基于虚拟筛选与分子动力学模拟探究轮状病毒抑制剂研发

目的：探究人优势轮状病毒毒株(Rotaviruses,RVs)VP8~*是否存在与脂肪酸保守性结合的位点,从中筛选出与VP8~*靶点特异性结合的分子。方法：应用分子对接的方法,搜寻VP8~*与脂肪酸分子结合的可能位点,并利用虚拟筛选从包含7655个化合物的数据库中针对潜在位点进行对接,然后对得分高的蛋白配体复合物进行分子动力学(MD)模拟。结果：分子对接发现脂肪酸酸结合于VP8表面的似峡谷的口袋,脂肪酸与预测的口袋之间形成了较强的相互作用;虚拟筛选打分与MD模拟的参数证实了Doxorubicin-Semiquinone、 ZINC000004216238VP8结合的稳定性。结论：人优势流行株轮状病毒蛋白VP8~*与脂肪酸分子结合具有保守性,Doxorubicin-Semiquinone、ZINC000004216238可以作为人轮状病毒的潜在抑制剂的分子骨架。     

12C6+离子束放射治疗脑胶质瘤的有效性全文替换

目的 探究不同剂量¹²C⁶⁺离子束辐照大鼠C6脑胶质瘤的肿瘤局部控制效果,为¹²C⁶⁺离子束治疗脑胶质瘤提供试验依据。方法 建立42只雄性SD大鼠C6脑胶质瘤模型,辐照前随机选取3只荷瘤鼠作为对照,其余随机分为0 Gy组(n=15)、1.0 Gy组(n=12)及2.0 Gy组(n=12),每组前期预试验随机选取6只进行生存分析。不同剂量¹²C⁶⁺离子束辐照前及辐照后第7、14天进行CT能谱成像增强扫描,每组于辐照后各时间点随机选取3只荷瘤鼠心脏灌流采集脑组织苏木精-伊红染色和Ki-67、CD34免疫组织化学染色。结果 0 Gy组与2.0 Gy组荷瘤鼠生存期差异有显著统计学意义(P <0.05)。2.0 Gy组辐照第7、14天肿瘤实体65 keV单能量CT值、碘浓度逐渐降低,1.0 Gy组辐照第14天明显降低,且均与0 Gy组差异有显著统计学意义(P<0.05)。2.0 Gy组辐照第7、14天肿瘤实体Ki-67增殖指数及CD34阳性细胞表达量逐渐...     

iPSC-MSCs体外对骨关节炎患者关节软骨组织的基质保护作用全文替换

目的 研究多能诱导干细胞来源的间充质干细胞(iPSC-MSCs)体外对膝骨关节炎(KOA)患者关节软骨组织的基质保护作用及部分机制。方法 经知情同意,收集KOA患者关节软骨,剪碎处理后加入IL-1β(10 ng/ml)刺激96 h,再分别加入不同数量的iPSC-MSCs(1×10~5、1×10~6、1×10~7)细胞,在37℃、5% CO₂培养箱内培养3 d。另设IL-1β(10 ng/ml)诱导组和培养液对照组。硫酸软骨素含量测定法检测软骨组织中糖胺聚糖含量,免疫组化法检测组织中Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原表达,ELISA法检测共培养上清液中MMP13、IL-6、IL-10水平,HE染色检测离体软骨组织的病理改变。结果 与对照组比较,IL-1β可诱导KOA软骨组织中软骨细胞肿胀死亡,炎性细胞比例升高,Ⅰ型胶原水平升高、Ⅱ型胶原水平降低,培养上清液中MMP-13、IL-6水平升高(P<0.01),IL-10和糖胺聚糖含量减少(P<0.01);与IL-1β诱导组比较,iPSC-MSCs不同细胞数共培养可降低上清液中MMP-13、IL-6水平和Ⅰ型胶原水平,促进Ⅱ型...     

miR-1229-5p对人结直肠癌细胞SW480增殖、迁移及侵袭的作用研究全文替换

目的：探讨miR-1229-5p对SW480细胞生物学功能的影响和作用机制。方法：采用瞬时转染在SW480细胞中过表达miR-1229-5p,进行细胞克隆、EdU实验、MTT、细胞划痕、Transwell小室迁移及侵袭实验,检测miR-1229-5p mimics组与对照组结直肠癌细胞SW480生物学功能变化。转染过表达miR-1229-5p慢病毒后进行裸鼠皮下成瘤实验,观察miR-1229-5p在体内对细胞增殖能力的影响。通过预测软件TargetScan筛选出X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)作为miR-1229-5p的潜在下游靶基因,并检测miR-1229-5p对其蛋白表达的影响。在SW480细胞中转染XAF1过表达质粒,共转染miR-1229-5p后进行回复实验验证miR-1229-5p通过靶向XAF1促进SW480细胞增殖及侵袭。结果：miR-1229-5p mimics组较miR-NC组细胞的增殖、迁移及侵袭能力均提高(P<0.01);miR-1229-5p组瘤体体积高于miR-NC组(P<0.01);miR-1229-5p组对靶基因XAF1表达量低于miR...     

oHSV2表达PTEN对于抗肿瘤影响的研究撤回

目的 利用溶瘤病毒改造后在临床上有破坏癌细胞并具有增强抗癌免疫力的能力,我们将构建一种oHSV2-PR41,从而探索Ⅱ型单纯疱疹病毒(oHSV2)与PTEN联用的效果。方法 3μg的pHG52d34.5CMV-PR41(简称PR41)质粒与3μg的oHSV2-GFP DNA,磷酸钙法转染到ICP4细胞中,重组产生oHSV2-PR41。基因检测鉴定后,大量生产病毒。选取30只BALB/c小鼠,用小鼠结肠癌细胞(CT26)全部植瘤。肿瘤体积达到一定程度后开始分别用oHSV2-PR41和oHSV2-GFP、IS BUFFER瘤内给药,定期观察肿瘤大小与小鼠生长状况。结果 用oHSV2-PR41给药的小鼠比其他两组生长状况要好。结论 溶瘤病毒与PTEN的联用有较好的抗肿瘤效果。     

不同入路腰方肌阻滞对腹腔镜直肠癌根治术患者术后的镇痛效果的影响全文替换

目的 对比不同入路腰方肌阻滞(quadratus lumbar muscle block, QLB)对腹腔镜直肠癌根治术患者术后的镇痛效果。方法 选取本院收治的拟行腹腔镜直肠癌根治术治疗的直肠癌患者128例,采用随机数字表法分为前路组(QLB腰方肌与腰大肌之间的筋膜平面入针)、外侧路组(QLB外侧入针)、后路组(QLB后路入针)和对照组(常规静脉自控镇痛),每组各32例。对比4组患者术后首次按压静脉自控镇痛(patient-controlled intravenous analgesia, PCIA)时间、首次排气时间和下床活动时间。对比4组患者术后不同时刻视觉模拟评分(visual analog scale, VAS)评分。对比四组患者PCIA有效按压次数、术后24 h内舒芬太尼总用量。对比4组患者术后不良反应。结果 前路组、外侧路组及后路组3组首次按压PCIA时间均长于对照组(P<0.05),首次排气和首次下床活动则均短于对照组(P<0.05)。VAS评分在组间、时点间及组间时点间交互作用比较差异均有统计学意义(P<0.05)。前路组、外侧路组及后路组3组PCIA...     

血小板/淋巴细胞比率比值升高可能预示中国MPO-ANCA相关性血管炎患者进展至终末期肾病的风险较低全文替换

目的：血小板/淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)作为一种新型炎症指标,在系统性红斑狼疮和IgA血管炎等炎症疾病中得到了研究。PLR是否可作为评估抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性血管炎患者疾病活动的生物标志物目前研究较少。本研究旨在探讨中国髓过氧化物酶-抗中性粒细胞胞浆抗体(myeloperoxidase-anti-neutrophil cytoplasmic antibody,MPO-ANCA)相关性血管炎患者诊断时的PLR与炎症反应及疾病活动度的关系,评估PLR是否能预测终末期肾病(end stage of renal disease,ESRD)的进展和全因死亡率。方法：收集MPO-ANCA相关性血管炎患者的临床、实验室、病理特征及预后资料。采用Spearman相关分析检验两个连续变量之间的关联。采用Cox回归分析PLR与ESRD或全因死亡率之间的相关性。结果：连续纳入190名MPO-ANCA相关性血管炎患者。基线PLR与CRP(r=0.333,P<0....     

贝利尤单抗联合糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮的临床疗效观察撤回

目的：研究贝利尤单抗与糖皮质激素(GC)共同作用于系统性红斑狼疮(SLE)患者的有效性和安全性。方法：选取就诊的60例SLE患者,随机分为试验组和对照组,两组均使用环磷酰胺治疗,此外,根据患者的病情、体质等给予适当剂量的泼尼松治疗,试验组在该基础上给予贝利尤单抗联合治疗,6个月后,观察两组炎性因子[白细胞介素(IL)-4,IL-6,干扰素-γ(IFN-γ)]水平和试验前后糖皮质激素使用量的变化以及其免疫学功能相关指标(IgA、IgG、补体C3以及C4)的含量变化及差异。并比较两组不良反应的情况。结果：研究开始前,两组患者各指标无明显差异,给药6个月后,两组患者各指标均有一定程度的改善,但试验组患者的IL-4,IL-6,IFN-γ及糖皮质激素的用量明显低于对照组,C3、C4水平显著高于对照组,IgA、IgG含量明显低于对照组且不良反应的发生率也更低。差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：贝利尤单抗对于系统性红斑狼疮的治疗有较好的安全性和有效性,能有效减少糖皮质激素的用量,可以应用于系统性红斑狼疮的治疗中。     

Tmub1沉默对大鼠肝部分切除术后肝细胞增殖的影响

目的探讨Tmub1蛋白在肝再生过程中的作用及其在肝再生过程中对Securin蛋白的影响。方法 54只大鼠随机分为3组即Tmub1 RNAi慢病毒组、空载慢病毒组及正常对照组,其中Tmub1 RNAi慢病毒组、空载慢病毒组注射相应病毒颗粒(3×107TU),对照组未行注射,2 d后行肝部分切除术(partial hepatectomy,PH),每组分为6个亚组:PH术后0、2、6、12、24、48 h,每亚组3只大鼠,术后提取原代肝细胞、留取肝脏组织标本,利用Real-time PCR和Western blot检测慢病毒干扰效果及Tmub1沉默后对Securin蛋白的影响。MTT实验、流式细胞仪检测原代肝细胞的增殖情况。结果Real-time PCR和Western blot表明实验组Tmub1 mRNA和蛋白被有效抑制;Tmub1沉默后securin mRNA表达无明显变化,而G2/M期securin蛋白量明显减少。MTT实验表明Tmub1沉默可明显上调PH术后6～24 h肝细胞的增殖速率;流式细胞分析结果显示实验组处于G2/M期的肝细胞比例明显增高。结论 Tmub1蛋白在肝再生过程中对肝细胞增殖进程发挥负向调控作用,而该作用可能与其在蛋白质水平影响了Securin的表达密切相关。     

SMB-1型金属β-内酰胺酶的原核表达及酶活性研究

目的原核表达SMB-1型金属β-内酰胺酶,并研究其水解β-内酰胺类抗生素的活性。方法利用化学合成方法合成blaSMB-1基因,经PCR扩增后克隆至pET28a载体,构建重组的原核表达质粒pET28a-SMB-1,转化至E.coli BL21(DE3),诱导表达。表达的重组蛋白经Ni2+-NTA纯化后,测定其水解底物时的酶促反应动力学参数及最适pH值和温度。结果重组质粒经测序证明其正确性;表达的重组蛋白相对分子质量约为33 000,纯化后蛋白的质量浓度为0.20 mg/mL,该酶对本实验中除氨曲南外的所有β-内酰胺类抗生素均具有较高水解活性,其最适pH值为8.0,最适温度为40℃。结论利用工程菌E.coliBL21(DE3)-pET28a-SMB-1成功实现了SMB-1型金属β-内酰胺酶的原核表达,为深入研究其生物学功能及作用机制提供了物质基础,同时也为研发该酶的抑制剂提供了靶标物质。     

清肝化瘀颗粒对原发性肝癌模型大鼠Raf/MEK/ERK通路的影响撤回

目的探讨清肝化瘀颗粒治疗原发性肝癌大鼠对迅速加速纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路表达的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、清肝化瘀颗粒低剂量组、清肝化瘀颗粒剂中剂量组和清肝化瘀颗粒剂高剂量组,每组10只。除空白对照组外,其他4组饮用含二乙基亚硝胺的灭菌食用水建立原发性肝癌大鼠模型,空白对照组只饮用灭菌食用水。14周后,清肝化瘀颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg的清肝化瘀颗粒灌胃,空白对照组及模型对照组给予等体积的生理盐水灌胃。连续灌胃2周后,处死大鼠并取出肝脏组织,用苏木精-伊红染色法观察肝脏组织形态学,并检测各组大鼠肝脏组织Raf、MEK和ERK mRNA和蛋白表达水平。结果苏木精-伊红染色结果显示空白对照组大鼠肝细胞结构正常,模型对照组可见肿瘤细胞,肝细胞结构被破坏。与空白对照组比较,其余4组大鼠肝脏组织Raf、MEK和ERK的A值及mRNA、蛋白表达水平升高,清肝化瘀颗粒中剂量组和清肝化瘀颗粒高剂量组低于模型对照组,且清...     

HSP90抑制剂17-DMAG调控胰腺癌细胞PANC-1增殖及凋亡的初步研究

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)功能特异性抑制剂17-DMAG对胰腺癌细胞PANC-1增殖与凋亡的影响。方法体外培养腺癌细胞PANC-1,17-DMAG处理PANC-1细胞后,CCK8法测定细胞生长曲线,观察细胞增殖的抑制情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化,Jc-l染色检测线粒体膜电位变化,RT-PCR法测定17-DMAG处理PANC-1细胞前后Bcl-2、Bax表达变化。结果 17-DMAG处理组24 h时D(490)值较对照组差异无统计学意义(P>0.05),48、72 h后较对照组D(490)值分别减少(18.3±2.4)%、(21.5±3.2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。17-DMAG处理组48 h时较对照组能显著地抑制PANC-1细胞增殖(P<0.05),细胞凋亡率[(22.4±2.4)%]较对照组[(4.2±1.7)%]显著增加(P<0.05);线粒体电位显著降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示,17-DMAG处理组抑制Bcl-2的表达,促进Bax的表达。结论 17-DMAG可抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖并诱导其凋亡,该效应可能是通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2家族成员的表达实现。     

基于系统权变理论的医学类虚拟教研室构建

为进一步加强医学类基层教学组织建设, 本文基于医学类教研室的特征与问题分析、虚拟教研室基本类型与特征, 运用系统权变理论, 从目标与价值系统、技术系统、社会心理系统、结构系统、管理系统5个方面尝试对医学类虚拟教研室的构建提出建议, 医学类虚拟教研室在建设时应明确组织核心价值观及定位, 强化组织的教学核心职能, 创建独特的医学教育组织文化, 进一步形成多维矩阵型组织结构, 完善管理机制等。     

急性颅脑损伤患者体液内皮素-1 表达的意义简

目的：探讨急性颅脑损伤患者脑脊液及血清内皮素-1（endothelin-1, ET-1）含量及其临床意义。方法36例急性颅脑损伤患者以GCS评分分组（20例GCS≤12分患者为中、重型颅脑损伤组、16例GCS＞12分患者为轻度颅脑损伤组）;选择同期住院的非神经系统疾病手术患者19例为对照组。两组患者采用双抗体夹心（ ELISA ）法检测脑脊液和血清的ET-1浓度。结果中、重度颅脑损伤组血清ET-1浓度高于轻度损伤组（ P ＜0．01）和对照组（ P ＜0．01）;轻度颅脑损伤组血清ET-1浓度高于对照组（ P ＜0．01）。中、重度颅脑损伤组脑脊液ET-1浓度高于轻度损伤组（ P ＜0．01）和对照组（ P ＜0．01）;轻度颅脑损伤组脑脊液ET-1浓度高于对照组（ P ＜0．05）。所有研究对象中,血清ET-1浓度高于脑脊液（ P ＜0．01）。结论急性颅脑损伤患者脑脊液及血清ET-1水平均明显升高,并且与颅脑损伤的程度密切相关。     

Exendin-4对肿瘤坏死因子-α诱导的单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察exendin-4对大鼠肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法试验分组:对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组(10 ng/ml)、TNF-α(10 ng/ml)+E1组(1 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E5组(5 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E10组(10 nmol/L exendin-4)。收集24 h细胞,提取RNA,采用实时荧光定量检测细胞内MCP-1 mRNA的表达;分别在24、48 h收集各组细胞培养上清液,采用ELISA检测培养细胞上清中MCP-1、FN的浓度。结果孵育24 h时,TNF-α组MCP-1 mRNA和细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P<0.01);与TNF-α组比较,TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞内MCP-1 mRNA和培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;孵育48 h时,TNF-α组细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P<0.01);与TNF-α组比较,TNF-α+E1组、TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;并且随着时间的延长和exendin-4浓度的增加,培养上清内MCP-1、FN含量降低更加明显。结论 Exendin-4可明显抑制TNF-α诱导的系膜细胞MCP-1 mRNA的表达,并以剂量和时间依赖的方式抑制TNF-α诱导的系膜细胞培养上清内MCP-1、FN的含量,提示exendin-4可能会对肾脏具有一定保护作用。     

胰岛素样生长因子-1 与原发性高血压及左心室肥厚的关系简

目的 观察原发性高血压（EH）患者血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平及其与原发性高血压及左心室肥厚（LVH）的关系.方法 选择原发性高血压患者132例为观察组,其中高血压1级（EH1级）42例,高血压2级（EH2级）46例,高血压3级（EH3级）44例,单纯EH无LVH（EH-非LVH组）68例,EH合并LVH （EH-LVH组）64例.采用放射免疫法测定原发性高血压各组患者和健康体检者（正常对照组）60例的血清IGF-1水平及左心室质量指数,并对比分析.结果 血清IGF-1水平,观察组[（296.41 ±60.51）ng/mL]明显高于对照组[（172.41±41.25）ng/mL],差异有统计学意义（P＜0.05）,EH1级、EH2级和EH3级组患者与对照组比较,差异均有高度统计学意义（P＜0.01）.EH-LVH组、EH-非LVH组与对照组比较,血清IGF-1水平、左心室质量指数均明显较高,差异均有统计学意义（P＜0.05）,且EH-LVH组均高于EH-非LVH组（P＜0.05）.IGF-1水平与左心室质量指数呈正相关（r=0.42,P＜0.05）.结论 EH患者血清IGF-1水平明显升高,IGF-1可能参与了EH的发生、发展过程.     

基于Tsallis小波熵的变压器励磁涌流识别方法

针对变压器励磁涌流和内部故障电流识别的热点问题,为了有效克服香农熵在对信号的小波分解系数进行特征提取时具有局限性的缺陷,达到提高识别的有效性和快速性的目的。提出了基于Tsallis小波能量熵和时间熵判据的变压器励磁涌流和内部故障电流的识别新方法。该方法将小波分析与Tsallis熵结合对变压器暂态信号进行分析,在小波能量谱的基础上,得到Tsallis小波能量熵判据,并根据时间熵的定义得到 Tsallis 小波时间熵判据,综合利用两种判据对暂态信号进行识别。该方法不仅可以成功识别励磁涌流,并且提高了识别的准确性、可靠性和灵敏性。MATLAB/Simulink仿真实验结果验证了所提方法的有效性和准确性。