散寒除湿法对寒湿痹阻型类风湿关节炎患者Th17/Treg 细胞平衡的影响

目的:观察基于散寒除湿法立方的穴位贴敷治疗类风湿关节炎(RA)寒湿痹阻证患者的临床疗效及对辅助性T细胞17 (Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法:将102例RA患者随机分为对照组与治疗组。对照组采用甲氨蝶呤联合来氟米特治疗,治疗组在对照组基础上加用中药穴位贴敷治疗。比较2组治疗前后疾病活动度评价表(DAS28)评分及中医证候积分。采用流式细胞术检测患者外周血Th17、Treg细胞的表达比例,采用酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-17 (IL-17)水平。结果:治疗组总有效率为92.31%,高于对照组的76.00%(P0.05)。与同组治疗前比较,治疗后2组关节压痛数、关节肿胀数、视觉模拟评分(VAS)、红细胞沉降率(ESR)、DAS28评分、外周血Th17细胞比例、血清IL-17含量均降低(P0.05),Treg细胞比例、IL-10含量均升高(P0.05)。与对照组治疗后比较,治疗组关节肿胀数、ESR、DAS28评分、外周血Th17细胞比例、IL-17含量均较低(P0.05),Treg细胞比例、IL-10含量均较高(P0.05)。结论:基于散寒除湿法立方的穴位贴敷能有效改善活动期寒湿痹阻型RA患者的临床症状,纠正RA患者体内Th17/Treg细胞失衡状态。     

逍遥解郁方对卒中后抑郁患者Th17/Treg平衡及其相关细胞因子的影响

目的:观察逍遥解郁方治疗卒中后抑郁(PSD)的效果及对辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)及其相关细胞因子的影响。方法:将106例PSD患者按照随机数字表法分为2组,每组53例,对照组予以盐酸氟西汀胶囊口服,治疗组在对照组用药基础上加用中药逍遥解郁方口服,两组疗程均为8周。比较两组治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分,并比较外周血Th17、Treg含量和Th17/Treg值,并比较两组血清白细胞介素(IL)-17A、IL-6、IL-10、神经生长因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)水平、多巴胺(DA)、5羟色胺(5-HT)水平。结果:治疗后治疗组HAMD、NIHSS评分低于对照组(P0.01),MoCA评分高于对照组(P0.01);血清BDNF、CNTF、DA、5-HT水平均高于对照组(P0.01)。治疗后治疗组外周血Th17、Th17/Treg值、血清IL-17A、IL-6水平低于本组治疗前和对照组(P0.01),外周血Treg、血清IL-10高于本组治疗前和对照组(P0.01),差异均有统计学意义。结论:逍遥解郁方有利于改善神经营养因子和神经递质的表达,促进神经功能恢复,疏解抑郁情绪,治疗PSD效果显著,其机制可能与调节Th17/Treg细胞失衡,调控Th17、Treg相关细胞因子的表达有关     

黄连素对阿尔兹海默症大鼠Th17、Treg亚群比例及脑组织炎性细胞因子的影响

目的探究黄连素对阿尔兹海默症大鼠外周血辅助性T细胞(T helper cell,Th) 17、调节性T细胞(regulatory T-cell,Treg)亚群比例,以及脑组织炎性细胞因子水平的影响。方法大鼠分为假手术组、模型组、黄连素组,除假手术组外,其余各组采用腹腔注射D-半乳糖联合Aβ25-35海马注射的方法建立阿尔兹海默症大鼠模型,药物干预4周后,留取标本,流式细胞技术检测两组大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例,实时荧光定量PCR检测两组大鼠海马组织炎性细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-17、IL-22、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-βmRNA转录水平。结果 (1)与假手术组相比,模型组Th17、Treg细胞比例升高(P0.05),与模型组相比,黄连素组大鼠外周Th17细胞比例降低(P0.05);(2)与假手术组相比,模型组大鼠海马组织促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22、TNF-α转录水平均显著升高(P0.01),抑炎性细胞因子TGF-β转录水平显著降低(P0.01);与模型组相比,IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α转录水平均降低(P0.05),TGF-β转录水平升高(P0.05)。结论黄连素能降低阿尔兹海默症大鼠外周血Th17亚群比例,减轻脑组织内炎性反应。     

放化疗联合热疗治疗中晚期宫颈癌的疗效及对CD4~+T细胞平衡失调的影响

目的观察同步热放化疗治疗中晚期宫颈癌的临床疗效及对体内CD4~+T细胞平衡失调的影响。方法将200例中晚期宫颈癌患者随机分为2组,同步放化疗组(CRT组)给予同步放化疗治疗,深部热疗加同步放化疗组(H+CRT组)在同步放化疗基础上给予盆腹腔深部局部热疗,比较2组临床疗效及生存期。同时选择同期健康体检女性100例作为健康对照组,检测健康对照组及CRT组、H+CRT组治疗前后外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞百分率及IFN-γ、Fox P3蛋白水平和IL-4、IL-17水平。结果 H+CRT组临床总有效率明显高于CRT组(P0.05),生存期明显长于CRT组(P0.05)。与健康对照组比较,宫颈癌患者外周血Th1细胞百分率、Th17/Treg比值及IFN-γ蛋白水平均明显降低(P均0.05),Th17、Treg细胞百分率及Fox P3蛋白水平和IL-17、IL-4水平均明显升高(P均0.05),虽然Th2细胞百分率与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05),但是Th1/Th2比值明显低于健康对照组(P0.05),出现Th1/Th2漂移。治疗后,Th1、Th2、Th17、Treg细胞百分率及IFN-γ、Fox P3蛋白水平和IL-4、I-17水平均明显恢复(P均0.05),且H+CRT组各指标恢复程度明显优于CRT组(P均0.05)。结论中晚期宫颈癌患者体内出现CD4~+T细胞平衡失调,热疗可以通过纠正CD4~+T细胞的水平达到抗肿瘤的目的。     

养阴方对HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠Th17、Treg细胞失衡的作用研究

目的考察在热休克蛋白(HSP)65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE~(-/-)小鼠分别饲喂普通和高脂饲料,并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养阴方对AS模型小鼠血脂、斑块、Th17细胞与Treg细胞比例(Th17/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术测定抗凝血中IL-17A~+CD4~+Th17及Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-2、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10水平;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定脾脏中Stat3、Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、Stat5a mRNA表达;Western blotting法测定脾脏中磷酸化STAT3(pSTAT3)、磷酸化STAT5(pSTAT5)、FOXP3和主动脉中pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P0.01),HDL显著升高(P0.05);主动脉斑块面积明显减小(P0.01);外周血IL-17A~+CD4~+Th17细胞显著减少(P0.05),Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg显著增加(P0.05),Th17/Treg值大幅下降(P0.01);血清IL-6水平显著下降(P0.05),IL-2(P0.01)、TGF-β(P0.05)、IL-10(P0.05)水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P0.01),pSTAT5(P0.01)和FOXP3(P0.05)蛋白水平上升;主动脉Stat3 mRNA(P0.01)和pSTAT3蛋白(P0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠的高脂血症及AS,同时调节外周血中Th17/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Th17、Treg的效应可能与减弱的IL-6/pSTAT3和增强的IL-2/pSTAT5信号有关。     

穴位埋线联合水飞蓟宾对非酒精性脂肪性肝炎患者免疫失衡和炎症因子的影响

目的 探讨穴位埋线联合水飞蓟宾对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者免疫失衡和炎症因子的影响。方法 将2018年6月—2020年4月在湖北省中医院消化内科就诊的166例NASH患者随机分为水飞蓟宾组(SIL组)和联合组,SIL组82例予以水飞蓟宾胶囊口服治疗,联合组84例予以穴位埋线联合水飞蓟宾胶囊口服治疗,2组均治疗3个月。比较2组患者治疗前后肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP)水平]、外周血CD4⁺ T淋巴细胞中辅助性T淋巴细胞17(Th17)和调节性T淋巴细胞(Treg)所占比例及Th17/Treg比值、炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果 治疗后2组患者ALT、AST、GGT、外周血Th17细胞比例、Th17/Treg比值、IL-6、IL-17、TNF-α均较治疗前显著降低(P均<0.05),Treg细胞比例、IL-10均较治疗前显著升高(P均<0.05),且联...     

开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血Th细胞平衡及相关细胞因子表达的影响

目的：探究开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞（Treg）平衡及相关细胞因子表达的影响。方法：将72只大鼠随机分为空白对照组（16只）、模型组（56只）。所有大鼠背部脱毛后,空白对照组大鼠外涂凡士林,模型组大鼠予5%咪喹莫特乳膏外用+大黄灌胃建立阳虚型银屑病SD大鼠模型。将50只造模成功大鼠随机分为模型对照组、雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组,每组10只。各组大鼠予以相应药物灌胃干预,1次/d,连续7 d。观察并记录大鼠背部皮损银屑病面积与严重性指数（PASI）评分,流式细胞仪检测外周血Th17/Treg比例,ELISA法检测白介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平,并取背部皮肤行病理组织切片观察。结果：与模型对照组比较,雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组PASI评分、Th17/Treg比例、IL-17水平下降（P<0.05）,TGF-β水平上升,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：开玄泄浊方治疗阳虚型银屑病的机制可能与调节Th17/Treg比例及相关因子的表达有关。     

益肾安宫方治疗复发性自然流产临床观察及对外周血 Th17 和 Treg 的影响

目的:观察益肾安宫方治疗复发性自然流产(RSA)的临床疗效及对患者外周血辅助性T细胞17 (Th17)和调节性T细胞(Treg)的影响,进一步阐明益肾安宫方治疗RSA的机制。方法:将RSA患者60例随机分为治疗组与对照组,每组各30例。对照组根据血孕酮水平给予黄体酮针肌肉注射;治疗组在对照组治疗的基础上,辨证选用益肾安宫Ⅰ号方、益肾安宫Ⅱ号方内服治疗。另选正常早孕期女性30例为空白对照组。观察患者临床疗效,采用流式细胞仪测定各样本中Th17和Treg细胞比例。结果:总有效率治疗组为93.33%,对照组为73.33%,2组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗前,治疗组及对照组患者外周血Th17较空白对照组升高(P 0.05),Treg值降低(P 0.05);而治疗组与对照组Th17、Treg值组间比较,差异无统计学意义(P 0.05)。治疗后,治疗组患者外周血Th17值降低、Treg值升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P 0.05);而与空白对照组比较,差异无统计学意义(P 0.05)。治疗后,对照组Th17、Treg值与治疗前比较改善不大(P 0.05);而与空白对照组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。结论:益肾安宫方有助于降低RSA患者外周血Th17细胞比例,升高RSA患者外周血Treg细胞比例,维持免疫耐受状态,有利于妊娠结局。     

重症脑梗死患者血清免疫炎性细胞因子水平变化研究

目的分析重度脑梗死患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例变化,比较Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例与患者病情严重程度GCS评分相关性。方法选择重度急性脑梗死患者80例,依据入院后24 h病情严重程度评分(格拉斯哥昏迷评分,Glasgow Coma Scale,GCS)将患者分为重度组(30例)与特重组(50例)。酶联免疫吸附法检测发病后24 h患者外周血清中hs-CRP、IL-6、TNF-α水平。流式细胞术检测外周血清中Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例变化,采用Pearson直线相关分析Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例与GCS评分之间相关性。结果发病后,重度组与特重组患者hs-CRP、IL-6、TNF-α水平比较差异有统计学意义。外周血Treg/CD4+细胞百分比、Th17/CD4+T细胞比例2组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清Th17/CD4+T细胞百分比与GCS评分呈正相关(r=5.981,P0.05),血清Treg/CD4+细胞百分比与GCS呈直线正相关(r=-4.872,P0.05)。结论急性重症脑梗死患者发病后体内存在严重的免疫抑制炎症反应。主要表现为炎性细胞因子hs-CRP、IL-6、TNF-α水平上升以及Treg/CD4+细胞比例升高、Th17/CD4+T细胞比例下降。免疫调节性T细胞、抑制性T细胞比例变化与临床病情严重程度存在相关性。     

犀角地黄汤对免疫性血小板减少症模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞及Th17细胞的影响

目的探讨犀角地黄汤对免疫性血小板减少症(ITP)模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞(Treg)、Th17细胞及相关细胞因子的影响。方法将48只大鼠随机分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组及犀角地黄汤低、中、高剂量组,每组8只。除正常组外,其余组均采用腹腔注射兔抗大鼠血小板血清(APS)建立ITP模型,于造模开始后第7天开始,各给药组灌胃给予相应剂量药物,连续14 d。采用血细胞计数仪检测造模前、灌胃前、灌胃结束后各组大鼠外周血中血小板数目;灌胃结束后,采用流式细胞术检测各组大鼠Treg、Th17细胞比例,采用实时荧光定量PCR法检测淋巴细胞Foxp3 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、IL-35水平。结果灌胃结束后,与模型组比较,犀角地黄汤各剂量组大鼠血小板数目明显上升(P均0.05),外周血淋巴细胞中Treg所占比例、Foxp3 mRNA相对表达量及IL-35水平均明显上升(P均0.05),而Th17细胞所占比例及IL-17水平均明显下降(P均0.05),且具有剂量依赖性;犀角地黄汤高剂量组各指标与醋酸泼尼松组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论犀角地黄汤可能通过上调ITP大鼠外周血中Treg细胞表达,下调Th17细胞表达,维持Treg/Th17平衡,进而调节相关细胞因子IL-17、IL-35的表达发挥抗血小板减少作用。     

清营活血汤对原发性胆汁性肝硬化肝胆湿热型的疗效以及对外周血Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨清营活血汤治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)肝胆湿热证的临床效果以及对血清Th17/Treg水平的影响。方法:选择PBC肝胆湿热证病例共98例,参照数字表法随机分为对照组和治疗组各49例;对照组口服复方甘草酸苷片,2片/次,3次/d,连服2周后,口服熊去氧胆酸胶囊,13~15 mg·kg~(-1)·d~(-1),3次/d,餐后口服;治疗组在对照组用药基础上给予清营活血汤治疗,1剂/d,常规水煎煮2次,分早晚内服;所有患者均给予24周治疗。比较两组中医临床症状积分;分析两组患者治疗24周后的临床疗效;比较两组患者外周血中辅助性T细胞17(Th17)细胞和调节性T细胞(Treg)水平;检测两组血清白细胞介素(IL)-17,IL-6和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果:治疗组治疗后中医临床症状积分均明显低于对照组(P0.01);治疗组治疗后总反应率为93.88%,对照组为77.55%,治疗组明显高于照组(P0.05);治疗组治疗后患者外周血中Th17细胞明显低于对照组,而Treg细胞明显高于对照组(P0.01);治疗后治疗组患者血清IL-17和IL-6水平明显低于对照组,而TGF-β显著高于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论:在西医治疗基础上,清营活血汤治疗PBC肝胆湿热证可显著改善患者临床症状,提高临床疗效,调节外周血Th17/Treg平衡及其细胞因子水平可能是其发挥疗效的机制之一。     

清热活血方对胶原诱导性关节炎大鼠肠道微生态及Th17/Treg平衡的影响

目的通过观察清热活血方对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠的肠道微生态和Th17/Treg平衡的影响,探讨其治疗类风湿关节炎(rhumatoid arthritis,RA)的机制。方法SD大鼠30只,采用随机数字表法分为与正常组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、清热活血方组、益生菌组,每组6只。除正常组外,其余组大鼠均以Ⅱ型胶原和完全弗式佐剂的混合乳化剂为抗原,尾根部注射制作CIA模型。MTX组每周给予MTX 1.0 mg/kg;清热活血方组和益生菌组每晨分别给予20 g/kg清热活血方和350mg/kg益生菌。连续灌胃4周后,采用16Sr DNA技术对大鼠肠道粪便菌群测序并分析;采用流式细胞术检测各组大鼠脾脏辅助性细胞亚群Th17(CD4~+IL-17~+)细胞和调节性T细胞Treg(CD4~+CD25~+Foxp3~+)的比例。结果与正常组比较,模型组菌群丰度降低(P0.05,P0.01),Th17水平升高,Treg水平降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,清热活血方组菌群丰度升高(P0.05,P0.01),Th17水平降低,Treg水平升高(P0.05);MTX组和益生菌组Treg水平均上调(P0.05),但下调Th17水平不明显(P0.05)。结论清热活血方缓解RA的关节症状可能与其改善肠道菌群失调,调节机体Th17/Treg免疫失衡有关。     

益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病稳定期吸烟患者外周血Th17/Treg免疫平衡的影响

目的观察益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期吸烟患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响。方法将172例COPD稳定期吸烟患者随机分为2组。对照组86例采用常规西医治疗;治疗组86例在对照组治疗基础上联合益气固表丸治疗。2组均治疗3个月。比较2组治疗前后外周血Th17/Treg比例,血清炎症因子[白细胞介素8(IL-8)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1 s用力呼气容积(FEV1)、FEV1/FVC]、6 min步行距离、改良呼吸困难指数(m MRC)、COPD评估测试(CAT)评分。结果治疗后2组Th17、Treg、Th17/Treg与本组治疗前比较均降低(P0.05),且治疗组Th17、Treg、Th17/Treg均低于对照组(P0.05)。治疗后2组IL-8、TNF-α水平均降低(P0.05),IL-10水平升高(P0.05),且治疗组IL-8、TNF-α水平均低于对照组(P0.05),IL-10水平高于对照组(P0.05)。治疗后2组FVC、FEV1、FEV1/FVC与本组治疗前比较均升高(P0.05),且治疗组FVC、FEV1、FEV1/FVC均高于对照组(P0.05)。治疗后2组6 min步行距离增加(P0.05),m MRC、CAT评分降低(P0.05),且治疗组6 min步行距离高于对照组(P0.05),m MRC、CAT评分低于对照组(P0.05)。结论益气固表丸能维持COPD稳定期吸烟患者外周血Th17/Treg免疫平衡,改善患者临床症状。     

玉屏风颗粒对过敏性紫癜患儿Th17/Treg细胞失衡的调节作用

目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿外周血Th17细胞及其相关因子IL-17和Treg细胞的水平,探讨玉屏风颗粒在调节HSP患儿Th17/Treg细胞失衡的作用以及治疗HSP的疗效。方法将确诊为过敏性紫癜初发的50例儿童,随机分为常规治疗组和玉屏风治疗组,各25例,疗程2周。25名同年龄段儿保科健康体检儿童为健康对照组。分别抽取健康对照组、常规治疗组和玉屏风治疗组治疗前后静脉血,采用流式细胞术检测外周血CD~(4+)CD~(25+)调节性T细胞(Treg)和Th17细胞比例;ELISA法检测血浆中IL-17水平。结果常规治疗组总有效率为68%,玉屏风治疗组总有效率为96%,2组比较有显著性差异(P0.05)。常规治疗组和玉屏风治疗组患儿外周血Th17细胞数及其相关因子IL-17水平较健康对照组明显增高(均P0.05),Treg细胞数较健康对照组明显降低(均P0.05),但常规治疗组患儿Th17、Treg细胞数和IL-17水平与玉屏风治疗组患儿比较差异均无统计学意义(均P0.05)。常规治疗组治疗后Th17细胞数、IL-17水平较治疗前有所下降,Treg细胞数较治疗前有所升高,但差异均无统计学意义(均P0.05)。玉屏风治疗组治疗后Th17细胞数、IL-17水平较治疗前和常规治疗组治疗后明显下降(P0.05),Treg细胞数较治疗前和常规治疗组治疗后明显增高(P0.05)。结论 HSP患儿存在显著的Th17细胞及IL-17水平增高和Treg细胞减少。玉屏风颗粒能在一定程度上降低Th17细胞及IL-17水平,升高Treg细胞水平,增加HSP的疗效。     

消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法:将75只C57BL/6小鼠随机分为消水方(33.5 g·kg~(-1))组、顺铂(6 mg·kg~(-1))组、消水方(27 g·kg~(-1))+顺铂(6 mg·kg~(-1))组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射磷酸盐缓冲液(PBS)外,其余各组小鼠均采用Lewis肺癌细胞胸腔注射建立模型,连续给药10 d后各组取10只小鼠处死,采用流式细胞技术检测外周血中Th17,Treg细胞数量;流式微球阵列法(CBA)以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21),白细胞介素-23(IL-23)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脾组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt),叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白表达。结果:各组小鼠外周血Th17,Treg细胞数量均高于空白组(P0.05,P0.01)。其中消水方+顺铂组、消水方组较模型组能明显增加Th17细胞数量(P0.05),降低Treg细胞数量(P0.01)。消水方+顺铂组IL-6,IL-17A,IL-21含量分别较其余各组均显著升高(P0.01);消水方+顺铂组较消水方组、模型组IL-23含量升高(P0.05),TGF-β1含量降低(P0.05)。与顺铂组、模型组比较,消水方+顺铂组、消水方组可上调脾组织中RORγt mRNA表达(P0.01),下调Foxp3 mRNA表达(P0.05)。与模型组比较,消水方+顺铂组可上调脾组织RORγt蛋白表达(P0.05),下调Foxp3蛋白表达(P0.01)。结论:消水方联合顺铂可能通过上调Th17细胞水平,下调Treg细胞水平,从而纠正Th17/Treg免疫失衡,发挥抑制MPE作用。     

围术期异体输血对肺癌患者Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡的影响

目的观察围术期异体输血后肺癌患者外周血CD4+T细胞各亚群Th1、Th2、Th17及Treg细胞相关因子的比例变化。方法将行手术治疗的64例肺癌患者随机分为2组:未辐照组34例术中输入普通悬浮红细胞,辐照组30例术中输入辐照悬浮红细胞,分别于术前及术后14 d应用流式细胞术(FCM)测定2组患者外周血Th1(IFN-γ)、Th2(IL-4)、Th17(IL-17)及Treg(Foxp3)细胞比例。结果术后14 d,2组外周血中Th1、Treg细胞比例和Th1/Th2均明显高于术前(P均<0.05),Th2细胞比例、Th17/Treg均明显低于术前(P均<0.05),且辐照组Th1细胞比例及Th1/Th2、Th17/Treg比值均显著高于未辐照组(P均<0.05),Treg细胞比例低于未辐照组(P<0.05)。结论肺癌患者围术期异体输血后Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡可能与输入异体血中的活性淋巴细胞有关。     

左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群的影响

目的观察左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失模型小鼠脾脏辅助性T细胞亚群17（Th17）/调节性T细胞亚群（Treg）亚群平衡的影响,并探讨其作用机制。方法 50只BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为假手术组、卵巢切除模型组、左归丸加减（简称中药）小、中、大剂量组,共5组,每组10只。中药组分别给予中药小、中、大剂量（7.25、14.50、29.00 g/kg）,1天1次,1次约0.5 m L,连续用药12周;同时假手术组及模型组给予等量的生理盐水。采用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法检测各组血清雌二醇（E2）水平,双能X线骨密度仪检测股骨骨密度（bone mineral density,BMD）,流式细胞仪胞内外双染色法检测脾脏单个核细胞Th17/Treg亚群比例,RT-PCR法检测脾脏单个核细胞IL-17A、TGF-βmRNA表达。结果与假手术组比较,模型组E2、BMD均降低（P〈0.05）,Th17亚群比例、Th17/Treg比值均升高（P〈0.05）,Treg亚群比例明显降低（P〈0.05）,IL-17A mRNA表达明显升高（P〈0.05）,TGF-βmRNA表达明显降低（P〈0.05）;与模型组比较,中药中、大剂量组BMD值明显升高（P〈0.05）,Th17亚群比例、Th17/Treg比值降低（P〈0.05）、Treg亚群比例升高（P〈0.05）,IL-17A mRNA表达降低（P〈0.05）及TGF-βmRNA表达升高（P〈0.05）。相关性分析显示BMD与血清E2水平、Treg亚群比例呈明显正相关（P〈0.05）,与Th17亚群比例呈明显负相关（P〈0.05）;血清E2水平与Treg亚群比例呈明显正相关（P〈0.05）,与Th17亚群比例呈明显负相关（P〈0.05）。结论 Th17/Treg亚群平衡状态与雌激素缺乏骨丢失存在相关性,左归丸加减能降低雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17亚群比例,升高雌激素缺乏骨丢失小鼠Treg亚群比例。左归丸加减可能通过调节雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群平衡达到治疗作用,且该方无明显雌激素样作用。     

芪灵汤联合高效抗逆转录病毒疗法对HIV/AIDS患者Th17和Treg细胞表达水平的影响

目的探讨芪灵汤联合高效抗逆转录疗法（HAART）对HIV/AIDS患者外周血Th17和Treg细胞表达水平的影响。方法将55例HIV/AIDS患者随机分成HAART治疗组28例和联合治疗组27例,并选取21例HIV阴性患者为健康对照组。HAART治疗组给予HAART治疗,联合治疗组给予芪灵汤联合HAART治疗,观察24周。同时根据治疗前外周血CD4+T细胞计数水平,将HIV/AIDS患者分为3层,第一层：1～100 个/μL;第二层：101～200 个/μL;第三层： 201～350个/μL,运用流式细胞术（FCM）检测HIV/AIDS患者治疗前基线、治疗4、12、24周时间点、健康对照组外周血Th17、Treg细胞的表达水平及CD4+T细胞数目。结果与健康对照组比较,HIV/AIDS患者外周血中Th17细胞基线表达水平及CD4+T细胞数显著降低,Treg细胞基线表达水平则升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与同组治疗前比较,HAART治疗组与联合治疗组治疗4、12和24周时CD4+T细胞计数均升高,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。不同CD4+T细胞水平,两组患者有效率差异无统计学意义（P>0.05）。各时间点上,HAART治疗组与联合治疗组Th17细胞、Treg细胞表达水平无统计学意义（均P>0.05）。与HAART治疗组比较,治疗24周后,联合治疗组Th17/Treg比例显著升高,差异有统计学意义（U=2.135,P=0.038）。结论芪灵汤能够改善Th17/Treg细胞免疫平衡,这可能是芪灵汤提高HIV/AIDS患者免疫功能的机制之一。     

益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞的影响。方法用流式细胞仪检测18例经益气解毒方加常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(观察组)及l5例常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞比例,RT-PCR法检测Foxp3 mRNA和ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果观察组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例和Foxp3 mRNA的相对表达量均低于对照组(P0.05),而Th17细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均高于对照组(P0.05);观察组患者血清IL-6水平高于对照组(P0.05),而TGF-β水平低于对照组(P0.05)。结论益气解毒方可影响中晚期鼻咽癌CD4+CD25+调节性T细胞的比例与功能,增强Th17细胞的分化,其机制可能是通过调节IL-6和TGF-β水平而逆转鼻咽癌免疫耐受。