淋巴结脱细胞支架的构建及效果评价

目的 对小鼠淋巴结脱细胞和卵巢脱细胞支架进行比较,为人工卵巢的制作提供组织工程材料。方法使用表面活性剂(0.5%SDS)振荡清洗方法脱细胞,再用去离子水(ddH₂O)清洗其内残留SDS,获得脱细胞支架。HE染色观察脱细胞的形态,DAPI染色观察细胞的残留情况,Masson染色观察胶原纤维,阿尔新蓝染色(Alician Blue)观察糖胺聚糖,透射电镜观察支架超微结构,并测定DNA和羟脯氨酸含量。结果 与新鲜淋巴结及卵巢相比,脱细胞后大体观察组织体积稍缩小,颜色变淡,呈毛玻璃状。HE染色未见明显细胞残留,可见交织成网的纤维结构。Masson染色显示淋巴结和卵巢脱细胞支架胶原纤维形态保留完整。Alcian Blue染色显示卵巢脱细胞支架中蓝色条带较细,淋巴结脱细胞支架中有稍粗不定形基质样结构。DAPI染色未见明显细胞核。扫描电子显微镜见密集分布的大量纤维以及与纤维相连的较小的片状细胞外基质成分,相互连接成3D网架结构。DNA定量分析得出淋巴结及卵巢脱细胞支架仅残留7.45%及11.96%(P<0.05),卵巢脱细胞后羟脯氨酸含量减少(P<0.05)。结论 ...     

脱细胞技术在气管组织工程构建中的应用展望

近年来,脱细胞技术在气管组织工程的研究与应用已经成为当前的热点,并取得了一些进展。但是如何更好地将脱细胞气管基质应用于临床仍需要深入的研究。本文将对气管组织工程中不同脱细胞技术的优缺点及在长段气管损伤中的应用进行综述,并对未来的研究进行展望。     

脱细胞真皮基质在口腔医学中的研究应用

脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix,ADM）是去除了真皮中具有抗原性的细胞成分,而保留了原有胶原纤维、弹力纤维等结构的真皮支架。ADM最早作为真皮替代物用于烧伤患者的创面修复,近些年已有眼耳鼻喉、头颈外科、牙周病学等领域应用报道。本文主要对ADM在口腔科医学领域中的应用作一综述。     

牛脱细胞肌腱基质的制备方法研究

目的:探究牛肌腱组织脱细胞的方法,为组织工程法修复肌腱所需生物材料的制备提供理论和实验基础。方法:牛的肌腱作实验材料,被组织粉碎机粉碎后,依次放入不同浓度的胰蛋白酶溶液、Triton X-100溶液、SDS溶液浸泡处理后,所得基质用过氧乙酸-乙醇溶液中灭菌消毒处理,然后依次用蒸馏水和PBS缓冲液洗涤、过滤。最后冷冻、干燥、保存。冰冻切片进行苏木素-伊红染色,观察细胞核残留情况。微量DNA提取试剂盒提取脱细胞后跟腱基质DNA,检测DNA的残留量。结果:大体观察可见,各实验组跟腱组织经脱细胞处理后,均呈乳白色匀浆状。苏木素-伊红染色结果显示,跟腱组织脱细胞处理后细胞核均大量减少,细胞核残留极少,每高倍视野中细胞核残留不大于5。DNA含量结果显示,当牛跟腱组织依次经过0.5%胰蛋白酶溶液处理2h、1%的Triton X-100溶液处理2h、0.5%的SDS溶液处理1h后,得到的肌腱脱细胞基质DNA含量最少,为0.03μg/mg。结论:依次用胰蛋白酶溶液、Triton X-100溶液、SDS溶液浓度分别为0.5%、1%、0.5%、处理时间分别为2h、2h、1h时,对牛肌腱组织的脱细胞效果最佳。     

脱细胞生物支架的研究进展

在使用脱细胞方法去除组织器官中的细胞成分后,通常仅保留细胞外基质,以此来获得脱细胞生物支架。脱细胞生物支架在组织工程领域有广泛研究,应用于多种组织与器官并取得了良好的效果。脱细胞方法多种多样,在单独使用其中一种方法难以得到好的脱细胞效果时,可将多种方法结合使用以得到较好的脱细胞效果,但也要注意根据不同组织的特点选择合适的脱细胞方法。获得脱细胞支架后可通过组织学染色等方法检测脱细胞效果及生物相容性等情况。     

脱细胞人工真皮基质的研究进展

皮肤缺损创面的治疗一直是临床工作中的难点,而修复后瘢痕增生等并发症也同样困扰着临床医师.脱细胞人工真皮基质(ADM)具有改善创面血运、缓解增生性瘢痕的作用,常用于烧、创伤的修复重建,可提高患者术后生活质量.ADM在慢性创面、手足外科及瘢痕修复等治疗中均具有重要作用,同时ADM还可用于乳腺癌术后乳房再造、眼眶重建及膈肌修...     

脱细胞血管基质的制备方法研究

目的:通过不同脱细胞方法制备脱细胞血管基质材料,比较筛选出较为理想的血管脱细胞方法,为临床血管修复提供良好的组织工程生物材料。方法:1采用不同浓度的胰蛋白酶、Triton X-100、SDS组合,对牛血管进行脱细胞处理,制备脱细胞牛血管基质。2苏木素-伊红染色,观察细胞核残留情况,以比较脱细胞效果。3利用微量样品基因组DNA提取试剂盒提取脱细胞血管基质的DNA,超微量蛋白核酸分析仪检测DNA含量。结果:大体观察:各组血管经过不同脱细胞方法处理后,所得脱细胞血管基质呈乳白色。苏木素-伊红染色观察:光镜下观察,可见各组均有不同程度的细胞核残留,其中1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+1%SDS组和0.1%胰蛋白酶Triton X-100+0.5%SDS所制备的脱细胞血管基质细胞核残余最少,每高倍视野中细胞核残留不大于3。DNA提取检测:所提取DNA的含量显示,0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+1%SDS和0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+0.5%SDS的脱细胞效果较好,DNA残留量分别为0.22μg/mg和0.231μg/mg。结论:应用0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+1%SDS和0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+0.5%SDS的方法来制备脱细胞基质的效果较好。     

脱细胞骨骼肌支架与雪旺细胞构建体外人工神经模型的研究

目的：研究来源于自体骨骼肌组织的脱细胞细胞支架和自体雪旺细胞作为种子细胞的混合培养物作为一种神经桥接物的可能性。方法：将体外培养、扩增的雪旺细胞与用化学萃取制备且经过无菌多聚赖氨酸预处理的脱细胞骨骼肌支架进行混合培养2周,用扫描电子显微镜观察两者生长与附着情况。结果：雪旺细胞可与自体脱细胞骨骼肌支架艮好附着,并在支架上增殖、迁移,形成类似Bungner带的雪旺细胞链。结论：将自体脱细胞骨骼肌支架与雪旺细胞混合培养而构建体外人工神经模型是可行的。     

脱细胞真皮基质应用的研究

脱细胞真皮基质是一种新型真皮替代物作为深度烧伤创面的修复覆盖材料，能够降低抗原-抗体反应，减缓炎症免疫反应。本文就脱细胞真皮的应用机理、制备、免疫性分析和实际应用作一综述。     

一种大鼠心脏全器官灌注脱细胞方案及其脱细胞效果评价

目的  用一种新的灌注脱细胞方案对离体SD大鼠心脏进行脱细胞处理,对其脱细胞效果进行检测与评估。方法  取12只2月龄同窝雄性SD大鼠,按随机数字表法分为脱细胞组和对照组,每组6只。将各组大鼠麻醉并行全身肝素化后取出心脏。取脱细胞组心脏称取重量,然后将灌注针逆行插入升主动脉,连接好灌注装置进行脱细胞,观察脱细胞过程中心脏外观的变化,结束后称取脱细胞后的质量。在各心脏左心耳、右心耳、心尖部及右室流出道的同一部位取少量组织测定dsDNA含量,余组织制作石蜡切片并行HE染色及Masson染色后采集图像分析。结果  脱细胞过程中,心脏颜色逐渐变得淡红,再变得相对透明,最后变成乳白色,肉眼可见冠脉血管结构保存完好。脱细胞组脱细胞前后心脏质量分别为（1.27±0.03）g、（0.49±0.02）g,差异有统计学意义（t=111.164, P < 0.001）。2组心脏各处测得的dsDNA含量差异均有统计学意义（均P < 0.01）,且脱细胞组各处测得的dsDNA含量均显著低于50 ng/mg。对照组心脏HE染色切片及Masson染色切片均可见典型的心肌组织切片图像。而脱细胞组HE染色切片及Masson染色切片图像呈网状,均无明显细胞及核结构,其内可见冠状动脉轮廓。结论  该脱细胞方案操作简单,效果可靠,是一种较为理想的心脏全器官脱细胞生物支架制备方案。     

三种常用脱细胞技术的比较研究

目的:比较研究三种脱细胞技术胰酶脱细胞法,Dispase脱细胞法,高渗盐水脱细胞法。找出最适合用于脱细胞生物基质制备的方法。方法:制备的猪真皮分别经胰酶、Dispase、高渗盐水脱细胞处理。结果:经胰酶、Dispase处理的猪真皮均脱尽细胞,而经高渗盐水处理的未能脱除细胞。结论:采用0.125%胰酶,4℃,24小时可脱尽猪真皮内细胞;胰酶脱细胞法和Dispase脱细胞法无显著性差异,而单纯的高渗盐水脱细胞方法的可行性值得商榷。     

异种脱细胞真皮基质在修复口腔粘膜缺损中的应用

目的:探讨异种脱细胞真皮基质在修复口腔粘膜缺损中的应用效果,为口腔粘膜缺损提供新的治疗方法。方法:应用异种脱细胞真皮基质海奥口腔修复膜修复12例口腔手术后粘膜组织缺损创面,其中软组织创面10例,骨创面2例,术后随访3～6个月,观察其临床效果。结果:12例患者中1例骨创面大部分成活,其余11例完全成活,均修复理想,未发生排斥反应,修复区外观平整,触之柔软,弹性良好,与正常口腔粘膜颜色相近,软组织修复成功率100%。结论:异种脱细胞真皮基质是一种理想的口腔粘膜及粘膜下软组织缺损修复的生物材料,对骨创面修复需进一步研究。     

脱细胞真皮基质的制备方法及其在口腔科的应用

脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix，ADM）是近几年国外兴起的一种真皮替代物，是利用特定的方法将皮肤中的细胞成分去除，仅保留真皮中含胶原网架的细胞外基质。ADM根据制备材料的来源不同分为同种异体真皮基质（alloderm）与异种真皮基质（xenoderm）两种。同种异体真皮基质的制备材料为人类尸体皮肤，异种真皮基质主要来源于猪的皮肤。ADM作为真皮替代物治疗全层皮肤缺损的效价在于它的低抗原性、快速血管化和作为表皮载体或支架的稳定性，而这些特性很大程度上取决于ADM的最终成分。     

异种脱细胞真皮基质的临床研究进展

异种脱细胞真皮基质(Xenogeneic acellular dermalmatrix, Xeno-ADM)是异种皮经过生物工程技术制备而成的新型真皮移植替代材料。研究表明其具有低抗原性、快速上皮化且可塑性强等特点,在临床创伤修复方面得到广泛的应用。本文就异种脱细胞真皮基质的特性及其在临床应用进展上进行综述。     

异种脱细胞真皮基质在鼻中隔缺损修复中的应用

目的探讨应用异种（牛）脱细胞真皮基质修复膜修复鼻中隔术后黏膜缺损的价值。方法对27例鼻中隔术后的黏膜缺损或穿孔应用异种（牛）脱细胞真皮基质修复膜行一期修复。结果随访4周～2年,24例鼻中隔偏曲矫正及肿瘤切除术后患者均无穿孔,3例鼻中隔穿孔患者一次性修复成功,外形满意。结论异种（牛）脱细胞真皮基质修复膜修复鼻中隔术后的黏膜缺损或穿孔手术操作简便,效果良好,有很好的临床应用价值。     

脱细胞真皮基质在口腔科的临床应用研究

脱细胞真皮基质(ADM)是人或动物皮肤经脱细胞处理后制备而成的生物材料,其特点为具有低抗原性,且具有较好的组织相容性,最早用于烧伤治疗中.随着临床上对ADM制备技术的深入研究,ADM逐渐被应用到其他学科领域中.在口腔科的应用包括创面覆盖、腮腺手术中预防畸形和并发症、引导组织再生等.探讨ADM的生物学特性、作用机制和体内...     

应用异种脱细胞真皮基质在种植义齿修复中的美学效果评价

目的评估异种脱细胞真皮基质植入上前牙种植区唇侧软组织的临床美学效果。方法对30例单个上前牙缺失患者行美学区单颗种植义齿修复的患者进行回顾性研究。随机分为实验组和对照组,实验组行种植术伴种植区唇侧异种脱细胞真皮基质骨膜下植入术,对照组行单纯种植术。种植义齿负载半年后按一定标准拍摄口内照片,两位观察者用红色美学指数评估口内照片中种植体周软组织各项得分。分组进行统计学分析,分析不同软组织处理与红色美学指数值之间的关系。结果种植义齿负载半年后两组种植体留存率均为100%;实验组红色美学指数平均为10.77±2.56分,对照组的红色美学指数平均9.57±2.10分,两组比较,实验组患者红色美学指数较高(P<0.05)。结论在上颌前牙美学区进行单牙种植修复时,采取异种脱细胞真皮基质骨膜下植入,可以改善种植区唇侧的美学效果。     

脱细胞真皮基质与羟基磷灰石在颌骨部分缺损中的临床应用

目的:观察评估脱细胞真皮基质与羟基磷灰石在颌骨部分缺损中的临床应用效果。方法:选择外伤或拔牙后牙槽骨缺损病例30例,采用羟基磷灰石填塞缺损区,表面覆盖脱细胞真皮基质。结果:脱细胞真皮基质与羟基磷灰石能引导骨组织再生,保持牙槽骨丰满,为后期修复提供保障。结论:异体脱细胞真皮基质与羟基磷灰石联合修复颌骨部分缺损能有效解决牙槽萎缩、骨量减少等问题,值得临床推广。     

Masquelet技术联合双层人工真皮在四肢大面积皮肤脱套性缺损中的应用

目的 探讨Masquelet技术联合双层人工真皮在四肢大面积皮肤脱套性缺损中的应用.方法 回顾性分析采用Masquelet技术联合双层人工真皮治疗的13例四肢大面积皮肤脱套性缺损患者的临床资料.结果 13例患者植皮均成活良好,未出现皮肤破溃及窦道,无明显疤痕挛缩及增生,皮肤厚度较为满意.植皮处皮肤弹性、柔韧性较为理想....     

异体脱细胞真皮和异种脱细胞真皮在烧伤创面治疗中的应用效果比较

目的 探讨异体脱细胞真皮和异种脱细胞真皮在烧伤创面治疗中的应用效果.方法 选取68例烧伤需行植皮治疗的患者作为研究对象,随后分为观察组和对照组,各34例.对照组患者给予异体脱细胞真皮治疗,观察组给予异种脱细胞真皮治疗,对比两组患者的治疗效果.结果 观察组患者创面愈合状况与对照组相比差异无统计学意义.观察组患者创面脱水干燥时间、创面愈合时间(27.3±4.5)、(17.1±3.6),与对照组的(27.1±4.8)、(16.8±3.5)相比,差异无统计学意义.观察组患者血管分布、色泽、厚度和柔软度评分与对照组相比差异无统计学意义.结论 异体脱细胞真皮和异种脱细胞真皮治疗效果差异无统计学意义,临床可采取异种移植,减少患者治疗费用.