mTOR信号通路调控1,25二羟维生素D_3抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖的研究

目的研究1,25二羟维生素D3抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖作用以及对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法用不同剂量1,25二羟维生素D3(10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L)分别处理Hep-2细胞24、48、72h,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测Hep-2细胞的增殖情况,并计算抑制率;采用流式细胞仪分析1,25二羟维生素D3对Hep-2细胞周期分布的影响,Western blot检测1,25二羟维生素D3对mTOR信号通路的影响。结果不同浓度1,25二羟维生素D3均可抑制Hep-2细胞增殖,改变细胞周期分布,使G0/G1期Hep-2细胞比例增高。1,25二羟维生素D3干预后Hep-2细胞TSC1、TSC2蛋白表达较对照组增高(P0.01),Rheb蛋白表达明显降低;mTOR蛋白及其磷酸化水平表达与对照组比较均降低(P0.01),mTOR蛋白磷酸化表达降低尤为明显(P0.01);4EBP-1蛋白表达较对照组增高(P0.01)。结论 1,25二羟维生素D3改变喉癌细胞Hep-2细胞周期分布,影响mTOR信号通路蛋白表达,从而抑制细胞增殖。     

1，25—二羟基维生素D3诱导HL—60细胞分化并下调nm23基因的表达

目的 观察1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]对白血病细胞株HL-60的诱导分化作用并探讨其机制。方法 通过MTT试验、细胞形态观察,表面标志分析和硝基四氮唑蓝（NBT）还原反应。观察1,25（OH）2D3作用后HL-60细胞增殖的改变和分化情况;通过流式细胞仪和RT-PCR检测细胞周期和nm23基因表达的变化。结果 HL-60细胞经1,25（OH）2D3作用后增殖受抑制,向成熟单核细胞系分化。细胞被阻滞在G1期、nm23基因的表达下调。结论 1,25（OH）2D3对HL-60细胞株具有诱导分化作用。其作用机制可能与下调nm23基因的表达有关。     

1,25（OH）2D3对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的探讨1,25一二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠系膜细胞增殖与凋亡及其相关基因Fas表达的影响。方法体外培养的大鼠系膜细胞,分为正常对照组(0 mol/L)和不同浓度1,25(OH)2D3干预组(10-10mol/L;10-8mol/L;10-6mol/L),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪,检测不同作用时间(24 h、48 h)下,系膜细胞增殖及凋亡情况,免疫荧光染色法观察干预24 h后,凋亡相关基因Fas的表达情况并测定各组荧光强度。结果与正常对照组相比,1,25(OH)2D3干预组,可明显抑制系膜细胞增殖,促进凋亡,并呈作用时间依赖性。同时免疫荧光染色证实干预浓度越大,系膜细胞内Fas表达增多,荧光强度增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 1,25(OH)2D3干预大鼠肾小球系膜细胞,能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,Fas的表达增多,呈浓度和时间依赖性。     

雷帕霉素类衍生物依维莫司在恶性血液病中的作用

针对不同信号通路的分子靶向冶疗已成为一种极有发展前景的肿瘤治疗模式.在许多血液系统的恶性疾病中存在mTOR及其相关信号系统异常激活.mTOR抑制剂通过抑制这些信号传导通路而达到抑制细胞增殖、蛋白合成和细胞周期进展的作用.雷帕霉素类衍生物依维莫司(RAD001)是一种新发现的雷帕霉素衍生物,其通过阻断PI3K/Akt/m...     

MAPK/ERK信号通路在逆转乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路在逆转乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用。方法 采用人乳腺癌细胞系MCF-7和T47D分别建立他莫昔芬治疗耐药细胞株MCF-7/TAMR和T47D/TAMR。分析MCF-7细胞与MCF-7/TAMR细胞、T47D细胞与T47D/TAMR细胞增殖能力和MAPK/ERK信号通路分子表达情况的差异。分析丝裂原活化蛋白激酶激酶（MEK）抑制剂U0126抑制MAPK/ERK信号通路后,对MCF-7/TAMR和T47D/TAMR细胞增殖的抑制作用、细胞周期分布以及转录因子表达的影响。结果 与MCF-7细胞和T47D细胞比较,MCF-7/TAMR细胞和T47D/TAMR细胞的增殖速度显著加快（P<0.05）,克隆形成能力显著增强（P<0.000 1）,MAPK/ERK信号通路分子[ERK、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（pERK）和c-MYC]表达量显著增高。采用MEK抑制剂U0126抑制MAPK/ERK信号通路后,MCF-7/TAMR细胞和T47D/TAMR细胞的增殖速度显著减慢（P<0.000 1）,细胞周期发生...     

PI3K／AKT／mTOR信号通路在造血干细胞中作用的研究进展

PI3K／AKT／mTOR信号通路调节细胞生长、增殖和存活等生命过程,在多种细胞生命过程中起着关键的作用,在造血干细胞中同样也扮演着重要的角色。过度激活PI3K／AKT／mTOR信号通路会造成造血干细胞的耗竭,而抑制PI3K／AKT／mTOR信号通路,则B细胞的分化会受到显著的抑制。本文系统介绍PI3K／AKT／mTOR信号通路中关键节点的蛋白,包括PI3K,AKT,mTOR,FoxO和GSK-3等在造血干细胞中作用的最新研究进展。     

吡格列酮对高糖培养的肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1表达和合成的影响

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂-吡格列酮对肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达和合成的影响,探讨其肾脏保护机制。方法体外培养肾小球系膜细胞,随机分组为正常对照糖（NG组）、高糖（HG组）及高糖＋不同浓度吡格列酮（P1、P2、P3组）。培养48小时后收集各组细胞及上清液,应用RT-PCR方法检测细胞MCP-1mRNA含量,采用ELLSA法检测细胞上清液中MCP-1蛋白浓度。结果 （1）肾小球系膜细胞可表达及合成MCP-1;（2）与NG组比较,高糖刺激后肾小球系膜细胞MCP-1mRNA表达以及细胞上清液中MCP-1蛋白含量显著增高（P〈0.05）;（3）加入吡格列酮干预后,肾小球系膜细胞MCP-1mRNA表达以及细胞上清液中MCP-1蛋白含量显著下降,且呈现浓度依赖性。结论吡格列酮可抑制肾小球系膜细胞MCP-1mRNA表达和蛋白合成,且呈现剂量依赖性,该作用可能与其肾脏保护部分有关。     

基因甲基化与mTOR在成人急性淋巴细胞白血病中的研究进展

基因甲基化是引起基因沉默的一种方式,甲基化修饰是表观遗传修饰中一种最为重要并且常见的DNA修饰,也是脊椎动物唯一的DNA自然修饰方式。 DNA的高甲基化可以使肿瘤抑制基因以及编码细胞黏附分子和生长调控蛋白的基因失活。在基因表达的调控、基因结构稳定等方面有着十分重要的作用,与肿瘤的发生发展关系密切［1］。与此同时,随着医学的不断进步,信号传导系统的缺陷和异常活化与肿瘤发生、发展及预后的关系已成为肿瘤分子生物学的研究热点,同时通过干预信号传导途径治疗肿瘤也成为生物治疗的新兴领域。哺乳动物西罗莫司靶蛋白（ mammalian target of rapamyein ,mTOR）是细胞内多种重要信号传导通路的枢纽,具有调控翻译起始、转录、蛋白合成和降解,调节细胞的生存、增殖和细胞凋亡等细胞重要生理功能。该信号通路激活程度也是判断肿瘤患者预后的重要指标之一。因此抑制该信号通路已成为肿瘤预防和肿瘤靶向治疗的热点［2］,有研究报道,mTOR通路与多基因甲基化之间存在一定关系,两者的结合有可能为肿瘤患者的诊疗提供新的思路。     

IGF-1/PI3K/Akt/mTOR信号通路失衡与孤独症关系研究进展

IGF-1/PI3K/Akt/mTOR信号通路在调节细胞生长、增殖、分化、能动性、生存、代谢和蛋白质合成过程中起重要作用。孤独症是广泛性发育障碍疾病,病因机制复杂,其发展与其分子机制改变是近年研究的热点。IGF-1/PI3K/Akt/mTOR信号通路失调与孤独症发生有关,该信号通路在孤独症的诊断、治疗中可能有重要作用。本文就IGF-1/PI3K/Akt/mTOR信号通路失衡与孤独症关系的研究进展作一综述。     

mTOR信号通路与心血管疾病的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路调节细胞的生长、代谢、增殖等过程,在细胞生长过程中扮演着重要的角色。在分化成熟的血管内皮细胞和心肌细胞中,mTOR在依赖于激活蛋白激酶B（Akt）引起的氧化应激条件下,调控细胞的凋亡和自噬过程。     

mTOR信号通路在造血及其它系统衰老中作用的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,在调节细胞的生长、增殖和存活中起着重要的作用.mTOR复合体调控mRNA的转录、核糖体的合成及代谢相关基因的表达,通过磷酸化其下游的靶蛋白如S6蛋白激酶和4E-BP1等来调节细胞的活动.近年来,mTOR分子及其相关信号通路在衰老调控中所起的作用渐渐被人们所认识.对mTOR信号通路在衰老中的生物学功能和调节机制的研究,不仅可以深入了解细胞自我更新和分化的机制,而且对衰老及其相关疾病的治疗、预防及寻找潜在的治疗靶点与药物具有重要意义.本文主要介绍mTOR信号通路在造血系统及其他系统衰老中研究的最新进展.     

Notch1信号通路与白藜芦醇抗急性T淋巴细胞白血病作用机制研究进展

摘要: 急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是一类预后不良的恶性淋巴细胞增殖性疾病。T-ALL的发生与Notch1及其介导的信号通路密切相关。Hes-1基因是Notch1的靶基因,被激活后通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制抑癌基因p53表达阻止细胞凋亡,诱导TALL发生。白藜芦醇（Res）是一种具有化学防癌作用的多酚类植物抗生素。Res对T-ALL Molt-4细胞具有抑制增殖、诱导凋亡的作用。但Res是否通过Notch1通路发挥作用及其机制尚不十分清楚。本文就Notch1信号通路与T-ALL的发生、治疗以及Notch1信号通路与白藜芦醇抗T-ALL作用机制的研究现状作一综述。     

运动诱导骨骼肌肥大的信号传导通路

归纳分析运动诱导骨骼肌生理性适应肥大机制,为训练计划设计提供指导性的建议.运动诱导骨骼肌生理性适应肥大机制涉及到多种信号传导途径:①雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)信号传导通路刺激骨骼肌生长.②PI3K-mTOR在调节细胞和器官生长中扮演着重要的作用.③mTOR参与肌肉适应性生长的调节.④和肾上腺素能激动剂克伦特罗诱导的肌肉生长通过mTOR和其下游的目标蛋白.⑤mTOR通路参与抗阻力训练诱导肌肉肥大.大量关键蛋白分子和信号传导通路被发现和证实,其中Akt/mTOR信号通路,被认为在参与调节肌肉的生长,增加蛋白的合成方面起到重要的作用.改变运动方式,能够选择性的激活Akt和mTDR的上游的效应分子目前并不清楚,需进一步研究.     

mTOR信号通路与白血病靶向治疗研究进展

mTOR是P13K／Akt信号通路下游的一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,通过调节细胞周期进程、蛋白质合成和降解、细胞能量代谢等多种途径发挥重要的生理功能,在细胞的生存、生长、增殖过程中起着中心调控点的作用。新近研究显示mTOR信号通路异常调控与白血病具有相关性,靶向mTOR可能成为白血病治疗的新方向。     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及其抑制剂在乳腺癌临床诊治中的应用进展

PI3K-Akt-mTOR信号通路异常激活在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用,也与乳腺癌内分泌治疗及靶向治疗耐药密切相关。mTOR位于该细胞信号通路的下游,与肿瘤细胞的转录、翻译、增殖、代谢和转移等行为密切相关。mTOR抑制剂通过不同的靶点作用于PI3K-Akt-mTOR信号通路,恢复内分泌治疗的敏感性,从而发挥其抗癌作用。本文就mTOR、mTOR抑制剂及PI3K-Akt-mTOR信号通路在乳腺癌中的最新研究进展作一综述。     

NF-κB信号传导通路与弥漫性大B细胞淋巴瘤研究进展

根据基因表达谱研究,弥漫性大B细胞淋巴瘤至少可分为三种分子亚型：生发中心B细胞样的弥漫性大B细胞淋巴瘤（GCB—DLBCL）,活化性B细胞样弥漫性大B细胞淋巴瘤（ABC—DLBCL）,原发性纵隔大B细胞淋巴瘤（PMBL）。后两者生长、增殖依赖于NF—κB信号转导通路异常活化和NF—κB靶基因高表达。研究揭示,该信号传导通路可能成为治疗该类DLBCL的潜在靶点。现对NF—κB信号传导通路与弥漫性大B细胞瘤的相关研究进展作一综述。     

糖肾汤对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

背景：肾小球系膜细胞是糖尿病肾病致病的主要靶细胞,高糖环境下系膜细胞发生一系列功能改变,导致疾病不断发生发展,应用中药进行干预治疗,对延缓糖尿病肾病的发展具有重要意义.目的：探讨肾小球系膜细胞在高糖环境下增殖情况以及糖肾汤含药血清对其的影响.设计：对照实验.单位：浙江中医学院附属第二医院实验室.材料：以2003-08取自上海市第一人民医院肾内科SD大鼠系膜细胞株作为实验对象,2003-10浙江中医学院实验动物中心的清洁级SD大鼠45只,雌雄各半,体质量（180&;#177;20）g,作为制备含药血清动物.糖肾汤（由大黄、桃仁、虫、黄芪、地骨皮、黄连等组成）,按比例称取后,水煎、过滤、浓缩至含生药3 g/mL.方法：将SD大鼠随机分为正常组、糖肾汤组、卡托普利组各15只.将糖肾汤和卡托普利含药血清分为不同的剂量组作用于系膜细胞体系,正常组每日灌胃相同容量蒸馏水,用锥虫蓝染色法和四唑盐法分别检测用药后对系膜细胞毒性及增殖的影响.主要观察指标：在含药血清刺激后大鼠肾小球系膜细胞活力,及细胞增殖情况.结果：实验大鼠均进入结果分析.①系膜细胞在高糖持续作用下,其增殖受到抑制（与空白组比较P＜0.05）,糖肾汤及卡托普利干预后均可不同程度地逆转上述高糖的抑增殖作用（与高糖组比较P＜0.05）.②各组含药血清干预大鼠肾小球系膜细胞后,无明显毒性作用（细胞活力均达94%以上,与空白组比较P＞0.05）.结论：高糖可抑制系膜细胞增殖,而糖肾汤可刺激系膜细胞增殖.     

肾脏系膜细胞内葡萄糖转运蛋白1与糖尿病肾病

<正>糖尿病肾病(DN)是糖尿病最严重的微血管并发症之一,是西方国家导致终末期肾病的最主要原因,也是我国慢性肾脏病的首要病因之一。DN的主要特点为大量细胞外基质蛋白在肾小球系膜区沉积和系膜细胞(MC)肥大,肾小球及肾小管基底膜增厚,以及肾小管间质纤维化,最终造成肾小球硬化。高血糖可以促进DN的进展,并且会直接导致肾小球内葡萄糖浓度升高。葡萄糖转运蛋1(GLUT1)可以调节MC葡萄糖的浓度,并进一步激活下游的细胞因子及信号传导通路。在DN的进展     

高糖对大鼠肾小球系膜细胞LPA3（edg-7）表达影响及姜黄素的干预作用

目的探讨高糖对大鼠肾小球系膜细胞增殖及其LPA3（edg-7）表达和姜黄素的干预作用。方法体外培养大鼠肾系膜细胞,同步后采用高浓度的葡萄糖（30mmol/l）联合不同浓度姜黄素进行干预处理。应用MqT测量高糖及不同浓度姜黄素干预后肾小球系膜细胞增殖活力。应用RT-PCR检测正常培养及高糖作用后大鼠肾小球系膜细胞LPA3（edg-7）的表达及不同浓度姜黄素对其表达的影响。结果高糖促进大鼠系膜细胞增殖,上调LPA3（edg-7）的表达。姜黄素可抑制高糖刺激引起的系膜细胞增殖,下调LPA3（edg-7）表达。当姜黄素浓度大于或等于10／μmol／L时,系膜细胞增殖明显受到抑制（P〈0．05）,且表现为浓度依赖性。在基础状态下,系膜细胞表达一定量的LPA3（edg-7）,经高糖刺激后,LPA3（edg-7）基因表达上调;姜黄素可下调高糖刺激引起的LPA3（edg-7）mRNA高表达,当姜黄素浓度为20μmol／L时能明显下调高糖刺激引起的系膜细胞LPA3（edg-7）基因表达（P〈0．05）,且随其浓度增高,抑制作用有增强趋势。结论姜黄素能抑制高糖刺激大鼠肾系膜细胞增殖并可下调高糖刺激引起的LPA3（edg-7）基因表达。LPA3（edg-7）基因表达与肾小球系膜细胞增殖成正相关,下调LPA3（edg-7）表达,可能为姜黄素抑制肾小球系膜细胞增殖的作用途径之一。     

细胞因子与系膜细胞进展

肾小球系膜细胞是最活跃的固有细胞成分,在肾小球损伤过程中首当其冲,为各种细胞因子作用的主要靶细胞。各种细胞因子间的相互作用导致系膜细胞不断增殖与硬化,是肾小球肾炎向终末期肾病发展的关键。文章就近年来研究较多的部分细胞因子与系膜细胞关系的进展作一综述。