二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞增殖和对G2/M期的阻滞作用

目的研究二烯丙基二硫(DADS)抑制人胃癌MGC803细胞增殖和对G2/M期的阻滞作用。方法采用MTT法测定DADS对MGC803细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测DADS对MGC803细胞周期的影响。结果30mg/L、60mg/L、90mg/L的DADS对MGC803细胞的抑制率分别为31.58%±2.20%、53.87%±4.50%、81.58±1.70%,随浓度增高呈上升趋势;对MGC803细胞周期的影响为G0/G1期细胞比率下降,G2/M期逐渐上升。结论DADS对人胃癌MGC803细胞增殖的抑制作用是通过G2/M期阻滞,抑制细胞分裂来完成的。     

Survivin基因沉默抑制胃癌MGC-803细胞增殖并增强其对塞来昔布的敏感性

目的研究Survivin基因沉默对人胃癌MGC-803细胞增殖和对化疗药物塞来昔布敏感性的影响。方法设计合成Survivin的siRNA序列,LipofectamineTM2000转染入MGC-803细胞。采用RT-PCR和Western blotting检测Survivin在干扰后mRNA和蛋白的表达情况,利用流式细胞仪检测细胞周期。通过MTT法和细胞克隆形成试验法察Survivin基因沉默后MGC-803细胞对塞来昔布的敏感性。结果 Survivin基因沉默48 h后,MGC-803细胞的Survivin基因和蛋白表达明显降低(P<0.05)。细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少(P<0.05)。Survivin基因沉默组细胞对塞来昔布的敏感性显著性增强(P<0.05)。结论 Survivin特异性siRNA能显著沉默MGC-803细胞Survivin基因,抑制细胞增殖,并增强MGC-803细胞对塞来昔布的敏感性。     

黄芪多糖抑制人胃癌MKN45、MGC-803细胞生长的作用机制

目的:探讨黄芪多糖抑制人胃癌细胞MKN45、MGC-803生长的作用机制。方法:将人胃癌细胞MKN45、MGC-803置于RPMI1640培养基中做传代培养,分为对照组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组和黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)组。对照组采用1640培养基培养,5-FU组给予不同质量浓度的5-FU培养,黄芪多糖组给予不同质量浓度的黄芪多糖培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验检测细胞生长抑制情况,使用流式细胞仪检测细胞周期,使用荧光显微镜观察细胞凋亡情况。结果:(1)培养24 h,APS质量浓度≥10.0 g·L~(-1)、5-FU质量浓度≥0.05 g·L~(-1)时,MKN45、MGC-803细胞受抑制作用均比较明显;培养48 h,APS质量浓度≥5.0 g·L~(-1)、5-FU质量浓度≥0.025 g·L~(-1)时,MKN45、MGC-803细胞受抑制作用均比较明显;(2)细胞培养48 h后,5-FU组和APS组MKN45、MGC-803细胞周期均改变,停留在G0/G1期的细胞比例显著高于对照组,处于S期和G2/M期细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P0.05);(3)培养48 h后,5-FU组和APS组MKN45、MGC-803细胞凋亡率均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:黄芪多糖可以抑制胃癌细胞MKN45、MGC-803的生长,其作用机制可能是使细胞停留在GO/G1期并诱导细胞发生凋亡。     

胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803的细胞周期分布及侵袭能力之比较研究

目的体外培养胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803,并比较两种细胞周期分布情况及侵袭能力。方法采用流式细胞术观察两株细胞的周期分布情况;采用涂有Matrigel胶的Transwell小室对胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803进行体外侵袭实验,通过检测穿过小室的相对细胞数量比较两株细胞的侵袭能力。结果SGC-7901在G0/G1期、S期、G2/M期的分布百分比分别为(63.74±3.40)%、(30.23±2.70)%、(6.03±0.70)%;MGC-803在G0/G1期、S期、G2/M期的分布百分比分别为(62.94±6.13)%、(28.67±7.76)%、(8.39±1.69)%,两胃癌细胞株对应的周期时相分布百分比差异无统计学意义(P>0.05);检测SGC-7901和MGC-803穿过涂抹有Matrigel胶的聚碳酸酯膜的细胞数分别为65.67±6.03和94.5±3.68,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MGC-803细胞的侵袭能力明显强于SGC-7901,而两株细胞在对应的周期时相分布情况则无明显差异。     

转录因子E2F-1过表达抑制胃癌细胞MGC-803的增殖

目的 了解E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖、生长和细胞周期的影响。方法 PCR扩增E2F-1基因片段;然后经限制性内切酶 EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后将E2F-1定向克隆到真核表达载体pCMV-HA2中转化筛选。用脂质体Lipofectamine2000将该载体转染MGC-803胃癌细胞,然后用含G418的培养基筛选获得具Genectin抗性的过表达E2F-1的胃癌细胞株。RT-PCR和Western blotting技术检测MGC-803/E2F-1细胞内E2F-1表达情况。对稳定转染E2F-1的胃癌MGC-803/E2F-1细胞(实验组)、转染空载体的MGC-803/EV(阴性对照组)及未转染的MGC-803细胞进行MTT法检测,绘制生长曲线和计算细胞增殖率;流式细胞仪检测各组细胞周期分布。结果 RT-PCR和Western blotting 实验证实重组载体pCMV-E2F-1-HA2成功转入胃癌细胞内,并稳定过表达E2F-1。MTT法检测发现,与MGC-803/EV细胞组和MGC-803细胞组相比,胃癌MGC-803/E2F-1细胞的生长受到明显抑制,增殖率下降(26.61±5.19)% vs （93.4±10.29）%、（100±0.00）%,均P <0.01);细胞周期分析显示MGC-803/E2F-1组的细胞在G0/G1期所占比例为70.63%,高于MGC-803/EV组（60.03%,P<0.01）和MGC-803细胞组（60.43%,P<0.01）;MGC-803/E2F-1组的细胞在S期所占比例为(11.27%),明显低于MGC-803/EV组（28.70%,P<0.01）和MGC-803细胞组（29.70,P<0.01）。结论 E2F-1基因过表达抑制胃癌细胞的增殖和生长,细胞周期停滞在G0/G1期。     

罗格列酮诱导裸小鼠胃癌移植瘤细胞分化

目的研究罗格列酮（ROS）对人胃低分化黏液癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤的诱导分化作用,初步探讨其可能机制。方法培养人胃癌MGC-803细胞,建立移植瘤模型,随机分为模型组、雏甲酸组、ROS25mg／kg组、ROS50mg／kg组和ROS100mg／kg组,用药后,观察移植瘤体积变化并计算抑瘤率;检测肿瘤细胞周期及胃粘蛋白（Mucin5AC）。结果ROS能缩小移植瘤体积,肿瘤细胞被阻滞于G0／G1期,S期细胞减少;Mucin5AC表达增强。结论ROS诱导胃癌裸小鼠移植瘤细胞分化,可能是通过抑制胃癌细胞从G1期向S期过渡,降低细胞的增殖能力实现的。     

沙樱桃脂类对人MGC-803细胞抑制作用的实验研究

目的 探讨沙樱桃脂类对人胃癌MGC-803细胞的毒性作用及其机制.方法 采用台盼蓝法检测细胞数、流式细胞仪检测细胞凋亡.将人MGC-803细胞分别与不同浓度的沙樱桃脂类(沙樱桃脂组)、5-FU(5-FU组)及PBS溶液(对照组)共同培养,观察沙樱桃脂类对人胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用.结果 对人MGC-803细胞分别给予0.5、1.0、3.0 mg/L沙樱桃脂类及10 mg/L 5-FU,培养6h、12h、18 h、24h和48 h,活细胞数随沙樱桃脂类浓度的增加和作用时间的延长而减少,与5-FU组相似(P＞0.05),而与对照组比,差异有统计学意义(P＜0.01);分析存活细胞率,表明人MGC-803细胞增殖被阻滞于G0G1期.在给予沙樱桃脂类0.5、1.0、3.0 mg/L和5-FU培养48 h后,人MGC-803细胞的凋亡率分别为13.8％、19.6％、26.2％和21.1％.结论 沙樱桃脂类对人胃癌MGC-803细胞具有显著毒性作用,其机制可能与沙樱桃脂类可抑制MGC-803细胞分裂,并诱导其凋亡有关.     

阿霉素前体药Ac-Phe-Lys-PABC-ADM通过ERK1/2途径促进胃癌细胞死亡

目的:研究阿霉素前体药(PADM)对人胃癌细胞系MGC-803生长以及ERK1/2信号通路的影响。方法:培养MGC-803人胃癌细胞系,检测组织蛋白酶B的表达、PADM及阿霉素(ADM)对细胞生长的抑制作用、p-ERK1/2、ERK1/2和β-actin的表达,以及细胞周期。结果:MGC-803细胞系中组织蛋白酶B表达丰富;PADM和ADM对细胞生长呈剂量依赖性抑制作用;处理48 h时,PADM的半数抑制浓度(IC50)为14.9μmol/L,是ADM(IC50=4.9μmol/L)的3.04倍。与ADM相比,PADM显著下调p-ERK1/2水平,并使细胞周期停滞在G2/S期。结论:PADM可通过ERK1/2途径诱导细胞死亡。PADM与ADM抗肿瘤机制可能不同。     

抗癌活性肽对人肿瘤细胞株增殖的影响及其机理探讨

目的:探讨由山羊内脏提取制备的抗癌活性肽(Anti -cancer active peptide,ACBP)对人胃癌细胞株BGC - 823、MGC - 803、人鼻咽癌细胞株CNE增殖的影响及作用机理.方法:应用MTT法和流式细胞术观察不同剂量ACBP在不同时间对体外培养的BGC - 823、MGC - 803及CNE细胞增殖的影响,并对细胞周期及凋亡进行了检测.结果:MTT结果显示ACBP对BGC - 823、MGC - 803及CNE的增殖有抑制作用且呈现剂量依赖效应,在ACBP 20ug/mL时,对三种细胞株的抑制率分别达到38.3％、29.79％和42.02％ (P ＜0.01)).流式细胞术检测细胞周期结果显示,3种对照组细胞大部分处于G0/G1期和S期,培养24h后,S期细胞数开始减少,G0/G1期细胞数增加,48h和72h后呈现显著性变化(P＜0.01).流式细胞术检测细胞凋亡结果显示ACBP作用早期,凋亡细胞(AV+/PI -)增多,在48h和72h后更加明显.结论:ACBP对分化不同的胃癌细胞BGC - 823、MGC - 803及鼻咽癌CNE细胞的增殖有抑制作用,其作用机制可能为诱导细胞凋亡,抑制DNA合成.     

沉默β-catenin表达对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响与作用机制研究

目的探讨β-链蛋白（β-catenin）表达下调对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响,并分析其作用机制。方法将RNA干扰慢病毒（β-catenin-RNAi慢病毒）及空载体慢病毒（β-catenin-Neg）分别感染MGC-803细胞,分为实验组（MGC-803-RNAi细胞）、阴性对照组（MGC-803-Neg细胞）、空白对照组（未处理的MGC-803细胞）。Westernblot检测验证转染效率;双染流式细胞术检测细胞凋亡率,单染流失细胞术分析细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力;Westernblot检测细胞Bax、Bcl-2、cyclinD1及基质金属蛋白酶（MMP）-7蛋白表达水平。结果MGC-803-RNAi、MGC-803-Neg细胞中显示绿色荧光的细胞约占80%,MGC-803细胞不显示荧光;与MGC-803-Neg、MGC-803细胞相比,MGC-803-RNAi细胞β-catenin表达水平明显下调(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),出现G1/S期阻滞现象(P＜0.05),侵袭能力明显减弱(P＜0.05),Bcl-2、cyclinD1及MMP-7蛋白表达水平下调(均P＜0.05）,而Bax蛋白表达水平上调(P＜0.05)。结论沉默β-catenin表达可促进胃癌MGC-803细胞凋亡,阻滞其细胞周期进程,减弱其侵袭转移力,其作用机制可能与影响Wnt/β-catenin信号通路下游靶蛋白表达有关。     

金花茶水提取物对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响

目的:研究金花茶水提取物不同浓度、不同时间对人胃癌MGC-803细胞株增殖的影响。方法：用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液体外培养人胃癌MGC-803细胞,绘制细胞生长曲线并计算人胃癌MGC-803细胞群体倍增时间;采用噻唑蓝比色法（MTT）检测不同浓度的金花茶水提取物作用不同时间对人胃癌MGC-803细胞的增殖抑制作用,计算细胞增殖抑制率及金花茶水提取物半数抑制浓度（IC50）,并通过统计分析,确认金花茶水提取物作用的最佳时间。结果：不同浓度金花茶水提取物对MGC-803细胞的增殖均有抑制作用,并且与剂量呈量效关系。24,48,72 h的IC50分别为（912.33±12.70）,（789.67±10.69）,（746.00±6.08）mg/L。结论：金花茶水提取物对人胃癌MGC-803细胞的增殖有抑制作用,抑制率与浓度呈量效关系,金花茶水提取物作用的最佳时间为48 h。     

稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株的建立

目的 建立稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株。方法 使用阳离子脂质体分别将真核表达载体pCMV-Cdx2-HA或空载体pCMV-HA转染至人胃癌细胞MGC-803中,G418筛选出阳性克隆后扩大培养。RT-PCR和Western Blot技术检测各组胃癌细胞中Cdx2基因mRNA和蛋白的表达情况,将挑选出的稳定株命名为MGC-803/Cdx2细胞（转染组）和MGC-803/EV细胞（空载体组）;流式细胞仪检测MGC-803细胞（未转染组）、MGC-803/EV细胞和MGC-803/Cdx2细胞的细胞周期和凋亡情况。结果 成功筛选出稳定过表达Cdx2基因的MGC-803胃癌细胞,即MGC-803/Cdx2细胞;与MGC-803细胞和MGC-803/EV细胞比较,MGC-803/Cdx2细胞中Cdx2基因mRNA和蛋白的表达明显增加（P<0.05）,而且细胞周期G0/G1期比例和凋亡率也明显增加（P<0.05）。结论 成功构建了稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株,而且Cdx2过表达使细胞周期停滞、凋亡增加。     

紫杉醇对人胃癌MGC803细胞形态和增殖的影响

目的 研究紫杉醇对人胃癌MGC803细胞的细胞形态的影响和相关增殖因素的变化.方法 采用MTT法测定药物敏感性;光镜、电镜、MTT法活细胞计数、流式细胞仪等方法观察其生物学特征的改变.结果 0.1mg/mL、0.2mg/mL紫杉醇可以抑制MGC803细胞于S期,紫杉醇能抑制MGC803细胞生长增殖,并且呈浓度依赖性.结论 0.1mg/mL、0.2mg/mL紫杉醇能明显地抑制MGC803细胞的增殖.     

端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸对MGC-803胃癌细胞的影响

目的探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxy nucleotides,ASODN)对MGC-803胃癌细胞端粒酶活性及细胞生长的影响。方法将实验分为正常对照组、端粒酶正义寡聚脱氧核苷酸(sense oligodeoxy nucleotides,SODN)组和不同剂量的ASODN组;脂质体介导的ASODN和SODN作用于MGC-803细胞后,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附法(ELISA)、吖啶橙染色法、流式细胞术检测细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞形态、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果转染48h后,终浓度为1、3及5μmol/L的ASODN对MGC-803细胞端粒酶活性及细胞的增殖均有抑制作用,与正常对照组比较差异显著(P<0.01),并呈一定剂量依赖性;流式细胞仪检测到凋亡峰,细胞被阻滞在G1/S期;吖啶橙染色后光镜下观察发现有典型的凋亡小体。结论以端粒酶RNA模板区为靶点的ASODN明显抑制MGC-803胃癌细胞的增殖,其机制可能是通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞的凋亡,ASODN对胃癌的治疗具有重要价值。     

染料木素对人胃癌MGC-803细胞增殖及PKA活性的影响

目的 本文通过研究染料木素（Gen）对体外培养MGC-803细胞增殖以及PKA活性的影响,探讨Gen抑制MGC-803细胞系增殖的分子机制.方法 光镜下观察经Gen处理后人胃癌MGC-803细胞形态学改变;应用MTT法检测Gen对体外培养的人胃癌MGC-803细胞增殖影响;PepTag法检测Gen对MGC-803细胞PKA活性的调节.结果 与空白对照组比较,经Gen处理后MGC-803细胞外形呈不规则状、细胞间隙增大、折光性差;MTT实验发现Gen能够抑制体外培养的MGC-803细胞增殖,并且抑制作用呈现时间及浓度依赖性;浓度为40 μg/mL的Gen可以显著上调MGC-803细胞的PKA活性（P＜0.01）.结论 Gen对人胃癌细胞系MGC-803细胞的增殖有抑制作用,上调PKA活性可能是Gen抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的机制之一.     

中介体复合物亚基8在胃癌中的表达及其对临床预后和细胞周期的影响

目的 探讨中介体复合物亚基8(MED8)在胃癌中的表达及其与预后的关系和对细胞周期的影响。方法 采用公共数据库分析MED8在胃癌及癌旁组织的表达及其与患者预后的关系，并纳入2012年6月至2017年7月于蚌埠医学院第一附属医院行胃癌根治术的104例患者进行验证。采用受试者工作特征曲线评估MED8对患者术后5年生存率的预测价值；采用生物信息学方法预测MED8在胃癌中的生物学功能；采用慢病毒转染调控胃癌细胞系(MGC-803)中MED8的水平，流式细胞学分析MED8表达水平对MGC-803细胞G1/S期转换的影响。免疫印迹实验检测MED8表达水平对MGC-803细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶4(Cdk4)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)蛋白表达的影响。结果 MED8在胃癌组织中高表达与患者不良预后相关(P<0.001),且具有良好的预后预测价值(曲线下面积=0.733,P<0.001);基因富集分析提示MED8可能参与细胞周期进程。流式细胞实验表明上调MED8表达可促进MGC-803细胞从G1期进入S期(P<0.001),下调MED8则相反(P<0...     

姜黄素对胃癌MGC-803细胞株增殖及其核因子κB表达的影响

目的 探讨姜黄素对人胃低分化腺癌MGC-803细胞株增殖及细胞中核因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响.方法 将培养的MGC-803细胞分为对照组(A组)、5 μmol/L姜黄素作用组(B组)、10 μmol/L姜黄素作用组(C组)和20 μmol/L姜黄素作用组(D组),分别干预24、48、72 h,用cell counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖抑制情况,用免疫蛋白印迹(Western blot)法检测各组作用24 h后细胞中NF-κB表达情况.结果 作用24、48、72 h,不同浓度的姜黄素对胃癌细胞MGC-803的增殖有抑制作用,且随姜黄素浓度的增加和作用时间的延长,增殖抑制率逐渐增加.Western blot法检测显示,作用24 h后A、B、C、D组MGC-803中NF-κB蛋白表达量分别为(0.889±0.019)、(0.640±0.019)、(0.503±0.014)和(0.349±0.022),随着作用浓度的增加,NF-κB表达量逐渐降低,组间差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 姜黄素能够抑制胃癌细胞MGC-803增殖,且随着姜黄素浓度的增加和作用时间的延长,细胞增殖抑制率逐渐增加;胃癌细胞MGC-803存在NF-κB的表达;姜黄素通过下调NF-κB的表达从而对胃癌细胞MGC-803的增殖起到抑制作用.     

苦参素对人胃癌细胞系MGC-803增殖的抑制作用

目的:观察苦参素对人胃癌细胞系MGC-803的增殖抑制作用.方法:人胃癌细胞系MGC-803接种培养24 h后,实验组分别加入不同浓度苦参素(0.25 g/L、0.5 g/L、1g/L、2g/L、4 g/L),阳性对照组与阴性对照组分别加入氟尿嘧啶(2g/L)和培养液,继续培养12 h,24 h,36 h,48 h,采用MTT法测定苦参素对MGC-803细胞的增殖抑制情况.判定苦参素的剂量与MGC-803细胞增殖活性间的关系,计算细胞抑制率和群体倍增时间.结果:苦参素在0.25～4 g/L范围内,对MGC-803细胞的增殖活性具有抑制作用,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.001),且该作用随剂量增加而增加.与阴性对照组比较,阳性对照组和实验组细胞群体倍增时间增加.结论:苦参素对人胃癌细胞系MGC-803有明显的增殖抑制作用,且具有时间、剂量效应关系.     

树舌多糖对胃癌MGC-803细胞PTK活性的影响

目的研究树舌多糖（Ganoderma applanatum polysaccharides,GAPS）对MGC-803细胞增殖和PTK活性的影响,探讨树舌多糖抗肿瘤作用机制。方法 MTT法检测树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增殖抑制作用;流式细胞术检测PTK活性。结果树舌多糖对胃癌MGC-803细胞具有增殖抑制作用,且呈时间及浓度依赖性。树舌多糖能下调PTK活性,与细胞对照组比较有差异（P〈0.05）。结论树舌多糖能抑制胃癌MGC-803细胞的增殖,下调PTK活性。     

雪灵芝水提取物对人胃腺癌MGC-803细胞Bcl-2，Bax基因表达的影响

目的研究雪灵芝水提取物对人胃腺癌MGC-803细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法不同浓度的雪灵芝水提取物处理体外培养的MGC-803细胞,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MYr）法检测细胞存活水平;应用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡水平;采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白印迹法（Western Blot）测定人胃腺癌MGC-803细胞的Bcl-2和Bax基因表达情况。结果雪灵芝水提取物作用于人胃腺癌MGC～803细胞后,0．1～0．8mg／mL浓度组细胞存活水平随药物浓度的增大而减小（P〈0．05）;0．8mg／mL浓度组MGC-803细胞G．期比例为（61．23±6．45）％、S期细胞比例为（26．86±3．38）％、细胞凋亡率为（0．07±0,01）％,与对照组相比,P〈0．05;与对照组相比,0．8mg／mL浓度组Bcl-2 mRNA表达降低、Bax mRNA表达增加（P〈0．05）;0．2～0．8mg／mL浓度组Bcl-2蛋白表达降低、Bax蛋白表达增加。结论雪灵芝水提取物在一定浓度范围内可降低MGC-803细胞的存活水平,使细胞发生凋亡,其机制可能为通过下调Bcl-2基因、上调Bax基因表达,促进细胞凋亡发生。