异黄酮类化合物对前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制

[目的 ]通过观察金雀异黄素 (genistein ,GS)、大豆苷元 (daidzein ,DA)和大豆黄素 (glycitein ,GL)对前列腺癌细胞 (PC 3 )增殖的影响 ,探讨通过膳食干预途径预防前列腺癌发病的可行性。 [方法 ]将PC 3在PRMI 164 0培养液 (含10 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。实验设溶剂对照组、顺铂阳性对照组及三种受试物各三个剂量组 (5× 10 -6mol/L ,2 5× 10 -6mol/L ,75× 10 -6mol/L) ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对PC 3的增殖情况进行分析。 [结果 ]与溶剂对照组相比 ,2 5 μmol/LGS、75 μmol/LDA和 75 μmol/LGL对PC 3处理 72h可抑制PC 3增殖 ,抑制率分别为42 %、5 0 %及 3 9%。三种受试物均可抑制细胞DNA合成并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,降低细胞增殖指数。 [结论 ]大豆异黄酮类化合物GS、DA和GL均具有明显抑制前列腺癌细胞PC 3增殖效应 ,并呈现剂量 效应和时间 效应关系 ,提示通过膳食干预方式可预防前列腺癌的发生     

胡桃醌对人前列腺癌PC-3细胞抑制作用

目的探讨胡桃醌对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法溴化四氮唑蓝(MTT)法检测不同剂量胡桃醌对PC-3细胞生长抑制影响;采用Annexin V-FITC/PI染色实验,流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关 X 蛋白(Bax)的表达量。结果与对照组比较,12.5、25、50和100 μmol/L胡桃醌对前列腺癌PC-3细胞具有抑制作用且呈剂量依赖性,抑制率分别为20.6%、39.7%、57.3%和66.2%;流式细胞仪检测胡桃醌(≥ 25 μmol/L)作用细胞后诱导PC-3细胞发生早期和晚期凋亡,当胡桃醌浓度为25、50和100 μmol/L时其早、晚期凋亡率分别是7.37%和2.07%、11.03%和5.8%及18.62%和8.54%,均高于对照组诱导的细胞凋亡率(P<0.05);随着胡桃醌浓度(≥ 50 μmol/L)不断增加,可上调Bax并下调Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论胡桃醌对前列腺癌PC-3细胞具有细胞毒作用,抑制细胞生长。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞抑制作用

研究表明，主要存于葡萄皮、籽中的白藜芦醇能有效地治疗前列腺癌，但尚未应用于前列腺癌的预防。如果葡萄及其制品具有预防和抗前列腺癌功效，则可选择一种易加工、符合人们饮食习惯的消费产品-葡萄汁，以达到预防效果，从而放弃对需高成本的白藜芦醇单体的提取。本研究将葡萄（含皮、籽）制备成葡萄汁，观察其对体外人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制的作用及其机制。方法:白藜芦醇及不同浓度葡萄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测葡萄汁、白藜芦醇对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末端标记法(TUNEL)观察凋亡细胞的形态结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰。结果:葡萄汁、白藜芦醇能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞生长;TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰。以上各指标中,葡萄汁随着浓度增大作用加强;低剂量组的作用比白藜芦醇组差,中、高剂量组的白藜芦醇浓度低,但作用比白藜芦醇组强。结论:葡萄汁对抗人前列腺癌PC-3细胞的作用,除白藜芦醇外,可能还存在其他抗癌成分的作用。葡萄汁、白藜芦醇对PC-3细胞生长抑制作用的机制可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡有关。     

大豆异黄酮诱导胃癌细胞凋亡作用研究

目的：体外实验探讨大豆异黄酮诱导胃癌细胞发生凋亡的可能性，揭示该凋亡发生与bcl-2和bax之间的关系。方法：采用MTT比色法测定大豆异黄酮对胃癌细胞的生长抑制率；以透射电镜和TUNEL染色法，定性、定量地研究大豆异黄酮与胃癌细胞凋亡的关系；通过免疫组织化学法和RT－PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果：大豆异黄酮对胃癌细胞有明显抑制作用，随大豆异黄酮浓度增加和培养时间的延长而增强；透射电镜可见胃癌细胞出现典型的凋亡细胞形态，如细胞核染色质致密浓缩，或聚集于核膜呈新月形小体；TUNEL染色法可染色阳性的胃癌细胞出现细胞核碎裂，核质固缩，细胞膜突出形成质膜小泡等凋亡细胞形态学变化。免疫组织化学和RT－PCR法发现大豆异黄酮下调bcl-2的表达，上调bax的表达。结论：诱导胃癌细胞发生凋亡是大豆异黄酮抗胃癌作用的机制之一，大豆异黄酮可能通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导胃癌细胞发生凋亡。     

大豆异黄酮诱导食管癌细胞凋亡作用研究

目的 在体外实验中，探讨大豆异黄酮诱导食管癌细胞发生凋亡的可能性，揭示该凋亡发生与bel-2和bax之间的关系。方法 采用MTT比色法测定大豆异黄酮对食管癌细胞的生长抑制率；以透射电镜和。TUNEL染色法，定性、定量地研究大豆异黄酮与食管癌细胞凋亡的关系；通过免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果 大豆异黄酮对食管癌细胞有明显抑制作用，随大豆异黄酮浓度增加和培养时间的延长而增强；透射电镜可见食管癌细胞出现典型的凋亡细胞形态，如细胞核染色质致密浓缩，或聚集于核膜呈新月形小体；TUNEL染色法可见，经大豆异黄酮处理24、48、72、96h后，食管癌EC-9706细胞凋亡数明显随时间延长而增加。免疫组织化学法发现经大豆异黄酮处理24、48、72、96h后，食管癌EC-9706细胞的bcl-2蛋白阳性率减少，bax蛋白阳性率增加。经大豆异黄酮处理24、48、72、96h后，经RT—PCR检测发现食管癌EC-9706细胞bcl-2和bax的mRNA表达阳性，并显示bcl—2mRNA条带密度随时间的延长而递减，bax mRNA条带密度随时问的延长而增强。结论 诱导食管癌细胞发生凋亡是大豆异黄酮抗食管癌作用的机制之一，大豆异黄酮可能通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导食管癌细胞发生凋亡。     

叶黄素对人前列腺癌PC-3M细胞增殖抑制作用

目的探讨叶黄素对体外培养人前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制作用及机制。方法选择人前列腺癌PC-3M细胞为研究对象,随机分为5组:0(对照组)、5、10、20、40μmol/L叶黄素组,采用噻唑蓝法检测PC-3M细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测PC-3M细胞周期,采用荧光显色法观察细胞形态,紫外分光光度法检测细胞上清液中caspase-3的含量。结果与对照组比较,各剂量叶黄素组PC-3M细胞增殖抑制率明显升高,具有剂量和时间依赖性(P <0.01);与对照组比较,叶黄素10、20、40μmol/L剂量组PC-3M细胞G1期细胞比例明显增加,G2M期细胞比例明显减少(P <0.01);与对照组比较,叶黄素各剂量组PC-3M细胞形状发生明显变化,细胞变圆,核碎裂且核染色质凝聚,凋亡小体形成,且随剂量增加凋亡数显著升高;与对照组比较,各剂量叶黄素组PC-3M细胞上清液中caspase-3含量明显升高,呈剂量效应关系(P <0.05)。结论叶黄素可抑制体外培养的人前列腺癌PC-3M细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与叶黄素增加PC-3M细胞caspase-3表达有关。     

高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮

目的：建立测定保健食品中大豆异黄酮含量的高效液相色谱法。方法：通过对流动相的优选，以甲醇：水=3：2为流动相，使染料木素、大豆苷元、大豆甙、染料木甙4种大豆异黄酮主要成分达到较好的分离效果，可分别测定4种成分含量及以此4种成分为主要成分的保健食品中大豆异黄酮含量。结果：方法的最低检出浓度分别为大豆甙1．9μg／ml、染料木甙1．2μg／ml、大豆苷元1．0μg／ml、染料木素0．8μg／ml；标准曲线线性范围分别为1．9—100μg／ml、1．2—100μg／ml、1．0—170μg／ml、0．8～140μg／ml；方法平均回收率分别为99．1％、98．5％、97．5％、98．8％；相对标准偏差均（10％。结论：建立的方法可准确、快速的测定大豆异黄酮的含量。     

苹果汁对PC-3细胞生长及其相关基因表达的影响

<正>苹果为我国产量最大的水果,资源十分丰富,有很好的营养价值和特殊的保健作用。苹果中的多酚能抑制癌细胞的增殖。其中,原花青素是苹果中主要的酚类成分。大量研究证实,原花青素可通过抗氧化,诱导凋亡,调控细胞周期等机制达到抗肿瘤的效果,对结肠癌,乳腺癌,前列腺癌     

异黄酮对前列腺癌细胞的激素受体基因表达的影响

[目的] 通过大豆异黄酮的活性物质染料木黄酮和大豆苷元抑制前列腺癌PG-3和LNCaP细胞增殖和对激素基因表达的影响，探讨大豆异黄酮治疗和预防前列腺癌的可能机制。[方法] 0、10、20、40、60、80和160μmol／L剂量组的染料木黄酮和大豆苷元处理前列腺癌细胞，细胞存活率用MTT方法检测，α雌激素受体(ERα)、β雌激素受体(ERβ)、雄激素受体(AR)和血管上皮生长因子(VEGF)等基因的mRNA表达用RT-PCR进行检测。[结果] 染料木黄酮和大豆苷元对PC-3、LNCaP细胞具有明显的抑制生长作用，在160μmol／L的浓度时，染料木黄酮、大豆苷元作用72h后，PC-3细胞的存活率分别为12．28％和44．88％，LNCaP细胞的存活率分别为25．48％和43．14％，其抑制效应具有时间和剂量依赖性，同时发现对．PC-3细胞的VEGF、ERα和ERβ基因表达下调，AR基因处理前后没有检测到；对LNCaP细胞的VEGF和AR基因表达下调，ERα和ERβ的表达并无影响。[结论] 大豆异黄酮能抑制前列腺癌细胞的增殖效应，存在时间和剂量效应关系，雌激素受体基因可能直接在大豆苷元抑制PC-3细胞的增殖中参与作用，而染料木黄酮抑制PC-3细胞和染料木黄酮及大豆苷元抑制LNCaP细胞可能主要是通过Akt通路影响VEGF和AR等基因而实现。     

麦胚黄酮类提取物诱导乳腺癌细胞株凋亡的作用

目的　检测麦胚黄酮类提取物对人体乳腺髓样癌细胞株 BCap- 37凋亡的诱导作用 ,探讨其分子学机制。方法　用流式细胞仪检测麦胚黄酮类提取物对人体乳腺髓样癌细胞株BCap- 37细胞凋亡的诱导作用及对 bcl- 2基因蛋白表达的抑制作用。用光学显微镜观察凋亡细胞的形态学特征。结果　 1 .麦胚黄酮类提取物主要阻断乳腺癌细胞由 G2 - M向 S期转变 ,并能诱导细胞发生凋亡 ,呈现剂量 -效应关系 ( P<0 .0 0 0 1 )。 2 .麦胚黄酮类提取物亦能明显抑制人体乳腺癌细胞株 BCap- 37中 bcl- 2基因的蛋白表达 ,其表达率与麦胚黄酮类提取物浓度成负相关 ( P<0 .0 1 )。3.显微镜下观察 ,可见乳腺癌细胞出现凋亡特征性形态学改变 :细胞体积缩小、胞浆浓缩、胞核固缩、染色质靠核膜凝集成不同形态 ,如马蹄型、月牙型、肾型 ,形成凋亡小体。结论　麦胚黄酮类提取物具有诱导人体乳腺髓样癌细胞株 BCap- 37凋亡的作用 ,bcl- 2蛋白表达水平的降低可能是促进细胞凋亡的重要条件     

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。     

PROGRAMMED CELL DEATH AND SURVIVAL PATHWAYS IN PROSTATE CANCER CELLS

Programmed cell death, or apoptosis, is a series of morphologically and biochemically related processes. The extrinsic (death receptor mediated) and intrinsic (mitochondrial-mediated) apoptotic pathways can be triggered by physiological and pharmacological substances. However, other molecular events influence the sensitivity of prostate cancer cells to apoptotic stimuli, leading to marked variations in the responsiveness of prostate cancer cell lines to individual stimuli. Modulation of apoptotic responses by over expression of anti-apoptotic proteins (NF-κB, IAPs and Bcl-2), or attenuation of pro-apoptotic proteins (PTEN and Bax) may be responsible for the variations in sensitivity of these cell lines to hormone and chemotherapy. The expression of anti- and pro-apoptotic proteins in some of the widely used in vitro models of prostate cancer is reviewed.     

新疆天然植物黑加仑对食管癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:观察新疆天然植物黑加仑水提物对食管癌细胞的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度(10-1、10-2、10-3g/ml)黑加仑水提物作用不同时间(12、24、36h)对人食管癌细胞株Eca109的细胞存活量的影响,以大鼠正常肝细胞(BRL)为正常对照细胞株;用Bradford法测定肿瘤细胞蛋白质合成的变化;采用流式细胞技术(FCM)观察黑加仑作用后肿瘤细胞周期变化及凋亡情况;通过倒置显微镜观察细胞的形态变化。结果:黑加仑水提物10-1g/ml组对人食管癌细胞株Eca109作用24h后,癌细胞的生长和蛋白合成均有明显抑制作用(P<0.05),对正常肝细胞的存活量及蛋白合成均无影响;流式细胞仪检测二倍体峰前出现凋亡峰,细胞凋亡率为49.6%;并且癌细胞呈现典型的凋亡细胞形态。结论:黑加仑水提物可通过诱导细胞凋亡而抑制人食管癌细胞株Eca109细胞的生长。     

染料木黄酮抑制DU145细胞的作用及其机制研究

目的: 研究大豆异黄酮主要成分染料木黄酮 (GEN)对离体培养DU145前列腺癌细胞的生长抑制作用及其机制。方法: DU145前列腺癌细胞接受不同浓度的GEN处理,克隆形成试验用于测定DU145细胞的生存曲线及IC50;DNA ladder和DAPI(4-6-二氨基-2-苯基吲哚)染色法用于检测细胞凋亡;流式细胞仪和免疫印迹法分别用于观察细胞周期改变和相关蛋白表达。结果: 克隆形成试验显示: GEN能抑制离体培养DU145细胞的生长,其作用于DU145细胞的IC50约为30 mmol。GEN 处理24h后,早发细胞凋亡仅见于高浓度GEN处理组,72 h后凋亡亦见于较低浓度GEN组。流式细胞仪显示GEN可导致DU145细胞G2/M期阻滞;细胞周期相关蛋白分析显示随着GEN浓度的提高,p21cip1蛋白表达稳步上升,周期素B1呈双相改变,cdc-2则变化较小。结论: GEN可抑制离体培养DU145前列腺癌细胞的生长,其作用机制可能与GEN诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关,后者同时伴有细胞周期相关蛋白表达的改变。     

大豆异黄酮诱导HeLa细胞凋亡、细胞周期阻滞和[Ca~(2+)]_i浓度升高(英文)

目的探讨大豆异黄酮SI-I抑制HeLa细胞生长机制。方法 HeLa细胞经过10,20,and 40 g/ml的大豆异黄酮SI-I处理4d后,采用倒置显微镜和透射电镜观察其形态学变化,利用流式细胞仪检测细胞周期分布,通过激光扫描共聚焦显微镜观察细胞中[Ca2+]i浓度。结果倒置显微镜观察到HeLa细胞数量明显变少,细胞严重变形。透射电镜观察到HeLa细胞发生凋亡形态学变化。流式细胞仪分析发现HeLa细胞周期阻滞于G0/G1或G2/M期,细胞凋亡率随SI-I浓度的增加而上升。激光扫描共聚焦显微镜观察到凋亡的HeLa细胞内[Ca2+]i显著升高。结论大豆异黄酮SI-I抑制HeLa细胞生长是通过凋亡诱导作用,并且细胞周期阻滞和[Ca2+]i浓度升高可能是其诱导凋亡机制之一。[营养学报,2012,34(4):373-378]