大鼠高强度运动后的软骨损伤及寡聚基质蛋白的表达

目的探讨高强度运动对大鼠关节软骨及大鼠膝关节液软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达的影响。方法将20只SD大鼠随机分为对照组和高强度运动组各10只。高强度运动组进行8周高强度跑台运动。对照组不进行运动跑台。8周后取大鼠股骨髁病理学检查,采用酶联免疫吸附法检测大鼠关节液中COMP水平。结果高强度运动组大鼠膝关节出现关节软骨损伤表现,关节液中COMP的表达高于对照组(P0.05)。结论高强度运动导致的关节软骨损伤,创伤性关节炎与COMP水平有关。     

6周高强度跑台运动对大鼠关节液及滑膜白细胞介素-1β的影响①

目的探讨高强度跑台运动对大鼠关节液及滑膜白细胞介素-1β(IL-1β)的影响.方法将24只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为安静对照组和高强度运动组各12只.高强度运动组进行6周高强度跑台运动.取各组大鼠膝关节股骨内侧髁软骨及滑膜组织,HE染色观察其组织变化,免疫组化法检测IL-1β在大鼠滑膜中的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠关节液中IL-1β水平.结果高强度运动组大鼠膝关节出现关节软骨损伤和滑膜炎表现,关节液中IL-1β的表达高于安静对照组(P<0.05),滑膜组织中IL-1β的表达明显高于安静对照组(P<0.01).结论高强度运动导致的关节软骨损伤、滑膜炎症,以及关节液、滑膜中IL-1β的异常表达可能是创伤性关节炎发生的机制之一.     

运动干预对实验性高同型半胱氨酸血症大鼠过氧化及血管内皮功能的影响

目的:探讨运动干预对实验性高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)大鼠过氧化及血管内皮功能的影响。方法:将48只大鼠随机分为6组,每组各8只。对照组(n=8只)给予普通饲料喂养;高蛋氨酸组(n=40只)在此基础上加3%的蛋氨酸,再根据运动强度分为模型组、叶酸组、HHcy运动组(低强度组、中强度组、高强度组),8只/组,持续16周。检测各组大鼠血清同型半胱氨酸(Hcy)、血浆丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素1(ET-1)水平。结果:干预后8周,HHcy运动组血清Hcy水平明显下降,且显著低于模型组(16.09±4.85 vs.24.24±3.11μmol/L)(P0.05);干预后16周,HHcy运动组血清Hcy水平与对照组无显著性差异(7.81±0.64 vs.6.63±1.27μmol/L)(P0.05),各组血清Hcy水平依次为叶酸组(6.63±1.27μmol/L)低强度组(7.62±0.73μmol/L)中强度组(6.91±0.37μmol/L)高强度组(6.19±0.34μmol/L)(P0.05);干预后16周,HHcy运动组MDA均显著下降,SOD活力和GSH-PX含量明显升高(P0.05),中、高强度运动组各过氧化指标与对照组无显著性差异(P0.05);与对照组比较,干预后16周模型组、叶酸组和低强度组ET-1明显升高(61.64±12.29、58.86±10.32、59.11±9.09 vs 49.48±11.09pg/ml),NOS(8.52±2.09、18.13±4.65、17.08±4.20 vs 33.98±6.67U/ml)、NO(1.19±0.24、1.30±0.41、1.30±0.41 vs 2.29±0.28μg/L)明显下降(P0.05),而中强度组、高强度组中ET-1、NOS与对照组比较,差异无显著性意义(P0.05);HHcy运动组、叶酸组NO均明显高于模型组(P0.05)。结论:高蛋氨酸饮食可诱发大鼠HHcy,而中、高强度运动干预有助于降低HHcy大鼠血清Hcy水平,改善氧化应激状态,减轻内皮功能损伤。     

不同强度跑台运动对大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原纤维的影响

目的探讨不同强度跑台训练对大鼠膝关节软骨胶原纤维形态学及基因表达的影响。 方法采用随机数字表法将48只雄性SD成年大鼠分为对照组、低强度运动组、中强度运动组及高强度运动组。3个运动组大鼠分别进行低、中、高强度跑台运动。于实验进行8周后处死所有实验动物,取膝关节软骨标本行天狼星红-饱和苦味酸染色观察胶原纤维排列情况,采用免疫组化技术检测Ⅱ型胶原（Col2）含量;另外本研究同时采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测软骨biglycan（BGN）、fibromodulin（FMOD）及Ⅱ型胶原（Col2）mRNA表达。 结果对照组膝关节软骨胶原纤维排列规则;低、中强度运动组与对照组间无明显差异;而高强度运动组胶原排列不规则、细纤维数量增多;高强度运动组Ⅱ型胶原含量显著低于对照组。与对照组比较,低强度运动组软骨细胞Col2 mRNA表达明显增高,高强度运动组BGN mRNA表达明显增高。 结论低、中强度运动有助于维持关节软骨正常结构及功能;高强度运动能促使关节软骨Ⅱ型胶原纤维减少、排列紊乱,但软骨自我修复可能同时存在。     

少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤关节液IL-1β及软骨修复组织Ⅱ型胶原影响的实验研究

目的应用少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤进行干预,观察其对大鼠在体软骨损伤关节液中IL-1β水平及和修复组织中Ⅱ型胶原的影响。方法选用在相同条件下喂养的6～8周清洁级SD大鼠,制作成关节软骨损伤动物模型,按照组内均衡一致原则随机编为3组,即少阳生骨方组实验组（S组）、盐酸氨基葡萄糖胶囊组对照组（A组）和生理盐水空白对照组（K组）,每组9只。于造模完成后的第二天,开始灌胃药物,S组少阳生骨方灌胃,A组盐酸氨基葡萄糖胶囊灌胃,K组生理盐水灌胃。对比观察少阳生骨方及盐酸氨基葡萄糖胶囊对大鼠关节软骨损伤后不同时期（4周、8周、12周）关节液中IL-1β水平和修复组织中Ⅱ型胶原的影响。结果三组关节液中IL-1β水平检测,S组和A比较：第4、8、12周A组高于S组（P〈0．05）;第4、8、12周K组高于S组（P〈0．05）;第4、8、12周K组高于A组（P〈0．05）。治疗前后自身比较：S组第8周、第12周均低于第4周（P〈0．05）;A组第8周、第12周均低于第4周（P〈O．05）;K组第4周〉第8周〉第12周（P〈0．05）。组织学观察显示S、A组软骨缺损修复组织的数量及质量均优于K组,S组的修复效果强于A组。结论通过和解少阳的方法可显著降低关节液中导致软骨细胞损伤的炎性介质IL-1β水平,提高软骨损伤后修复组织中Ⅱ型胶原的表达,从而有助于软骨损伤的修复。     

软骨寡聚基质蛋白与Ⅱ型胶原螺旋肽及印度刺猬蛋白诊断膝关节骨性关节炎的价值

目的探讨关节滑液软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、Ⅱ型胶原螺旋肽(human typeⅡcollagen helical peptide,HELIX-Ⅱ)、印度刺猬蛋白(Indian hedgehog,IHH)在膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)诊断中的应用价值。方法 KOA患者120例为KOA组,同期体检健康者80例为对照组。采用ELISA法检测2组关节滑液中COMP、HELIX-Ⅱ及IHH表达水平,ROC曲线评估关节滑液COMP、HELIX-Ⅱ及IHH诊断KOA的效能。结果 KOA组关节滑液COMP[(65.34±28.75)μg/L]、HELIX-Ⅱ[(2.75±0.13)nmol/L]及IHH[(17.23±4.32)ng/L]水平均高于对照组[(36.10±9.12)μg/L、(0.81±0.67)nmol/L、(10.75±1.79)ng/L](P0.05);KOA组X线片K-L分级Ⅲ~Ⅳ级患者关节滑液COMP、HELIX-Ⅱ及IHH水平[(71.10±8.11)μg/L、(2.24±0.56)nmol/L、(21.51±3.03)ng/L]高于Ⅰ~Ⅱ级患者[(62.30±9.71)μg/L、(1.44±0.42)nmol/L、(16.33±4.39)ng/L]和0级患者[(57.60±6.73)μg/L、(0.49±0.40)nmol/L、(13.97±2.09)ng/L](P0.05),且Ⅰ~Ⅱ级患者高于0级患者(P0.05);ROC曲线结果显示,关节滑液COMP、HELIX-Ⅱ和IHH诊断KOA的最佳截断值为49.25μg/L、1.47nmol/L、13.80ng/L,AUC为0.918(95%CI:0.871~0.965,P0.001)、0.858(95%CI:0.793~0.924,P0.001)、0.780(95%CI:0.696~0.864,P0.001),准确率为89.0%、84.0%、75.0%,灵敏度为83.3%、76.8%、78.3%,特异度为81.6%、80.0%、64.4%。结论 KOA患者关节滑液中COMP、HELIX-Ⅱ和IHH水平增高,且与KOA病变程度相关,在KOA诊断中具有较高的应用价值。     

不同强度的主动运动对大鼠膝关节软骨的影响

目的:研究不同强度的主动运动对大鼠膝关节软骨的作用。方法:8周龄雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、低强度运动组、中强度运动组、高强度运动组。对照组自由活动,实验组每天按照不同的运动强度进行跑步训练。8周后处死大鼠,切取膝关节关节软骨,以苏木素伊红(HE)及甲苯胺蓝染色、透射电镜等观察不同强度的主动运动对关节软骨形态结构、细胞代谢的影响。结果:运动8周后,低、中强度运动组软骨表面完整,软骨层的厚度较对照组显著增厚(P<0.05);高强度运动组软骨表面部分缺损,表面粗糙,软骨层的厚度较对照组显著降低(P<0.05)。HE染色显示低、中强度运动组软骨负重区蛋白多糖分泌较对照组明显增加,而高强度运动组负重区蛋白多糖分泌较对照组明显减少。透射电镜显示:低、中强度组软骨表面可见明显的圆形突起,膜样胶原纤维连续,而高强度运动组软骨表面圆形突起减少,部分表层胶原纤维暴露。结论:不同强度的主动运动对大鼠膝关节软骨具有不同的作用。低、中强度的主动运动可以增加软骨表面厚度、明显改善关节软骨的代谢,尤以中等强度的作用更明显;高强度的主动运动可能对关节软骨产生破坏效应。     

血清阴性脊柱关节病患者血清软骨寡聚基质蛋白水平及意义的研究

目的探讨检测软骨寡聚基质蛋白（COMP）水平对血清阴性脊柱关节病（SPA）患者疾病活动性及早期软骨破坏的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法,检测40例SpA患者及40例正常人血清中COMP的水平。同时测定SpA患者的其他实验室及临床指标：类风湿因（RF）、血沉（ESR）、C-反应蛋白（CRP）、肿痛关节数、附着点压痛数、夜间背痛（h）、骶髂关节压痛、脊柱活动度（Schober试验）及骶髂关节的CT分级,分析它们与COMP的相关性。结果SpA患者血清COMP水平（11．459±3．091）U／L明显高于正常对照组（9．234±1．722）U／L,两组差异有统计学意义（P〈0．001）。28例SpA活动期患者血清COMP水平为（12．772±2．223）U／L,与12例不活动期患者[（9．450±2．211）U/L]比较差异有非常显著性意义（P〈0．001）。COMP水平与SpA患者的ESR、CRP、肿痛关节数、附着点压痛数、夜间背痛（h）、脊柱活动度及骶髂关节的CT分级,呈正相关（P〈0．05）,与年龄、病程、RF、骶髂关节压痛、无明显相关（P〉0．05）。结论SpA患者血清中COMP高水平存在提示SpA疾病活动性和早期关节软骨破坏。     

负重游泳运动对膝骨性关节炎大鼠关节软骨及血清超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的观察负重游泳运动对膝骨性关节炎大鼠关节软骨及血清超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的影响,探讨负重游泳运动防治膝骨性关节炎的机制。 方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组（20只）和模型组（30只）,模型组大鼠采用木瓜酶注射法制作膝骨性关节炎模型,造模成功后,在空白组和模型组中各抽取10只大鼠进行以下测定：①肉眼及光镜下观察大鼠膝关节软骨形态及病理学改变并评分;②免疫组化法观察大鼠膝关节软骨中的基质金属蛋白酶13（MMP-13）阳性细胞数量;③Elisa法测定大鼠血清中SOD和MDA的含量。将剩余的20只模型组大鼠随机分为负重游泳组（10只）和对照组（10只）。空白组剩余的10只大鼠和对照组的10只大鼠不予任何干预,负重游泳组的10只大鼠则接受6周的负重游泳运动,然后对这3组大鼠亦进行上述3项指标的测定。 结果（1）负重游泳训练前（干预前）,负重游泳组和对照组大鼠关节软骨面大体观分值［3.00（2.00,3.25）和3.00（2.00,3.25）］、关节软骨Mankin′s评分的分值［9.00(7.00,11.25)和9.00(7.00,11.25)］以及关节软骨中MMP-13细胞百分数［（36.40±3.22）%和（36.40±3.22）%］分别较空白组相应的分值［0.00（0.00,0.00）、0.00(0.00,0.25)和（1.90±0.53）%］明显增加,且组间差异均有统计学意义（P<0.05）。负重游泳训练后（干预后）,负重游泳组大鼠关节软骨面大体观分值［2.00(2.00,2.25)］、镜下观Mankin′s评分的分值［8.00(6.00,9.25)］及软骨中MMP-13阳性细胞数［(35.20±3.64)%］均较对照组［3.00(3.00,4.00)、11.00(8.50,13.25)、（47.70±4.06）%］明显减少（P<0.05）。（2）干预前,负重游泳组和对照组大鼠血清SOD含量均明显低于空白组（P<0.05）,而2组血清MDA含量均高于空白组（P<0.05）。干预后,负重游泳组大鼠血清SOD含量［(3.43±0.52)μg/ml］分别较组内干预前［（2.66±0.68）μg/ml］和对照组干预后［（2.44±0.76）μg/ml］有明显增加（P<0.05）;负重游泳组和对照组大鼠干预后的血清MDA含量［（1.95±0.65）和（1.97±0.64）μg/ml］均较组内干预前［（1.73±0.50）和（1.73±0.50）μg/ml］有所增加,但差异并无统计学意义（P&rt;0.05）,而2组大鼠干预后的血清MDA含量分别与空白组［（1.25±0.43）μg/ml］比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论负重游泳训练能够延缓膝骨性关节炎模型大鼠膝关节软骨细胞的进一步破坏,并能增加膝骨性关节炎模型大鼠血清SOD的含量。     

心理应激状态下中小负荷运动对大鼠体内β-内啡肽和白细胞介素1含量的影响

目的:分析心理应激状态下中小负荷运动大鼠体内β-内啡肽和白细胞介素1含量变化。方法:实验于2003-09/11在扬州大学体育学院动物实验室进行。选用健康雄性SD大鼠56只,随机均分为7组:①对照组:不给予任何刺激。②电击组:采用自制的电击笼对其电击。电流为1.0～2.0mA,电压30V,周期100s,间歇90s,每次电击持续30min,隔天1次,连续2周。③心理应激组:旁观电击组大鼠遭受电击的过程,通过视觉、听觉等产生心理应激。每次应激持续30min,隔天1次,连续2周。④30min运动组:第1周每天适应性游泳训练10min,然后每天无负重游泳1次,30min/次,共8周。⑤60min运动组:第1周每天适应性游泳训练30min,然后每天无负重游泳1次,60min/次,共8周。⑥心理应激 30min运动组。⑦心理应激 60min运动组。心理应激组大鼠末次应激24h后,其余各组大鼠在未次运动训练24h后取血和下丘脑以测定β-内啡肽和白细胞介素1含量。结果:①心理应激组血清白细胞介素1水平显著低于对照组[(0.317±0.104)μg/L,(0.520±0.150)μg/L]。下丘脑和血清中β-内啡肽的含量均明显高于对照组[(624.102±91.383)μg/g,(236.641±82.513)μg/g;(966.086±60.365)μg/L,(661.944±99.054)μg/L]。②心理应激 30min运动组和心理应激 60min运动组血清白细胞介素1的含量[(0.503±0.104)μg/L和(0.721±0.049)μg/L]均显著高于心理应激组,而下丘脑和血清中β-内啡肽的含量[(426.181±53.303)μg/g和(259.346±46.362)μg/g;(670.51±65.412)μg/L和(450.933±56.010)μg/L]显著低于心理应激组,其中以心理应激 60min运动组最为明显(P<0.01)。结论:在心理应激状态下中等负荷运动可明显抑制β-内啡肽含量升高,白细胞介素1含量下降。     

类风湿关节炎患者关节液血红素氧合酶-1水平的变化及临床意义

目的 检测类风湿关节炎(RA)患者关节液中血红素氧合酶-1(HO-1)水平,探讨HO-1在RA中的临床意义.方法 对50例RA患者(活动期24例,非活动期26例)及30名正常对照者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HO-1、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平和葡萄糖6-磷酸异构酶(GPI)在关节液中的含量.结果...     

长距离跑步大鼠膝关节滑膜基质金属蛋白酶的表达

背景：很多研究表明基质金属蛋白酶 1,3,9 和 13 对关节软骨的退变存在影响,但是针对关节滑膜进行的专项研究相对较少。目的：观察长距离跑步运动对基质金属蛋白酶 1,3, 9 以及基质金属蛋白酶 13 在滑膜上的表达的影响。方法：Wistar 雄性大鼠 15 只随机分为 3 组：对照组、平板组和上坡组。对照组普通笼养;平板组每天在平板0°的水平面跑步机上以 1 km/h,运动 1 h,持续 45 d;上坡组先在平板 0°跑步机上以 1 km/h,运动 1 h,持续 15 d,然后在上坡＋20°的跑步机上每天以 1 km/h,运动 1 h,持续 30 d。造成不同程度的膝关节滑膜损伤模型,造模成功后取双后肢膝关节,进行石蜡包埋,矢状面整体切片,而后进行苏木精-伊红和免疫组织化学染色,观察并分析实验结果。结果与结论：长距离跑步运动后,平板组和上坡组的滑膜组织中基质金属蛋白酶 1 的表达都比对照组增高（P 〈 0.05）,但平板组和上坡组之间差异无显著性意义（P 〉 0.05）;而 3 组基质金属蛋白酶 3 的表达并无明显变化（P 〉 0.05）;基质金属蛋白酶 9 和基质金属蛋白酶 13 在滑膜组织中的表达呈梯度递增状态（P 〈 0.05）,对照组表达最低,平板组有所升高,上坡组的表达最高。说明长距离跑步运动可通过改变基质金属蛋白酶的表达而影响大鼠膝关节滑膜组织的正常生理结构。     

低频脉冲超声干预膝骨关节炎模型免关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达

背景：研究表明,低频脉冲超声能促进全层关节软骨缺损修复,延缓实验性早期骨关节炎的病变进展。水通道蛋白3存在于关节软骨及滑膜上．并在骨天节炎的发病机制中发挥重要作用。目的：探讨低频脉冲超声对实验性膝骨关节炎兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达的影响。方法：成年新西兰兔左后膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周制备实验性兔膝关节骨关节炎模型,造模成功后随机分为两组：实验组予以低频脉冲超声治疗（频率为1MHz,功率为2.0w）,1次/d．15min/次：对照组不接受超声治疗。分别于治疗后2,4,8周,采用免疫组纵化学方法观察兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达。结果与结论：随着造模后时间的延长,各组兔芙节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达均有所增加;与对照组比较,实验组兔哭节软骨及滑膜水通道蛋白3表达明显降低（P〈0.01）。说明低频脉冲超声能降低实验性兔膝骨关节炎关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达,从而缓解关节肿胀,延缓软骨及滑膜的退变,具有软骨及滑膜保护作用。     

超声对类风湿性关节炎患者膝关节软组织病变及关节积液的诊断价值

目的探讨超声在诊断类风湿性关节炎(RA)患者膝关节软组织病变及关节积液的应用价值。方法 RA组患者57例,体检健康者57例为对照组,超声观测两组膝关节软组织病变及关节积液的情况。结果 RA组髌上囊液体深度(0.58±0.29)cm,滑膜厚度(0.41±0.32)cm,均大于对照组;股骨内、外侧髁软骨厚度为(0.76±0.25)mm和(1.12±0.23)mm,均小于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。RA组中髌上囊积液检出率为84.2%,高于对照组(8.7%);RA组滑膜内血流检出率为80.7%,亦高于对照组(3.5%),差异均有统计学意义(均P0.05)。结论超声对RA患者膝关节软组织病变及关节积液的诊断准确,具有无创、直观及重复性好等优点,值得推广。     

独活挥发油关节腔注射对实验性兔膝骨性关节炎的影响

目的探讨独活挥发油(VOOA)对骨性关节炎(OA)软骨病变的药理学学作用及其机制,为研制较为理想治疗骨性关节炎药物提供药理学实验参考。方法通过前交叉韧带切断(ACLT法)法建立实验性兔膝骨性关节炎(OA)模型,观察假手术组、溶剂对照组、OA模型组、挥发油实验组[(剂量1组、剂量2组、剂量3组),加入VOOA分别为0.01,0.03,0.06 ml/(kg·3 d)。]各组关节面的大体病理改变,酶联免疫分析试验法(ELISA)检测关节液白介素-1(IL-1)水平及关节积液生长转化因子水平(TGF-β)。结果与假手术组比较,模型组造成了实验性的骨性关节炎,出现软骨缺损甚至关节面溃疡,关节液IL-1水平升高,TGF-β降低,独活挥发油剂量1组缓解了软骨面损伤,减轻了炎性程度,TGF-β水平明显升高,剂量2组较剂量1组缓解骨关节炎损伤更为明显,但剂量3组却与模型组比较无显著差异。结论独活挥发油关节腔内注射可减轻兔膝骨性关节炎,抑制软骨细胞的破坏,对软骨组织具有明显的保护作用。但大剂量独活挥发油作为异物关节腔注射,刺激并加重了关节腔的炎症,小剂量的挥发油对实验性兔膝关节炎具有保护性作用。     

红花注射液关节腔冲洗结合钩针松解治疗膝关节骨性关节炎

目的：探讨运用红花注射液膝关节腔冲洗结合钩针松解治疗膝关节骨性关节炎的临床效果。方法：将78例膝关节骨性关节炎患者随机分为治疗组和对照组,各39例。对照组患者关节镜手术中灌注液采用临床普遍采用的生理盐水进行膝关节腔灌注冲洗,治疗组患者采用目前临床使用广泛的活血通络代表药物红花注射液灌注冲洗膝关节腔灌注并结合钩针松解膝关节周围软组织粘连。结果：治疗组治疗后平均积分（89.250±13.236）分,对照组治疗后平均积分（66.750±12.250）分,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,表明关节镜下红花注射液灌注冲洗治疗膝关节骨性关节炎疗效显著。结论：采用红花注射液膝关节腔冲洗改善微循环、缓解炎性改变、促进关节软骨及滑膜损伤组织的修复,并结合钩针松解膝关节周围软组织的粘连、调整膝关节力学平衡,以恢复膝关节功能活动,消除临床症状,该方法疗效显著,安全可靠。     

鹿茸多肽干预膝骨性关节炎软骨细胞的增殖

背景：软骨细胞体外培养实验证实,鹿茸多肽其具有显著的促细胞有丝分裂活性,可刺激软骨细胞的增殖。目的：观察鹿茸多肽对实验性骨性关节炎相关细胞因子的调节作用和对软骨细胞增殖的影响。方法：将新西兰大白兔随机分成正常组,假手术组和模型组。正常组不予任何处理,假手术组左膝关节内侧皮肤切开后缝合,模型组建立左膝骨性关节炎模型。模型组建模成功后再将随机分为2组,鹿茸多肽组给予鹿茸多肽针剂生理盐水稀释液关节腔注射干预,生理盐水组给予生理盐水关节腔注射作为对照,干预后第1,7,15,30天分别观察鹿茸多肽组和生理盐水组关节软骨形态学变化和软骨细胞结构变化;酶联免疫吸附法检测关节液中白细胞介素1β,肿瘤坏死因子α和转化生长因子β1的水平,免疫组织化学法检测关节软骨增殖细胞核抗原表达并计算细胞增殖指数。结果与结论：在相同时间段内,与生理盐水组相比,鹿茸多肽组关节软骨增殖细胞核抗原表达,细胞增殖指数及关节液中转化生长因子β1含量均增高（P〈0.05）,关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平明显降低（P〈0.05）。结果证实鹿茸多肽可降低实验性骨性关节炎过程中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平,提高转化生长因子β1水平,并可促进关节软骨细胞的增殖。     

血液和关节液内生物标记物水平对狗膝关节软骨早期运动性损伤的预测

背景:传统的影像学检查对关节软骨损伤检测的敏感性均偏低,应用检测体液内生物标记物水平对软骨损伤程度有待评估。目的:了解软骨寡聚基质蛋白(COMP)、金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、金属基质蛋白酶-3(MMP-3)、金属基质蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)作为生物标记物对于膝关节软骨早期运动性损伤评估的意义。设计:观察对比实验。单位:解放军第一五○中心医院。材料:选择18只成年雄性混血狗,体质量15～25kg,平均22.5kg,抽签法将杂交狗随机分为3组:①平地跑步组(n=8),跑步路线为平坦路线;②坡度跑步组(n=8),跑步路线为10°坡度;③对照组(n=2),实验动物自由活动。方法:对平地跑步组及坡度跑步组实验狗每日跑步训练,上下午各1h,速度为4m/s。跑步训练持续10周。分别对两组实验狗训练当日及第2,4,6,8,10周时抽取血液及关节液,应用ELISA方法检测COMP、MMP-1、MMP-3、TIMP-1浓度,根据标准品浓度与OD值建立标准曲线,查出待测样本相应浓度,在同一时间点对关节进行MRI检查(检查当天停训1d)。10周后处死所有实验狗,选择在股骨髁负重区对膝关节软骨采集标本并做组织学观察。主要观察指标:平地跑步组及坡度跑步组实验狗训练当日及第2,4,6,8,10周血清及关节液中COMP、MMP-1、MMP-3、TIMP-1浓度及膝关节MRI检查结果;10周后各组实验狗膝关节软骨组织学观察结果。结果:18只实验狗全部进入结果分析。①血清学检查结果:坡度跑步组实验狗血清MMP-1浓度在6,8周时明显高于平地跑步组(P<0.01),MMP-3浓度在8周时明显高于平地跑步组(P<0.01);血清MMP-3/TIMP-1比值在2周时低于平地跑步组(P<0.05),血清TIMP-1浓度在4周时低于平地跑步组(P<0.05),而6,8,10周高于平地跑步组(P<0.05-0.01),MMP-3/TIMP-1比值在2周时低于平地跑步组(P<0.05)。②关节液检查结果:在2,4,6,8,10周坡度跑步组关节液中COMP浓度明显高于平地跑步组(P<0.01),MMP-1浓度在2,4,6周时高于平地跑步组(P<0.05-0.01),MMP-3浓度在2,4,6,8周时高于平地跑步组(P<0.01);关节液中MMP-3/TIMP-1比值在2,4,8周时高于平地跑步组(P<0.05-0.01)。③血清COMP、MMP-1、MMP-3、TIMP-1浓度,MMP-3/TIMP-1比值与关节液相应指标间存在显著相关关系(r=0.631,0.502,0.748,0.651,0.667,P<0.01)。④各组实验狗膝关节软骨组织学观察结果:平地跑步组及坡度跑步组训练10周时膝关节软骨损伤病理改变明显,表层关节软骨细胞活性明显降低,坡度跑步组重于平地跑步组。⑤MRI检查结果:平地跑步组及坡度跑步组在训练2周后便开始有膝关节早期运动性损伤改变,并有进行性加重迹象。结论:长时间大强度重复、冲击性、扭转或剪切性的运动容易产生运动性损伤甚至骨性关节炎;生物标志物变化反映病变进程灵敏程度优于MRI检查。