血管内皮细胞生长因子受体KKR胞外配基结合区单？…

目的 研制能封闭血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）受体ＫＤＲ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）?探讨其抑制ＶＥＧＦ诱导的体内外活性。方法 以原核表达的ＫＤＲⅠ￣Ⅳ区融合蛋白免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用杂交瘤技术制备抗ＫＤＲⅠ￣Ⅳ的ＭｃＡｂ，并用免疫双扩、ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性，用ＶＥＧＦ刺激内皮细胞增殖及鸡胚血管形成实验检测该抗 的中和活性。结果 通过筛选和鉴定获得了２株ＫＤＲⅠ     

从粪便及胃液中检测癌相关抗原GP87,CEA,S—Tn及尿激？…

为寻找胃癌普查的简便方法，冯抗消化道肿瘤单克隆抗体（ｍＡｂ）Ａｄｎａｂ－９，组合ＣＬ－３，ＧＳ－２和抗原激酶（ＵＰＡ）多克隆抗体，用ＥＬＩＳＡ直接法和酶免疫电泳法，检测了粪便标本１４４例和胃液标本１５３例中癌相关抗原ＧＰ８７，ＣＥＡ，Ｓ－Ｔｎ及ＵＰＡ。结果表明，以抗ＧＰ８７ｍＡｂ Ａｄｎａｂ－９检测时，粪便组的阳性率：胃癌为８７．９％，萎缩性胃炎（ＣＡＧ）为７４．１％，ＣＡＧ伴不典型增生（ＡＴＰ）     

抗—HEV单克隆抗体B4C重链可变区基因的克隆及初步表达

抗－ＨＥＶ８７Ａ株单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｂ４Ｃ的经体外研究鉴定，证实对我国暴发和散发性ＨＥＶ毒株有很高的特异性。为从分子水平上了解ｍＡｂＢ４Ｃ，我们利用基因工程技术，从杂交瘤细胞系中克隆出了重链可变区基因，并对其全部核苷酸序列进行了分析，可能属于小鼠免疫球蛋白重链Ｉ亚组，将ＶｎｃＤＮＡ克隆到高效表达载体ｐＱＥ－３１中，经ＩＰＴＧ诱导，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，可见１条Ｍｒ的１６０００左右的表达带，表达产     

鼻咽癌抗独特型单克隆抗体的制备和鉴定

用针对鼻咽癌癌细胞相关抗原的单克隆抗体Ｆｃ１（Ａｂ１）作免疫原，采用常规免疫和杂交瘤制备方法，获得了一株抗Ｆｃ１Ｖ区独特型的杂交瘤：２Ａ９。双夹心ＥＬＩＳＡ显示２Ａ９所分泌的抗体（Ａｂ２）对Ｆｃ１有效强的亲和力。ＥＬＩＳＡ结合抑制试验结果显示，Ａｂ２能抑制Ｆｃ１对鼻咽癌细胞ＣＮＥ１的反应。这就证明Ａｂ２作用于Ｆｃ１抗体的Ｖ区。用Ａｂ２与钥孔戚血蓝素（ＫＬＨ）交联物免疫小鼠产生的抗－抗独特型抗体（Ａｂ３）的血清，能与Ｆｃ１竞争ＣＮＥ１细胞株上的原始靶抗原。免疫组化证实，Ａｂ３与Ｆｃ１对鼻咽癌细胞有相同的反应，均为细胞膜染色。可以看出Ａｂ３与Ａｂ１（Ｆｃ１）具有相同的配位。以上结果表明：２Ａ９杂交瘤细胞所分泌的抗独特型抗体Ａｂ２是带有鼻咽癌相关抗原内影像的单克隆抗体。     

抗人白细胞单克隆抗体的特异性及其特性鉴定

目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色ＳＰ法鉴定其组织特异性。　结果成功地制备１株抗人白细胞　ｍＡｂ，命名为ＳＺ－１０５。ＥＬＩＳＡ法测定其腹水效价为１×１０－５。琼脂糖双扩散鉴定为ＩｇＧ１类。流式细胞仪间接免疫荧光技术及免疫组化ＳＰ法测定表明，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５可选择性地与外周血液的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞呈强阳性反应，而与红细胞及血小板不出现反应。该ｍＡｂ还可与正常人骨髓的白细胞前体起反应。另外，在肝、肺、脾、胸腺及淋巴结正常组织中的巨噬细胞表面，也有ＳＺ－１０５抗原表达。ＳＺ－１０５抗原经亲和层析纯化，再经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ　和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ证实，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５识别的抗原是相对分子质量（Ｍｒ）为７５　０００左右的单链蛋白多肽。结论　获得１株具有高度免疫学活性和组织特异性的抗人白细胞ｍＡｂ　ＳＺ－１０５，其对研究白细胞的分化、免疫功能，以及隐匿性急、慢性炎症疾病的放免显像诊断都具有一定的临床意义。     

胸腺肿瘤组织中EB病毒、细胞增殖和凋亡的检测

目的 研究胸腺肿瘤在广州５所医院的发病情况,与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）感染是否相关以及肿瘤细胞增殖和凋亡的等级,方法 以４３例胸腺肿瘤和７例胸腺增生组织主研究对象,采用原位分子杂交检测ＥＢ病毒编码的ＥＢＥＲｓ,免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＥＢＮＡ－１,ＬＭＰ－１,ＰＣＮＡ,ｂｃｌ－２和ｐ５３原位细胞凋亡（ＴＵＮＥＬ）方法检测细胞凋亡,结果 （１）胸腺疾病在广州５所医院活检中仅占有０．０５７％,其中肿瘤占７４．     

淋巴瘤血管内皮细胞人白细胞DR抗原和第Ⅷ因子相关抗原的表达

目的试图揭示人白细胞ＤＲ抗原（ＨＬＡ－ＤＲ）和第Ⅷ因子相关抗原（ＦⅧＲＡｇ）的表达规律,研究血管内皮细胞的生物学行为。方法应用ＨＬＡ－ＤＲ和ＦⅧＲＡｇ的抗血清,对３９例淋巴瘤中血管内皮细胞的功能异质性进行免疫组织化学及其形态定量研究,同时取新生儿、成人淋巴结及反应性增生淋巴结做对照。结果新生儿、成人淋巴结及反应性增生淋巴结内各类血管内皮细胞对ＨＬＡ－ＤＲ、ＦⅧＲＡｇ均呈阳性,其中高内皮后微静脉（ＨＥＶ）呈强阳性;Ｈｏｄｇｋｉｎ病和Ｔ细胞淋巴瘤中血管多数是ＨＥＶ样血管,内皮细胞均表达ＨＬＡ－ＤＲ及ＦⅧＲＡｇ;Ｂ细胞淋巴瘤中血管多数是毛细血管样血管,内皮细胞很少表达或不表达ＨＬＡ－ＤＲ,只表达ＦⅧＲＡｇ。结论说明Ｈｏｄｇｋｉｎ病和Ｔ细胞淋巴瘤中血管内皮细胞既参与免疫调节过程,又参与凝血过程;而Ｂ细胞淋巴瘤内血管内皮细胞只参与凝血过程,不参与免疫调节过程。     

人巨细胞病毒单克隆抗体的研制检定和应用

采用人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＡＤ１６９株作为免疫原，制备出１３株鼠－鼠杂交瘤细胞系。对其中的６株进行了检定．免疫印迹试验结果表明：单克隆抗体（ＭｃＡｂ）７Ｂ４、７Ｄ７、７Ｅ１１、８Ｅ８和８Ｄ６相对应的ＨＣＭＶ多肽分子量分别为４６、１５０、３８、５１７２和６５ｋＤ．ＨＣＭＶ感染人胚肺二倍体细胞（２ＢＳ）后不同时间制成抗原片，与ＭｃＡｂ作间接免疫荧光试验。结果表明：ＭｃＡｂ８Ｂ８相应的病毒多肽为即刻早期抗原，其它５株ＭｃＡｂ相应的病毒多肽均为晚期抗原，６株ＭｃＡｂ等量混合后，标上辣根过氧化物酶，用于ＩｇＭ抗体捕获法ＥＬＩＳＡ（ＭａｃＥＬＩＳＡ）中，并与间接ＥＬＩＳＡ（ＩＥＬＩＳＡ）同时检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ．在未经选择的１００份脐带血中，两法均为阳性的３份，两法均为阴性的９４份；ＭａｃＥＬＩＳＡ阳性而ＩＥＬＩＳＡ阴性的２份血清的特异性试验证明，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ确为阳性．ＩＥＬＩＳＡ阳性而ＭａｃＥＬＩＳＡ阴性的１份血清的特异性试验证明，它是由ＲＦ引起的假阳性。     

Epstein—Barr病毒膜抗原在昆虫细胞sf9中的表达,纯 …

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒膜抗原基因（ＥＢＶ－ＭＡ）称ＭＡ１和截去穿膜区的ＭＡ基因称ＭＡ２分别插入杆状病毒表达载体ｐＶＬ－９４１。将两种重组质粒分别与杆状病毒ＤＮＡ共转染ｓｆ９细胞后获得Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ１和Ｂａｃｕｌｏ－ＭＡ２两种重组病毒，表达产物分别位于重组病毒感染的细胞表面或释放到细胞培养液中。免疫荧光方法检查，在感染的细胞表面表达产物与抗ＭＡ的单克隆抗体特异性地结合，ＳＤＳ－Ｐ     

三株肝癌单克隆抗体的Western免疫印迹实验

Ａ１０、Ｅ５和Ｆ１１是３株抗人肝细胞癌的单克隆抗体（ｍＡｂ）。经ＡＢＣ免疫组化染色法证实，这些ｍＡｂ针对的抗原在８例肝癌组织中呈高表达，Ａ１０、Ｅ５和Ｆ１１分别为６／８，５／８和６／８；而在肝炎中呈低表达，分别为２／１１、０／１１和１／１１［１］。故这几株ｍＡｂ所针对的相应抗原可能是肝癌相关抗原。作为筛选肝癌细胞表达文库的候选抗体，通过Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹反应可了解其相应抗原的一些性质及确定ｍＡｂ对变性抗原的识别能力。１　材料和方法１－１　细胞株和ｍＡｂ　肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１与ＨＨＣＣ…