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相似文献
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1.
目的观察PEG启动子调控腺相关病毒介导的黑色素瘤分化相关基因7(MDA-7)在体内外抑制肝癌细胞的生物学活性,探讨重组腺相关病毒介导MDA-7基因用于肝癌基因治疗的应用前景。方法构建重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统,体外感染人肝癌细胞株HepG2细胞。Western印迹检测转染细胞内MDA-7蛋白;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡变化。构建肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,尾静脉注射rAAV-PEG-MDA-7,观察其对肝癌生长的抑制作用;ELISA方法检测血浆MDA-7蛋白浓度;TUNEL法分析MDA-7对肿瘤细胞的凋亡诱导情况;免疫组织化学分析MDA-7在肿瘤组织中的表达。结果重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可特异性转染HepG2细胞,MDA-7蛋白在HepG2细胞中高效表达,并呈时间依赖性。重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,G0/G1期细胞百分比明显增多,G2/M期的细胞显著减少(P〈0、05)。全身系统性给予rAAV-PEG-MDA-7后,血清中可持续检测到MDA-7蛋白,且注射后2周浓度达高峰(200ng/ml);肿瘤生长受抑制,抑瘤率为62%(P〈0、05);免疫组化结果显示MDA-7在肿瘤组织中表达;TUNEL结果显示rAAV-PEG-MDA-7可诱导肿瘤细胞凋亡。结论构建出的重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统具有良好的肿瘤靶向性,通过抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡发挥抗肝癌作用。  相似文献   

2.
目的 观察PEG启动子调控腺相关病毒介导的黑色素瘤分化相关基因7(MDA-7)在体内外抑制肝癌细胞的生物学活性,探讨重组腺相关病毒介导MDA-7基因用于肝癌基因治疗的应用前景.方法 构建重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统,体外感染人肝癌细胞株HepG2细胞.Western印迹检测转染细胞内MDA-7蛋白;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡变化.构建肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,尾静脉注射rAAV-PEG-MDA-7,观察其对肝癌生长的抑制作用;ELISA方法检测血浆MDA-7蛋白浓度;TUNEL法分析MDA-7对肿瘤细胞的凋亡诱导情况;免疫组织化学分析MDA-7在肿瘤组织中的表达.结果 重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可特异性转染HepG2细胞,MDA-7蛋白在HepG2细胞中高效表达,并呈时间依赖性.重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,GO/G1期细胞百分比明显增多,G2/M期的细胞显著减少(P<0.05).全身系统性给予rAAV-PEG-MDA-7后,血清中可持续检测到MDA-7蛋白,且注射后2周浓度达高峰(200 ng/m1);肿瘤生长受抑制,抑瘤率为62%(P<0.05);免疫组化结果显示MDA-7在肿瘤组织中表达;TUNEL结果显示rAAV-PEG-MDA-7可诱导肿瘤细胞凋亡.结论 构建出的重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统具有良好的肿瘤靶向性,通过抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡发挥抗肝癌作用.  相似文献   

3.
目的:研究奥曲肽联合奥美拉唑治疗上消化道出血的效果和只用奥美拉拖唑治疗上消化道出血的效果对比。方法把我院收治的200例上消化道患者随机分成研究组和对照组,其中研究组110例,对照组90例,研究组采用奥曲肽联合奥美拉唑进行治疗,对照组只是用奥美拉唑治疗。结果研究组显效率为77.30%,对照组显效率为66.67%;研究组治疗有效率为97.27%,对照组治疗有效率为93.33%;结果显示,研究组治疗效果明显高于对照组,两组比较式无明显的统计学差异(P<0.05),具有统计学意义。结论经过研究显示,奥曲肽联合奥美拉唑治疗上消化道出血的疗效明显要高于单独是用奥美拉唑治疗上消化道出血的疗效,治疗效果比较明显,这种治疗方法可以在临床上推广。  相似文献   

4.
目的:观察奥曲肽(OCT)对Bel7402人肝癌细胞上生长抑素受体2(SSTR2)的调节,以及对OCT抑瘤作用的影响。方法: 以MTT法测量OCT对Bel7402细胞增殖的影响,光镜下观察细胞形态的变化。以细胞迁移实验和粘附实验观察细胞侵袭和粘附能力的影响。以流式细胞仪检测细胞表面SSTR2的表达和细胞周期的影响。以裸鼠人肝癌种植模型,观察OCT对种植瘤生长的影响,以免疫组化和半定量RT-PCR观察SSTR2mRNA和蛋白的表达。结果: OCT处理的7402细胞增殖能力和细胞形态无明显改变,细胞的侵袭和粘附能力明显下降,细胞生长静止期(G0/G1)的比例显著增加,但未见凋亡峰,细胞表面SSTR2蛋白的表达明显受抑,但SSTR2mRNA的表达与对照组比较无显著差异;裸鼠人肝癌原位种植瘤在OCT治疗后生长受到明显抑制,种植瘤内SSTR2mRNA和蛋白的表达显著增加。结论: SSTR2是OCT抑制肝癌的重要介导物,但它同样也受到OCT的调节,即短期OCT处理引起肝癌细胞上SSTR2脱敏、内化,OCT的功效受到部分抑制;长期持续的治疗可以导致肝癌细胞SSTR2表达的增加,有利于OCT抑制肝癌作用的更好发挥。  相似文献   

5.
生长抑素及奥曲肽的肝细胞保护作用及其机制研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
目的: 探讨生长抑素(SST)及其类似物奥曲肽(OCT)对大鼠肝细胞的保护作用及其机制。方法: 以原代培养肝细胞建立无水乙醇/四氯化碳(CCl4)细胞损伤模型,观察SST及OCT预处理对培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量的影响。此外,将75只SD大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化模型组及大、中、小剂量SST治疗组。除正常对照组外均以40%CCl4皮下注射8周,期间各SST治疗组分别给予SST 200 μg·kg-1·d-1、100 μg·kg-1·d-1、50 μg·kg-1·d-1。采用酶试剂法、末端核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷原位缺口末端标记法(TUNEL)分别检测肝功能及肝细胞凋亡指数。结果: 经SST(10-8-10-6 mol/L)及OCT(10-7-10-5 mol/L)预处理后,损伤模型组肝细胞的培养上清液中ALT、AST水平显著下降。不同剂量SST治疗还能明显降低肝纤维化大鼠的血清ALT、AST、碱性磷酸酶(ALP)及总胆红素(TBIL)水平,提高血清清蛋白(ALB)水平,抑制肝细胞凋亡,其中小剂量SST治疗组最佳。结论: SST及OCT可减轻CCl4引起的肝细胞损伤,改善肝功能,并抑制肝细胞凋亡,可能在肝纤维化的防治中发挥重要作用。  相似文献   

6.
 目的:研究慢病毒介导的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)内皮分化功能的影响。方法:用密度梯度离心结合贴壁法培养大鼠骨髓MSCs,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs,未转染MSCs作为对照,应用ELISA法检测CGRP蛋白表达;实验分为转染Lenti-CGRP的MSCs(CGRP)组、转染Lenti-CGRP的MSCs+CGRP受体拮抗剂(CGRP8-37)组(CGRP +CGRP8-37)及未经转染的对照组。应用免疫细胞化学检测细胞CD31和Ⅷ因子相关抗原的表达以鉴定其分化能力;细胞计数法观察转染CGRP后MSCs增殖的影响;Matrigel实验观察转染CGRP对MSCs形成管腔样结构能力的影响。结果:MSCs转染CGRP基因经诱导分化后的CD31和Ⅷ因子相关抗原阳性细胞数量增多,与对照组相比有显著差异(P<0.05);转染CGRP组细胞数量增长较快,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);Matrigel实验显示转染CGRP组细胞微血管新生明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。而CGRP+CGRP8-37组上述作用明显被抑制。结论: 转染CGRP基因能促进MSCs向内皮分化,并能促进内皮细胞增殖,在一定的条件下,可促进微血管新生。  相似文献   

7.
目的:本研究旨在观察局部应用奥曲肽对福尔马林诱发的痛反应以及脊髓背角磷酸化的c AMP反应元件结合蛋白(phosphorylated c AMP response element binding protein,p CREB)表达的影响。方法:实验采用行为学观察和外周神经单纤维记录的方法,研究足底注射2.5%福尔马林50μl诱发的SD大鼠痛反应;同时采用免疫组织化学染色观察脊髓背角p CREB的表达。结果:福尔马林足底注射可以引起大鼠典型的双相性痛行为,敏化C和Aδ类初级传入单位,包括机械阈值的下降和传入放电率的增加(P0.001);同时福尔马林注射还可以明显增加双侧脊髓背角p CREB的表达,以注射侧最为显著(P0.05和P0.01)。足底注射生长抑素类似物奥曲肽(20μmol/L,50μl)可明显降低福尔马林诱发的第二相特异性伤害行为评分,减少C和Aδ类单位的传入放电率;同时局部应用奥曲肽还可以部分抑制福尔马林诱发的脊髓背角p CREB表达增加。结论:结果提示,局部应用奥曲肽可以显著抑制福尔马林诱发的痛反应,脊髓背角p CREB参与了此过程。  相似文献   

8.
罗非昔布与奥曲肽联合应用增强抑制人胃癌细胞株的生长   总被引:3,自引:1,他引:3  
探讨罗非昔布联合奥曲肽能否增强对胃癌生长的抑制及初步机制。采用3H 胸腺嘧啶掺入观察药物对胃癌细胞DNA合成的影响。应用中效原理分析两药联用的效应性质。观察罗非昔布联合奥曲肽对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长的作用。免疫组化检测胃癌PCNA表达 ,TUNEL法检测细胞凋亡。罗非昔布联合奥曲肽在体外能协同抑制胃癌细胞的DNA合成。罗非昔布对胃癌的抑瘤率为 89 7% ,显著低于联合组 (98 8% ) (P <0 0 1)。罗非昔布使体外或体内胃癌细胞PCNA指数下降 6 3%或 4 3% ,联合奥曲肽后下降 83 3%或 79 3% (P <0 0 5 )。罗非昔布组胃癌移植瘤细胞凋亡指数为 (4 6 6 0± 3 4 2 ) % ,显著高于对照组 (8 5 6± 2 34) % (P <0 0 1) ,显著低于联合组 (78 2±6 5 ) % (P <0 0 1)。罗非昔布联合奥曲肽通过增加胃癌细胞凋亡及抑制细胞增殖从而增强对胃癌生长的抑制。  相似文献   

9.
目的观察奥曲肽联合立止血治疗肺结核大咯血的疗效。方法肺结核并大咯血患者52例,随机分为治疗组与对照组。治疗组奥曲肽与立止血联合使用,对照组仅垂体后叶素,观察其疗效和不良反应。结果治疗组显效率为63.0%,总有效率92.6%;对照组显效率40.0%,总有效率76.0%。两组有效率、显效率有显著差异(P<0.05)。结论奥曲肽联合立止血治疗肺结核大咯血比单用垂体后叶素治疗止血速度快,疗效显著,且副作用小。  相似文献   

10.
目的:研究上消化道出血(Upper gastrointestinal,UGH)患者使用奥曲肽(Octreotide,Oct)联合兰索拉唑(Lansoprazole,LPZ)的临床疗效.方法:选择2018年1月至2018年12月于我院就诊的UGH患者106例,以随机数表法分为观察组和对照组,每组53例.对照组给予LPZ ...  相似文献   

11.
目的: 探讨甲胎蛋白(ɑ-fetoprotein,AFP)mRNA和米托蒽醌抗性基因(Mitoxantrone-resistant 7,MXR7)mRNA作为游离癌细胞(isolated tumor cells,ITC)的标志物在肝癌肝移植患者外周血中的表达情况及其与术后肿瘤复发和转移的关系。方法: 以2002年4月至2003年12月期间的53例肝癌肝移植患者为对象,通过建立稳定可靠的实时荧光定量RT-PCR检测方法来定量检测肝癌患者外周血全细胞中AFP mRNA和MXR7 mRNA在整个肝移植术围手术期的表达和动态变化情况,并与术后肝癌复发和转移进行相关分析。 结果: 将研究对象分为肝癌移植组(53例)、晚期肝癌组(8例)、良性肝病组(26例)、正常对照组(10例),检测发现在肝移植术前,晚期肝癌组的AFP mRNA和MXR7 mRNA其表达率均达到100%,在肝癌移植组中表达率分别为57.7%和53.6%。2者均明显高于在良性肝病组(表达率为19.2%和0)和正常对照组(表达率均为0)(P<0.05)。同时在2者的阳性结果表达水平上,晚期肝癌组和肝癌组要明显高于良性肝病组和正常对照组(P<0.05),前2者阳性结果定量水平达到1×1012copies/g RNA,是后2者定量水平的100-200倍。围手术期AFP mRNA和MXR7 mRNA的表达无论是表达率还是阳性结果表达水平,均以在术中的检测标本为最高,而术后1周为次之。术后出现2次以上的持续性的AFP mRNA和MXR7 mRNA的表达往往提示肝癌的复发和转移,较之移植术后没表达或一过性升高的病例,其差异有统计学意义(P<0.05),而术前和术中单次的AFP mRNA和MXR7 mRNA的表达与否则对术后肝癌复发和转移无明显影响(P>0.05)。结论: AFP mRNA和MXR7 mRNA可以作为肝癌ITC细胞的标志物,具有较好的特异性。术后血全细胞检测出现2次以上的持续性的AFP mRNA和MXR7 mRNA的表达可以有效预测肝癌肝移植术后肿瘤复发和转移。  相似文献   

12.
骨桥蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床病理意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
C中OPN表达评分明显高于高分化HCC(P<0.05).存在转移的HCC中OPN表达评分明显高于无转移者(2.65±1.83比1.30±1.71,P<0.01).结论 HCC中OPN的表达与其临床病理有关,提示OPN可能是HCC转移复发的一个潜在指标.  相似文献   

13.
大蒜素抗肝癌的免疫机制研究   总被引:2,自引:3,他引:2       下载免费PDF全文
目的: 利用鼠肝癌动物模型,评价大蒜素在体内抗肝癌的有效性及可能的免疫应答机制。方法:在BALB/c小鼠右侧腋部皮下接种MM45T.Li细胞建立实验动物模型,将40只BALB/c小鼠随机分成两组,模型组和大蒜素治疗组,每组动物各20只,予接种后第2 d腹腔内注射给药,分别注射0.2 mL 0.9%NS和0.2 ml (1.95 kg/L)大蒜素液,每天1次,连续14 d;每2 d持续测量肿瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线;于末次给药第2 d处死动物,称取肿瘤重量,计算肿瘤生长抑制率;用HE染色法、免疫组织化学法检测肿瘤组织中淋巴细胞浸润情况;用流式细胞仪检测小鼠外周血中T淋巴细胞亚群。结果:与模型组相比,大蒜素治疗组小鼠移植瘤生长明显受到抑制;肿瘤组织HE染色示大蒜素治疗组肿瘤组织中有较多淋巴细胞浸润,且能从形态学上观察到巨噬细胞及中性粒细胞在肿瘤组织中浸润,而模型组肿瘤组织中淋巴细胞浸润较少;免疫组织化学法检测到大蒜素治疗组肿瘤组织中有较多CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润;流式细胞仪检测到大蒜素治疗组小鼠外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比分别为52.59%±4.93%和18.94%±1.87%,明显高于模型组的32.34%±6.40%和12.01%±1.06%(P<0.05)。结论: 大蒜素可能通过活化CD4+和CD8+T淋巴细胞诱导抗肿瘤免疫作用抑制肿瘤细胞的生长。  相似文献   

14.
目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3( GPC3)免疫组织化学染色在肝细胞癌病理诊断的应用价值。方法 制作14个含731例肝肿瘤和肿瘤旁肝组织芯片,其中肝细胞癌357例、胆管癌26例、肝细胞癌癌旁肝组织包括肝硬化171例、血管瘤旁肝组织93例、肝转移癌84例。全部病例采用免疫组织化学检测GPC3(1G12克隆)蛋白表达,实验设阳性对照。结果 72.0%的肝细胞癌(257/357)GPC3呈阳性反应,其余374例非肝细胞癌病例均为阴性,包括胆管癌、肝转移癌、肝细胞癌癌旁肝组织(包括肝硬化和血管瘤旁肝组织)。GPC3阳性率在不同的肝细胞癌组织学分级的差异有统计学意义(P<0.01),阳性率高低排列为Ⅲ级(77.1%,64/83)、Ⅱ级(73.3%,187/255)、Ⅰ级6/12和Ⅳ级(0)为阴性。结论 GPC3免疫组织化学检测是肝细胞癌诊断的良好指标,敏感性达72.0%;也是区别瘤旁肝组织和肝转移癌的鉴别诊断指标,其特异性达100%。  相似文献   

15.

Background/Aims

Needle-track seeding is a rare but important complication of diagnostic and therapeutic ultrasound (US)-guided procedures in hepatocellular carcinoma (HCC). We examined the frequency of needle-track seeding after US-guided percutaneous ethanol injection (PEI), fine-needle aspiration biopsy (FNAB), and percutaneous transhepatic biliary drainage (PTBD) in order to determine the appropriate treatment for needle-track seeding and its clinical outcome.

Methods

We analyzed the clinical characteristics and treatment outcomes in eight patients who experienced needle-track seeding from HCC after an US-guided procedure (FNAB, PEI, or PTBD) between January 1990 and July 2004.

Results

Seven (0.14%) of 5,092 patients who experienced needle-track seeding (2 after PEI, 4 after FNAB, and 1 after PTBD) during the study period and 1 other patient who experienced needle-track seeding recently were recruited for this study. Two of the eight patients underwent mass excision and the other six patients underwent en-bloc wide excision for the needle-track seeding. Tumors recurred in the needle-tracks in both patients who underwent mass excision but not in the six patients who underwent en-bloc wide excision. Mortality occurred in three patients who experienced the recurrence and progression of intrahepatic HCC.

Conclusions

The incidence of needle-track seeding after US-guided procedures in HCC was 0.14%. En-bloc wide excision seems to be the optimal treatment for minimizing the probability of tumor recurrence due to needle-track seeding.  相似文献   

16.
肝细胞癌中DcR3表达与癌细胞凋亡的关系研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
目的探讨诱捕受体3(decoy receptor 3,DcR3)蛋白在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其与癌细胞凋亡和HCC预后的关系。方法应用免疫组织化学(EnVision法)及和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术检测43例HCC,16例非癌肝组织(单纯性肝硬化及肝血管瘤周围正常肝组织)中DcR3蛋白的表达及凋亡情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果DcR3明确定位于肝细胞胞质内;HCC组织中的DcR3蛋白的阳性率为74.42%(32/43),明显高于非癌肝组织43.75%(7/16,P〈0.05);HCC中有转移癌组DcR3阳性率为100%(22/22),明显高于无转移组52.94%(9/17,P〈0.01);DcR3蛋白的表达与AFP水平(r=0.444,P〈0.01)、门静脉癌栓(r=0.414,P〈0.01)有关,与年龄、性别、有无肝硬化、包膜浸润、肿瘤结节数及分化程度无关(P〉0.05)。HCC中细胞凋亡指数[AI(0.78±0.64)%]明显低于非癌肝组织[(3.32±1,81)%,P〈0.01];HCC临床TNM分期Ⅰ、Ⅱ期AI(1.03±0.69)%高于Ⅲ、Ⅳ期[(0.52±0.48)%,P〈0.01];HCC无转移组AI(1.10±0.72)%高于转移组[(0.44±0.27)%,P〈0.01];AI与AFP水平(r=-0.468,P〈0.01)、门静脉癌栓(r=-0.434,P〈0.01)、包膜浸润(r=-0,331,P〈0.05)有关,与年龄、性别、有无肝硬化、肿瘤结节数及分化程度无关(P〉0.05)。在HCC和非癌肝组织中,DcR3阳性者的AI均分别低于阴性者的AI(均P〈0.01)。结论DcR3表达可影响凋亡并在HCC的发生发展中起重要作用;检测DcR3蛋白与AI有助于判断HCC患者预后。  相似文献   

17.
目的了解人食管癌相关基因4( ECRG4)在人肝细胞肝癌组织和肝癌细胞系中的表达情况,探讨ECRG4对肝癌细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法提取24例配对肝细胞肝癌组织和癌旁肝组织的总RNA以及正常肝细胞系QSG7701和肝癌细胞系HepG2的总RNA和总蛋白,分别利用即时荧光定量PCR( RT-qPCR)和Western blot法检测ECRG4的表达;构建ECRG4的真核表达质粒ECRG4-pcDNA3.1,转染肝癌细胞系HepG2,进行体外的细胞增殖、凋亡以及迁移实验。结果与癌旁肝组织相比,在肝细胞肝癌组织中ECRG4 mRNA表达下调或缺失(98.5%,23/24,P<0.01);和正常肝细胞系QSG7701相比,ECRG4 mRNA在肝癌细胞系HepG2中的表达明显下调( P<0.05)并且其蛋白表达水平也明显降低。转染ECRG4表达质粒后HepG2细胞的增殖和迁移能力明显低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。结论 ECRG4在肝细胞肝癌中表达下调,在体外肝癌细胞系中过表达ECRG4可抑制细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡,ECRG4可能是肝细胞肝癌潜在的抑癌基因,有望为肝细胞肝癌分子靶向治疗提供新策略。  相似文献   

18.
肝癌术后早期应用胸腺肽α 1对T淋巴细胞亚群的影响   总被引:1,自引:1,他引:1  
目的:探讨肝癌患者术后早期应用胸腺肽α1对T淋巴细胞亚群的影响。方法: 46例肝癌手术患者, 随机分治疗组(23例)和对照组(23例), 治疗组于术后1、3、5 d皮下注射胸腺肽α1 1.6 mg,观察2组术前后第1、4、7 d CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的变化情况。结果:(1)组内比较:对照组术后CD4+、CD4+/CD8+低于术前(P<0.05),术后第1、4、7 d CD8+高于手术前(P<0.05)。治疗组CD3+、CD4+、 CD4+/CD8+术后与术前相比无显著差异;CD3+、CD4+/CD8+术后第1、7 d比较有显著差异(P<0.05)。(2)组间比较:CD4+、CD4+/CD8+治疗组高于对照组(术后第1、4、7 d均P<0.05),治疗组CD8+细胞百分率低于对照组(术后第1、4、7 d均P<0.05);治疗组CD3+细胞百分率高于对照组(术后第4、7 d P<0.05)。结论: 手术对肝癌患者术后T淋巴细胞免疫功能有抑制作用,胸腺肽α1对T淋巴细胞免疫功能有调节作用。  相似文献   

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