羊水细胞、脐血细胞ABO血型PCR-SSP法基因定型与血清学定型比较

目的探讨羊水细胞、脐血细胞ABO血型的PCR-SSP基因定型方法的可靠性。方法采集孕妇羊水细胞和新生儿脐血细胞,ABO基因定型用PCR-SSP法,血清学定型用低离子溶液常规单克隆标准血清方法。结果69例羊水细胞、脐血细胞标本均检测出ABO基因型,两者基因定型完全一致。脐血ABO血清学血型与脐血细胞及羊水细胞ABO基因型血型有显著性差异(P<0.01)。羊水细胞血清学定型与羊水细胞和脐血细胞基因定型有非常显著差异(P<0.001)。脐血细胞血清学定型与羊水细胞血清学定型有显著性差异(P<0.05)。结论PCR-SSP方法检测羊水细胞及脐血细胞ABO基因型可准确诊断胎儿及新生儿ABO血型,值得推广。     

序列特异性引物PCR法检测MN血型基因型

目的　建立MN血型系统基因分型的方法 ,检测人群中MN基因的频率。方法　用快速盐析法抽提样本DNA ,序列特异性引物PCR法检测MN基因。结果　 115例汉族人群中MM基因型为 2 5例 ,MN基因型为 6 0例 ,NN基因型为 30例。M基因频率为 0 .4 78,N基因频率为 0 .5 2 2。结论　该方法可以检测MN血型基因型。浙江汉族中N基因频率大于M基因频率     

聚合酶链式反应-特异性序列引物基因定型在新生儿溶血病ABO血型定型中的应用

目的研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PCR-SSP)基因定型在新生儿溶血病(CHDN)ABO血型定型中的应用。方法收集20例来自广东省肇庆市第一人民医院新生儿溶血病(HDN)的样本,对这些样本进行ABO血型鉴定等一系列血型血清学方法进行检测,然后用PCR-SSP基因定型技术进行样本的基因分型。结果与其血型的血清学分型结果进行比较,新生儿溶血病ABO血型的定型是新生儿输血的必要保障,而PCR-SSP基因分型较血型血清学方法更快捷、准确。结论 PCR-SSP基因正型技术将不再局限于疑难血型的鉴定中,并会越来越多地应用于HDN的鉴定中。     

ABO基因定型在疑难血型鉴定中的应用

Landsteiner1 90 0年发现的 ABO血型 ,是目前最具临床意义的血型系统。常规使用的定型技术是采用单克隆或多克隆抗体与红细胞凝集试验进行测定 ,疑难者再附加吸收放散试验、唾液定型等试验项目 ,但由于血型血清学技术的局限性 ,致使一些疑难标本难以及时、准确判定。作者参考国外文献 [1] ,建立了稳定的 PCR ABO基因分型技术 [2 ] ,在实际工作中解决了一些疑难血型鉴定病例 ,现报告如下。材料与方法1　血型血清学试验　按照文献[3 ] 操作。抗 - A、抗 -A1、抗 - B由卫生部长春生物制品研究所制备 ,抗 -H、抗球蛋白试剂由上海输血研究…     

PCR-SSP基因分型技术在ABO疑难血型定型中的应用

目的 研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PC-SSP)基因分型技术在ABO疑难血型鉴定中的应用.方法 收集8例来自广东省肇庆市无偿献血者的ABO疑难血型样本,采用正反定型实验、吸收放散试验等一系列血型血清学方法进行检测;提取基因组DNA,并用PCR-SSP基因分型技术,特异性扩增ABO基因片段,根据有无PCR产物以及产物长度,判断样本的基因型.结果 通过凝胶电泳检测PCR反应的特异性产物,判断样本1～6号ABO基因型为A/O型,样本7,8号为B/O型.8例疑难ABO基因分型结果与其血型的血清学分型结果吻合.结论 ABO疑难血型定型的解决是一个复杂的难题,而PCR-SSP基因分型是一种方便、快速、可靠的技术,对于解决ABO疑难血型鉴定非常有用.     

PCR-SSP技术对羊水细胞ABO血型的基因鉴定

目的通过PCR-SSP基因技术检测胎儿羊水细胞ABO血型基因型,产前诊断胎儿ABO血型。方法选取了6名孕16 W以上的孕妇,抽取羊水细胞并进行分离,提取羊水细胞DNA,运用PCR-SSP技术分析其ABO血型基因型,并通过出生后的脐带血的血型鉴定进行确认。结果 6例羊水标本均通过PCR-SSP方法检测出了ABO血型的基因型;该6名胎儿的脐带血的ABO血型与羊水细胞的血型一致。结论 PCR-SSP技术可以准确地检测胎儿羊水细胞的ABO血型。     

100例江西地区健康汉族人群ABO血型基因分型的研究

目的研究PCR-SSP法进行ABO血型基因分型的技术,探讨其应用于临床检验的可行性。方法 2006年10月至2011年10月,随机抽取江西地区健康汉族个体100例,采用血清学和PCR-SSP两种方法鉴定血型。结果 100例基因分型结果与血清学结果一致,江西地区人群以O型为多：O〉A〉B〉AB,基因频率：A基因为0.2253,B基因为0.1753,O基因为0.5998,共检出4种等位基因,9种基因型。结论基因分型技术应用于江西地区临床检验具有可行性,可以作为弥补血清学技术不足的一种快速实验方法。     

用ABO正反定型法纠正误定血型3例

<正> 在检测 ABO 血型时,大多数实验室均采用抗 A、抗 B 血清作红细胞正定型。我院自1988年以来,采用先由化验室作红细胞正定型,血库配血复核时作血清反定型。通过正、反定型,纠正了单用红细胞定型或单用血清定型的失误。3例 ABO 血型检定见附表。讨论:例1为恶性肿瘤患者,由于其红细     

常见ABO抗原和稀有A2抗原同步基因分型的研究

目的建立人类ABO血型系统的同步基因分型法研究ABO血型。方法采用PCR-SSP技术,设计合成13对序列特异性引物,摸索最佳退火温度,通过调整引物浓度、Mg2+浓度等,使ABO系统等位基因在同一条件下进行同步扩增和扩增产物在同一凝胶中进行同步电泳;使用此方法,检测34例已知血清学ABO血型的与20例已知序列的A2亚型标本。结果用基因分型法检测出的ABO常见基因和A2基因,与已知血清学ABO分型结果相符合。结论该ABO基因分型方法适合中国人ABO基因常规鉴定与研究。     

北京地区汉族人群ABO血型基因分型研究

本研究建立ABO基因分型技术，研究北京地区汉族人群中ABO基因型的分布，以了解该人群基因分布特点及规律。通过Multiplex·PCR·RFLP技术和PCR·SSP技术建立起稳定的ABO血型基因分型方法．应用该方法开展对北京地区汉族人群ABO基因分型的研究。研究结果表明，A102、O1、B为北京地区汉族人群中较为常见的等位基因；在北京汉族人群中A型以A102为主，占绝对优势；未检测到A201等位基因，但发现3例O2基因样本，此结果提示在北京汉族人群中存在O2基因。结论：通过研究初步了解了北京地区汉族人群ABO基因分型规律．为ABO血型系统的深入研究提供了参考依据。     

ABO血型与白癜风的相关性探讨

目的：探讨ABO血型与白癜风发病及其转归的相关性。方法：采用血型群体遗传学及血型血清学检测统计712例白癜风患者ABO血型表现型及基因频率分布。随机选取其中A、B、AB、O型白癜风患者各70例对其进行规范治疗3个月,观察其疗效并进行统计学分析。结果：①白癜风组与健康对照组的ABO血型分布特征分别为A﹥B﹥O﹥AB、B﹥O﹥A﹥AB;A、B、O基因频率分布特征分别为O型﹥A型﹥B型、O型﹥B型﹥A型,白癜风组与健康对照组的A、O血型分布、A、B、O型基因频率比较差异均有统计学意义（P﹤0.05）。②A、O型血型与白癜风的发病具有相关性,r值分别为0.027、0.031（P﹤0.05）。A、B、AB血型白癜风患者的治疗效果优于O型血患者。结论：白癜风的发病与ABO血型有一定的相关性,A型血可能为白癜风的易感因素,O型血可能为负危险因素,但O型血患者的治疗效果较差。     

PCR-SSP与血清学技术用于ABO血型分型的比较

目的 探讨ABO血型基因分型技术应用于临床检验的可行性.方法 随机抽样100例江西健康汉族个体,并收集20例正反定型不符的标本,采用血清学和序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)鉴定血型.结果 100例健康个体的基因分型结果与血清学分型结果一致,19例正反定型不符标本的基因分型结果准确.分型结果表明江西地区以O型为多,100例健康个体中,O型36例(36%),A型32例(32%),B型24例(24%),AB型8例(8%),基因频率:p(A)基因为0.225 3,q(B)基因为0.175 3,r(O)基因为0.599 8,且符合Hardy-Weinberg平衡.结论 基因分型技术应用于临床检验具有可行性,在鉴定疑难血型方面可以作为血清学分型的补充.     

PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的初步研究

目的：探索使用PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的方法,探讨献血者血型检测中与ABO血型抗体效价相关的影响因素及注意事项。方法仪器微板法测定抽样标本的ABO血型抗体效价;仪器微板法及手工试管法测定各血型混合血浆的ABO血型抗体效价;统计分析该中心2013年5～7月检测出的ABO血型抗体效价降低的情况。结果A型献血者与B型献血者的ABO血型抗体效价比较,差异无统计学意义（P＞0．05）,O型献血者的ABO血型抗体效价明显高于A型或B型献血者（P＜0．05）;手工试管法的灵敏度明显优于仪器微板法,而手工试管法二的灵敏度又明显优于手工试管法一（P＜0．05）;ABO血型抗体效价降低的A型献血者明显多于B型或O型（均P＜0．01）,ABO血型抗体效价降低的男性献血者明显多于女性（P＜0．01）。结论仪器微板法测定ABO血型抗体效价操作简便、结果判读客观、重复性好,1∶1～1∶80的稀释比例范围能满足绝大多数标本的测定需要,采用梯度稀释有助于减小测定误差;血型、性别、年龄、亚型等因素可能与献血者ABO血型抗体效价降低相关。     

微流体芯片技术在ABO血型基因分型中的应用

本研究建立一种简单、可靠的ABO基因检测结果报告评估方法。利用微流体芯片检测技术代替凝胶电泳,通过对实验条件的优化,进行multiplex—PCR—RFLP的ABO基因分型结果判读,并通过对150份标本进行测试．对该检测方法的稳定性和准确性进行评估。结果显示,全部检测结果与血清学分析结果一致,并且检测出1例因肿瘤引起的B型抗原减弱病例。结论：建立的微流芯片基因检测系统稳定、可靠,实现了ABO基因分型检测结果的客观化、标准化和自动化。     

中国人群ABO血型与糖尿病肾病发病的相关性研究

目的探讨ABO血型及肾功能参数在糖尿病肾病发病中的作用。方法选取北京市垂杨柳医院收治的糖尿病肾病患者400例作为病例组,健康体检者400例作为健康对照组,分析ABO血型、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)水平和糖尿病肾病发病的相关性。结果 A型和AB型的分布比例两组之间差异有统计学意义(P0.05),病例组A型比例(21.5%)明显低于健康对照组A型比例(31.0%),差异有统计学意义,病例组AB型比例(21.5%)明显高于健康对照组AB型比例(10.0%),但B型和O型两组之间差异无统计学意义(P0.05);病例组不同血型的血清BUN水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。而血清Cr水平,病例组中A型[(90±10)μmol/L]、AB型[(108±12)μmol/L]明显高于健康对照组的A型[(57±12)μmol/L]、AB型[(66±11)μmol/L],差异均有统计学意义(P0.05),但O型和B型两组之间差异无统计学意义(P0.05)。血清UA水平两组不同ABO血型差异均无统计学意义(P0.05);经Logistic回归分析,A型、AB型和BUN、Cr与糖尿病肾病发病呈正相关,OR值分别为:3.916、1.234、1.925、1.031。结论 A型、AB型、BUN、Cr是糖尿病肾病发病的独立危险因子。     

孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术的建立

本研究目的是建立孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术,用于ABO血型不合引起的新生儿溶血病的产前诊断。根据ABO血型基因DNA全序列和mRNA序列设计4对引物,选择20例健康供者血浆,提取血浆中DNA进行扩增,探索最佳的血浆DNA提取及PCR扩增条件,初步建立单人ABO血型基因分型技术。将O型血浆DNA与A型或B型血浆DNA按1：1、2：1、4：1、8：1、10：1、20：1、40：1、100：1进行混合,模拟孕妇外周血胎儿与孕妇自身ABO基因混合状态,建立混合ABO血型基因分型技术。选取14例孕30周以上的孕妇外周血标本,进行胎儿ABO血型基因型鉴定,并对孕妇进行追踪,尽量获取胎儿出生以后的外周血标本进行ABO血型鉴定,以评价孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术的灵敏度与准确性。结果表明：单人血浆进行准确血型鉴定的最少模板DNA量约为0．625ng,500μl血浆提取的DNA量即可达到PCR扩增要求;当混合血浆中O型DNA所占比例≤10时,可以准确检测出非0基因的存在;14名O型孕妇外周血标本中9例标本扩增出非O型基因,5例未扩增出非0基因;通过血清学方法对5例胎儿出生后外周血进行ABO血型鉴定,其中A型3例,B型1例,O型1例,与其基因分型结果一致,符合率100％。结论：本研究建立的孕妇外周血胎儿ABO血型基因提取、分型技术,可以对妊娠中晚期胎儿ABO血型基因型进行准确鉴定,从而为新生儿溶血病的产前诊断与预防提供指导意见。     

一管式多引物焦磷酸测序技术在HPV分型检测中的应用

目的：探讨一管式多引物焦磷酸测序技术在人类乳头瘤病毒（HPV ）分型检测中的临床应用价值。方法设计针对7个不同 HPV亚型的高度特异性测序引物,采用一管式多引物测序法,通过半巢式聚合酶链反应（PCR）扩增获得 HPV基因片段,并进行焦磷酸测序分析。结果通过半巢式PCR扩增和一管式多引物焦磷酸测序,成功区分了7种不同的 HPV亚型,且测序结果与PCR-反向点杂交法检测结果的符合率是100％。结论一管式多引物焦磷酸测序技术是一种简便、高效、高通量、高灵敏度、高准确度的HPV分型检测方法,值得推广应用。