黄芩苷对小鼠脑片和大鼠皮质神经元缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用

 目的在离体水平,探讨黄芩苷对缺氧缺糖/再灌注(OGD/RP)诱导的脑片及神经元损伤的保护作用及机制。方法小鼠离体脑片OGD/RP模型中,以2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)产物白评价脑片活性;原代培养大鼠皮层神经元OGD/RP模型中,以噻唑蓝(MTT)还原和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定神经元活性变化,用2,7-二氯荧光素二乙酸盐(DCF-DA)测定细胞内自由基水平。观察不同时间给予黄芩苷对损伤的保护作用。结果在脑片,全程给药和OGD时给予黄芩苷0.01～1μmol·L^-1,再灌注时给予黄芩苷0.1～1μmol·L^-1,可显著减轻损伤。在神经元,全程给予黄芩苷0.1～1μmol·L^-1可减轻神经元损伤,并降低神经元内自由基水平升高。结论黄芩苷对OGD/RP损伤有浓度依赖性保护作用,再灌注时给药亦有效,其作用至少部分与抗自由基有关。     

心通注射液对缺糖缺氧心肌细胞LDH的影响

1　实验材料1 1　方剂组成　由葛根、鸡血藤、三七、玄参、党参五味药组成。1 2　制剂制备　心通注射液由黑龙江中医学院中药系制剂教研室提供 ,按制备注射剂的常规方法制成灭菌、澄清的注射液。每ｍｌ相当于生药 0 85ｇ。经测定 :ＰＨ为 7 40、Ｋ 为 4 0 2ｍＥｑ/Ｌ、Ｃａ2 为4 62ｍＥｑ/Ｌ、Ｍｇ2 为 1 72ｍＥｑ/Ｌ。2　实验方法2 1　心肌细胞培养　心肌细胞培养按常规方法[1 ] ,用新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠的乳鼠。在无菌条件下取其心室 ,剪成 1ｍｍ3小碎块 ,用 0 1 %的胰蛋白酶消化 ,用ＭＥＭ培养基制成 1× 1 0 6 细胞悬液 ,加 2 0…     

马齿苋抗缺氧活性部位筛选及其化学成分研究

目的 筛选马齿苋耐缺氧的活性部位,并对其化学成分进行研究。方法 采用常压密闭耐缺氧实验进行活性部位筛选,采用多种色谱手段、理化和波谱学方法进行化学成分研究。结果 醇提水沉部位为马齿苋抗缺氧的活性部位,从此活性部位中分离获得10个化学成分,利用理化和波谱分析方法鉴定了其中5个化学成分,分别为对羟基苯乙胺、表木栓醇、β-谷甾醇、正三十烷醇、β-胡萝卜苷,其中对羟基苯乙胺为首次从该植物中分离获得。结论 马齿苋抗缺氧的活性部位所含多为低极性成分,从中分离获得化学成分的活性仍有待于研究。     

川芎嗪对缺氧缺糖损伤的血管内皮细胞周期和前列环素的影响

目的：研究在缺氧缺糖条件下，血管内皮细胞活性、前列环素生成和细胞周期的变化及川芎嗪对它们的影响。方法：缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤，MTT比色法、流式细胞仪观察川芎嗪对血管内皮细胞作用及细胞周期的影响，放射免疫法测定细胞培养液中前列环素含量。结果：川芎嗪抑制缺氧缺糖引起的血管内皮细胞减少，其作用主要使S期和G2M期细胞比率增加，促进损伤的血管内皮细胞释放前列环素。结论：川芎嗪具有保护缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤，其作用主要是通过增加S期和G2M期细胞和前列环素的水平。     

黄芩苷通过上调miR-190表达缓解缺氧缺糖对神经细胞损伤的研究

目的 探讨黄芩苷对缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的神经元细胞增殖、凋亡、炎症、氧化应激的影响及其对miR-190的调控作用.方法 采用OGD处理小鼠海马神经元HT22细胞建立细胞损伤模型,使用不同剂量(10、30 mg/L)的黄芩苷处理HT22细胞,分别将miR-NC、mi...     

毛蕊异黄酮对H9c2细胞缺糖缺氧损伤的保护作用

目的:探讨毛蕊异黄酮(calycosin)抗缺糖缺氧H9c2细胞的保护作用,并初步研究其可能的作用机制。方法:H9c2心肌细胞分为正常对照组、模型组和毛蕊异黄酮处理组,建立缺糖缺氧模型,在H9c2细胞缺糖缺氧前用毛蕊异黄酮预处理2小时,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量,应用MTT法检测心肌细胞存活率,Western blot检测毛蕊异黄酮对PI3K/Akt和Nrf-2/HO-1信号通路相关蛋白表达的影响。结果:经1¹0μM/L的毛蕊异黄酮预处理后,细胞的LDH释放水平显著下降,细胞的存活率高于模型组。毛蕊异黄酮(10μM/L)处理细胞2个小时后,磷酸化Akt/PI3K,Nrf1,Nrf-2,HO-1的蛋白表达升高。结论:毛蕊异黄酮对H9c2细胞的缺糖缺氧诱导细胞损伤有保护效果,其作用可能与激活PI3K/Akt和Nrf2/HO-1信号通路有关。     

黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用

目的观察黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用,在细胞水平阐明黄芩苷治疗脑缺血-再灌注损伤的作用机制。方法选用SH-SY5Y神经细胞,采用缺氧-复氧结合缺糖-复糖的方法,对其进行攻击,模拟人体神经细胞的缺血-再灌注损伤,观察黄芩苷对此损伤的治疗作用。结果缺氧、缺糖8h结合复氧、复糖12h对神经细胞可造成明显损伤,导致SH-SY5Y细胞线粒体的活性下降,凋亡率明显上升;而黄芩苷可以显著减轻上述损伤。结论黄芩苷对缺氧、缺糖-再灌注损伤的神经细胞有保护作用。     

黄芪与川芎有效成分配伍对乳鼠海马神经元细胞缺氧缺糖损伤的保护作用

目的 研究黄芪与川芎有效成分(黄芪甲苷、藁本内酯、川芎嗪、阿魏酸)配伍对乳鼠海马神经元细胞缺氧缺糖损伤的保护作用.方法 原代培养海马神经元细胞,以免疫组化染色法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE),建立缺氧缺糖损伤模型,MTT法确定药物安全浓度.细胞随机分为正常组、模型组、阳性对照组、配伍组,比色法检测细胞中半胱氨酸蛋白...     

玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本文运用血清药理学方法,观察了玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用,报告如下。1 实验材料 玉竹:玉竹水煎醇沉液,文火浓缩成2g/ml生药浓度,备用。RPMI1640培养基;每1000ml培养液含日产1640粉10.4g,谷胺酰氨0.292g,Hepes6.02g,NaH-     

红景天苷对缺氧/缺糖损伤神经细胞的保护作用

目的 :以SH-SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤为模型 ,观察红景天苷对神经细胞保护的作用。方法 :流式细胞术检测细胞凋亡百分率及细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率 ,用试剂盒显色法测定LDH的含量。结果 :缺氧 /缺糖损伤 2h可诱导神经细胞凋亡和坏死 ,分别为 18.5 9% (P<0.01)和 4 .94 % (P<0.01)。形态学观察也发现大量神经细胞染色质凝聚 ,核碎裂 ,凋亡小体产生 ,并显著增加细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度和LDH的释放 ,分别为 8.46nmol·L^-1(PP<0.01)和 16 .5 9% (P<0.01) ,并随缺氧 /缺糖损伤时间的延长而明显增高 ;红景天苷 (1～ 3μmol·L^-1)能显著降低神经细胞凋亡及坏死的百分率 ,降低细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度 ,减少LDH的释放 ,其作用随剂量增加而作用增强。结论 :红景天苷具有抑制SH-SY5Y细胞凋亡的作用 ,可对神经细胞起到保护作用 ,这种作用可能与其降低细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度有关。     

黄连解毒汤对神经细胞保护作用活性成分的筛选

目的:探讨黄连解毒汤及其主要成分小檗碱、黄芩苷、巴马汀、栀子苷对过氧化氢(H2O2)、谷氨酸(Glu)所致神经细胞损伤的影响.方法:制备H2O2,Glu损伤入神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)、小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)模型,设正常对照、模型、黄连解毒汤、小檗碱、黄芩苷、巴马汀及栀子苷组,筛选浓度为7.812 5,15.625,31.25,62.5,125,250,500 mg·L-1,应用MTT法检测药物对损伤后细胞增殖的影响.结果:黄连解毒汤能够促进SH-SY5Y细胞增殖,适当浓度的栀子苷能够促进SH-SY5Y,Neuro-2a细胞增殖,并对H2O2,Glu损伤的SH-SY5Y细胞有保护作用,对H2O2损伤的Neuro-2a也具有保护作用.结论:栀子苷可能为黄连解毒汤对神经细胞保护作用的有效成分.     

丹参素对缺糖-缺氧损伤神经细胞的保护作用

研究表明脑组织缺血性损伤过程中存在着神经细胞凋亡。且神经细胞凋亡在缺血性脑损伤中起十分重要的作用。药物可通过干预神经细胞凋亡过程阻止缺血性损伤的进一步发展，而发挥对神经细胞损伤的保护作用。细胞内Ca^2 超载是缺血性脑损伤的发病机制之一，在缺血后神经元凋亡发生中也     

黄连解毒汤的药效学研究进展

黄连解毒汤出自《肘后备急方》,方名始见于《外台秘要》,由黄连、黄芩、黄柏、栀子组成,为清热解毒的代表方。具有清热、泻火、解毒之功效,主治一切实热火毒、三焦热盛之证。笔者对近年来黄连解毒汤的药效学研究作一综述。1抗菌作用大量研究表明,黄连解毒汤对多种细菌有抑制     

红景天苷对缺氧缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的:观察红景天苷对神经细胞系SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位和凋亡的影响.方法:四唑盐比色实验(MTT)检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率.结果:缺氧/缺糖损伤2h可诱导SH-SY5Y细胞凋亡和坏死,分别为18.59%(P＜0.01)和4.94%(P＜0.01),形态学观察也发现SH-SY5Y细胞的染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,线粒体膜电位和活性分别降低29.17%(P＜0.01),38.80%(P＜0.01),随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多,线粒体膜电位和活性进一步下降;红景天苷能显著降低SH-SY5Y细胞凋亡及坏死的百分率,提高线粒体膜电位和活性,其作用随剂量增加而作用增加.结论:红景天苷可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生.     

大鼠皮质神经细胞原代培养及缺氧缺糖性损害对其损伤的研究

急性缺血缺氧性脑损伤的发病率、致残率和病死率都很高,严重危害人类健康,因此,对其发病机制的研究和有效治疗方案的探索一直是研究的热点。但在体实验往往受到体液、呼吸、循环等复杂因素的影响,很难解释某单一因素的影响作用及强度。因此探索体外培养方法。建立缺氧缺糖损伤模型,对研究脑神经细胞的缺仇缺氧性损害是十分必要的,是神经科学研究中一项不可缺少的手段。     

丹皮酚对原代培养的大鼠皮质和海马神经元缺糖缺氧再灌损伤的保护作用

 目的研究丹皮酚对大鼠神经元缺糖缺氧再灌损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法建立原代培养的新生大鼠神经元缺糖缺氧再灌损伤模型,随机分组为:对照组;模型组;丹皮酚组:建立模型,每个再灌时间点均经0.2×10^-6,1×10^-6,5×10^-6mol·L^-1 3个浓度药物处理;MK-801阳性对照药组。倒置相差显微镜下进行一般形态学观察,用MTT法测定神经元存活率。通过放射配基结合实验测定N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA受体)结合力,采用荧光法测定细胞内游离钙离子([Ca²⁺]i)浓度及应用试剂盒测定一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果丹皮酚可显著降低大鼠皮质和海马神经元缺糖缺氧再灌损伤时细胞死亡率,减弱NMDA受体结合力,降低神经细胞内游离钙离子浓度([Ca²⁺]i)及NO含量、NOS活性的升高。结论丹皮酚对离体培养的大鼠神经元缺糖缺氧再灌损伤具有明显保护作用,其作用机制可能与抗氧化及减弱NMDA受体结合力有关。     

黄连解毒汤的临床应用

黄连解毒汤在临床各科应用广泛,本文概述了黄连解毒汤辨证与治疗的适应症及鉴别应用。     

丹参素对缺氧/缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的:观察丹参素对神经细胞SH-SY5Y缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位(MMP)和凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞分为5组:对照组、模型组、尼莫地平组及丹参素15、30mg/L组,给予相应处理后分别培养2、4、6、12h。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色实验检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果:缺氧/缺糖损伤2h,模型组的线粒体活性和MMP水平较对照组显著降低(P<0.01),并随缺氧/缺糖损伤时间的延长而变化越显著。而细胞凋亡和坏死的百分率均较对照组显著升高(P<0.01),形态学观察也发现染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多。丹参素能显著提高SH-SY5Y细胞线粒体膜电位和活性,降低细胞凋亡及坏死的百分率,其作用随剂量增加而作用增加。结论:丹参素可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生。     

附子人参不同配伍比例对缺糖缺氧/复糖复氧损伤大鼠心肌细胞的保护作用

目的观察不同配伍比例的附子人参对缺糖缺氧/复糖复氧损伤大鼠心肌细胞的保护作用。方法将原代培养6 d的心肌细胞分为正常对照组、模型组、不同配伍比例的附参组、空白血清组。建立原代大鼠心肌细胞缺糖缺氧/复糖复氧损伤模型,观察不同配伍比例的附子人参血清对损伤心肌细胞自发搏动、细胞活力的作用,并测定心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及心肌组织上清液中一氧化氮(NO)分泌量和乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果与空白血清组比较,各附参配伍组心肌细胞自发搏动频率、细胞活力显著升高(P0.05),心肌细胞SOD活性显著升高(P0.05),MDA含量、NO分泌量和LDH释放率均显著降低(P0.05),而且附参(2∶1)组对心肌细胞的自发搏动频率、细胞活力、SOD、MDA和LDH作用均不同程度地优于其余各配伍组。结论各附参配伍组对缺糖缺氧/复糖复氧损伤大鼠心肌细胞具有保护作用,其中以附参(2∶1)组作用效果最为显著。