电离辐射诱发的Jurkat T淋巴细胞凋亡及其机制

用原位末端标记法，麦格－姬联（ＭＧＧ）染色法和免疫组化技术，观察了经５，１０，２０和３０Ｇｙ不同剂量的γ射线照射后４ｈ－３６ｈ，人Ｊｕｒｋａｔ Ｔ淋巴细胞白血病的凋亡及Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果表明，不同剂量γ射线照射后，Ｔ淋巴细胞数的减少和凋亡率均显示出较好的量效和时效关系，证实细胞凋亡是照射后Ｔ淋巴细胞数减少的主要原因之一；     

电磁脉冲对犬淋巴细胞损伤及其机制的实验研究

目的 研究电磁脉冲（ＥＭＰ）对犬淋巴细胞的损伤效应及其机制。方法 用细胞化学,原位末端标记和免疫细胞化学技术,分析Ｔ淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡以及ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的改变。结果 （１）２～１２万Ｖ／ｍ的场强能使外周血Ｔ细胞及其亚群出现不同程度的下降,其中以６万Ｖ／ｍ照射后２４ｈ最为明显,Ｔ细胞及Ｔｕ,Ｔｓ细胞数分别降低至对照值的７７％,８１％和６３％;（２）在上述场强范围内,凋亡淋巴细胞随照射     

实验性隐睾诱导小鼠生精细胞凋亡的研究

目的 研究手术隐睾所致成年小鼠生殖细胞凋亡及相关调节因子ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白在曲细精管中的定位、变化。方法 以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测凋亡的生殖细胞,生物素－抗生物素蛋白ＤＣＳ体系间接免疫荧光法检测Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白在曲细精管中的定位、分布。结果 隐睾术后３ｄ,手术侧睾丸重量及细胞凋亡数量与对侧地无明显区别。而６￣１５ｄ,睾丸重量明显减轻,凋亡细胞     

小鼠^60Co—γ射线照射后空肠组织中NO和cGMP含量变化

目的和方法：选用ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，采用一氧化氮荧光分光光度法和放射免疫测定法，对不同剂量６０Ｃｏ－γ射线（８Ｇｙ、１２Ｇｙ、１４Ｇｙ）照射后的小鼠和８Ｇｙ照射后不同时间（分别为２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ）小鼠空肠组织中ＮＯ－２和ｃＧＭＰ含量进行了测定。结果：８Ｇｙγ射线全身照射后，小鼠空肠组织中ＮＯ－２含量增加，照后４８ｈ含量最高，ｃＧＭＰ含量在照后２４ｈ最高，４８ｈ降至接近对照水平，在４８ｈ处，ｃＧＭＰ含量与照射剂量呈依赖性正相关。     

Bax抗原在艾滋病人脑组织中的表达及其原位检测

采用快速免疫组织化学染色方法及ＤＮＡ３- 羟基末端特异性标记技术对２３例艾滋病人及１９例非艾滋病对照病人死后脑组织标本中Ｂｃｌ－２相关Ｘ蛋白（Ｂａｘ）及细胞凋亡进行了原位检测。结果显示，艾滋病人脑组织Ｂａｘ阳性率达７３．９％（１７／２３），而对照病人脑组织阳性率为５．３％（１／１９）。凋亡细胞与Ｂａｘ双染结果显示两者常出现在同一细胞中，均多见于巨噬细胞及神经细胞。因此，结果提示Ｂａｘ抗原在艾滋病人脑组织中高度表达，并且艾滋病与Ｂａｘ和细胞凋亡三者之间具有一定的关系。     

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤-2基因家族基因的表达及与细胞死亡的关系

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因（ｂｃｌ－２）家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。在缺血再灌流６ｈ，Ｂａｘ免疫染色增加，２４～４８ｈ达到高峰，ｂｃｌ－ｘＬｍＲＮＡ在２４ｈ后表达下降，ｂｃｌ－ｘＬ蛋白在４８ｈ可见明显降低，并且在缺血敏感神经元Ｂａｘ和ｂｃｌ－ｘＬ表达变化显著，与细胞凋亡发生的部位一致，相反，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和蛋白表达未见明显变化。提示ｂｃｌ－ｘＬ和Ｂａｘ可能参与脑缺血再灌流中神经细胞死亡的调节，其表达变化与神经元对缺血的敏感性相关     

常压缺氧大鼠血浆和肺组织TXB_2和6－keto－PGF_（1α）的动态变化

本文观察常压缺氧２４ｈ及１，２，４ｗ（６ｈ／ｄ，６ｄ／ｗ）后大鼠血小板数及聚集率和血浆及肺ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）的动态变化。结果表明（１）缺氧大鼠血小板数呈先增加、后恢复、再下降，血小板聚集率呈先减少、后增加再减少的动态变化。（２）血浆ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）均明显升高，（３）肺组织６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）升高早于ＴＸＢ＿２，提示ＰＧＩ＿２参干旱期缺氧肺血管张力调节。（４）缺氧大鼠２周时肺动脉高压达到高峰，右心室明显肥厚，而肺组织ＴＸＢ＿２至缺氧４周后才见增加，表明ＴＸＢ＿２不是缺氧早期肺血管收缩的主要因素。     

震动伤引起的家犬外周血淋巴细胞凋亡及其机制

应用免疫细胞化学和酶细胞化学技术，观察了震动伤引起的家犬外周血淋巴细胞凋亡，Ｔ淋巴细胞数的变化及其发生机制。结果表明，实验所用２００、１００和８０三种垂直加速度值（Ｇ）在致伤后不同时间，均可引起淋巴细胞的凋亡，其凋亡率随Ｇ值增加而增大；观察伤后不同时间细胞凋亡的变化，发现在伤后３ｄ其凋亡率达到峰值，约为伤前的５～８倍；而外周血Ｔ淋巴细胞数在伤后明显降低，与凋亡呈现出相反的变化趋势；还发现伤后３ｄ与凋亡相关的ｐ５３和Ｂａｘ蛋白阳性率分别为伤前值的２．３和１．８倍，二者在诱发淋巴细胞凋亡中可能起着重要作用。     

细胞凋亡调控因素有关基因的研究

抑制细胞凋亡的基因主要是Ｂｃｌ－２基因和Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂｃｌ－ＸＬ，ＭＣＬ－１），其编码的蛋白质能抑制细胞凋亡和延长细胞寿命，其抑细胞凋亡作用以Ｂｃｌ－２最为重要。促进细胞凋亡基因或因素较多，主要有Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂａｘ，Ｂｃｌ－Ｘｓ）、ｐ５３肿瘤抑制基因、ｃ－ｍｙｃ原癌基因、ＴＧＦ－β、Ｆａｓ抗原及其配体，其中Ｂａｘ基因、ｐ５３基因与Ｂｃｌ－２基因在细胞凋亡的调控作用方面密切相关     

具有谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力的抗体酶研究──单克隆抗体的制备及化学诱变

将２，４－二硝基氯苯（ＤＮＣＢ）专一地与底物谷胱甘肽（ＧＳＨ）巯基反应，合成了半抗原ＧＳＨ－Ｓ－ＤＮＰ；通过蛋白质连接技术（戊二醛法）将此半抗原偶联到牛血清白蛋白（ＢＳＡ）上，制备出全抗原。用吸收光谱测得每个ＢＳＡ分子上平均连接３３个半抗原。用全抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过淋巴细胞杂交瘤技术，制备出抗ＧＳＨ的单克隆抗体杂交瘤细胞系４Ａ４、６Ａ６、１Ｃ８和４Ｇ３等。将其中的４Ａ４培养上清经５０％（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀、ＤＥＡＥ－５２纤维素离子交换柱层析和ＢｉｏｇｅｌＰ－２００凝胶过滤分离得到４Ａ４ＩｇＧ抗体，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检验纯度大于９０％。４Ａ４ＩｇＧ可变区中的丝氨酸（Ｓｅｒ）经苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）活化，再用硒化氢（Ｈ２Ｓｅ）处理，则Ｓｅｒ转变成硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ），使４Ａ４ＩｇＧ引入该催化基因。化学诱变后的４Ａ４ＩｇＧ具有谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）活性，其活力是世界上最好的ＧＰＸ模拟物ＰＺ５１的１１００倍，是游离ＳｅＣｙｓ的２．２×１０４倍，已达到天然酶活力的数量级水平。经初步应用，该抗体酶可防止自由基对心肌线粒体的损伤。     

乙醇诱导人胃上皮细胞癌细胞株（BGC—823）细胞凋亡

为进一步阐明了乙醇引起胃粘膜损伤的机理,本实验在离体培养的人胃上皮癌细胞株（ＢＧＣ－８２３）建立了乙醇诱导细胞凋亡的模型。从细胞形态、ＤＮＡ梯状条带及流式细胞仪检测等方面,观察了不同剂量的乙醇作用不同时间后ＢＧＣ－８２３细胞凋亡的发生情况。结果表明,较低浓度的乙醇（１．５％￣４％）能有效诱导细胞凋亡,且随剂量增大凋亡发生时间缩短。较高浓度（大于４％）则引起细胞坏死,２％乙醇诱导时,６ｈ即有凋亡出现     

球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞凋亡及相关基因表达 …

目的：探讨球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞（ＳＭＣ）凋亡的机制。方法：采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学技术检测球囊损伤内皮后血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）凋亡及Ｂａｘ,Ｂｃｌ－２蛋白的变化,结果：球囊损伤内皮后第３ｄ,血管中层出现凋亡的ＳＭＣ;损伤后第７ｄ,内膜和中层ＳＭＣ凋亡率最高,凋亡的ＳＭＣ主要分布内膜层;以后爱渐降低,至损伤后第２８ｄ,仅内膜     

镉对大鼠输精管损伤及锌保护的超微结构与葡萄糖—6—磷酸酶细胞 …

目的 研究小剂量氯化镉对大鼠输精管近、远段的影响及锌的保护作用。方法 用１％氯化镉（２ｍｇ／ｋｇ体重）腹腔注射雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠后４ｈ到６０ｄ及镉、锌联合注射后３ｄ、１５ｄ取材。采用电镜观察和葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）电镜细胞化学定量研究。结果 镉注射４ｈ后，输精管主细胞出现超微结构改变，３￣７ｄ改变最明显，１５ｄ有所减轻，６０ｄ后基本恢复正常。主细胞的主要改变为线粒体肿胀，内质网扩     

低剂量电离辐射对小鼠免疫器官cAMP和儿茶酚胺含量的影响

本文报道，７５ｍＧｙ／（１２．５ｍＧｙ／ｍｉｎ）单次全身Ｘ射线照射后９小时用ＳＲＢＣ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，在免疫后４天和７天脾脏、胸腺和下丘脑ｃＡＭＰ含量均降低；而在免疫后４天脾脏去甲肾上腺素、肾上腺素和酪氨酸含量均增高，免疫后７天肾上腺素含量仍持续增高；当连接γ射线６５ｍＧｙ（０．０１５ｍＧｙ／ｍｉｎ，６ｈ／ｄ）全身照射小鼠后即刻或２９小时后免疫，脾脏和下丘脑ｃＡＭＰ含量也均降低。提示，低剂量     

蛋白激酶C抑制剂诱导CNE—2Z细胞凋亡的研究

目的和方法：采用蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）催化区抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）、调节区抑制剂ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ），诱导ＣＮＥ—２Ｚ细胞２４ｈ。结果：（１）ＳＴ、ＳＳ对细胞ＤＮＡ裂解的影响均随浓度增高而逐步增强，作用明显的终浓度分别为１×１０６ｍｏｌ／Ｌ和４×１０５；（２）核形态观察：诱导后部分细胞核变小，核浓缩及核碎裂；（３）ＤＮＡ琼脂糖电泳：诱导后的细胞有典型梯状ＤＮＡ条带；（４）流式细胞仪分析：诱导组Ｇ１期前均有ＤＮＡ亚二倍体峰，即凋亡峰。细胞周期改变：ＳＴ使Ｇ２期增加、Ｇ１、Ｓ期减少；ＳＳ使Ｓ期增加和Ｇ１期减少。结论：ＰＫＣ抑制剂可有效地促进ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡，但与抑制剂剂量有关，细胞周期的改变可能在ＰＫＣ抑制剂诱导的细胞凋亡中起重要作用。     

54例非霍奇金病Bcl-2、Bax、Fas和Fas-L蛋白表达及其意义

研究凋亡相关蛋白Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｆａｓ和Ｆａｓ－Ｌ在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义。方法应用免疫组化Ｓ－Ｐ法对５４例ＮＨＬ进行检测。结果：（１）Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｆａｓ和Ｆａｓ－Ｌ阳性率分别为５０％、８３．８％、８８．９％和８８．７％。     

常压缺氧大鼠血浆和肺组织TXB2和6—keto—PGF1α的动态变化

本文观察常压缺氧２４ｈ及１，２，４ｗ后大鼠血小板数及聚集率和血浆及肺ＴＸＢ２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α的动态变化。结果表明（１）缺氧大鼠血小板数呈先增加、后恢复、再下降，血小板聚集率呈先减少、后增加再减少的动态变化。（２）血浆ＴＸＢ２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α均明显升高。（３）肺组织６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α升高早于ＴＸＢ２，提示ＰＧＩ２参于早期缺氧肺血管张力调节。（４）缺氧大鼠２周时肺动脉高压达到     

镉对大鼠输精管损伤及锌保护的超微结构与葡萄糖-6-磷酸酶细胞化学的研究

目的研究小剂量氯化镉对大鼠输精管近、远段的影响及锌的保护作用。方法用１％氯化镉（２ｍｇ／ｋｇ体重）腹腔注射雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠后４ｈ到６０ｄ及镉、锌联合注射后３ｄ、１５ｄ取材。采用电镜观察和葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）电镜细胞化学定量研究。结果镉注射４ｈ后,输精管主细胞出现超微结构改变,３～７ｄ改变最明显,１５ｄ后有所减轻,６０ｄ后基本恢复正常。主细胞的主要改变为线粒体肿胀,内质网扩张及髓样结构增多。镉注射后４ｈ,远段主细胞Ｇ－６－Ｐａｓｅ反应产物明显减少,３ｄ最少,１５ｄ反应产物增多。镉、锌联合注射后超微结构及Ｇ－６－Ｐａｓｅ活性损伤均较单纯镉组轻。结论锌对镉所致大鼠输精管主细胞超微结构损伤及远段主细胞Ｇ－６－Ｐａｓｅ活性影响有明显保护作用。     

降钙素基因相关肽单克隆抗体的研制及初步鉴定

以人工合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）－牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联物（ＣＧＲＰ－ＢＳＡ）为免疫原，用微量脾内免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其免疫脾细胞与小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选、３次克隆化后，获得３株能稳定分泌抗ＣＧＲＰ单克隆抗体的杂交瘤细胞３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２。用琼脂双扩散法鉴定，３Ｂ４为ＩｇＧｌ亚类，７Ｅ１１和８Ｆ２均为ＩｇＭ类。杂交瘤细胞的染色体条数在９２￣     

肿瘤碱性蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了４株抗人血清肿瘤碱性蛋白（Ｔｕｍｏｕｒｂａｓｉｃｐｒｏ－ｔｅｉｎ，ＴＢＰ）杂交瘤细胞株（１Ｃ３、４Ｆ４、５Ｆ４、３Ｇ９），并以制备的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对其抗原决定簇及免疫学特性进行了分析。Ｉｇ亚类测定：均为ＩｇＧ２ａ，腹水效价为１×１０－６～１×１０－８。特异性测定：ＴＢＰＭｃＡｂ与ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ和Ａｌｂ无交叉反应。单抗相加试验证实：５Ｆ４、４Ｆ４和１Ｃ３为识别ＴＢＰ上同一抗原决定簇，３Ｇ９则为识别ＴＢＰ上另一抗原决定簇。分别利用单株和混合株ＭｃＡｂ标酶建立了可应用于人血清ＴＢＰ含量测定的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，并用于人血清ＴＢＰ含量测定。