鼻咽上皮癌变过程中端粒酶活性和端粒酶RNA的表达

目的 研究二亚硝基哌嗪（DNP）诱发大鼠鼻咽癌变过程中端料酶的表达规律。方法 以DNP诱导大鼠鼻咽癌：用PCR-ELISA和Nested RT-PCR检测DNP诱导大鼠鼻咽癌变不同阶段端粒酶活性和端料酶RNA的表达,同时作病理形态学检测。结果 DNP诱导大鼠鼻咽癌变过程中,端粒酶活性不断升高,端粒酶的变化与鼻咽癌变呈正相关,而且端粒酶中RNA表达先于端粒酶的表达。在大鼠鼻咽上皮细胞异型增生阶段即出现端粒酶的激活和端粒酶RNA的表达。结论 化学致癌物DNP诱导细胞癌变端粒酶的激活,且端粒酶的扩活和端粒酶RNA的表达是鼻咽上皮癌变的早发事件,与鼻咽癌的发生、发展有关。     

Ki-67、P53、LAT1在食管癌及癌前病变组织中的表达及其临床意义

目的:观察Ki-67、P53、LAT1在食管鳞癌及癌前病变组织中的表达情况并探讨其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测食管正常黏膜组织20例、癌前病变组织68例(轻度非典型增生21例,中度非典型增生22例,重度非典型增生25例)以及癌组织34例中Ki-67、P53及LAT1的阳性表达情况,分析三者在食管癌组织中表达的相关性。结果:食管正常黏膜组织、轻度非典型增生、中度非典型增生、重度非典型增生以及癌组织中,Ki-67阳性表达率分别为0%(0/20)、23.8%(5/21)、40.9%(9/22)、76.0%(19/25)、82.4%(28/34),P53阳性表达率分别为0%(0/20)、14.3%(3/21)、31.8%(7/22)、48.0%(12/25)、67.6%(23/34),LAT1阳性表达率分别为0%(0/20)、19.0%(4/21)、36.4%(8/22)、52.0%(13/25)、76.5%(26/34)。等级相关分析结果显示,Ki-67、P53、LAT1的阳性表达均与组织学分级显著相关(r=0.626,0.427,0.586,P<0.01);Ki-67与P53、LAT1在食管癌组织中的表达呈正相关(r=0.428,0.596,P<0.01)。结论:Ki-67、P53、LAT1蛋白的异常表达与食管癌的癌变过程显著相关,三者联合检测具有重要的临床意义。     

口腔鳞癌中survivin、cyclinD1和p53基因的表达及其相关性

目的:探讨survivin、cyclinD1和p53基因蛋白在口腔鳞癌中的表达及其相互关系.方法:应用免疫组化SP法检测95例口腔鳞癌组织和50例正常口腔黏膜组织中survivin、cyclinD1和p53蛋白的表达.结果:survivin、cyclinD1和p53在口腔鳞癌与正常口腔黏膜组织之间的差异均有统计学意义(P<0.05);在口腔鳞癌中,Survivin和CyclinD1蛋白的过表达均与临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),p53过表达与组织分化程度及临床分期有关(P<0.05或P<0.01);survivin的过表达与cyelin D1及p53蛋白表达均呈正相关(r=0.628,0.829),cyclin D1蛋白的过表达与p53蛋白表达也呈正相关.结论:survivin、cyclinD1和p53基因在口腔鳞癌的发生、发展中起着不同程度的作?三者之间可能具有协同作用.     

口腔鳞癌及癌前病变组织中p27、p53蛋白的表达

目的　探讨 p2 7、p5 3蛋白表达在口腔鳞癌发生发展中的意义。 方法　应用免疫组化S P法分别检测 9例口腔正常黏膜 ,11例单纯性增生、2 6例癌前病变及 5 4例鳞癌组织中p2 7、p5 3蛋白的表达。 结果　p2 7蛋白在口腔正常黏膜和单纯性增生组织中呈高表达 ,在癌前病变和鳞癌组织中高 (低 )表达率分别为 6 1 5 % (38 5 % )、2 5 9% (6 1 1% ) ,在鳞癌中阴性表达率为 13% ;p2 7蛋白的表达与鳞癌的组织分化程度、临床分期相关 (P <0 0 5 )。p5 3蛋白在正常黏膜、单纯性增生及轻、中度不典型增生中未见表达 ,在重度不典型增生和鳞癌中可见 2 8 6 %和 4 8 1%的阳性表达 ,二者差异有高度显著性 (P <0 0 1) ;在鳞癌中 p5 3蛋白表达与组织分化程度相关 (P <0 0 5 ) ;p2 7和p5 3表达在鳞癌中呈负相关 (P <0 0 1)。 结论　p2 7蛋白表达的减少在口腔鳞癌的发生发展中起着重要作用 ,并与其预后因素密切相关。p5 3蛋白的表达在癌前病变向鳞癌转变过程中起重要作用。综合分析 p2 7、p5 3表达有助于口腔鳞癌的早期诊断和患者预后的估计。     

人食管鳞癌组织中RhoC和Ki-67的表达及意义

 目的：检测人食管鳞癌组织中RhoC和Ki-67的表达,探讨它们在食管鳞癌发生发展中的作用及相关性。方法：采用免疫组织化学方法（二步法）,检测分析52例人食管鳞癌组织中RhoC和Ki-67蛋白的表达情况及其与患者临床病理特征的关系。结果：（1）食管鳞癌组织RhoC蛋白的阳性表达率为61.5%（32/52）,相应癌旁组织RhoC阳性表达率为29.7%（11/37）,差异显著（P＜0.05）。（2）RhoC表达与食管鳞癌临床TNM分期和淋巴结转移密切相关,TNM Ⅲ期食管鳞癌组织中RhoC阳性表达率为78.3%（18/23）,显著高于TNM Ⅰ～Ⅱ期的48.3%（14/29）（P＜0.05）;伴有淋巴结转移的食管鳞癌组织中RhoC阳性表达率为81.8%（18/22）,显著高于无淋巴结转移的46.7%（14/30）（P＜0.05）。（3）食管鳞癌组织中,RhoC与Ki-67的表达呈显著正相关（r=0.322,P＜0.05）,均呈升高趋势。结论：RhoC的高表达与食管鳞癌的分期、淋巴结转移及细胞增殖密切相关。RhoC可成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标。     

端粒酶hTR和hTRT在肿瘤中的表达及意义

目的 :探讨端粒酶hTR、hTRT基因表达在人肿瘤中的意义 ,并与 p5 3蛋白改变相比较 ,评估其对肿瘤临床诊断的价值。方法 :用原位杂交及免疫组化技术检测了 115例恶性肿瘤、6 0例良性及癌前病变中hTR和hTRT的表达 ,并与 p5 3基因蛋白改变相比较。结果 :hTR、hTRT在人恶性肿瘤中的平均检出率分别为 81%、83%。在转移性癌中两者均为 10 0 %的阳性率 ,而在慢性肝炎伴肝硬化中hTR、hTRT分别可见 5 0 %、6 0 %的弱阳性表达 ,其他良性病变及癌前病变均为阴性。p5 3蛋白在人恶性肿瘤中的平均阳性率为 4 9 6 % :在良性病变及癌前病变均为阴性。结论 :恶性肿瘤中hTR和hTRT明显高于 p5 3的检出率 ,且在良恶性病变中的表达差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,并提示端粒酶hTR、hTRT与癌的生物学行为有密切关系 ,端粒酶基因hTR、hTRT的原位杂交检测可以作为一个比 p5 3更好的肿瘤诊断的新标记物。     

前列腺癌组织中N-Myc、p53的表达及其临床意义

目的探讨N-Myc、p53在前列腺癌组织中的表达、两者的相关性及其临床意义。方法收集2015～2016年安徽医科大学第一附属医院行前列腺手术的前列腺癌患者63例及前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)患者50例,采用免疫组化MaxVision法检测病理组织中N-Myc、p53的表达。结果 N-Myc、p53在前列腺癌组织中的表达均升高(P 0. 05),前列腺癌组织中N-Myc、p53中表达与有无骨转移和TNM分期具有相关性(P 0. 05),与患者年龄、术前PSA水平等因素无关(P0. 05)。另外,p53表达与Gleason评分亦相关。结论 N-Myc和p53在前列腺癌中呈高表达,可能共同参与前列腺癌的恶性进展和转移,有望成为检测前列腺癌转移的新靶点。     

子宫颈癌及癌前病变HPV16、Ki-67的表达及其相关性

目的对子宫颈癌及癌前病变中HPV感染和增殖细胞核抗原Ki-67表达情况进行研究。方法对45例子宫颈浸润性鳞状细胞癌、5例子宫颈腺癌、35例子宫颈上皮内瘤变（CIN）和5例正常宫颈组织采用免疫组化EnVision法进行HPV16和Ki-67表达的检测。结果HPV16阳性率为78．9％（71／90）,其中HPV16阳性率在子宫颈癌组织中为76．0％（38／50）,在CIN病变中为94．3％（33／35）,在正常子宫颈黏膜上皮组织中为阴性（0／5）。Ki-67阳性细胞在正常子宫颈、CIN和子宫颈癌组织中表达逐级增加,显示Ki-67表达程度与组织学类型有关。HPV和Ki-67在CIN和癌组织中的表达呈显著相关（P〈0．005）。结论瑞安地区子宫颈癌及癌前病变组织中存在HPV感染,HPV感染可能在子宫颈癌的发生、发展中起着重要作用。联合应用Ki-67与HPV可作为筛选子宫颈癌高危个体有价值的生物学标记。     

HPV感染、宫颈炎、CIN及宫颈癌患者的宫颈黏膜脱落细胞端粒酶定量研究

目的 检测研究表明女性在感染人乳头瘤病毒（HPV）后引起宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（CIN）及进而发展为宫颈癌时其宫颈黏膜脱落细胞端粒酶活性量发生变化,探其对筛查和早期诊治女性宫颈癌患者的临床价值.方法 选HPV检测阴性的正常对照组26例、HPV阳性组28例、HPV阳性宫颈炎组27例、HPV阳性CIN组26例、宫颈癌组24例、HPV阴性宫颈炎组26例、HPV阴性CIN组23例共七个检测组,采集宫颈黏膜脱落细胞标本以293细胞为阳性标准进行端粒酶TRAP实时荧光定量检测.结果 端粒酶活性定量值：正常对照组,范围0～3.15、平均0.36;HPV阳性组,范围0～21.6、平均1.98,＞10的3例;HPV阳性宫颈炎组,范围0～71.5、平均4.88,＞10的4例;HPV阳性CIN组,范围0～ 407、平均20.8,＞10的5例;宫颈癌组,范围1.2 ～5.5＆#215;106、中位数346,其中＜10的4例;HPV阴性宫颈炎组,范围0～66.6、平均4.19,＞10的3例;HPV阴性CIN组,范围0 ～158、平均14.2.统计学分析宫颈癌组与其他各组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,HPV阳性CIN组与正常对照组比较有统计学意义（P＜0.05）,其余各组间两两比较无统计学意义（P＞0.05）.结论 女性在感染HPV并引起宫颈炎、CIN阶段,其宫颈黏膜脱落细胞端粒酶活性逐步增高,在宫颈癌阶段增高最为显著,因此对采取宫颈黏膜脱落细胞进行端粒酶活性定量检测,可作为对女性宫颈癌的有效筛查和早期诊断手段之一.     

bcl-2、ki-67和p53在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨bcl-2、ki-67和p53在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法:采用SP免疫组织化法检测60例喉鳞状细胞癌患者bcl-2、ki-67和p53的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:喉鳞状细胞癌中bcl-2、P53、Ki-67的阳性表达率分别为60.0%(36/60)、53.3%(32/60)、30.0%(18/60)。喉鳞状细胞癌患者的bcl-2、P53和Ki-67阳性表达与组织学分级及淋巴结转移密切相关,组织学分级越低,伴有淋巴结转移的喉鳞状细胞癌患者的bcl-2、P53和Ki-67阳性表达率明显高于其他组(P0.05),但与年龄、肿瘤大小并无显著相关性(P0.05)。结论:bcl-2、ki-67和p53是评价喉鳞状细胞癌预后的较好指标,三者联合检测有助于判断喉鳞状细胞癌的病理临床特征。     

端粒酶逆转录酶和c-myc基因在子宫内膜样癌及子宫内膜增生中的表达

目的　探讨端粒酶逆转录酶 (hTERT)及c myc基因在子宫内膜增生及癌变过程中的作用、意义及二者相关性。方法　所用标本包括 14例子宫内膜单纯增生 ,8例复合增生 ,10例不典型增生 ,42例内膜样癌 ,用原位杂交法检测hTERT和c mycmRNA表达。结果　 (1)hTERT在子宫内膜单纯、复合、不典型增生病变和内膜样癌中阳性结果分别 2 / 14、4/ 8、8/ 10和 92 9% (3 9/ 42 ) ,前两组均为弱阳性表达 ,后两组多为中度和强阳性 ,统计分析表明不典型增生病变和内膜样癌中hTERT表达高于单纯和复合增生 (P <0 0 5)。c myc在子宫内膜单纯、复合、不典型增生病变和内膜样癌中阳性结果分别 3 / 14、1/ 8、5/ 10和 54 8% (2 3 / 42 ) ,后两组c myc阳性率显著高于前两组 (P <0 0 5) ;不典型增生病变的c myc阳性水平高于单纯及复合增生 (P <0 0 5)。(2 )hTERT阳性水平与内膜样癌分化相关(P <0 15) ;c myc阳性率随内膜样癌浸润深度增加而递增 (P <0 0 5)。 (3 )子宫内膜增生和内膜样癌各组中hTERT与c myc表达均不相关 (P >0 0 5)。结论　hTERT及c myc基因过表达与子宫内膜不典型增生及恶性转化相关 ,并与内膜样癌演进以及不良预后有关 ,但其两者表达之间无相关性     

胶质瘤细胞ING1、人端粒酶逆转录酶及人端粒酶相关蛋白1基因表达的研究

目的 探讨胶质瘤细胞ING1、人端粒酶逆转录酶(hTERT)和人端粒酶相关蛋白1(hTP1)基因表达的意义。方法 用mRNA原位杂交及免疫组织化学染色方法观察了70例不同级别的人胶质瘤组织。结果 hTERT mRNA和蛋白的阳性表达率分别为88.6％和82.9％,hTP1 mRNA和蛋白的阳性表达率均为100％,这4种阳性肿瘤细胞的密度彼此间均呈正相关(r=0.758～0.882,P<0.0005),并均随肿瘤级别升高而相应增加(P<0.05～0.01)。ING1 mRNA和蛋白的阳性表达率分别为94.3％和88 6％,两种阳性肿瘤细胞密度间也呈正相关(r=0.831,P<0.0005),但两者均随肿瘤级别升高而相应减少(P<0.01),并均分别与hTERT mRNA和蛋白及hTP1 mRNA和蛋白的阳性肿瘤细胞密度呈负相关(r=-0.211～-0.384,P<0.05～0.001)。结论 胶质瘤细胞中hTERT和hTP1基因表达异常增加可能是抑制其ING1基因表达的重要因素,这3种基因的表达异常可能在胶质瘤发生及恶性进展过程中起重要作用。     

肝细胞肝癌中端粒酶、p53和CK19的表达及意义

目的探讨端粒酶、p53和CK19在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床病理意义。方法应用组织芯片技术和免疫组化SP法检测272例HCC及81例癌旁组织中端粒酶、p53和CK19的表达情况,并分析其与临床病理特征及预后的关系。结果 (1)272例HCC中端粒酶、p53和CK19的阳性率分别为56.62%(154/272)、12.90%(35/272)和14.30%(39/272),均高于癌旁组织的9.88%(8/81)、0(0/81)和0(0/81),差异均有显著性(P<0.01)。(2)端粒酶在HCC中的表达与术后无瘤生存时间、组织学分级、肿瘤直径、卫星灶、脉管癌栓及临床分期有关(P<0.05),与其他指标无关(P均>0.05);p53在HCC中的表达与术后无瘤生存时间、组织学分级、肝被膜浸润、血中AFP含量及淋巴结转移有关(P<0.05),与其他指标无关(P均>0.05);CK19在HCC中的表达与术后无瘤生存时间、组织学分级、肿瘤直径、肝硬化、卫星灶、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),与其他指标无关(P>0.05)。(3)三者在HCC中的表达互呈正相关(端粒酶与p53:r=0.137,P=0.024;端粒酶与CK19:r=0.497,P=0.001;p53与CK19:r=0.274,P=0.005)。(4)Kaplan-Meier生存分析结果显示:HCC组织中端粒酶、p53和CK19阳性的患者生存时间缩短。结论 HCC中端粒酶、p53和CK19的阳性表达与多种临床病理指标相关,三者均可作为HCC患者预后不良的判断因子。     

食管鳞状细胞癌中MCM2蛋白与Ki-67的表达及对比研究

目的 探讨微小染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance 2 protein,MCM2)与Ki-67在食管癌中的表达及两者表达的差异和相关性.方法 采用免疫组化EliVision方法,分别检测90例食管鳞状细胞癌组织中MCM2,Ki-67的表达,计算其标记指数(labeling index,LI),分析MCM2,Ki-67在食管鳞癌中的表达及两者之间的差异和相关性.结果 90例食管癌组织均表达MCM2及Ki-67抗原,其中MCM2 LI高于Ki-67,两者差异有统计学意义(P＜0.05).同时显示MCM2及Ki-67的表达与食管鳞癌的分化程度具有相关性,MCM2在食管鳞癌各级组织间表达差异均有统计学意义(P＜0.01),而Ki-67只在Ⅰ级与Ⅲ级食管鳞癌组织间差异有统计学意义(P＜0.01).并且MCM2与Ki-67在食管鳞癌中的表达呈正相关关系(P＜0.01).结论 MCM2是优于Ki-67的细胞增殖标记物,可用于对食管鳞癌的分级和判断食管鳞癌恶性程度的高低.     

星形细胞瘤端粒酶反转录酶及其mRNA的原位表达

目的 :观察端粒酶反转录酶 (TRT)及其mRNA在各级星形细胞瘤中的原位表达 ,分析其与病理分级和患者预后的关系。方法 :收集解放军总医院各级星形细胞瘤 47例 ,选取尸检正常脑组织 2例、脱髓鞘病变 7例作为对照。应用免疫组织化学方法检测石蜡包埋标本中TRT蛋白 (端粒酶反转录酶 )及Ki6 7的表达并用原位杂交方法检测TRTmRNA在石蜡切片及体外培养的人胶质母细胞株中的表达 ,对结果用计算机图像分析系统进行量化分析。结果 :端粒酶反转录酶蛋白在正常胶质细胞中呈阴性 ,在增生病例和 1、2、3、4级肿瘤病变中呈现阳性率和阳性强度递增的现象。相关分析显示它与Ki6 7的表达密切相关 (P <0 0 1) ,同时它与分级和预后相关 (P <0 0 1) ;端粒酶反转录酶mRNA的表达明显低于TRT蛋白水平的表达 ,但与TRT蛋白显著相关 (P <0 0 1) ,多形胶质母细胞瘤细胞株TRTmRNA呈中度阳性。结论 :TRT蛋白和TRTmRNA的表达与肿瘤的Ki6 7表达和病理分级密切相关 ,TRT蛋白还与预后相关 ,提示端粒酶TRT基因及其蛋白表达的水平可能与肿瘤的演进一致 ,TRTmRNA的表达与端粒酶活性是一致的     

PTK7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的研究酪氨酸蛋白激酶-7（PTK7）在食管鳞状细胞癌、癌旁组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌的发展、侵袭、淋巴结转移的关系,分析其在食管鳞癌中的诊断价值及预后变化。方法收集食管鳞状细胞癌标本80例及癌旁组织63例,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶连结（SP）法检测PTK7蛋白的表达,结合临床相关因素进行x2检验及Kaplan—meier等统计学分析。结果80例患者食管鳞状细胞癌组织中有45例PTK7蛋白表达阳性（X2=50．17,P〈0．01）,食管癌旁非典型增生及正常鳞状上皮中PTK7蛋白表达均阴性。PTK7表达与食管鳞癌的年龄、性别、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、浸润长度、临床分期等比较差异无统计学意义（P〉0．05）;与5年生存率比较差异亦无统计学意义（X2=0．2,P〉0．1）;当肿瘤组织PTK7蛋白表达综合免疫组化评分≥5分时,5年生存率有下降趋势（X2=3．35,P=0．06）。结论PTK7表达与食管鳞癌有关,当PTK7综合免疫评分≥5分时,5年生存率有下降趋势。利用检测PTK7的表达,有助于综合判断食管鳞癌的相关性和临床预后。