一种评估抗真菌药物抗霉菌作用的新方法：角质层真菌计？…

为了测试非皮肤癣菌性霉菌在人体角质层内的生长状况，测试伊曲康唑抗病原性非皮肤癣菌性霉菌的活性，取健康志愿者和正在接受伊曲康唑２００ｍｇ／ｄ治疗至少２周的患者的皮肤角质层，选黄曲霉菌、类孢镰刀菌、短帚霉菌和暗色柱顶孢霉菌作为试验菌种，用角质层真菌计量分析法进行研究。发现在１周内，健康者的角质样本中均有真菌菌丝体生长，但受试的不同霉菌其生长状态和发育程度有很大的差异。在含有伊曲康唑的角质层样本中真菌生     

球毛壳甲真菌病合并红色毛癣菌感染

甲真菌病为较常见的皮肤真菌感染,常由皮肤癣菌,念珠菌其它真菌等引起,少数可由短帚霉、曲霉等真菌引起。过去普遍认为其发病率在3％—6％左右,而近期则有报道在22％以上。其中以短帚霉、圆酵母样壳孺孢、曲霉属真菌最常见。毛壳属真菌的致病性也只是     

一种评估抗真菌药物抗霉菌作用的新方法——角质层真菌计量生物学分析法

为了测试非皮肤癣菌性霉菌在人体角质层内的生长状况 ,测试伊曲康唑抗病原性非皮肤癣菌性霉菌的活性 ,取健康志愿者和正在接受伊曲康唑 2 0 0mg/d治疗至少 2周的患者的皮肤角质层 ,选黄曲霉菌、尖孢镰刀菌、短帚霉菌和暗色柱顶孢霉菌作为试验菌种 ,用角质层真菌计量分析法进行研究。发现在 1周内 ,健康者的角质层样本中均有真菌菌丝体生长 ,但受试的不同霉菌其生长状态和发育程度有很大的差异。在含有伊曲康唑的角质层样本中真菌生长受到抑制 ,伊曲康唑的抗真菌活性的水平比常规的最小抑菌浓度所示的抗真菌活性要高。结论 :一些重要的病原性非皮肤癣菌性霉菌能通过形成菌丝的方式在人体角质层中生长 ;但其生长过程有部分被角质层自身的一些不明机制所抑制 ,而且被口服的伊曲康唑进一步抑制。     

他汀类降血脂药物对曲霉的体外抗真菌作用

目的 观察降血脂药物洛伐他汀、辛伐他汀对曲霉体外抗真菌活性，以及它们与唑类抗真菌药、两性霉素B的联合抗曲霉作用。方法 分别用纸片扩散法和微量液基稀释法，测定洛伐他汀、辛伐他汀对烟曲霉、黄曲霉、土曲霉和黑曲霉的抗菌活性。用纸片扩散法、琼脂扩散联合Etest法测两种药物与伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B的联合抗曲霉作用。结果 纸片扩散法显示洛伐他汀、辛伐他汀有体外抗曲霉活性。洛伐他汀、辛伐他汀对烟曲霉的最低抑菌浓度（MIC）范围分别为8 ~ 128 μg/mL、4 ~ 64 μg/mL；最低杀菌浓度（MFC）与MIC的差异在2个稀释度内。对于非烟曲霉，48 h时，20 μg洛伐他汀或辛伐他汀不能产生清晰抑菌圈。洛伐他汀、辛伐他汀对黄曲霉的MIC分别为128 μg/mL和64 μg/mL；两者对土曲霉和黑曲霉的MIC均 > 256 μg/mL。洛伐他汀、辛伐他汀与伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B均无协同作用。结论 在体外，洛伐他汀、辛伐他汀有抗曲霉活性；但与唑类抗真菌药、两性霉素B无协同作用。     

特比萘芬体外抗丝状真菌药物敏感试验:菌体不同形态对MIC的影响

目的 观察特比萘芬对部分深部丝状真菌和皮肤癣菌的MIC及分别接种未发芽孢子、发芽孢子和菌丝对MIC的影响。方法 参考M38-P(丝状真菌稀释法抗真菌药物敏感性试验参考方案)试验方案及其改进方案,测定特比萘芬对7株曲霉、5株着色真菌、4株波氏假阿利什霉、4株尖端赛多孢子菌及5株皮肤癣菌的未发芽孢子、发芽孢子或菌丝的MIC,并比较相互间的差异。结果 受试菌株以未发芽孢子形态接种时,曲霉MIC范围为≤0.03~0.5μg/mL,暗色真菌的MIC范围为≤0.03~0.06μg/mL,波氏假阿利什霉及尖端赛多孢子菌的MIC均>16μg/mL,皮肤癣菌的MIC均≤0.03μg/mL,提示上述菌株中除波氏假阿利什霉及尖端赛多孢子菌外,其余菌株体外均对特比萘芬敏感。所有受试菌中,除杂色曲霉和疣状瓶霉接种发芽孢子时MIC与接种菌丝时的MIC相差4倍外,其余菌株接种发芽孢子或菌丝悬液时的MIC与接种孢子时的MIC差异无显著性。结论 受试曲霉、暗色真菌及皮肤癣菌体外均对特比萘芬敏感或较敏感。在丝状真菌的特比萘芬体外药物敏感试验中,接种易于获取并易于量化的未发芽孢子时的MIC可以反映特比萘芬体外对发芽孢子及菌丝的抗菌活性。     

我国不同地域烟曲霉临床分离株CSP基因型及对抗真菌药物的敏感性分析

【摘要】 目的 探讨我国不同地域致病烟曲霉临床分离株CSP基因型分布情况,以及不同地域、不同CSP基因型烟曲霉药物敏感性有无差异。 方法 对福建、上海、河北及北京四地临床分离到的112株烟曲霉分别通过形态学、温度试验及β微管蛋白分子生物学测序鉴定,再对烟曲霉进行CSP基因分型,同时用M38-A方法测定伏立康唑、伊曲康唑及两性霉素B对不同型别烟曲霉的最低抑菌浓度（MIC）。 结果 112株曲霉均鉴定为经典烟曲霉,共确定11个CSP基因型,其中t04A、t03、t01最多见,分别为32株、17株、24株。福建分离株以t10、t04A、t01最常见,上海分离株以t04A、t01最常见,河北分离株以t01、t03、t04A最常见,北京分离株以t02、t04A、t01和t03最常见,t25为1个新CSP基因分型,新基因型菌株的菌落形态、生长速度、最适生长温度与其他菌株并无显著差别。不同CSP基因型烟曲霉对抗真菌药物敏感性差异无统计学意义,但福建地区分离株对伊曲康唑的MIC值低于其他三地的分离株。 结论 烟曲霉临床株CSP基因型存在一定的地域特点,不同基因型的烟曲霉对抗真菌药物的敏感性差异无统计学意义,而不同地域来源烟曲霉对伊曲康唑敏感性存在差异。     

曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性测定及其耐药的分子机制初探北大核心CSCD

目的探讨曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性及其耐药的分子机制。方法利用微量液基稀释法测定22株曲霉游离孢子对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性;同时建立22株曲霉生物膜的体外模型,用抗真菌药物敏感试验联合甲基四氮盐（x1Tr）减低法来评价曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性。通过实时RT—PCR测定烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类药物靶酶基因的相对表达量。结果对于曲霉的游离孢子,两性霉素B的最低抑菌浓度（MIC）范围是0．5～2mg／L,卡泊芬净的最低有效浓度（MEC）范围是0．125—0．25mg／L,伏立康唑的MIC范围是0．5—1mg／L;对于曲霉生物膜,两性霉素B的SMIC。（抑制50％固着性曲霉生物膜生长的最小药物浓度）和SMIC。（抑制80％固着性曲霉生物膜生长的最小药物浓度）范围分别是2～〉32mg／L和8～〉32mg／L,卡泊芬净的SMIC∞和SMIC8D范围分别是32～〉256mg／L和256～〉256mg／L,伏立康唑的SMIC∞和SMIC。范围分别是4～〉256mg／L和32～〉256mg／L。烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类药物靶酶基因相对表达量测定显示,与0h相比,7个待测基因在4h时表达量没有变化;8h时AfuMDR1、CYP51A、CYP51B表达量升高,CYP51A表达量升高最明显;12、16、24h时MuMDR1、AfuMDR2、AfuMDR4、CYP51A、CYP51B表达量升高,其中CYP51A表达量升高的最明显;AfuMDR3和atrF在生物膜形成过程中表达量没有明显变化。结论与游离孢子相比,曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性明显下降;烟曲霉形成生物膜以后,药物外排泵基因和唑类靶酶基因的表达量升高。     

不同抗真菌药物对艾滋病合并马尔尼菲篮状菌病临床疗效及体外药敏试验结果分析

目的观察艾滋病合并马尔尼菲篮状菌病患者体外真菌药敏结果和不同抗真菌治疗方案的疗效。方法将酵母相马尔尼菲篮状菌调成菌悬液并转移至药敏培养基中混匀,然后将混匀的酵母菌悬浮液接种到ATBTMFUNGUS 3酵母样真菌敏感性检测试纸条上孵育,可以通过肉眼判读杯状凹中酵母菌的生长情况,获得两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑、氟康唑、氟胞嘧啶的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);同时临床观察不同抗真菌药物治疗的疗效。结果84株马尔尼菲篮状菌均显示两性霉素B MIC<0.5 mg/L,伊曲康唑MIC<0.125 mg/L,伏立康唑MIC<0.06 mg/L。73株(86.90%)马尔尼菲篮状菌显示氟康唑MIC≥1 mg/L。69株(82.14%)马尔尼菲篮状菌显示氟胞嘧啶MIC≥4 mg/L。药敏结果显示马尔尼菲篮状菌对两性霉素B、伊曲康唑和伏立康唑的MIC均处于低水平,而对氟康唑和氟胞嘧啶MIC均处于高水平。84例患者中有7例未接受抗真菌治疗者均死亡,77例患者接受了抗真菌治疗,其中74例治疗好转,治疗好转率96.10%。两性霉素B治疗组好转率96.88%,伏立康唑治疗组好转率92.31%,两组比较差异无统计学意义(P=0.43)。结论艾滋病合并马尔尼菲篮状菌病可以选择两性霉素B、伏立康唑和伊曲康唑治疗,不推荐选择氟康唑和氟胞嘧啶治疗。     

抗真菌药物单独和联合应用对曲霉体外药敏试验研究

目的:探讨两性霉素B(AmB)、特比萘芬(TBF)、伊曲康唑(ICZ)、氟胞嘧啶(5-FC)和氟康唑(FCZ)在单独和联合用药时对曲霉的敏感性.方法:应用美国临床实验室标准化委员会制定的M38-A方案,单独用药时AmB、TBF和ICZ取100%生长抑制为最小抑菌浓度(MiC),5-FC和FCZ取50%生长抑制为最小抑菌浓度,联合用药时取100%生长抑制为最小抑菌浓度,以部分抑菌浓度(FIC)来判定药物间的相互作用,药物间的相互作用解释为FIC≤0.5为协同作用,0.5＜FIC≤1.0为相加作用,1.0＜FIC≤2.0为无关作用,FIC＞2.0为拮抗作用.结果:TBF对烟曲霉的MIC值明显高于黄曲霉和黑曲霉,ICZ对黄曲霉的MIC值较低,AmB对黑曲霉的MIC值较低,而对黄曲霉MIC值较高,差异具有统计学意义.TBF联合ICZ、AmB联合ICZ对曲霉菌属产生较好的协同相加作用.AmB联合TBF对曲霉主要表现为相加作用,5-FC和FCZ与其他药物联合应用对曲霉菌属表现为拮抗和无关作用.结论:单独用药时不同抗真菌药物对曲霉菌种的敏感性具有差异.TBF联合ICZ、AmB联合ICZ在体外对曲霉具有协同和相加作用,其效果优于其他药物的联合应用.     

产孢丝状真菌药敏试验检测暗色真菌对九种药物的敏感性

目的 检测暗色真菌对9种常用抗真菌药物的敏感性,评价美国国家实验室标准委员会(NCCLS)推荐的产孢丝状真菌药敏试验方案(M38-P)应用于暗色真菌药敏试验的可行性.方法 参照M38-P方案,受试菌株共45株,包括卡氏枝孢14株,裴氏着色霉8株,紧密着色霉3株,疣状瓶霉16株,离蠕孢2株,德氏霉1株及弯孢1株.所用药物为氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑、咪康唑、益康唑、克霉唑、制霉菌素、两性霉素B和特比萘芬.菌悬液终浓度为(0.4~5)×10⁶cfu/mL,孵育温度35℃,培养时间5~7d.结果 45株暗色真菌对伊曲康唑和特比萘芬的敏感性较高,部分菌株对氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑、两性霉素B存在耐药现象.结论 M38-P方案可用于暗色真菌的药敏试验研究,耐药菌株的发现提示在今后的治疗中药敏测试是必要的.     

Onychocola canadensis Sigler bei Onychomykose

Moulds or non-dermatophyte moulds (NDM) are being increasingly isolated as causative agent of onychomycoses. Known causes of a NDM-OM are Scopulariopsis brevicaulis, Fusarium, Aspergillus, Acremonium, Neoscytalidium dimidiatum, Arthrographis kalrae, and Chaetomium. In this article, 5 patients with suspected nail infection due to Onychocola canadensis are reported for the first time in Germany. Systemic antifungal agents are not considered to be effective in NDM onychomycosis. In individual cases, however, terbinafine seems to be effective in Onychocola canadensis infection of the nails. Treatment of choice represents, however, nontraumatic nail avulsion using 40?% urea ointment followed by antifungal nail lacquer with ciclopirox olamine or amorolfine.     

以棋盘法测定汉防己甲素联合伏立康唑的体外抗烟曲霉活性

【摘要】 目的 探讨汉防己甲素对伏立康唑抗烟曲霉的体外增效活性。 方法 参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）推荐的M38-A2方案,采用棋盘式微量液基稀释法测定汉防己甲素联合伏立康唑对21株烟曲霉临床株的抗真菌活性,以吸光度A值测定法判读最低抑菌浓度,并以FICI法评价联合用药的效果,同时以其中的CMCC（F）A.1a株为代表,用等效线图解法验证结果。 结果 汉防己甲素与伏立康唑单独作用于上述烟曲霉临床株的最低抑菌浓度分别为512 μg/ml和0.125 ~ 2 μg/ml,联合用药时的最低抑菌浓度值分别降至8 ~ 128 μg/ml和0.03 ~ 0.5 μg/ml,且终点清晰,“拖尾现象”消失,FICI值为0.13 ~ 0.63,有16株菌表现为协同作用,其余菌株表现为无关作用。CMCC株相应的MIC值等效曲线是凹形,也表明具有协同作用。 结论 汉防己甲素对伏立康唑抗烟曲霉有体外增效活性。     

Scytalidium dimidiatum melanonychia and scaly plantar skin in four patients from the Maghreb: imported disease or outbreak in a Belgian mosque?

Scytalidium dimidiatum is a geophilic dematiaceous, non-dermatophyte mould that can become a pathogen for plants and humans particularly in tropical and subtropical regions. We report 4 cases of S. dimidiatum onychomycosis presenting clinically as thickened and dark toenails. The skin of the soles was scaly. The time and location of the contaminations were uncertain. Indeed, the patients were ancient immigrants from the Maghreb to Belgium. They were also regularly travelling to their countries of origin. They were also often barefoot in the same Belgian mosque. The disease was unresponsive to current oral antifungal treatments.     

中药黄芩苷、黄连素体外抗解脲脲原体作用

目的探讨黄芩苷、黄连素体外抗解脲脲原体(UU)的作用。方法采用微量液体稀释法在体外分别测定黄芩苷、黄连素对UU8型标准菌株及15株UU临床菌株的抗菌效应,并与红霉素比较。结果黄芩苷、黄连素对UU8型标准菌株的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.25mg/mL和0.0625mg/mL;对15株UU临床菌株的MIC范围分别为0.125～2.0mg/mL和0.0625～4.0mg/mL,MIC50分别为0.50mg/mL和0.25mg/mL,MIC90为1.0mg/mL和2.0mg/mL。黄芩苷、黄连素对UU临床菌株体外抑菌作用的差异无显著性意义(P>0.05)。红霉素对UU8型标准菌株的MIC为0.5μg/mL;对15株UU临床菌株的MIC范围为16～64μg/mL。结论黄芩苷、黄连素对UU8型标准菌株和对红霉素耐药的UU临床菌株均具有较强的体外抗菌作用。     

耐伊曲康唑烟曲霉临床分离株对四种抗真菌药物的敏感性测定

目的 测定耐伊曲康唑烟曲霉临床株对4种抗真菌药物的敏感性。方法 自一例对伊曲康唑无效的肺曲霉球患者体内系列分离6株烟曲霉。利用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）的微量液基稀释法M38-A方案和E-test法测定6株烟曲霉临床分离株对两性霉素B、卡泊芬净、米卡芬净、伏立康唑和伊曲康唑的敏感性。结果 6株烟曲霉中，2株对伊曲康唑的最低抑菌浓度（MIC）为 0.5 μg/mL，其他4株的MIC均 ＞ 16 μg/mL；两性霉素B和伏立康唑对6株烟曲霉的MIC分别为1 μg/mL和0.25 ~ 1 μg/mL，卡泊芬净和米卡芬净对6株烟曲霉的最低有效浓度均 ≤0.03 μg/mL。E-test法测定结果也显示，卡泊芬净和伏立康唑对6株烟曲霉有良好的抑制活性。结论 耐伊曲康唑烟曲霉临床株对两性霉素B、卡泊芬净、米卡芬净和伏立康唑敏感。     

六种抗菌药物体外对解脲支原体与人型支原体的抗菌作用

采用琼脂对倍稀释方法，测定了６种国产抗菌药物对３０株解脲支原体（Ｕｕ）、３０株人型支原体（Ｍｈ）体外抗菌作用效果。结果显示：乙酰螺旋霉素、氟哌酸和强力霉素有较强的抗Ｕｕ与Ｍｈ作用。乙酰螺旋霉素抗 Ｕｕ的 ＭＩＣ５０与 ＭＩＣ９０为０． ２５ｍｇ／Ｌ与１ｍｇ／Ｌ，抗Ｍｈ为０． ５ｍｇ／Ｌ与１ｍｇ／Ｌ。氟哌酸抗 Ｕｕ与Ｍｈ作用相同，ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为０．５ｍｇ／Ｌ与１ｍｇ／Ｌ。强力霉素抗Ｕｕ的ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为０．５ｍｇ／Ｌ与１ｍｇ／Ｌ，抗Ｍｈ为０．２５ｍｇ／Ｌ与２ｍｇ／Ｌ。Ｍｈ对红霉素有高度抵抗作用，ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为６４ｍｇ／Ｌ与１２８ｍｇ／Ｌ。６株 Ｕｕ、４株Ｍｈ对四环素高度耐药，ＭＩＣ５０与 ＭＩＣ９０分别为６４ｍｇ／Ｌ与１２８ｍｇ／Ｌ和１６ｍｇ／Ｌ与３２ｍｇ／Ｌ，但对其它抗菌药物敏感。小檗硷抗Ｕｕ与Ｍｈ作用相同，ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为４ｍｇ／Ｌ与８ｍｇ／Ｌ，对耐四环素的Ｕｕ与Ｍｈ也有相同的抗菌作用。     

8种抗菌药物体外抗解脲支原体与人型支原体的活性研究

目的指导临床合理用药。方法采用肉汤稀释方法,测定８种抗菌药物对２０株解脲支原体（ＵＵ）、２０株人型支原体（ＭＨ）体外抗菌作用效果。结果交沙霉素有较强的抗ＵＵ与ＭＨ作用。其ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为０．２５～２ｍｇ／Ｌ和０．１２５～０．５ｍｇ／Ｌ。强力霉素抗ＵＵ的ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为４ｍｇ／Ｌ与３２ｍｇ／Ｌ,抗ＭＨ为２ｍｇ／Ｌ和４ｍｇ／Ｌ。氧氟沙星抗ＵＵ的ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为８ｍｇ／Ｌ与１６ｍｇ／Ｌ,抗ＭＨ为２ｍｇ／Ｌ和４ｍｇ／Ｌ。ＭＨ对罗红霉素与阿奇红霉素有高度抵抗作用,ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为６４ｍｇ／Ｌ与１２８ｍｇ／Ｌ。５株ＵＵ、４株ＭＨ对四环素高度耐药,其ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为６４ｍｇ／Ｌ与１２８ｍｇ／Ｌ和３２ｍｇ／Ｌ与６４ｍｇ／Ｌ,对强力霉素与美满霉素也呈高度抵抗,ＭＩＣ９０为１６～３２ｍｇ／Ｌ,但对氧氟沙星较为敏感,ＭＩＣ９０为４ｍｇ／Ｌ。结论本研究提示ＭＨ的耐药性检测,对指导临床治疗具有重要意义。     

Successful eradication of Scytalidium dimidiatum-induced ungual and cutaneous infection with voriconazole

We report the successful treatment of extensive cutaneous infection and onychomycosis caused by Scytalidium dimidiatum in a 30-year old Nigerian woman.