三角帆蚌软组织中镉的含量测定及评价

目的对饲养的三角帆蚌软体组织中的镉含量进行测定和分析。方法采用氢化物原子荧光光谱法(AFS)测定三角帆蚌软体组织中的镉含量。结果三角帆蚌体内重金属镉含量为2.150μg.kg-1,RSD为1.70%。结论本实验所检测的三角帆蚌中的金属镉含量低于国际标准,符合食用要求。     

广霍香道地性的RAPD研究

目的：利用RAPD技术研究广藿香的道地性，为广藿香的道地鉴别和引种栽培的质量控制提供一种新方法。方法：利用随机引物扩增多态性DNA（RAPD）、琼脂糖电泳等技术显示不同产地广藿香基因组的多态性。结果：有3条随机引物（S358、S359、S443）能得到广藿香的RAPD图谱，其中S358能显示出不同产地广藿香基因组微小的差异。结论：随机引物S358能鉴别不同产地的广藿香。     

鱼腥草种质资源的RAPD分析

目的分析鱼腥草种质资源在分子水平上的遗传多样性。方法应用RAPD技术对92份鱼腥草种质资源进行检测。结果34个随机引物中有32个引物(94.1%)扩增产物具多态性。34个引物共得到200条扩增DNA片段,其中93.5%的片段具多态性。每个多态性引物平均可扩增出5.8个多态性片段。峨眉蕺菜和蕺菜种内平均遗传相似系数(genetic similarity,GS)分别为0.521和0.572,二者种间GS值为0.517。峨眉蕺菜与蕺菜中染色体数目为36的细胞型间相似程度最高,其平均GS值达0.530。栽培蕺菜类群比其野生类群遗传多样性相对较高。聚类分析表明,利用RAPD技术可将全部供试材料区分开,所有材料共划分为14类。其中,绝大多数(62个)聚为一类,且根据RAPD遗传相似系数划分的类群同地理分布有一定关系。结论(1) 鱼腥草种质资源在分子水平上确实存在较大遗传差异。(2) RAPD标记可作为构建鱼腥草DNA指纹图谱的有效工具。(3) 鱼腥草药材道地性与环境因素有关,但更大程度上由其遗传因素所决定。     

铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与鉴别

目的采用RAPD分子标记技术，对铁皮石斛8个野生居群的遗传多样性、亲缘关系以及分子鉴别等进行研究。方法筛选随机引物进行RAPD分析，通过UPGMA聚类，研究铁皮石斛各居群间的遗传关系，构建居群亲缘关系的分子系统树；利用特异性条带对铁皮石斛野生居群进行指纹分析鉴别。结果共筛选出10个有效引物，在8个野生居群材料的RAPD扩增中共得到439个位点，平均每个引物扩增出43.9个位点，每个居群扩增出54.9个位点；在所获得的104条可重现谱带中，9条是单态的，95条是多态的，多态性程度达91.35%，遗传距离在0.590～0.727之间，平均为0.686。结论铁皮石斛居群间遗传差异明显，具有较丰富的遗传多样性；RAPD可以作为铁皮石斛野生居群遗传多态性、居群亲缘关系和分子鉴别研究的有效手段；引物S412可以有效鉴别铁皮石斛的8个野生居群。     

甘肃产秦艽的DNA指纹图谱鉴别

目的 对产于我国甘肃省的中药秦艽的3种基源植物秦艽、麻花秦艽与小秦艽进行RAPD分析,建立具有鉴别意义的DNA指纹图谱.方法 采用RAPD分子标记对秦艽的基因组DNA进行PCR扩增,利用NTSYSpc 2.1和Popgene 3.2软件分析3种秦艽间的亲缘关系,构建树系图.结果 从80条RAPD引物中筛选出4条具有鉴别意义的多态性引物,在3种秦艽中共得到39个DNA条带,其中共有条带2条,多态条带37条.据此获得了能有效区别3种秦艽的多态性RAPD指纹谱.结论 甘肃产秦艽的3种基源植物遗传分化明显,RAPD方法能有效地将它们区分鉴别.     

23株灵芝栽培菌种的DNA指纹鉴别

目的收集23株灵芝栽培菌种为材料,从DNA水平上探讨不同产地的灵芝菌种的差异。方法从247个随机引物中筛选出县有较高多态性扩增检测能力的引物9条,对23株灵芝菌种进行RAPD分析。结果以其中的两条随机引物S17和S1005进行扩增分析可以有效鉴别大部分灵芝栽培菌种,作为分子标记。     

内蒙古产丹参的随机扩增多态性DNA研究

目的 用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)技术对内蒙古产丹参进行多态性分析. 方法 通过CTAB 法提取内蒙古产丹参干品DNA,用10个条随机引物进行RAPD分析. 结果 有2个随机引物扩增出了清晰的多态性图谱. 结论 该RAPD体系可用于评价内蒙古产丹参的质量.     

RAPD标记在药用菊花种质鉴定中的应用

目的：探讨药用菊花类型间的遗传关系,为药用菊花资源合理保护利用和新品种选育提供理论依据,也为药用菊花DNA指纹图谱的构建奠定基础。方法：利用改良SDS方法提取药用菊花的基因组DNA,以RAPD分子标记技术,对6种药用菊花进行了遗传多样性和亲缘关系分析。结果：从8个随机引物中筛选出多态性频率高的2个引物。2个引物共扩增出17个DNA条带,其中多态性条带16个,多态性达94%,显示菊花品种内丰富的遗传多样性。扩增的多态性片段在300~1300bp之间。结论：聚类分析结果表明,利用RAPD标记可将全部供试材料区分开,得出了药用菊花种质资源在分子水平上确实存在较大差异。     

不同产地白及遗传多态性的RAPD分析

目的 研究国内不同产地白及的遗传多样性和亲缘关系。方法 利用随机扩增多态DNA （random amplified polymorphic DNA,RAPD）引物,RAPD分子标记技术分析国内50个不同产地的白及。结果 RAPD技术扩增产物经琼脂凝胶电泳检测,从50条引物中筛选出10条（S8,S9,S14,S19,S23,S25,S28,S29,S30,S31）条带清晰的引物,10条引物共扩增出88条DNA条带,其中多态性的DNA条带数目为81条,占总数的92.05%。每个引物能扩增出5~11条DNA条带,平均可扩增出8.8条;扩增最少的引物为S19,扩增出5条DNA条带;扩增最多的引物为S29,扩增出11条DNA条带。而每个引物能扩增的多态性DNA条带数为3~11条,平均可扩增出8.6条。结论 不同产地的白及具有较丰富的遗传多样性,RAPD可有效应用于白及的遗传多样性研究。     

野生天麻和栽培天麻的DNA指纹图谱分析

目的对野生天麻和三种人工栽培天麻进行DNA指纹图谱的鉴别研究,了解其间遗传变异的大小,并建议天麻品种的检定方法.方法采用RAPD技术.结果从45个引物中筛选出23个扩增稳定且谱带清晰的引物,共得到209个遗传标记.DNA指纹图谱显示,各样品间有遗传差异,具有不同的遗传特征,据此可进行鉴别.结论RAPD技术可作为天麻鉴别的参考方法.     

广西产鸡血藤遗传多样性的RAPD与ISSR标记方法的比较研究

目的:比较随机扩增多态性DNA分子标记技术(RAPD)和简单重复序列间区扩增技术(ISSR)两种标记方法,研究广西不同居群鸡血藤遗传多样性的优劣。方法:分别采用RAPD和ISSR标记方法,利用POPGENE 32软件、Ntsys软件、SPSS 17.0软件,对广西不同采集地的9份鸡血藤的遗传多样性进行研究。结果:筛选出的3条RAPD引物及4条ISSR引物扩增后,共得到198和315个位点,多态性位点37和80个,多态性位点比率为18.7%和25.4%,有效等位基因数为1.416 8、1.584 0,基因多样性指数为0.269 4、0.351 3,Shannon多样性指数为0.431 6、0.529 9。ISSR标记均高于RAPD标记,RAPD和ISSR的平均遗传相似系数为0.757 64、0.683 80,表明ISSR检测遗传多样性更灵敏。二者的聚类结果相近,相关系数r为0.847,说明其在0.001水平呈极显著正相关。结论:ISSR标记方法比RAPD标记反映出更多的遗传多样性信息,更适合于广西产不同居群鸡血藤的遗传多样性研究。     

RAPD分子标记对药用植物大花红景天濒危原因分析

目的:利用RAPD分子标记技术研究大花红景天的遗传多样性,分析其濒危的可能原因.方法:利用改良的CTAB法提取各产地大花红景天的总DNA,以40条随机引物随机扩增,利用RAPDdistance1.04软件计算多态位点百分率以及遗传距离,并进行聚类分析.结果:大花红景天表现出较为丰富的遗传多样性,加条随机引物筛选出能扩增出清晰稳定条带的12条随机引物.12条随机引物共扩增出99条DNA条带,其中79条表现出多态性,占总带数的79.8%.各产地大花红景天的遗传距离在0.4784-0.7774之间.通过聚类分析可将5个产地的大花红景天分为2个类群.结论:多态位点百分率表明大花红景天具有丰富的遗传多样性,其濒危的可能原因是由于人类无规则且盲目的采挖造成的.     

随机扩增多态性DNA技术分型大肠埃希菌

目的：对大肠埃希菌(E．coli)进行随机扩增多态性DNA(RAPD)法基因分型并应用于医院感染的判断。方法：以优化的随机引物、反应体系和扩增条件对临床分离的161株E．coli进行RAPD法基因分型并按指纹图上DNA条带数及片段大小绘制基因分型图谱。同时对E．coli的医院内感染进行了观察与分析。结果：161株临床分离E．coli共得RAPD型120种；E．coli的医院内感染确实存在。结论：RAPD法可将E．coli分型120种并有效应用于E．coli医院内感染的判断。     

霍山地区4种石斛属植物的遗传多态性分析

利用AP-PCR方法对4种霍山来源的石斛属植物基因组DNA进行了多态性分析，从75种随机引物中筛选出10种扩增条带清晰、稳定的随机引物，通过PCR扩增共获得250条DNA片段，其中呈多态性的片段数为165条，占扩增条带数的66％，显示了霍山来源的石斛植物具有较高的遗传多态性；利用NT-syspc分析软件对不同石斛品种间的平均遗传距离进行了分析，并利用UPGMA聚类分析方法构建它们的亲缘关系聚类图，结果表明4种霍山来源的石斛品种具有较近的亲缘关系，它们之间的平均遗传相似系数为0．63，其中铁皮石斛和铜皮石斛的亲缘关系最近，两者间的遗传相似系数为0．78，它们与串珠石斛的遗传相似系数分别为0．6和0．61，与霍山石斛的遗传相似系数分别为0．63和0．58；但是，相对于形态接近的铜皮石斛，铁皮石斛与霍山石斛的亲缘关系更近。     

湖北贝母与川贝母随机扩增引物DNA的鉴别

目的 为鉴定湖北贝母，准确区分湖北贝母和暗紫贝母（正品贝母）寻找一种新的鉴别手段。方法采用随机扩增引物DNA（RAPD）法，筛选适于鉴别湖北贝母、暗紫贝母的随机引物。 结果 总共筛选了20条随机引物，得到一条引物S1能准确区分湖北贝母、暗紫贝母，并且其特异性非常高。结论 可利用随机引物S1通过RAPD进行DNA指纹图谱研究准确区分湖北贝母、暗紫贝母。     

大肠艾希菌的随机扩增多态性DNA基因分型及应用

目的对大肠艾希菌(E.coli)进行随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型并应用于医院感染的判断。方法以优化的随机引物、反应体系和扩增条件对临床分离的161株E﹒coli进行RAPD基因分型并按指纹图上DNA条带数及片段大小绘制基因分型图谱,同时对E.coli的医院内感染及个体感染的连续性进行了观察与分析。结果161株临床分离E.coli共得RAPD120型;E.coli的医院内感染确实存在。结论RAPD可将E.coli分为120型并有效应用于E.coli医院内感染的判断。     

冬虫夏草特异性PCR鉴定方法研究

目的建立一种准确、简便的方法鉴别冬虫夏草真伪。方法采用改良CTAB法从冬虫夏草样品中提取总DNA,根据r DNA中ITS1区序列设计一对特异性引物,对虫草样品进行特异性扩增。结果冬虫夏草标准品和部分市售虫草样品能扩增出255bp大小的目的片段,其余虫草样品未能扩增出相应条带。结论改良CTAB法提取DNA所需时间短对DNA分子破坏性小。特异PCR鉴别冬虫夏草真伪的方法准确快捷,对珍贵药材的甄别具有广阔的前景。     

青阳参及其近缘种的RAPD研究

目的 针对青阳参Cynanchum otophyllum Schneid.存在混淆种类和种内变异较大的情况,对青阳参和与其相混淆的隔山消C．wilfordii (Maxim.) Hemsl.和昆明杯冠藤C. wallichii Wight进行种间鉴别,并对青阳参的4个居群进行遗传多样性分析。方法 运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术进行分析,用Shannon指数和Nei指数评价青阳参的遗传多样性,用UPGMA类平均法进行聚类分析亲缘关系。结果 利用筛选出的10个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到72条带,其中多态性带有70条,多态性百分率为97.22%。由Shannon指数计算青阳参4个居群内的遗传多样性比率为68.52％,高于居群间的31.48%;同时由Nei指数估计青阳参4个居群中有69.44％的遗传变异来自居群内,高于居群间的30.56％。采用UPGMA聚类法得出反映各种间亲缘关系的树状图。结论 运用RAPD方法可以进行青阳参和隔山消两个种同昆明杯冠藤的种间鉴别;虽然居群间已有较高分化,但青阳参遗传变异主要分布在居群内。     

不同居群白芍的DNA随机扩增多态性研究

目的分析6个不同居群白芍的遗传多样性,为白芍的种质鉴定及遗传多样性分析提供依据。方法运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对浙江磐安、四川中江、安徽亳州、上海崇明、江苏宿迁和山东荷泽居群白芍的基因组DNA进行随机扩增,利用NTsys2.10e软件计算遗传相似性,运用UPGMA法进行聚类分析并构建树状图。结果共筛选了70个随机引物,从中挑选出8条多态性强、重复性好的引物,共检测出215个位点,多态性位点137个,多态位点比率为63.7%,UPGMA聚类可以将不同来源的白芍很好地区分开。结论不同产地间的白芍存在丰富的遗传多样性,RAPD分子标记方法可以用来鉴定不同产地的白芍。     

金钱白花蛇及其伪品的DNA分子诊断鉴别

为建立金钱白花蛇品种的DNA分子标记鉴定方法,本文通过提取金钱白花蛇及其伪品药材和原动物样品的模板DNA,用通用引物扩增样品的Cyt b基因片断。PCR扩增所得产物纯化后直接测序,所得序列经对位排列和比较金钱白花蛇及其伪品的DNA序列,发现Cyt b基因片段的种间差异显著大于种内个体间变异,因此该基因片段是蛇类药材鉴定中一个很好的分子标记。基于所得DNA序列数据,设计了一对高度特异性的鉴别引物用于金钱白花蛇的PCR鉴定。用该对引物对金钱白花蛇进行PCR鉴定。在60℃－65℃的复性温度条件下,样品的误检和漏检率为0,能100％地正确区分出正品与伪品药材,此外该方法还能检测出混合粉末中是否含有正品金钱白花蛇成分。研究结果表明用本鉴定引物对金钱白花蛇的PCR鉴定方法简便、有效,实用性强,该方法还有可能成为中成药复方组分鉴别的一种新手段。