中的枳实、白术、荷叶;采用高效液相色谱法测定本制剂中辛弗林、荷叶碱、柚皮苷、新橙皮苷。辛弗林色谱条件:流动相甲醇-水(含0.2%磷酸钠,0.3%十二烷基硫酸钠,用磷酸调pH值至3.5)(50∶50);检测波长275 nm。荷叶碱色谱条件:以乙腈为流动相A,以水(含2.2%三乙胺,1.1%冰醋酸)为流动相B,梯度洗脱;检测波长为270 nm。柚皮苷和新橙皮苷色谱条件:流动相乙腈-水(20:80);检测波长284 nm。结果定性鉴别方法专属性强、薄层效果佳。辛弗林的进样量在0.020 6～1.028 3μg范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 9;荷叶碱的进样量在0.020 9～0.521μg范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 9;柚皮苷进样量在0.377～3.770μg范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=1.000 0;新橙皮苷进样量在0.301 6～3.016μg范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=1.000 0。4个待测成分的平均回收率分别为99.7%、97.8%、99.9%、99.5%(RSD%均≤2.0%)。结论本方法准确可靠、重现性好,可有效控制枳术颗粒的质量。     

枳实及其提取物质量评价法的研究

 目的建立枳实及其提取物中辛弗林等生物碱类成分和橙皮苷等4种黄酮类成分的综合质量评价法。方法采用高效液相色谱法,以InertsilODS-3(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱分别对枳实及其提取物中辛弗林生物碱类成分和新橙皮苷、橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷黄酮类成分进行测定。辛弗林:流动相为甲醇-水(7:4)(水中含0.02%磷酸和0.1%十二烷基硫酸钠),检测波长275nm,流速0.6mL·min^-1;橙皮苷等4种黄酮类成分:流动相为甲醇-水-冰醋酸(38:58:4),检测波长284nm,流速1.0mL·min^-1。结果辛弗林、橙皮苷、柚皮苷分别在0.04～0.64,0.03～0.48和0.03～0.48g·L^-1内,线性关系良好。加样回收率分别为98.3%,98.7%,97.9%。结论本方法准确,重现性好,可作为枳实及其提取物综合质量评价分析法。     

一测多评结合指纹图谱的肝复乐胶囊质量控制研究

目的建立一测多评(QAMS)法同时测定肝复乐胶囊中白术内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、野黄芩苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、芦荟大黄素7种药效特征成分含量的方法。方法采用YMC-Pack ODS-A色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,分段转换波长为285 nm(0～30 min、35～50 min)、260 nm(30～35 min、50～80 min),柱温25℃,流速0.8 mL/min,建立肝复乐胶囊HPLC指纹图谱,并以橙皮苷为内标,建立白术内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、野黄芩苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、芦荟大黄素的相对校正因子,计算7种成分的含量,并与外标法测定结果进行比较,以验证QAMS方法的准确性、重复性及可行性。结果 10批指纹图谱共确定29个共有峰,指认白术内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、野黄芩苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、芦荟大黄素7种主要特征成分。10批样品图谱的相似度均大于0.95,峰形、分离度均较为良好,精密度及重复性RSD均小于1.5%,在24h内供试品溶液稳定,测定成分线性关系良好,线性范围适当。QAMS法计算值与外标法实测值差异无统计学意义。结论本研究建立的QAMS方法可作为简便快捷的质量评价模式用于肝复乐胶囊中7种成分的质量控制。     

UPLC同时测定枳壳厚朴8种成分含量

目的建立UPLC同时测定枳壳厚朴中厚朴酚、和厚朴酚、水合橙皮内酯(Meranzin hydrate,MH)、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素8种成分含量的方法。方法采用Waters UPLC CLASS-H色谱柱(BEH C_(18),2.1 mm×100 mm,1.7μm)。流动相为乙腈(A)-0.5%乙酸水(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min~(-1),检测波长290 nm,柱温40℃。结果厚朴酚、和厚朴酚、MH、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素分别在0.418 75～13.4,0.328 125～10.5,1.375～44,25.062 5～802,3.718 75～119,21.5～688,4.875～156,0.387 5～12.4μg线性关系良好(r0.999 8),平均回收率均大于95.0%,加样回收率分别为99.28%(RSD2.01%),93.27%(RSD4.45%),100.38%(RSD2.36%),106.98%(RSD1.98%),104.60%(RSD 1.57%),100.62%(RSD1.41%),102.04%(RSD 0.25%),95.76%(RSD5.32%)。结论该方法重复性好、专属性强、简便、快速、分离效果好,可为科学评价及全面控制枳壳厚朴的质量提供参考。     

一测多评法测定清热止咳颗粒及中间体中7种黄酮类成分的含量

建立同时测定清热止咳颗粒及清热止咳颗粒中间体中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷和汉黄芩苷7种黄酮类成分的一测多评方法(QAMS)。采用高效液相色谱法,Thermo BETASIL C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0. 1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速0. 8 m L·min-1,检测波长280 nm,柱温30℃。以新橙皮苷为内参物,建立该成分与芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷和汉黄芩苷的相对校正因子,采用该相对校正因子计算其他6种成分的质量分数,同时与采用外标法测定的质量分数进行比较,验证QAMS的可行性和准确性。新橙皮苷与芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷和汉黄芩苷的相对校正因子分别为1. 150,1. 109,1. 110,0. 658,0. 723和0. 572,在不同实验条件下相对校正因子重现性良好,7种成分的计算值与实测值无显著性差异。以新橙皮苷为内参物,同时测定芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷和汉黄芩苷的QAMS准确且可行,可用于清热止咳颗粒及中间体的质量控制。     

UPLC法同时测定痛泻要方中药饮片及其破壁饮片中7种活性成分的含量

摘要：目的 建立超高效液相色谱（UPLC）方法同时测定痛泻要方（TXYF）中药饮片及破壁饮片中芍药内酯苷、芍药苷、升麻素、芸香柚皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷、川陈皮素七种成分的含量,为痛泻要方中药饮片及破壁饮片的质量控制提供依据。方法 以UPLC法,色谱柱为Water Acquity UPLC BEH C18（100mm×2.1mm,1.7μm）为色谱柱,采用乙腈-0.1%甲酸为流动相;进行梯度洗脱;流速：0.3 mL/min;检测波长为240 nm;柱温35 ℃;进样量2 μL。对超高效液相色谱（UPLC）方法进行专属性、线性关系、灵敏度、精密度、回收率和稳定性的验证。定量测定痛泻要方中药饮片及破壁饮片中芍药内酯苷、芍药苷、升麻素、芸香柚皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷、川陈皮素七种成分的含量。结果 芍药内酯苷、芍药苷、升麻素、芸香柚皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷、川陈皮素分别在15.72-503 μg·mL-1（r=0.999 8）,51.58-1660 μg?mL-1（r=0.999 8）,3.88-124 μg?mL-1（r=0.999 4）,10-320 μg?mL-1（r=0.999 9）,6.72-215 μg?mL-1（r=1）,6.36-203.5 μg?mL-1（r=0.999 8）,0.24-7.75 μg?mL-1（r=0.999 8）浓度范围内呈现良好的线性关系;平均回收率分别为中药饮片99.67%、99.68%、99.75%、99.70%、99.19%、99.92%、99.85%;中药破壁饮片99.41%、100.06%、99.62%、99.92%、99.77%、99.97%、99.91%（n=9）。结论 该方法简便、快速、精确、重复性良好,结果准确可靠,可同时用于痛泻要方中药饮片及破壁饮片的质量控制。     

小儿健脾颗粒质量标准建立研究

目的 建立小儿健脾颗粒（Xiao’er Jianpi Granules,XJG）的定性、定量分析方法。方法 采用TLC法,以“整体鉴别”新模式为基础,建立了一样多测（炒莱菔子、甘草及陈皮）及一板多鉴（炒莱菔子、甘草）的鉴别方法。采用HPLC法,采用Kromasil C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,3.5μm）,以0.1%三氟乙酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,进样量5μL,柱温30℃,体积流量1 mL/min,检测波长252 nm（甘草酸）、275 nm（甘草苷）、283 nm（芸香柚皮苷、橙皮苷）、326 nm(3,6′-二芥子酰基蔗糖、芥子碱硫氰酸盐)。结果 建立的TLC鉴别方法,斑点清晰,能专属的鉴别处方中白术、陈皮、山药、炒莱菔子、焦山楂、甘草;建立了芥子碱硫氰酸盐、3,6′-二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、芸香柚皮苷、甘草苷、甘草酸含量测定方法,6个成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 9）,精密度、稳定性及重复性良好,加样回收率为97.8%～101.6%;4批样品中芥子碱硫氰酸盐、3,6′-二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、芸香柚皮苷、甘草苷、甘草酸的质量浓度分别为0....     

UPLC法同时测定痛泻要方及其破壁饮片中7种活性成分的含量

目的建立超高效液相色谱(UPLC)法同时测定痛泻要方(TXYF)及其破壁饮片中芍药内酯苷、芍药苷、升麻素、芸香柚皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷、川陈皮素7种成分的含量,为痛泻要方破壁饮片的质量控制提供依据。方法以UPLC法,色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,采用乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱;流速:0.3 m L·min~(-1);检测波长为240 nm;柱温35℃;进样量2μL。测定痛泻要方饮片及破壁饮片中芍药内酯苷、芍药苷、升麻素、芸香柚皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷、川陈皮素7种成分的含量。结果芍药内酯苷、芍药苷、升麻素、芸香柚皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷、川陈皮素分别在0.031 4~1.006μg(r=0.999 8),0.103 8~3.32μg(r=0.999 8),0.007 8~0.248μg(r=0.999 4),0.02~0.64μg(r=0.999 9),0.013 4~0.43μg(r=1),0.012 7~0.407μg(r=0.999 8),0.000 5~0.015 5μg(r=0.999 8)浓度范围内呈现良好的线性关系;平均回收率:痛泻要方饮片分别为99.67%、99.68%、99.75%、99.70%、99.19%、99.92%、99.85%;痛泻要方破壁饮片分别为99.41%、100.06%、99.62%、99.92%、99.77%、99.97%、99.91%(n=9)。结论该方法简便、快速、精确、重复性良好,结果准确可靠,可用于痛泻要方饮片及破壁饮片的质量控制。     

HPLC法同时测定白术中4种倍半萜

目的建立HPLC法同时测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮的含有量。方法白术甲醇提取液的分析采用Eclipse Plus C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;柱温25℃;体积流量1. 0 m L/min;检测波长220 nm、276 nm。结果白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮分别在0. 005 2~0. 052 mg/m L (R^2=0. 999 6)、0. 010~0. 10 mg/m L (R^2=0. 999 9)、0. 090~2. 9μg/m L (R^2=0. 999 7)、0. 30~1. 8 mg/m L (R^2=0. 999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率99. 13%~100. 34%,RSD 0. 72%~4. 76%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于白术的质量控制。     

白术抗炎活性成分的研究

 目的对白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)的抗炎活性成分进行研究。方法采用正相、反相硅胶柱色谱对白术中的化合物进行分离,依据理化性质、波谱数据分析进行结构鉴定,采用整体动物试验,对各成分进行初步抗炎作用研究,结果从白术中分离鉴定5个化合物,分别为白术内酯Ⅲ(Ⅰ)、白术内酯Ⅰ(Ⅱ)、12-异戊烯酰-14-乙酰-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇(Ⅲ)、12-α-甲基丁酰-14-乙酰-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇(Ⅳ-1)、12-β-甲基丁酰-14-乙酰-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇(Ⅳ-2)。抗炎结果表明,上述各成分对小白鼠急性炎症模型均有一定的抗炎作用。结论白术中含对小白鼠急性炎症模型有一定作用的抗炎活性成分,其中化合物Ⅲ及化合物Ⅳ-1 ¹³C-NMR波谱数据为首次报道。化合物Ⅳ-2数据为首次报道。     

不同地区白术药材及饮片中白术内酯Ⅱ的含量测定

目的:采用HPLC测定不同地区白术药材及饮片中白术内酯Ⅱ的含量.方法:采用Tigerkin C18 (4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-水(77∶23),流速1.0 mL· min -1,检测波长276 nm,柱温30℃.结果:测定了10个不同产地的白术药材和20个不同地区市售白术片及麸炒白术片中白术内酯Ⅱ的含量.结论:来源于不同地区的白术药材、白术片以及麸炒白术片中白术内酯Ⅱ的含量差别均较大.     

白术药材质量标准研究

目的建立白术中白术内酯类成分的含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同产地的生白术及蜜麸炒白术药材,Lichrospher C18(4.6 mm×150 mm id,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水(62∶38)。流速为1.0 ml/min,白术内酯I、III的检测波长为220 nm、白术内酯II检测波长为270 nm。结果得到了12批生白术、11批蜜麸炒白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的含量。结论按干燥品计算,生白术白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ不得低于0.25,0.31,0.38 mg.g-1;蜜麸炒白术白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ不得低于0.17,0.20,0.25 mg.g-1。     

HPLC法测定白术中白术内酯Ⅱ的含量

目的研究白术内酯Ⅱ的高效液相色谱测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,对白术中白术内酯Ⅱ进行含量测定,色谱柱:Kromasil-C18柱(4.6×250 mm,5μm);流动相:甲醇-水(80∶20);流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:276 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果测定了22种不同白术样品中白术内酯Ⅱ的含量,平均加样回收率为99.8%,RSD为1.2%。结论本法简单、灵敏、结果可靠,可作为白术质量控制的定量方法。     

白术挥发油中苍术酮的稳定性研究

目的：考察不同条件下白术挥发油中苍术酮的稳定性。方法：采用高效液相色谱法测定挥发油中苍术酮及白术内酯含量,以苍术酮及白术内酯的相对含量作为衡量苍术酮变化的指标。结果：白术挥发油纯品中的苍术酮在室温日光条件下,第6 天分解率达到12%以上,在室温避光条件下基本不变。挥发油吐温-80 溶液在室温避光条件下,苍术酮在第5 天的分解率达到30%以上,在冷冻避光条件下基本不变。挥发油中的苍术酮在人工胃液及人工肠液中均不稳定,其变化符合一级动力学过程。结论：在不同条件下,白术挥发油中苍术酮的稳定性不同,稀溶液中48 小时内比较稳定,苍术酮较其纯品稳定性好。     

HPLC法同时测定十三味和中丸中9种成分

目的建立HPLC法同时测定十三味和中丸(柴胡、枳壳、延胡索等)中芍药苷、延胡索乙素、盐酸小檗碱、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷、甘草酸、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含有量。方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Waters SunfireTMC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈⁃0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长210、230、283、345 nm。结果9种成分在各自范围内线性关系良好(R2≥0.9991),平均加样回收率95.1%~102.3%,RSD 0.48%~3.11%。结论该方法简便可靠,可用于十三味和中丸的质量控制。     

胃肠安丸组方中枳壳大黄配伍的化学成分研究

目的 研究枳壳大黄配伍后化学成分变化以及黄酮苷、蒽醌类成分在配伍前后含有量的差异.方法 采用HPLC对药材枳壳与大黄甲醇提取物配伍前后化学成分进行分析,测定枳壳中4种黄酮苷(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷),大黄中5种蒽醌类成分(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)在配伍前后游离型以及结合型含有量的变化.结果 指纹图谱分析结果显示枳壳大黄配伍后并未出现新的化学成分,而配伍后枳壳中黄酮苷类成分,大黄中蒽醌类成分含有量呈现不同程度的增加.结论 枳壳大黄配伍促进了其有效成分黄酮苷及蒽醌类化合物的溶出.     

基于UPLC-QTOF-MS结合多元统计的不同干燥方法白术中化学成分差异分析

目的 建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-QTOF-MS)结合多元统计分析技术的分析方法,比较不同干燥方法对白术中化学成分的影响。方法 采用UPLC-QTOF MS进行分析,对采集的图谱进行峰匹配、峰对齐、滤噪处理等进行特征峰提取,分别采用热图聚类分析、主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA) 对数据进行分析。结果 不同干燥白术样品在PCA轴上呈逐步变化的趋势,能有效的区分,与热图的Pearson聚类结果一致,分类结果较为理想;建立的PLS-DA模型结果较好,各样品中化学成分差异明显,根据一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合软件数据库搜索及相关文献进行成分鉴定,初步鉴定出34种化学成分,并筛选出白术内酯I、苍术醇、白术内酯Ⅱ、芹烷二烯酮、苯乙酸对羟基苯乙酯、白术内酯I(同分异构)、呋喃倍半萜、白术内酯Ⅳ、绿原酸、白术内酯Ⅲ这10种区分不同干燥方法的特征性成分,并呈现出不同的变化规律。结论 本研究成果为揭示不同干燥方法对白术代谢产物的影响规律及探讨白术药材的品质形成机制提供基础资料。