心脏干细胞移植电生理效应及其致心律失常机制

干细胞是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,根据来源分为胚胎干细胞(embryonic stemcell,ESC)和成体干细胞(somatic stemcell)。胚胎干细胞具有无限的自我更新能力,能够定向分化为各种细胞,但其移植存在伦理问题且有癌变可能;成体干细胞能够跨胚层分化,易于反复     

大鼠诱导性多能干细胞向神经前体细胞诱导分化研究

目的探讨大鼠来源的诱导性多能干细胞(iPS细胞)向神经前体细胞(NPC)定向诱导分化的方法。方法在大鼠iPS细胞培养到悬浮类胚体阶段加入维甲酸(RA)诱导分化,对分化获得的细胞,分别通过免疫荧光染色和实时定量PCR方法检测NPC标志物、用BrdU免疫荧光染色检测其增殖能力、并通过大鼠视网膜下腔移植对其存活、整合情况及分化能力进行检测。结果经诱导分化获得的细胞能够在贴壁培养条件下形成Rosette结构、表达NPC标志物并且绝大多数呈BrdU阳性,移植到大鼠视网膜下腔后能分化为神经元和胶质细胞。结论大鼠iPS细胞能够通过悬浮EB加RA诱导的方法分化为NPC,有可能作为细胞移植治疗视网膜退行性疾病的供体细胞。     

人骨髓间充质干细胞的培养及研究

目的　了解间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的培养条件、生物特性及分化能力。方法　抽取健康成人骨髓,利用密度梯度离心分离培养人MSC,并用流式细胞仪检测细胞表面标记,体外诱导MSC向成骨细胞分化。结果　成功地进行了人MSC的原代和传代培养;MSC CD34、CD45、HLA DR、CD62p等为阴性,CD29、CD44、CD166、CD90 等为阳性;MSC能够分化为成骨细胞。结论　人骨髓MSC在体外有较强的扩增能力,并能够向成骨细胞分化。     

成体干细胞与肺

<正>干细胞是一类具有自我更新和高度增殖、分化潜能的细胞,能够产生高度分化的功能细胞。按分化潜能可分成三类细胞,即全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。按生存阶段的不同可分为胚胎干细胞和成体干细胞两大类。     

胚胎神经上皮干细胞体外克隆增殖与分化的实验研究

目的观察胚胎神经上皮干细胞在体外克隆增殖和诱导分化的情况。方法取孕11 d大鼠的胚胎,经分离获得神经管上皮细胞,在无血清培养基内克隆、增殖、传代。取不同时期的神经球进行神经干细胞的鉴定和诱导分化,并通过免疫组织化学染色鉴定分化的结果。结果胚胎神经上皮干细胞在体外能够克隆、增殖,形成的神经球呈nestin阳性,在分化培养基内可分化为星型胶质细胞和神经元。结论胚胎神经上皮干细胞可在体外进行单细胞克隆和诱导分化。     

circSEC31A调控miR-324-5p对脂肪干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响

目的 探讨环状非编码RNA SEC31A(circSEC31A,又名hsa_circ_0006618)对脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化的影响和机制.方法 在脂肪干细胞中分别转染sh-circSEC31A和LV-circSEC31A后,细胞增殖采用CCK8法检测;细胞凋亡采用流式细胞仪检测;circSEC31A和miR-324-5p靶点结合情况采用双荧光素酶测定法检测;成骨分化相关分子RUNX2和OPN的mRNA和蛋白水平分别采用Western blot和RT-qPCR检测.结果 在脂肪干细胞中转染sh-circSEC31A后能够明显抑制细胞的增殖和成骨分化相关分子RUNX2、OPN的表达水平(P<0.05),促进细胞的凋亡(P<0.05).在脂肪干细胞中转染LV-circSEC31A后能够明显促进细胞的增殖和成骨分化相关分子RUNX2、OPN的表达水平(P<0.05),抑制细胞的凋亡(P<0.05).双荧光素酶结果 显示circSEC31A能够靶向结合miR-324-5p(P<0.05).回复实验显示,在脂肪干细胞中共转染LV-circSEC31A和miR-324-5p mimics后能够反转单独转染LV-circSEC31A对脂肪干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响;共转染LV-circSEC31A和miR-324-5p inhibitors后能够进一步加强单独转染LV-circSEC31A对脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化的影响.结论 circSEC31A能够通过靶向调控miR-324-5p参与脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化,circSEC31A可能成为干预脂肪干细胞生物学功能的靶点.     

大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化和脑内定位移植

目的 了解骨髓基质细胞（MSC）在体外对抗氧化剂和生长因子等的反应及其脑内移植后的情况。方法 体外培养成年大鼠MsC，用β-巯基乙醇、BDNF、GDNF、CNTF、forskolin诱导分化，并将MSC植入成鼠大脑皮质，观察MSC在体内外环境中是否能够分化为神经细胞。采用流式细胞术鉴定MSC，免疫荧光染色法鉴定神经细胞。结果 在本实验条件下，MSC未见被诱导成神经细胞，植入脑内的MSC能够存活并迁移，但也未见分化为神经细胞。结论 MSC横向分化为神经细胞可能是多因素作用的结果，需要更多的实验对其横向分化和定向分化进行探索。     

猪胚胎生殖细胞分化实验研究

目的 利用维甲酸(RA)和二甲基亚砜(DMSO)诱导猪胚胎生殖细胞(EG细胞)分化,证明猪胚胎生殖细胞能够在体外分化为多种组织细胞.方法 利用悬浮培养和无饲养层培养,将猪胚胎生殖细胞分化为拟胚体,再将拟胚体分别培养于添加维甲酸(Retinoic acid, RA)和二甲基亚砜(Dimethylsulphoxide, DMSO)诱导剂的培养基中培养,诱导胚胎干细胞分化.结果 当悬浮培养时猪EG细胞形成拟胚体,再经RA和DMSO诱导分化为类桑椹胚体、类ES样细胞集落、神经样细胞和滋养层样细胞.结论 猪胚胎生殖细胞能够在体外分化为多种组织细胞,证明猪EG细胞具有多能性.     

低氧微环境对间充质干细胞增殖、分化影响的研究进展

间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新能力和能够产生高度分化的功能细胞,例如骨髓间充质干细胞在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为中胚层来源造血细胞、成骨细胞和软骨细胞,还可分化为内胚层来源的肝细胞和外胚层来源的神经组织细胞.     

雷帕霉素诱导Mef2c表达促进心肌分化

目的:评价小分子化合物雷帕霉素、羟氯喹和MC1568对心肌分化效率和心肌分化转录因子Mef2c表达的影响.方法:利用DMSO诱导P19CL6小鼠畸胎瘤干细胞分化为自发跳动的心肌细胞,检测自噬诱导剂雷帕霉素对小鼠P19CL6畸胎瘤细胞向心肌分化的影响,研究相关机制.结果:自噬诱导剂雷帕霉素能够有效促进心肌分化,增强心肌标...     

PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究

目的研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用.方法①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞,并诱导其分化,巢素(Nestin)、神经丝-200(NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色鉴定.②加入纹状体提取液后,分化细胞用抗酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化鉴定,并用流式细胞技术检测分化比例.结果①从大鼠胚胎的腹侧中脑部位分离获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的细胞团,且能分化为神经元和神经胶质细胞.②经纹状体提取液诱导后,能够分化出多巴胺能神经元,分化比例达20%左右.结论纹状体提取液能诱导中脑神经干细胞向多巴胺能神经元的分化.     

壳寡糖对神经干细胞分化的影响

目的:探讨壳聚糖的降解产物壳寡糖对神经干细胞分化的影响。方法:将壳聚糖降解为分子量1100能够溶于水的壳寡糖,然后将不同浓度的壳寡糖(0.1mg/ml,0.01mg/ml)与神经干细胞共培养12天,研究壳寡糖对神经干细胞分化的影响,对照组采用无壳寡糖培养。结果:实验组的神经干细胞分化的突起平均长度比对照组要长,表明一定浓度的壳寡糖能够促进神经干细胞的分化。结论:用壳聚糖制备人工神经移植物时,壳聚糖导管不仅在神经再生过程可起到支架,细胞依附的作用,同时其降解产物壳寡糖能够起到促进神经生长的作用,而进一步阐明壳聚糖具有多功能的生物学作用。     

成熟肌肉细胞可逆分化成干细胞

来自于美国scripps研究所的研究人员现已鉴别出一种小分子化合物,该化合物能够诱导细胞进行逆分化,从现有的细胞状态逆分化成原来的前体细胞。这种被称为“逆转素”的小分子化合物能够使按正常程序分化的肌肉细胞进行逆转化,重新回到前体细胞阶段。这些前体细胞具有多向分化能力,可分化成不同类型的细胞。因此,逆转素可用于成熟细胞无限逆转化成为前体细胞的有效工具,从而使一     

神经干细胞移植治疗颅脑损伤后神经功能缺失的研究进展

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是指一类能够进行自我复制、自我更新,并能够通过对称或者不对称的分裂方式向神经元、星形胶质细胞以及少突胶质细胞等分化的具有多向分化潜能的母细胞。已有不少实验研究表明,神经干细胞移植可能作为颅脑损伤后遗症的治疗方法之一,移植入的神经干细胞不仅可以在脑内存活,而且能够促进神经功能恢复。作者对神经干细胞移植治疗颅脑损伤后神经功能缺失方面的研究作一综述。     

补肾方药促进神经干细胞增殖分化的研究概述

神经干细胞具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,在中枢神经系统中具有增殖和分化能力的细胞。结合中医药理论和近年来实验研究结果表明补肾中药有利于神经干细胞的增殖分化,补肾方药如地黄饮子、补肾生髓方、泻火补肾汤、六味地黄丸、颐脑解郁方、补益肝肾中药、复健片、何首乌、龟板和淫羊藿能够促使受损神经系统的恢复,其作用机制为保护神经系统和促进神经干细胞的增殖与分化。补肾中药对神经干细胞的增殖和分化的进一步深化研究,可以拓展其临床意义和扩大其应用前景。     

小鼠胚胎干细胞无饲养层培养及其生物学特性

目的建立小鼠胚胎干（ES）细胞株S8在无饲养层的条件下短期内连续传代体系,获得大量纯的ES细胞。方法ES-S8细胞无饲养层连续传代后,检测其未分化指标以及多分化潜能。结果ES-S8细胞在无饲养层条件下培养5代,AKP染色、SSEA-1免疫荧光、OCT-4均显阳性,以及经拟胚体（EB）途径自发分化后,能形成多种类型的细胞。结论ES-S8细胞能够在无饲养层条件下培养,至少传5代仍能保持未分化特异性指标和多分化潜能。     

T2DM胰岛β细胞去分化相关转录因子的研究进展

糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病,其病因很复杂。目前关于糖尿病发病机制的研究更多地关注于胰岛β细胞去分化。多项研究证实,胰岛β细胞在高血糖状态下能够去分化为类似祖细胞的状态,而不是凋亡。本文综述了2型糖尿病患者发生胰岛β细胞去分化的相关研究进展,包括胰岛β细胞去分化的证据及去分化相关的转录因子和调节因子,这些发现有望阻止β细胞去分化或者促进去分化后的β细胞再分化,为2型糖尿病的治疗提供新的思路。     

体外诱导小鼠胚芽干细胞分化为肝细胞的实验研究

目的寻找一种诱导小鼠胚芽干细胞向肝细胞定向分化的最佳诱导剂。方法分离提取孕11 d小鼠胚胎的原始生殖细胞,体外培养扩增后,一部分胚芽干细胞接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮生长因子（EGF）、β-神经生长因子（β-NGF）、维甲酸（RA）、肝细胞提取液进行诱导分化。另一部分胚芽干细胞与胎肝组织共培养。将培养12 d的细胞采用靛青绿摄入试验和白蛋白（ALB）免疫细胞化学染色来鉴定原始生殖细胞向肝细胞分化的情况。结果与胎肝组织共培养和添加了β-NGF、肝细胞提取液的胚芽干细胞能够诱导成肝样细胞,这些肝样细胞能够摄取ICG并表达ALB,上述3组细胞ALB阳性细胞数较对照组明显增多（P〈0.05）。bFGF、EGF、RA并无诱导分化作用。结论β-NGF、胎肝组织产生的细胞因子及肝细胞提取液中的细胞因子可诱导小鼠胚芽干细胞向肝细胞分化。     

葛根素对大鼠MSCs增殖及骨向分化中BMP-2 mRNA表达的影响

目的:通过观察葛根素(Puerarin,Pue)对骨髓间充质干细胞(marrow pluripotent stromal stem cells,MSCs)增殖和向成骨细胞(osteoblasts,OB)分化过程中BMP-2 mRNA表达的影响,从分子生物学角度探讨中药防治骨质疏松症的可能机制。方法:采用全骨髓贴壁法,提取MSCs,通过形态学观察及流式细胞仪等方法鉴定所提取的细胞。实验分为空白组、Pue组、经典诱导组。采用MTT法检测Pue最佳促增殖浓度;通过RT-PCR技术检测Pue对MSCs向OB分化时BMP-2 mRNA表达的影响。结果:MTT比色法检测示10-7mol/L、10~(-8)mol/L Pue能够促进MSCs增殖;ALP染色细胞阳性率显示10~(-6)mol/L Pue能够促进MSCs向OB分化;10~(-6)mol/L Pue能够促进MSCs向OB分化过程中BMP-2 mRNA的表达增强。结论:Pue具有促进体外培养MSCs增殖及提高其向OB分化中BMP-2 mRNA的表达能力。     

干细胞移植治疗心肌损伤

一、干细胞概况干细胞是一族具有自我复制和具有多向分化能力的细胞。干细胞可以保持静止状态 ,可以发生自我复制 ,也可以发生分化。这些行为被认为是由它们邻近的体细胞决定的 ,后者组成的微环境调节干细胞的生长和分化。这个微环境能够提供一些因子维持干细胞的未分化状态 ,并能把诱导干细胞发生分化的因子排斥在外。但这个微环境的容纳能力是有限的 ,如果干细胞的数量超过这个微环境的容纳能力 ,干细胞就会从这个微环境中分离出来并发生分化。干细胞内也存在一些因子维持干细胞的未分化状态 ,这些因子可抑制与干细胞分化有关基因的表达。…