长期应用尼古丁对恶唑酮诱导的实验性小鼠肠炎模型的影响及其机制探讨

目的分析和探讨长期应用尼古丁对恶唑酮(OXZ)诱导的实验性小鼠肠炎的影响以及肠黏膜和脾细胞生成细胞因子的类型.方法采用BALB/c小鼠,经直肠注入OXZ制成炎症性肠病(IBD)模型;皮下注射尼古丁0.5mg@kg.@d,连续3周.将小鼠处死后,取出大肠及脾脏.病理组织学观察大肠黏膜改变.采用ELISA法测定大肠黏膜及脾细胞产生的干扰素γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4).采用流式细胞仪检测技术(FACScan)分析脾细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达.结果尼古丁组的病理组织学计分显著低于OXZ组(19.8比23.7,P＜0.02).与对照组比较,OXZ组大肠黏膜[(185±47)pg/g比(94±14)pg/g]和脾细胞生成的IL-4明显高于对照组[(59±12)pg/ml比(10±1)pg/ml];与OXZ组比较,尼古丁组IL-4生成量更趋降低[肠黏膜(157±38)pg/g比(185±47)pg/g,P＜0.05;脾细胞(50±13)pg/ml比(59±12)pg/ml,P＜0.05].OXZ组IFN-γ/IL-4比值明显低于对照组(黏膜1.10±0.37比3.40±0.35,P＜0.02;脾细胞275±1.90比30.70±3.90,P＜0.01),与尼古丁组差异无显著性(黏膜110±0.37比0.78±0.14;脾细胞2.75±1.90比0.78±0.40).OXZ组,表达IL-4的CD+4细胞数较表达IFN-γ的CD+4细胞数高13.6倍.尼古丁组表达IL-4及IFN-γ的CD44+细胞数仅为OXZ组的32%和39%.结论OXZ诱导的小鼠IBD肠炎模型是Th2亚型(IL-4升高)为主的免疫应答反应;长期应用尼古丁,通过抑制IL-4生成,从而减轻OXZ诱导的实验性小鼠肠炎的组织学损伤.     

血清基质金属蛋白酶-9检测与系统性红斑狼疮活动性的关系

目的探讨血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与系统性红斑狼疮(SLE)活动程度的关系和意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法,检测30名健康人和36例SLE患者血清MMP-9水平,以分析其与SLE活动性变化关系。结果SLE患者血清MMP-9水平[(108±113)ng/ml]明显低于正常对照组[(352±115)ng/ml],P<0.001;糖皮质激素治疗后血清MMP-9水平[(246±196)ng/ml]与治疗前水平[(114±92)ng/ml]相比,差异有显著性意义(P<0.05);SLE患者活动期血清MMP-9水平[(72±66)ng/ml]低于非活动期[(166±146)ng/ml],P<0.05;SLEDAI>8分组[(80±72)ng/ml]低于SLEDAI≤8分组[(152±150)ng/ml],P<0.05;蛋白尿组[(82±20)ng/ml]低于非蛋白尿组[(152±43)ng/ml],P<0.05;关节炎组[(103±126)ng/ml]与非关节炎组[(117±89)ng/ml]之间差异无显著性,P>0.05。结论MMP-9可能与SLE的发病相关,血清MMP-9可作为反映SLE活动程度、肾脏损害及疾病进展或改善的一项指标。     

姜黄素对三硝基苯磺酸诱导的结肠炎模型细胞因子的影响

目的探讨姜黄素对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性结肠炎的疗效,并研究肠黏膜、脾细胞和血清中细胞因子的变化。方法45只Sprague-Dawley大鼠经直肠注入TNBS(100 mg/kg)诱导肠炎模型。实验动物分为阴性对照组、模型组(TNBS)和姜黄素治疗组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1),腹腔注射)。RT-PCR测定肠黏膜细胞因子表达水平,流式细胞术测定脾细胞内干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4,ELISA法测定血清中IFN-γ和IL-4。结果姜黄素治疗前后肠黏膜大体评分(3．9±1．0比2．2±0．7),髓过氧化物酶(MPO)活性[每毫克蛋白(15．0±2．6)U比(7．3±1．4)U],肠黏膜中Th1类细胞因子IFN-0γ(1．02±0．07比0．06±0．02)、IL-12 mRNA相对表达水平(0．29±0．05比0．11±0．01)和IFN-γ/IL-4比值(11．44±0．97比0．38±0．10),脾细胞中IFN-γCD4~+细胞百分比(31．7±7．5比21．1±3．7)和IFN-γ/IL-4 CD4~+比值(19．9±5．1比6．1±1．8),血清中IFN-γ质量浓度[(1528±159)pg/ml比(513±14)pg/ml]和IFN-γ/IL-4比值(19．5±4．1比4．2±0．6)均降低(P＜0．05或P＜0．01)。且姜黄素治疗前后肠黏膜中Th2类细胞因子IL-4 mRNA(0．09±0．01比0．15±0．04)和IL-10 mRNA相对表达水平(0．28±0．08比0．63±0．12),脾细胞中IL-4 CD4~+细胞百分比(1．6±0．5比3．4±1．1)和血清IL-4质量浓度[(81±1 5)pg/ml比(124±20)pg/ml]升高(P＜0．05或P＜0．01)。结论姜黄素能治疗TNBS诱导的肠炎,其机制可能与调节肠道局部和机体Th1/Th2平衡有关。     

羟氯喹抑制紫外线诱导的系统性红斑狼疮CD4+T细胞白细胞介素-10和干扰素-γ的表达

目的 研究紫外线对系统性红斑狼疮(SLE)CD4+T细胞因子的影响和羟氯喹的抑制作用.方法 选择SLE 30例,健康对照10名.磁珠分选SLE患者和健康人的CD4+T细胞,紫外线311 nm窄谱中波紫外线暴露,加入羟氯喹共培养,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清白细胞介素(IL)-10和干扰素-γ的表达水平.采用t检验进行统计学分析.结果 SLE患者CD4+T细胞IL-10表达高于健康对照[(27±4)和(18±3) pg/ml,P=0.011];经45、100 mJ/cm2紫外线暴露后,SLE活动患者CD4+T细胞IL-10表达升高[(27±4)和(77±42) pg/ml,(40±18)和(77±42) pg/ml,P=0.022,P=0.048],经100 mJ/cm2紫外线暴露后,活动患者CD4+T细胞IL-10表达高于稳定患者[(77±42)和(24±4)pg/ml,P=0.029];羟氯喹降低SLE活动患者CD4+T细胞IL-10和干扰素-γ表达[(2.6±4.0)和(17.9±2.3)pg/ml,P=0.018,P=-0.017)];羟氯喹降低经45,100 mJ/cm2紫外线暴露后SLE活动患者T细胞IL-10表达[(40±18)和(22±6)pg/ml,(77±42)和(21±5) pg/ml,P=0.037,P=0.04];羟氯喹降低经100 mJ/cm2紫外线暴露的SLE活动和稳定患者T细胞干扰素-γ表达[(18±3)和(13±14) pg/ml,(19±7)和(12±5) pg/ml,P=0.013,P=0.049].结论 紫外线加重SLE患者体内Th1/Th2细胞因子的比例失衡;羟氯喹抑制了紫外线诱发SLE患者干扰素-γ和IL-10的表达.

Abstract：

Objective To explore the role of hydroxychloroquine (HCQ) in ultraviolet B (UVB)- induced expression of interleukin (IL)-10 and interferon (IFN)-γ from CD4+T cells in patients with systemic lupus erythematosus (SLE). Methods Thirty patients with SLE and 10 healthy controls were enrolled in the study. CD4+ T cells were isolated using magnetic beads from SLE patients and healthy controls. HCQ was added in culture media before and after irradiation with UVB 311 nm narrow band ultraviolet B (NB-UVB). The levels of IL-10 and IFN-γ in the supernatant were detected with enzyme-linked immunosorbent (ELISA). Comparisons between groups were performed by t-test. Results The level of IL-10 was higher in SLE patients [(27±4) pg/ml] than that in healthy controls [(18±3) pg/ml, P=0.011]. After exposure of CD4+T cells to UVB in 45 or 100 mJ/cm2 dosages, the level of IL-10 was increased significantly in patients with active disease (P=0.022, P=0.048). After exposure of CD4+T cells to UVB in 100 mJ/cm2 dosages, the levels of IL-10 was higher in patients with active disease [(77±42) pg/ml] than patients with stable disease [(24± 4) pg/ml, P=0.029]. When CD4+ T cell were cultured with HCQ, IL-10 and IFN-γ levels in patients with active disease [(2.6±4.0), (17.5±2.3) pg/ml] were decreased significantly (P=0.018, P=0.017). HCQ reversed UVB-induced IL-10 expression in active SLE patients after exposure of CD4+T cells to UVB in 45 or 100 mJ/cm2 dosages (P=0.037, P=0.04). HCQ also reversed UVB-induced IFN-7 expression in active SLE patients and stable SLE patients after exposure to CD4+T cells with UVB in 100 mJ/cm2 dosages (P=0.013, P= 0.049). Conclusion UVB can aggravate the imbalance of Th1 and Th2 cytokines. HCQ inhibits UVB-induced IL-10 and IFN-7 expression of CD4+T cells in patients with SLE, especially in patients with active disease.     

在败血症休克及实验性内毒素热时的血中白细胞介素-1及肿瘤坏死因子

感染及损伤时体内产生白细胞介素-1β(IL-Iβ)、IL-1α及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。本研究对败血症休克患者及输注内毒素后志愿者测定血浆内 IL-1β,IL-1α及 TNF-α。研究对象为败血症休克患者15例,输注内毒素志愿者6例及健康对照者44名。67%健康对照者血浆IL-1β低于可测定水平,平均为62±8pg/ml;败血症患者明显增高达120±17pg/ml(P<0.001);在存活病例中其值较高,为153±30pg/ml,死亡病例中其值较低,为93±9pg/ml(P=0.05)。血浆 TNF-α在健康对照者平均为73±8pg/ml,败血症患者明显增高,达119±30pg/ml(P<0.02);此值与疾病严重程度相关(P=0.003)。输注内毒素后,IL-1β由注     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞功能的研究

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DC)的免疫功能.方法从慢性乙型肝炎患者外周血中分离单个核细胞,用无血清培养法分离培养DC,用流式细胞仪检测DC表型,用液闪计数仪观察DC对T细胞的增殖作用,用ELISA法检测混合淋巴细胞反应(MLR)中细胞因子的分泌水平.结果患者组DC的CD86的表达率为(70.2±5.2)%,明显低于正常人组(95.3±3.8)%,P＜0.01;其诱导T细胞增殖能力每分钟液闪计数cpm为10000±2000,明显低于正常人组(cpm为30000±3000),P＜0.01患者MLR中IL-12为(120.0±19.7)pg/ml,γ-干扰素为(799.0±161.3)pg/m1,明显低于正常人组的(280.0±41.1)pg/ml和(3359.0±635.4)pg/ml,P＜0.01.结论慢性乙型肝炎患者外周血DC免疫功能低下,并与DC表面CD86的表达率下降及DC分泌IL-12减少密切相关.     

冠心病患者分泌型磷脂酶A2的变化及其与白细胞介素8、溶血磷脂酸的关系

目的了解冠心病患者分泌型磷脂酶 A2(sPLA2)的变化,并通过测定 IL-8、LPA 等相关细胞因子,对 sPLA2的作用机制进行初步探讨。方法冠状动脉造影确诊的262例患者,其中急性冠脉综合征(ACS)110例,稳定性冠心病(SCHD)63例,正常患者89例,分别测定 sPLA2、白细胞介素8(IL-8)、高敏 C 反应蛋白(hs-CRP)和溶血磷脂酸(LPA)水平,并进行对比分析。结果冠心病患者sPLA2[(68±17)U/ml]、IL-8[(182±80)pg/ml]以及 LPA[(2.85±0.36)μmol/L]均明显高于对照组[sPLA2:(55±12)U/ml,IL-8:(119±33)pg/ml,LPA:(2.34±0.36)μmol/L,均 P<0.01],其中ACS 组的 sPLA2[(71±18)U/ml]、IL-8[(195±78)pg/ml]也明显高于 SCHD 组[sPLA2:(63±12)U/ml],IL-8:[(159±79)pg/ml,均 P<0.01;sPLA2与 IL-8(r=0.203,P=0.007)、LPA(r=0.658,P<0.01)、hs-CRP(r=0.231,P=0.005)均呈正相关;sPLA2≥63.75 U/ml 时,患冠心病的相对危险度为6.248(P<0.01)。结论冠心病患者 sPLA2明显升高,它可能与 IL-8共同参与冠心病的炎症发展过程,并与下游相关产物 LPA 进一步加速其进展。提示 sPLA2升高是冠心病的独立危险因素之一。     

乳球菌分泌的白介素-12对哮喘小鼠的疗效观察

目的将小鼠白介素-12基因(mIL-12)通过质粒载体pSEC导入乳酸乳球菌(NZ9000)中,观察mIL-12在细菌中的表达;通过鼻腔免疫来观察mIL-12对小鼠哮喘模型气道炎症及辅助T细胞亚群的影响。方法将mIL-12连接到pSEC载体上并将其转化到NZ9000中,用乳链菌肽(Nisin)诱导其表达IL-12蛋白质并做鉴定,将菌液离心浓缩后给小鼠滴鼻。BALB/c小鼠50只,随机分为5组,即对照组(A组);PBS组(B组);野生菌组(C组);rIL-12组(D组);工程菌组(E组)。除A组外,余各组每鼠在1、7、14 d腹腔注射卵白蛋白OVA(100μg/0.5ml),在20~26 d雾化吸入2%OVA,每天1次。B、C、E组在1、2、3、14、19、20、21 d分别给予10μl的PBS,不含质粒载体的野生乳酸菌(约5×108CFU),含IL-12的质粒载体的工程菌(约5×108CFU)。D组20、21、22天给3 ng/只重组白介素-12,第28天杀小鼠测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸粒细胞(EOS)个数及白介素-4(IL-4)、干扰素(IFN-γ)水平,肺组织HE染色切片观察病变。结果mIL-12能够在NZ9000中高效表达并释放到细胞外。A-E组BALF中EOS的数量分别为(0.51±0.23)×104cell/ml(、21.32±5.71)×104cell/ml(、22.84±6.16)×104cell/ml(、2.15±0.63)×104cell/ml、(2.62±0.73)×104cell/ml;IL-4的含量分别为68.43±9.08 pg/ml、332.13±61.36 pg/ml、324.65±57.27 pg/ml、121.25±35.55 pg/ml、114.22±15.70 pg/ml;IFN-γ的含量分别为110.28±12.19pg/ml、56.25±12.08 pg/ml、70.36±8.27 pg/ml、166.11±57.12 pg/ml、171.75±60.90 pg/ml。B和C组的EOS数I、L-4与IFN-γ含量与A组相比有统计学差异(P<0.01);D、E组与B、C组比较有统计学意义(P<0.01)。工程菌组小鼠肺组织炎症细胞浸润明显减少,气道上皮损害减轻。结论mIL-12在乳酸乳球菌中能高效表达;鼻腔应用mIL-12能减少全身应用的副作用,且经济实用并较好地调节Thl/Th2平衡,对小鼠哮喘气道炎症的保护较为理想。     

十二指肠球部溃疡患者球部黏膜白细胞介素-10、白细胞介素-12和干扰素-γ的水平及其临床意义

背景:溃疡病患者常出现各种细胞免疫和体液免疫障碍。目的:探讨细胞因子白细胞介素（IL）-10、IL-12和干扰素（IFN）-γ在十二指肠球部溃疡（DU）发生中的作用。方法:在奥美拉唑、克拉霉素、替硝唑一周三联疗法治疗之前和之后4～6周从DU患者的球部钳取轴膜组织,应用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测IL-10、IL-12和IFN-γ的含量,并对照组进行比较。结果:一周三联疗法治疗前,DU患者球部劾膜的IL-10、IL-12和IFN-γ含量（17.983pg/ml±8.676pg/ml、44098 pg/ml±12.842 pg/ml±和82.373pg/ml±17.264pg/ml±）均显著高于对照组（85.99 pg/ml±4.147 pg/ml、17.550 pg/ml±5.980 pg/ml和26.298pg/ml±10.385 pg/ml,p<0.01）,且IL-10与IL-12的含量呈正相关（r=0.87,P<0.01）,IL-10与IFN-γ的含量也呈正相关（r=0.92,P<0.01）。治疗后,DU患者球部轴膜的IL-10IFN-γ含量均有所下降（17.289 pg/ml±3.939 pg/ml和27.030 pg/ml±3.753 pg/ml,P<0.01）,但IL-10的含量仍持续维持在较高水平（26.098 pg/ml±15.152 pg/ml,P<0.01）。结论:细胞因子IL-10、IL-12和IFN-γ可能在DU的发生机制中起重要作用。一周三联疗法治疗后,促炎症细胞因子IL-12和IFN-γ分泌得到有效抑制,而抗炎症细胞因子IL-10持续维待在较高水平,为黏     

系统性红斑狼疮患者骨髓CD34+细胞表面标志及与病情活动的相关性分析

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓CD34+细胞表面标志的变化,了解SLE患者造血干细胞是否存在异常。方法应用流式细胞术CD45/SSC设门分析10例SLE患者和10例正常人骨髓CD34+细胞CD90、CD117、CD123、CD164、CD166、CD95(FAS)、FAS-L、人类白细胞抗原(HLA)-DR等表面分子的表达及其与病情活动指标的相关性。结果活动期SLE患者骨髓CD34+细胞比例(1.5±0.4)%,明显低于正常人(2.3±0.8)%,P<0.01;非活动期患者(2.0±0.4)%与正常人相比差异无统计学意义。SLE患者CD34+、CD95+的表达明显高于正常人[(48.3±10.6)%vs(24.3±11.1)%,P<0.05],患者CDl23和CDl66也明显高于正常人[(45±22)%vs(20±4)%,P<0.05];[(31±20)%vs(11±6)%,P<0.05]。其余表面标志的表达与正常人相比差异无统计学意义。CDl23表达率与患者外周血白细胞计数负相关(r=-0.700,P< 0.05),与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分无相关性。CD166表达与SLEDAI(r=0.472,P<0.05),血清C3 (r=-0.712,P<0.01),尿蛋白定量(24h)(r=0.558,P<0.05)显著相关。结论SLE患者骨髓CD34+细胞CD95、CDl23、CDl66的表达率增加,CDl23的表达率与外周血白细胞计数显著负相关:CDl66的表达率与SLEDAI评分、24h尿蛋白呈显著正相关,与血清C3呈显著负相关,CDl66可能是一个新的SLE疾病活动性标志。     

病毒性心肌炎患儿细胞因子的改变及临床意义

目的探讨白细胞介素6、8(IL-6、IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)与病毒性心肌炎(VMC)的相关性。方法采用双抗体夹心(ELISA)法测定48例患儿及48名健康儿童外周血清IL-6、IL-8、TNF-α水平。结果VMC组IL-6、IL-8、TNF-α分别为(39.73±77.4)pg/ml、(142.27±36.12)pg/ml、(23.27±14.24)pg/ml,健康组分别为(30.26±89.0)pg/ml、(42.17±20.38)pg/ml、(19.91±11.14)pg/ml,VMC组IL-6、IL-8、TNF-α水平均显著高于健康组(P均<0.05)。结论IL-6、IL-8、TNF-α参与了VMC的发病,检测VMC患儿IL-6、IL-8、TNF-α水平有助于VMC的诊断、病情估计和预后,并为临床治疗开辟新途径。     

急性冠脉综合征患者外周血MCP-1和IL-18水平变化的临床意义

目的探讨急性冠脉综合征患者外周血单核/巨噬细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白细胞介素18(IL-18)水平变化的意义及其相关性。方法酶联免疫吸附法测定30例急性冠脉综合征患者(急性冠脉综合征组),30例稳定型心绞痛患者(稳定型心绞痛组)及29例胸痛、胸闷等症状予以冠脉造影正常的患者(对照组)外周血MCP-1和IL-18水平的变化,并分析冠状动脉的病变情况。结果①急性冠脉综合征组MCP-1水平[(151.84±29.66)pg/ml]显著高于稳定型心绞痛组[(128.49±16.97)pg/ml,P<0.001]和对照组[(112.11±10.36)pg/ml,P<0.01],并且稳定型心绞痛组和对照组比较有统计学意义(0.0010.05)。④急性冠脉综合征组外周血MCP-1和IL-18呈明显正相关(r=0.519,P<0.01)。结论外周血MCP-1和IL-18水平可以判断冠心病的严重程度,能预测急性冠脉综合征发生的危险性,但与冠状动脉的病变程度无明显关系,MCP-1和IL-18的正相关提示因子间相互作用可能共同促进冠脉综合征的发生和发展。     

CD4+白细胞介素-17+辅助性T细胞对香烟暴露小鼠肺部炎症及肺气肿的作用

Objective To evaluate the expression and the role of Th 17 in cigarette smoke-induced lung inflammation and emphysema in mice.Methods Forty male BALB/c mice were randomly divided into 4 groups, including a control group C12, a control group C24, a smoke-exposure 12 week group (S12) and a smoke-exposure 24 week group S24 (n = 10 each).Morphological changes were evaluated by mean linear intercepts and destructive index (DI).The proportion of CD4+ IL-17 + Th17, CD4+ IFN-γ+ Th1, CD4+ IL-17 +IFN-γ+ T( Th17/ Th1 ), CD8+ IFN-γ+ Tc1, CD8+ IL-21R + and CD4+ IL-17 + IL-21 + T cells in lungs of mice was determined by flow cytometry.The mRNA expressions of RORγt and IL-17 were evaluated by real-time PCR.Results Mean linear intercepts and DI were significantly higher in S12 and S24 groups [(39 ± 4)μm, (47 ±7) μm], (39.1 ± 1.6, 45.2 ±3.1 ) as compared to C12[(32 ±4) μm,28.2 ± 1.6] and C24groups [(33 ± 3 ) μm ,28.9 ± 2.1], all P ＜ O.05.The percentage of Th17 of S12 and S24 groups [(3.3 ±1.1 )%, (7.2 ±2.2)%] was significantly increased as compared with that of C12 and C24 groups [( 1.8± 0.8) %, (2.0 ± 0.6) %], all P ＜ 0.05.The mRNA levels of RORγt [( 25 ± 4), ( 35 ± 3 )] and IL-17 [(26 ± 3), (36 ± 3 )] in S12 and S24 groups were higher than in C12 [(10 ± 5 ), (13 ± 5 )] and C24 groups [( 11 ± 7 ), (8 ± 6)], all P ＜ 0.05.The percentage of Th 1, Th17/Th1 and Tc1 cells of S12 and S24 groups [(10.0 ±3.7)%, (26.2 ±6.0)%], [(0.61 ±0.30)%, (1.82 ±0.52)%], [(17.0±4.5 ) %, ( 26.8 ± 8.5 ) %] was significantly increased as compared with that of C12 [( 3.8 ± 1.7 ) %,(0.27±0.17)%, (4.8 ±1.9)%] and C24 groups [(4.2±1.3)%, (0.28±0.11)%, (5.2±1.0)%], all P＜0.05.Moreover, the frequency of Th17 cells had a positive correlation with Th1, Tc1 cells and emphysematous lesions ( r =0.519 - 0.797, all P ＜ 0.01 ).In addition, a positive correlation between Th17/Th1 cells and emphysematous lesions was also found (r =0.742, 0.802, all P ＜0.01 ).The percentage of CD4+ IL-17+ IL-21 +T cells was significantly increased in S12 and S24 groups [(0.19 ±0.04) %, (0.55 ± 0.24) %] compared to controls [(0.07 ± 0.03 ) %, (0.08 ± 0.03 ) %], all P ＜ 0.05.Meanwhile, as compared with that of the controls [( 1.22 ± 0.31 ), ( 1.34 ± 0.18 )], the percentage of CD8+ IL-21 R + T cells was also increased in SI 2 and S24 groups [( 2.94 ± 1.26 ), (4.12 ± 2.26 )], but there were no differences among smoke-exposure groups ( P ＞0.05 ).The frequency of CD4+ IL-17 + IL-21 + T cells had a positive correlation with Th 1, Tc1 cells and emphysematous lesions (r = 0.694 -0.754, all P ＜0.05).And the frequency of CD8+ IL-21R+ T cells also had a positive correlation with emphysematous lesions ( r = 0.516, 0.725, all P ＜ 0.05).Conclusions Cigarette smoke increased the expression and the activity of Th17 in mice.Th17 may play a potential (active) role in the development of lung inflammation through IL-21/IL-21R pathway.     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成过程中血清内毒素含量的变化

目的 探讨内毒素在非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用。方法 通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,并在实验第4、8、12、16、24周分批处死,同期设正常饮食组作为对照。腹主动脉采血,测定血清内毒素,肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素-1(IL-1)β水平,肝组织切片行溶菌酶、CD14免疫组织化学染色。 结果 成功建立大鼠NASH伴肝纤维化模型,NASH大鼠外周血内毒素水甲仅在24周脂肪性肝炎肝纤维化阶段明显升高为(0.23±O.06)Eu/L,对照组为(0.15±0.03)Eu/L(t>2.179,P<0.05),而4周起肝组织CD14表达就上调,溶菌酶阳性的库普弗细胞被激活,并随着实验的进展更加明显。血清TNFα水平从8周起明显增高为(26.39±24.21)pg/ml,对照组为(9.82±9.29)pg/ml(t>2.145,P<0.05),IL-1β从16周起升高为(23.76±21.81)pg/ml,对照组为(6.25±2.98)pg/ml(t>2.145,P<0.05)。 结论 NASH时存在内毒素性肝损伤。内毒素激活肝脏库普弗细胞以及促使TNFα等细胞因子释放可能是NASH的发病机制之一。     

拉米夫定治疗对慢性乙型肝炎患者PBMCs培养上清液中IFN-γ和IL-6表达的影响

目的研究拉米夫定对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清病毒载量和PBMCs表达IFN-γ和IL-6的影响,探讨拉米夫定抗病毒治疗的理论基础。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测拉米夫定治疗前后慢性乙型肝炎患者HBVDNA载量和外周血单个核细胞(PMBC)经植物血凝素(PHA)培养后分泌IFN-γ、IL-6的水平变化。根据治疗前基线将慢性乙型肝炎患者的HBVDNA载量分为高(>107copies/ml)、中(105~6copies/ml)、低(<105copies/ml)三组。结果治疗前CHB患者IFN-γ为139.98±112.61pg/ml,对照组286.31±180.25pg/ml(P<0.01);IL-6为697.73±285.34pg/ml,对照组384.42±166.83pg/ml(P<0.01);IFN-γ在HBV高载量组最低,低载量组最高;IL-6在低载量组最低,高载量组最高。不同应答效应组IFN-γ和IL-6含量不同,完全应答组与部分应答组、无应答组比较有显著性差异(P<0.01;P<0.05)。结论CHB患者PBMCs表达IFN-γ和IL-6的水平与患者的病毒载量相关。抗病毒治疗后IFN-γ水平明显提高,有助于介导细胞免疫应答。     

系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-1家族及白细胞介素-34水平

目的检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清白细胞介素(interleukin,IL)-1家族和IL-34水平,探讨其在SLE中的作用。方法采用蛋白芯片技术测定6例SLE患者及6名正常对照者血清IL-1家族成员水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定67例SLE组及86名正常对照组血清IL-34水平。结果与正常对照组相比,SLE组血清IL-1家族成员中IL-18和IL-36β水平升高[(21 405.00±3 098.96)pgml vs.(10 096.00±1 162.09)pgml,(275.50±78.75)pgml vs.(144.83±45.37)pgml,均P0.05];IL-36Ra水平降低[(902.00±361.29)pgml vs.(2 916.00±1489.56)pgml,P0.05];另外,SLE组血清IL-34水平明显高于正常对照组[(100.36±70.38)pgml vs.(41.90±6.89)pgml,P0.000 1],差异均有统计学意义。结论 SLE患者血清IL-18、IL-36β、IL-34水平升高,IL-36Ra水平降低,参与SLE发病。     

含CpG的寡脱氧核苷酸与5-氟尿嘧啶联用治疗小鼠肝癌

目的　探讨含CpG的寡脱氧核苷酸(ODN)单独及与5- 氟尿嘧啶(5 -FU)联用对小鼠移植性肝癌的治疗作用。方法　Balb/c小鼠皮下接种肝癌H22 细胞建立荷瘤鼠模型,肿瘤周围皮下分别注射生理盐水(对照组)、无CpG ODN、5 -FU、CpG ODN和CpG ODN+5 FU后,定期测量肿瘤大小。用酶联免疫吸附实验检测鼠血清白细胞介素(IL)- 12和干扰素(IFN) -γ含量;用乳酸脱氢酶释放法检测鼠脾脏自然杀伤(NK)细胞活性。结果　与对照组肿瘤体积[(6710±910) mm3 ]比较, CpG ODN、CpGODN+5- FU及单用5 -FU治疗后,肿瘤体积分别为(3579±481) mm3、(1998±474) mm3 及(2124±434) mm3(P值均<0.01)。对照组鼠血清IL -12 和IFN -γ的含量分别为(238±45) pg/ml和(57±8)pg/ml,与CpG ODN组[IL 12:(464±24) pg/ml;IFN -γ:(134±26) pg/ml]及CpG ODN+5 -FU组[IL -12:(336±29) pg/ml;IFN -γ:(111±5) pg/ml]比较,差异有统计学意义(P值均<0.05)。CpG ODN+5- FU组小鼠血清IL- 12及IFN -γ水平显著高于5- FU组[IL 12:(167±53) pg/ml;IFN -γ:(53±17) pg/ml;P<0.05]。与对照组NK细胞的杀伤活性[(19.2±1.0)%]相比,CpG ODN组[(44.0±1.4)%]及CpG ODN+5 FU组[(30.7±1.3)%]显著增强(P值均<0.05),且CpG ODN+5 FU组显著高于5- FU治疗组[(12.0     

雷公藤多甙对恶唑酮诱导小鼠肠炎模型脾淋巴细胞因子的作用及其机制

目的观察小鼠肠炎模型体外实验中,雷公藤多甙(MGT)对唑酮(oxazolone,OXZ)诱导的小鼠肠炎模型中脾脏淋巴细胞细胞因子分泌类型的影响,从免疫学、分子生物学角度探讨MGT治疗炎症性肠病(IBD)的作用机制.方法采用SJL/J小鼠,经直肠注入OXZ制成IBD模型;3d后将小鼠处死,即刻取出脾脏,收集脾细胞,将MGT(0.1和0.01 mg/ml两个浓度)分别加入培养的淋巴细胞液中,行FILISA检测白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ).结果1.MGT对IFN-γ生成的影响(1)正常对照组未加入MGT组(空白对照)的IFN-γ为(1 24±0 13)pg/ml;0.01mg MGT组为(0.97±0 26)pg/ml;0.1mg MGT组为(0 87±0 18)pg/ml;(P＜0.02);(2)OXZ肠炎模型组与正常对照组比较,未加入MGT组(空白对照)IFN-γ显著降低[(0 65±0 08)pg/ml比(1.24±0.13)pg/ml,P＜0.01],0.01mg MGT组和0.1mg MGT组IFN-γ均低于空白对照[分别为(0.47±0.05)pg/ml;(0 46±0 09)pg/ml],但差异无显著性.2.MGT对IL-4生成的影响(1)正常对照组未加入MGT组(空白对照)的IL4为(5.65±0.48)pg/ml;MGT有显著抑制作用[0.01 mg/ml MGT组为(4.97±0.38)pg/ml;0.1 mgMGT组为(3.98±0.32)pg/ml;P＜0.01];(2)0XZ肠炎模型组与对照组比较,未加入MGT组(空白对照)IL-4显著升高[(7.83±0.69)pg/ml比(5.65±0.48)pg/ml,P<0.01];0.01mg MGT组(7.07±0.47)pg/ml和0.1 mg MGT组(6.35±0.48)pg/m1与空白对照组比较,差异有显著性(P<0.01).结论雷公藤既可抑制IFN-γ(Th1)生成,亦可抑制IL-4(Th2)分泌.由于OXZ诱导的小鼠实验性肠炎模型系以1L-4过量生成为主的Th2型免疫反应,由此可以推测MGT治疗溃疡性结肠炎的机制可能与其抑制IL-4(Th2)生成有关.     

日本血吸虫卵对小鼠溃疡性结肠炎保护机制的探讨

目的探讨日本血吸虫卵对小鼠溃疡性结肠炎保护作用的免疫调节机制。方法以10 000个日本血吸虫卵经腹腔注射免疫小鼠4次,每次间隔1周,末次免疫后6 d用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎模型,观察虫卵免疫组和未免疫组小鼠的细胞因子和调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)亚群CD4+CD25+Foxp3+水平的变化。结果未经虫卵免疫的小鼠经TNBS诱导后结肠炎症状明显,细胞因子IFN-γ水平高达3.47±0.87 ng/ml,IL-4I、L-5和IL-10水平则较低分别为146.06±45.76 pg/ml,140.32±39.01 pg/ml,385.91±134.89 pg/ml;经虫卵免疫的结肠炎小鼠的炎症得到明显控制,IFN-γ表达被明显抑制其水平为1.53±0.51 ng/ml,IL-4I、L-5和IL-10水平显著升高分别为598.50±135.90 pg/ml,217.86±77.82 pg/ml,799.651±197.93 pg/ml。经虫卵免疫的结肠炎小鼠脾脏CD4+CD25+FoxP3+T细胞亚群比例为(3.55±0.81)%,显著高于未免疫组结肠炎小鼠的(2.31±0.39)%。结论日本血吸虫卵免疫对TNBS诱导的结肠炎小鼠具有保护作用,其保护性机制可能与CD4+CD25+FoxP3+T细胞对Th1过度反应的反馈性调节有关。     

培哚普利对急性冠状动脉综合征患者白介素-6和肿瘤坏死因子-α水平的影响

目的　观察急性冠状动脉综合征患者使用培哚普利治疗后白介素 - 6( IL- 6)和肿瘤坏死因子 ( TNF- α)水平的变化。方法　选择 10 0例诊断为不稳定型心绞痛 ( 73例 )和急性心肌梗死 ( 2 7例 )的病人分为两组 ,A组 ( 5 0例 )接受培哚普利治疗 2周 ,B组 ( 5 0例 )未接受培哚普利治疗。入院时和治疗 2周后分别检测 IL- 6和 TNF- α浓度。结果　入院时 A组 IL- 6和 TNF- α水平与 B组相比无显著性差异 ( 60 8.4± 112 .3 pg/ ml vs5 83 .1± 10 6.4pg/ m l,46.0±10 .4pg/ ml vs 44 .1± 8.8pg/ ml,P>0 .0 5 ) ,治疗两周后两组 IL - 6和 TNF-α水平均有降低 ,而 A组病人两周后 IL -6和 TNF- α水平与 B组相比有显著降低 ( 2 40 .5± 5 0 .4pg/ ml vs414.3± 98.6pg/ m l,16.2± 3 .5 pg/ m l vs3 2 .7± 6.2 pg/ ml,P<0 .0 5 )。结论　急性冠状动脉综合征患者应用培哚普利治疗后 IL - 6和 TNF-α水平降低 ,提示培哚普利可能有直接抗炎作用