1,25（OH）2D3对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的探讨1,25一二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠系膜细胞增殖与凋亡及其相关基因Fas表达的影响。方法体外培养的大鼠系膜细胞,分为正常对照组(0 mol/L)和不同浓度1,25(OH)2D3干预组(10-10mol/L;10-8mol/L;10-6mol/L),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪,检测不同作用时间(24 h、48 h)下,系膜细胞增殖及凋亡情况,免疫荧光染色法观察干预24 h后,凋亡相关基因Fas的表达情况并测定各组荧光强度。结果与正常对照组相比,1,25(OH)2D3干预组,可明显抑制系膜细胞增殖,促进凋亡,并呈作用时间依赖性。同时免疫荧光染色证实干预浓度越大,系膜细胞内Fas表达增多,荧光强度增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 1,25(OH)2D3干预大鼠肾小球系膜细胞,能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,Fas的表达增多,呈浓度和时间依赖性。     

维拉帕米抑制肾小球系膜细胞增殖效应及机制探讨

目的探讨维拉帕米对肾小球系膜细胞增殖的影响及可能的作用机理。方法体外培养的大鼠肾小球系膜细胞 ,经不同浓度的维拉帕米、血小板源生长因子 (PDGF)和 PDGF加维拉帕米处理后 ,Brd U和 MTT法作细胞增殖测定 ,并计算抑制率。结果维拉帕米抑制大鼠系膜细胞的生长 ,随药物浓度增加 ,抑制率随之增强。而 PDGF则呈现明显的促进作用 ,与对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 1)。再经维拉帕米处理后 (维拉帕米 + PDGF组 )系膜细胞生长减缓 (0 .796± 0 .0 13 ) ,较单纯 PDGF组 (1.2 67± 0 .0 3 5 )有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论维拉帕米具有抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用 ,其机理之一可能是拮抗 PDGF所介导的细胞增殖效应     

1,25-二羟维生素D3对人结肠癌细胞凋亡和自噬的影响及机制研究

目的 观察1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对人结肠癌HCT-116细胞凋亡和自噬的影响并初步探讨其机制.方法 体外培养人结肠癌细胞HCT-116,分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和联合组[1,25-(OH)2D3高剂量联合腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂]共5组,观察并比较各组细胞凋...     

青藤碱对大鼠肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨青藤碱(sinomenine,SIN)对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖和凋亡的影响。方法体外培养的大鼠MC,分为SIN分为高、中、低剂量组和空白对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,碘化丙啶染色后流式细胞术检测凋亡率,吖啶橙/溴乙锭染色后采用荧光显微镜观察细胞凋亡水平。结果MTT实验和流式细胞检测结果显示,与空白对照组比较,SIN高(P<0.01)、中(P<0.05)、低(P<0.05)剂量组MC增殖降低,凋亡增加,吖啶橙/溴乙锭染色结果显示SIN干预的MC出现凋亡的百分率增加。结论青藤碱可抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖并促进其凋亡,可能会使肾脏病理性损害减轻。     

低密度脂蛋白对体外培养的人肾小球系膜细胞产生活性…

近年来，非特异性物大分子在肾小球系膜区的沉积及其对肾小球的病理损伤的影响，被雠为是导致是有小球硬化形成的重要原因。而脂蛋白正是这类引人注目的分子物质本实验 人低密度脂蛋白对体外培养的人肾小球系膜细胞Ｈ２Ｏ２和Ｏ＾－２产生的影响，并与经ＬＤＬ刺激后ＧＭＣ的增殖水平及乳酸脱氢酶水平相比较。     

表皮生长因子对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:探讨表皮生长因子对体外肾小球系膜细胞增殖作用的影响,为进一步研究系膜细胞增殖的发生机制提供依据。方法:通过肾小球系膜细胞体外培养技术,用含有不同浓度表皮生长因子的培养液培养系膜细胞,作用不同时间,以噻唑蓝法检测细胞增殖能力,观察不同浓度、作用时间下系膜细胞增殖情况。结果:表皮生长因子在0～100ng/mL浓度范围内,其促增殖作用随浓度的增加而增大,呈剂量依赖性(P<0.01),当浓度持续增高时,其促增殖能力有所降低(P<0.05)。加入10ng/mL表皮生长因子作用12～24h促增殖能力逐渐提高,24h达到高峰(P<0.05),随后又随着时间的延长而逐渐降低(P<0.05)。结论:表皮生长因子在一定浓度和时间范围内具有促进肾小球系膜细胞增殖的作用。     

1,25—二羟基维生素D3对骨髓基质细胞增殖及其在骨折？…

本文将２０只新西兰大白兔的骨髓基质细胞进行体外培养,１,２５（ＯＨ）２ＶｉｔＤ３作用下,观察贴壁细胞与非贴壁细胞增殖程度,形成ＣＦＵ－Ｆ集落数;并将培养后的贴壁细胞与非贴壁细胞分别回注至相应大白兔的骨折处。     

1,25(OH)2D3口服冲击与血液灌流对维持性血液透析患者继发甲状旁腺功能亢进的疗效对比与护理

目的:比较1,25(OH)2D3口服冲击与血液灌流对维持性血液透析患者继发甲状旁腺功能亢进(SHPT)的疗效与护理。方法:将维持性血液透析SHPT患者42例随机分成A组[1,25(OH)2D3口服冲击组]及B组(血液灌流组)各21例。A组在1周3次血液透析治疗基础上给予1,25(OH)2D3口服冲击;B组给予1周3次血液灌流串联血液透析治疗。比较治疗后两组血清全段反应性甲状旁腺激素(iPTH)和皮肤瘙痒等改善情况,并探讨护理要点。结果:治疗12周后两组患者iPTH与治疗前相比具有显著性(P0.01),但B组下降程度较A组更为显著(P0.01)。结论:血液灌流对维持性血液透析患者SHPT的疗效比1,25(OH)2D3口服冲击更明显,且皮肤瘙痒等症状好转,值得临床推广。     

活动期炎症性肠病患者骨密度和血清1,25-(OH)D3水平检测分 析简

目的：分析检测活动期炎症性肠病（IBD）患者骨密度和血清1,25-（OH）D3水平以及两者之间的关系。方法选择活动期IBD患者65例,健康对照组33例,记录患者身高和体重,采用直接数字化双能X线骨密度仪测量患者腰椎1～4骨密度值,同时检测患者静脉血1,25-（OH）D3、血钙、血磷以及碱性磷酸酶（ALP）。结果溃疡性结肠炎（UC）组、克罗恩病（CD）组、对照组组间的腰1～4骨密度值以及血清1,25-（OH）D3水平等比较,差异有统计学意义（F分别=3.65、14.40,P均＜0.05）;UC组患者腰1～4骨密度值和血清1,25-（OH）D3浓度均低于对照组,差异有统计学意义（P均＜0.05）。 CD组患者腰1～4骨密度值和1,25-（OH）D3水平低于对照组,差异有统计学意义（P均＜0.05）。UC组和CD组患者腰1～4骨密度值和血清1,25-（OH）D3差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 IBD患者相对健康成人发生骨质疏松或骨折的风险较高,活动期IBD患者应及早开展骨质疏松筛查和风险评估。     

中药干预肾小球系膜细胞增殖的机制

<正>肾小球系膜细胞(MC)是肾小球内非常活跃的固有细胞,具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。肾小球系膜细胞增殖和系膜细胞外基质增加是几乎所有慢性进行性肾脏疾病最主要的组织学特征,因     

肌肽对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的机制及影响

目的探讨和研究肌肽对高糖环境下肾小球系膜细胞(RMCs)增殖的影响及相关机制。方法以大鼠的RMCs作为研究对象,分别采用MTT法和BrdU-ELISA法进行肌肽在高糖环境下对RMCs增殖影响的观察。利用酶生化法进行丙二醇(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)含量以及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定。结果肌肽能够显著抑制高糖诱导下的RMCs增殖,在肌肽浓度5~30mmol/L呈现出一定程度的浓度依赖性,而且与其抗氧化作用密切相关。结论肌肽通过抗氧化作用来抑制高糖诱导的RMCs增殖,而且在一定范围内表现出浓度依赖的特性。     

益气养阴活血方对肾小球系膜细胞增殖及ERK通路的影响

目的 观察益气养阴活血方含药血清对高糖条件培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响.方法 制备益气养阴活血方和福辛普利含药血清.将大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组、高糖培养组、高糖培养+福辛普利含药血清组和高糖培养+三个不同浓度益气养阴活血方含药血清组.培养6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后用Western-blot法对系膜细胞中磷酸化ERK1/2(pERK1/2)的表达进行半定量分析,用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖.结果 与正常对照组相比,高糖组早期(24 h、48 h)能显著促进系膜细胞增殖,福辛普利和高浓度中药含药血清组均可抑制高糖引起的系膜细胞增殖(P<0.05),两组间无统计学差异(P>0.05).高糖刺激6 h后系膜细胞中pERK1/2蛋白的表达即明显增高,24 h达到高峰,后逐渐减弱,福辛普利和不同浓度中药含药血清干预后,pERK1/2蛋白水平显著下降(P<0.05),中药组和西药组间无统计学差异(P>0.05).结论 益气养阴活血方能抑制肾小球系膜细胞增殖和ERK通路的磷酸化,这可能是其临床肾脏保护作用机制所在.     

青蒿琥酯对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的:观察青蒿琥酯对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC)凋亡的影响。方法:用不同浓度的青蒿琥酯刺激脂多糖诱导增殖的大鼠肾小球系膜细胞,HE染色观察凋亡细胞形态,DAPI荧光染色观察细胞核凋亡情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:青蒿琥酯对系膜细胞凋亡有明显诱导作用,呈一定剂量依赖性。结论:青蒿琥酯能够剂量依赖性地诱导大鼠系膜细胞凋亡。     

地龙成分及含药血清对人正常肾小球系膜细胞增殖的影响

目的研究地龙成分EFE及含药血清对体外培养的人正常肾小球系膜细胞(HMC)增殖的影响,并从血清药物化学角度探讨其药理药效和防治糖尿病肾病的可能作用机制。方法将常规培养的HMC分为地龙成分EFE直接给药和含药血清给药两种方式,分别设空白对照组、低、中、高剂量组和福辛普利组,各组分别于相应处理后24 h、48 h和72 h采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖。结果直接给药组中各药物组与空白对照组(直)比较,均不同程度的抑制了正常HMC的增殖,中剂量药物组(直)对HMC细胞的增殖抑制作用最为显著;含药血清组中各药物组与空白对照组(血)比较,也不同程度的抑制了正常HMC的增殖,高剂量药物组(血)对HMC细胞的增殖抑制作用最为显著,并且高剂量药物组(血)对细胞增殖的抑制率高于中剂量药物组(直)。结论地龙成分能够抑制HMC的增殖,其含药血清对正常HMC增殖的抑制作用优于地龙成分直接给药。     

大黄素干预高糖培养大鼠肾小球系膜细胞的凋亡

背景:前期工作已经证实中药复方消可宁(制大黄、制附子、生黄芪)能有效防治早期糖尿病肾病并获得国家专利(专利号:200410064899X)。目的:观察大黄主要活性成分大黄素对高糖培养的SD大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法:用20,40,80μmol/L大黄素刺激高糖培养的SD大鼠肾小球系膜细胞,苏木精-伊红染色观察凋亡细胞形态,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚荧光染色观察细胞核凋亡情况,流式细胞仪观察细胞凋亡率。结果与结论:苏木精-伊红染色及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色结果显示大黄素对高糖培养的肾小球系膜细胞的凋亡有影响,且与浓度与时间成正相关,细胞凋亡率组间差异有显著性意义(P<0.05)。提示大黄素可诱导肾小球系膜细胞凋亡,且与药物浓度及时间成正相关。     

一氧化氮合成酶在人肾小球系膜细胞中表达的研究

目的探讨肾小球系膜细胞 (MC)诱生型一氧化氮合成酶 (iNOS)的表达。方法采用 4个月龄水囊引产的胎儿 ,取胎肾 ,用不锈钢网筛分离技术 ,培养原代系膜细胞 ,用胰酶传代 ,取Ⅲ代细胞用于实验。设实验组和对照组 ,观察脂多糖 (LPS)刺激后不同时间 (4、6、2 4、4 8小时 )及一氧化氮合成酶抑制剂 (L NAME)刺激后同一时间 (2 4小时 )对诱生型一氧化氮合成酶表达的影响。结果细胞为梭形、星形或树枝状 ,核居中央 ,呈圆形或椭圆形 ;免疫荧光结果为抗结蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原、抗纤维连接蛋白 (FN)、抗层粘连蛋白 (LN)阳性 ;抗角蛋白、抗Ⅷ因子抗体阴性 ;在未刺激的MC中无iNOSmRNA的表达 ;LPS刺激后 4小时 ,即可检测到iNOS ;6小时后开始明显增加 ;2 4小时达到高峰 ;至 4 8小时iNOS仍较高 ;L NAME为iNOS特异性的抑制剂。结论肾小球MC确含有iNOS ,且在生理状态下呈稳定状态 ,病理状态下 (如LPS刺激后 )表达上调。     

VD及其活性代谢产物1，25（OH）2D3对免疫系统的影响

众所周知，VD及其活性代谢产物1,25（OH）2D3不仅对骨骼发育有重要的影响，而且还对单个核细胞群及其产生的细胞因子有重要的影响。它们的最突出的作用是对动物模型中自身免疫性疾病产生抑制作用，对人类细胞因子的产生有调节作用。而VD及1，25（OH）2D3的可能的作用机理为1,25（OH）2D3对多种细胞因子如IL-1、IL-2、IL-6、LFN—T等的分泌有抑制作用，而由此也提出了对自身免疫性疾病及移植排斥应可行1，25（OH）2D3的治疗方法。对于出生即应用VD防治佝偻病的新生儿，1，25（OH）2D3对免疫系统的影响还不是十分清楚。     

mTOR信号通路调控1,25二羟维生素D_3抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖的研究

目的研究1,25二羟维生素D3抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖作用以及对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法用不同剂量1,25二羟维生素D3(10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L)分别处理Hep-2细胞24、48、72h,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测Hep-2细胞的增殖情况,并计算抑制率;采用流式细胞仪分析1,25二羟维生素D3对Hep-2细胞周期分布的影响,Western blot检测1,25二羟维生素D3对mTOR信号通路的影响。结果不同浓度1,25二羟维生素D3均可抑制Hep-2细胞增殖,改变细胞周期分布,使G0/G1期Hep-2细胞比例增高。1,25二羟维生素D3干预后Hep-2细胞TSC1、TSC2蛋白表达较对照组增高(P0.01),Rheb蛋白表达明显降低;mTOR蛋白及其磷酸化水平表达与对照组比较均降低(P0.01),mTOR蛋白磷酸化表达降低尤为明显(P0.01);4EBP-1蛋白表达较对照组增高(P0.01)。结论 1,25二羟维生素D3改变喉癌细胞Hep-2细胞周期分布,影响mTOR信号通路蛋白表达,从而抑制细胞增殖。     

三七总皂苷调控miR-1231保护高糖下肾小球系膜细胞的研究

目的 探讨三七总皂苷(PNS)调控miR-1231对高糖诱导的肾小球系膜细胞(HMCs)增殖及炎症反应的影响。方法 将人肾小球系膜细胞(HMCs)分为空白对照组(CON),高糖组(HG)和三七总皂苷组(PNS)。采用CCK-8法检测PNS对高糖下HMCs增殖的抑制作用。采用Real-time PCR法检测miR-1231在各组的相对表达量,生物信息学分析法筛选与miR-1231相关的信号通路及其参与的生物学功能。采用ELISA法和Western blot法检测炎症因子的分泌情况。结果 CCK-8结果表明,与高糖组相比PNS在浓度为6.25～200μg/mL状态下,对细胞过度增殖的抑制作用呈现明显的浓度依赖性(P<0.05),且50μg/mL的PNS已能够显著改善高糖诱导下HMCs的异常增殖(P<0.01)。PCR的结果显示,与对照组相比,高糖组miR-1231表达显著下降;与高糖组相比,PNS干预后显著升高(P<0.01)。对miR-1231进行生物信息学分析,预测到miR-1231的靶基因有IGF1、TMED1、GSTT2等;用GeneOntology和KEGG数据...