辛伐他汀对兔脑血管痉挛中炎性反应的影响

目的探讨辛伐他汀对兔蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）中炎性反应的影响。方法36只新西兰大白兔随机分为3组,每组12只。①对照组：给予常规饲养并枕大池二次注入等渗盐水;②sAH组：通过枕大池二次注血法建立SAH模型;③SAH＋辛伐他汀组：对SAH兔经胃灌注辛伐他汀5mg·kg^-1·d^-1,连续7d。在各组兔造模前后,行两次脑血管造影。第2次脑血管造影后1d,取基底动脉组织制作病理切片,分别于光镜和透射电镜下观察其显微及超微结构。行免疫荧光染色后,采用共聚焦显微镜观察基底动脉内皮细胞核转录因子-κB（NF—kB）表达量的变化,同时采用实时荧光定量PCR技术检测其细胞间黏附分子1（ICAM-1）mRNA的表达。结果①脑血管造影显示二次注血后,SAH组兔基底动脉出现明显的痉挛,管径变细,SAH组的管径为（0．68±0．09）mm,对照组为（0．87±0．06）mm,P〈0．05;而给予辛伐他汀后,痉挛减轻,SAH＋辛伐他汀组的管径为（0．77±0．08）mm,与SAH组管径比较,P〈0．05。SAH组兔基底动脉壁略有增厚,电镜显示平滑肌细胞内合成旺盛;而给予辛伐他汀预处理后,这些变化明显减轻。@SAH组兔基底动脉管壁内皮细胞内NF—κB表达高于对照组（156±9和84±8,P〈0．05）,而给予辛伐他汀后,NF—κB表达量降低（118±9）,与SAH组比较,P〈0．05。SAH组兔基底动脉组织ICAM-1mRNA的表达量高于对照组（0．843±0．029和0．673±0．011,P〈0．05）;给予辛伐他汀后,基底动脉ICAM-1mRNA的表达量低于SAH组（0．763±0．037）,与SAH组比较,P〈0．05。结论辛伐他汀可能通过抑制炎性反应从而预防SAH后CVS的发生,其抑制炎性反应,可能是通过NF—κB信号途径实现的。     

c-jun氨基末端激酶在兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中的作用

目的观察兔蛛网膜下腔出血(SAH)后基底动脉中原癌基因c-jun氨基末端激酶(JNK)的表达规律,以探讨其与脑血管痉挛(CVS)的关系。方法将72只新西兰大白兔随机分为2组:①对照组:12只;②SAH组:60只。SAH组又随机分为注血后1、3、5、7、10 d,共5组,每组12只。采用枕大池二次注血法建立稳定的兔CVS模型,应用苏木素-伊红染色和Western印迹分别观察兔基底动脉的形态学改变和JNK的表达情况,并通过测量管径的变化来判断CVS的严重程度。结果 SAH组的基底动脉出现相应的病理学改变,管腔狭窄呈急性期收缩和迟发性痉挛双相改变;SAH组的JNK表达升高,在第7天时达到高峰(P<0.01),第10天后表达稍下降,但仍高于对照组(P<0.01)。结论在兔CVS模型的基底动脉中JNK的表达明显上调,呈现一定的时序性变化规律,与迟发性CVS的严重程度一致,在CVS的发生和发展过程中起了重要的作用。     

动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血液NF-κB与sICAM-1含量变化的临床意义

目的研究动脉瘤性蛛网膜下腔出血（SAH）患者血液核转录因子-кB（NF-κB）与可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）的动态变化规律。方法对35例动脉瘤性SAH病人发病后1～3d、7～9d、11～13d血液NF-κB与sICAM-1进行动态观察，用TCD检测大脑中动脉血流速度（VMCA）。结果动脉瘤性SAH患者血液NF-κB与sICAM-1分别在发病后1～3d各均值明显高于对照组和肿瘤组，而在7～9dsICAM-1的均值高于对照组和肿瘤组。结论NF-κB的高表达主要发生在CVS的早期。通过对NF-κB的早期监测，可以很好地预防、控制CVS的发生、发展。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对兔脑血管痉挛的作用

目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对兔蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛的影响及NF—κBp65、ICAM-1在基底动脉的表达。方法新西兰大白兔48只（雌雄不限）。随机分为对照组（8只）、SAH组（20只）及PDTC组（20只）。SAH组和PDTC组又分为SAH后1、3、5、7、14d亚组,每组4只。采用枕大池二次注血法制作SAH模型。PDTC组在第2次注血后即脑池内注射PDTC,0．25ml／次,2次／d,连续2d。观察基底动脉管径和厚度、病理形态学改变;免疫组化检测NF—κBp65、细胞间黏附分子1（ICAM-1）的表达。结果①SAH组在第3天开始出现基底动脉管径变细、管壁增厚,第7天最明显,与第1天比较,差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;PDTC组仅第7天与第1天比较有差异（P〈0．05）。在第3、5、7天时,SAH组与对照组及PDTC组比较上述指标,差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;PDTC组与对照组比较,差异均无统计学意义。（2）PDTC组与SAH组同时间点比较,病理形态损害、炎性细胞浸润程度减轻。③SAH组在第3天开始出现NF—κBp6、ICAM—1表达,第7天达高峰。第3、5、7d（ICAM-1包括第14d）,SAH组表达量均明显高于对照组和PDTC组（P〈0．01）。PDTC组与对照组比较亦增高,P〈0．05。结论PDTC对SAH后迟发性脑血管痉挛具有一定的预防作用。通过抑制NF—κBp65、ICAM-1的表达可能是其机制之一。     

阿托伐他汀在蛛网膜下腔出血脑血管痉挛中的预防作用机制

目的探讨阿托伐他汀在蛛网膜下腔出血(SAH)后并发脑血管痉挛(CVS)的预防作用机制。方法将54只成年SD大鼠随机分为对照组(18只)、模型组(18只)、治疗组(18只),治疗组在造模前予以阿托伐他汀20 mg/(kg·d),连续治疗7 d。造模成功后24 h对各组大鼠进行神经行为学评分,根据HE染色测量基底动脉血管横截面积和血管壁厚度,评估CVS情况。获取脑组织测量大鼠脑水肿程度,ELISA法检测血清内皮素-1(ET-1),采用蛋白免疫印记法检测基底动脉管壁平滑肌核转录因子-κB(NF-κB)蛋白及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达。结果治疗组与模型组相比基底动脉血管横截面积增加、管壁厚度减少,ET-1蛋白表达减少,脑水肿程度改善,NF-κB蛋白表达下调,eNOS蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P0.05)。结论阿托伐他汀对大鼠SAH后CVS有明显抑制作用,机制可能是通过减少ET-1表达缓解脑水肿、上调eNOS的表达并下调NF-κB的表达来实现的。     

CT血管造影评价兔基底动脉痉挛模型

目的探讨采用多层螺旋CT血管造影（multi-slices CT angiography，MSCTA）技术显示兔基底动脉，为兔脑血管痉挛（cerebralvasospasm，CVS）动物模型建立新的评价方法。方法取日本大耳白兔25只，分为对照组（5只）和蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）组（20只）。SAH组采用枕大池二次注血法制作兔脑基底动脉CVS模型，均经兔耳后中央静脉穿刺注射非离子型对比剂（碘海醇，含碘量300mg／m1），剂量按2．6ml／kg（体重）。采用高压注射器给药，注射速度0．4ml／s，延时15S开始扫描。SAH组于注血后1、4、7、11d，行2～5次基底动脉MSCTA。原始图像三维后处理技术采用容积重建（volume rendering，VR）。结果SAH组注血后1、4、7、11d基底动脉直径分别为（1．28±0．36）、（0．82±0．24）、（0．83±0．20）及（0．95±0．28）mm。VR法测得实验兔注血前基底动脉横径平均为（1．30±0．40）mm。CVS在注血后第1天出现，第4天达到高峰，第11天可见基底动脉痉挛有一定程度的缓解。结论MSCTA技术能够较理想地显示兔基底动脉，是评价活体动物CVS模型的可靠方法。     

核转录因子-κB和肿瘤坏死因子-α在动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血清中的表达

目的探讨核转录因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与动脉瘤性蛛网膜下腔出血(a SAH)后脑血管痉挛(CVS)之间的关系。方法选取a SAH患者42例的血液NF-κB、TNF-α分别进行动态检测,并采用经颅多普勒超声(TCD)检测大脑中动脉血流速度(VMCA)。结果 a SAH患者血液NF-κB在发病后1~3天、7~9天各均值明显高于对照组,TNF~α在发病后l~3天、7~9天各均值明显高于对照组。结论 a SAH患者NP-κB、TNF-α含量变化与CVS呈正相关。     

银杏总黄酮通过ERK/NF-κB信号通路对兔蛛网膜下腔出血后血管痉挛的影响

目的 探究银杏总黄酮通过细胞外调节蛋白激(ERK)/核因子(NF)-κB信号通路对兔蛛网膜下腔出血(SAH)后血管痉挛的影响。方法 雄性家兔随机分为假手术组、模型组、银杏总黄酮(156 mg/kg)组、3,4,5,4′-四甲氧基二苯乙烯(DMU-212,ERK激活剂,18 mg/kg)组、银杏总黄酮(156 mg/kg)+DMU-212(18 mg/kg)组,每组6只,模型组和用药组兔建立SAH模型。分组处理后,检测各组神经功能并进行评分;尼氏染色检测各组大脑海马神经元形态变化;苏木素-伊红(HE)染色检测各组大脑基底动脉痉挛情况,比较各组管壁厚度及管腔横截面积;测定各组基底动脉血流速度和脑组织氧化应激因子[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)-Px、丙二醛(MDA)];Western印迹法检测各组脑组织ERK/NF-κB通路相关蛋白p-ERK/ERK、核内NF-κB p65蛋白表达水平。结论 与假手术组相比,模型组大脑海马神经元出现明显损伤,基底动脉表现出严重的痉挛现象,管壁厚度、神经功能评分、血流速度、MDA水平、p-ERK/ERK、核内NF-κB p65表达明显...     

实验性结肠炎大鼠内毒素-Toll样受体4-核因子κB信号通路的变化及益生菌的作用

目的探讨和分析实验性结肠炎大鼠血浆内毒素水平的变化及结肠Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF-κB）表达及意义,并分析益生菌的作用。方法30只雄性W istar大鼠均分为正常对照组（NC组）、模型对照组（UC组）和益生菌治疗组（PC组）;UC和PC组建立2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）实验性结肠炎大鼠模型,PC组大鼠给予双歧三联活菌悬液（2.2×10^9CFU/只）治疗,1次/d,共4周。光镜下观察肠黏膜炎性反应并评分;鲎试验检测各组大鼠血浆内毒素水平;W estern印迹法和实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠TLR4和NF-κB p65蛋白及mRNA的表达,分析其变化及益生菌的作用。结果PC组炎性反应评分较UC组明显降低（P〈0.05）,但高于NC组（P〈0.01）;PC组血浆内毒素明显低于UC组（P〈0.05）,但高于NC组（P〈0.01）;UC组TLR4和NF-κB p65的蛋白及mRNA表达明显高于PC组和NC组（P〈0.05、0.01）,PC组高于NC组（P〈0.01）。结论内毒素-TLR4-NF-κB信号通路参与了大鼠实验性结肠炎的发生和发展,减少内毒素的产生、降低大鼠结肠TLR4和NF-κB表达可能是益生菌减轻大鼠结肠炎症的机制之一。     

罗格列酮对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的保护作用

目的研究过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPAR-γ）激动剂-罗格列酮对大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）模型脑血管痉挛的作用及对基底动脉Toll样受体4（TLR4）介导的炎性信号通路的影响。方法取SD雄性大鼠78只,应用抽签法随机分为对照组、SAH组及罗格列酮组,每组26只。采用枕大池二次注血法建立SAH模型。在2次注血前后30min,罗格列酮组大鼠经腹腔注射罗格列酮（3mg/kg,0．5mg/ml,二甲亚砜为溶剂）,给予SAH组大鼠等体积的二甲亚砜;对照组经枕大池注入等量等渗盐水,腹腔注射等体积二甲亚砜。于造模后第5天取基底动脉标本,HE染色观察管径和横截面积,免疫组化染色观察髓过氧化物酶（MPO）和细胞间黏附因子γ（ICAM-γ）的表达,Western blot检测TLR4蛋白的表达。结果对照组、SAH组、罗格列酮组大鼠的基底动脉的横截面积分别为（555084±4630）、（32139±3239）、（459694±4465）μ㎡,直径分别为（2604±14）、（1954±12）、（2374±12）μm。ICAM-1阳性细胞数分别为（0．5±0．2）、（4．7±0．7）、（2．5±0．6）个,MPO阳性细胞数分别为（0．9±0．3）、（17．9±2．6）、（6．5±1．3）个。TLR4蛋白的表达量分别为0．15±0．19、1．094±0．14、0．45±O．16。SAH组、罗格列酮组的上述指标与对照组比较差异有统计学意义,SAH组与罗格列酮组比较差异亦有统计学意义,P值均〈0．01。结论罗格列酮可能通过抑制TLR4信号通路途径,减轻SAH后基底动脉的炎性反应,缓解脑血管痉挛。     

米力农对兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的作用及其机制研究

目的探讨米力农对兔蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛的作用及其机制。方法取3个月龄日本大耳白兔32只,随机分为SAH组、对照组、米力农组及米力农+N-硝基-左旋精氨酸甲酯(L-NAME)组,共4组,每组8只。采用枕大池二次注入自体血建立SAH模型。向对照组兔枕大池内注入等渗盐水替代自体血,其他操作同SAH组。在SAH造模后30 min,对米力农组兔由耳源静脉注射米力农溶液5 ml(30μg/kg);米力农+L-NAME组,先经耳源静脉注射米力农溶液(30μg/kg),再注射L-NAME(30 mg/kg),共5 ml;对照组、SAH组注射等渗盐水5 ml。对4组兔均连续给药3 d,1次/d。术后第3天应用CT血管造影(CTA)和经颅多普勒超声(TCD)观察各组兔基底动脉的管径和血流速度。结果 TCD检查显示,对照组、SAH组、米力农组、米力农+L-NAME组基底动脉的平均血流速度分别为(19.4±1.8)、(32.7±4.2)、(17.8±1.8)及(33.2±7.2)cm/s;收缩期峰值流速分别为(27±5)、(45±4)、(29±3)及(44±4)cm/s。CTA检查显示,4组基底动脉管径分别为(1127±140)、(772±116)、(1113±101)及(802±91)μm。上述指标各组间比较,差异均有统计学意义,P<0.01。结论米力农对SAH后脑血管痉挛有缓解作用,其扩血管作用可能与L-NAME抑制一氧化氮合酶活性有关。     

R－型钙通道阻滞剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑动脉钙通道相关蛋白的影响

目的研究蛛网膜下腔出血（SAH）后脑动脉R-型钙通道的表达情况,并探讨R-型钙通道阻滞剂——SNX-482对脑动脉收缩相关蛋白的作用。方法20只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、SAH组、SAH＋尼莫地平组、SAH＋SNX-482组,每组5只。采用大鼠鞍上池注射自体动脉血法制备SAH模型,其后第1、2日每天向假手术组和SAH组的脑池内注射25μl等渗盐水,向SAH＋尼莫地平组和SAH＋SNX-482组注射25μl尼莫地平或SNX-482。第3日取脑动脉标本,后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹半定量检测R-型钙通道蛋白和调宁蛋白（calponin）的表达水平,经尿素甘油-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹检测肌球蛋白轻链2（MLC2）磷酸化百分比。结果①假手术组、SAH组、SAH＋尼莫地平组和SAH＋SNX-482组R-型钙通道蛋白相对量分别为0．38±0．08、0．86±0．07、0．66±0．11和0．72±0．09,假手术组的蛋白相对量均低于其他三组（P〈0．05）;②上述各组calponin相对量分别为2．32±0．14、0．54±0．17、0．75±0．19和1．42±0．15,各组间差异均具有统计学意义（P〈0．05）;③上述各组MLC2磷酸化百分比依次为12．2±2．8、41．0±3．2、36．1±2．8和25．3±1．9,除SAH和SAH＋尼莫地平两组外,其余各组间差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论R-型钙通道阻滞剂可抑制SAH大鼠脑动脉的calponin降解和MLC2磷酸化的程度,其作用强于L-型钙通道阻滞剂尼莫地平。     

重组人促红细胞生成素对脑梗死患者的脑保护作用

目的观察重组人促红细胞生成素（rHu—EPO）治疗脑梗死的疗效。方法根据发病时间,将217例脑梗死患者分为急性期组（发病≤48h）113例和亚急性期组（发病〉48h至5d）104例。每组又按抽签法随机分为2个亚组,A1组（急性期对照组）50例,A2组（急性期治疗组）63例;B1组（亚急性期对照组）50例,B2组（亚急性期治疗组）54例。各组患者均接受基础治疗,A2组和B2组辅助rHu—EPO治疗,3000U／次,皮下注射,1次／3d,共2次。治疗前和治疗后第1、6个月时,采用改良爱丁堡±斯堪的那维亚评分（MESSS）评价神经功能缺损状况,检测治疗后14d时血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平,并观察血清一氧化氮（NO）变化。结果①治疗后第1、6个月A2组患者MESSS分别为16±6、10±7,A1组分别为21±8、14±4,两组间第1、6个月比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;治疗后14d,A2组NSE为（10．0±3．6）μg/L,NO为（41±6）μmol／L,A1组NSE为（12．4±5．8）μg／L,NO为（47±10）μmol／L,两组比较,P〈0．05和P〈0．01。②第1、6个月B2组与B1组间MESSS差异无统计学意义（均p〉0．05）;14d时两组间NO水平相近（P〉0．05）,但两组间NSE比较[（12．0±5．1）、（14．3±4．8）μg/L],差异有统计学意义（P〈0．05）。③第1、6个月A2组与B2组间MESSS比较,差异有统计学意义（均P〈0．001）。结论EPO能改善脑梗死急性期患者的近期预后,具有脑保护作用;但对亚急性期患者的预后,未显示有改善作用。短期应用rHu—EPO,无明显不良反应。其治疗机制之一可能是抑制了NO过量生成。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺血-再灌注大鼠核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）对局灶性脑缺血-再灌注大鼠的脑保护作用及对核因子KBp65（NF—kB p65）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）表达的影响。方法 取健康雄性SD大鼠72只，采用随机数字法分为假手术组、缺血再灌注组、PACAP组，每组大鼠24只，每组再分为再灌注12h和24h组，每时间点12只大鼠。采用线栓法建立大脑中动脉缺血模型，于缺血后2h进行再灌注。PACAP组于再灌注30min内，由尾静脉注射（5×10^-7）％的PACAP，（5×10^-9）g／kg，假手术组和缺血-再灌注组，用等体积（0．1ml／kg）的等渗盐水代替PACAP。再灌注12、24h取脑，光镜下观察脑组织的结构；并采用Western印迹法检测NF—kBp65的表达，免疫组化法检测TNF—d的表达。结果 ①PACAP组大鼠光镜下脑组织细胞损伤程度与缺血-再灌注组相比明显减轻。②PACAP再灌注12、24h，TNF—α阳性细胞的表达分别为（20．0±2．5）、（30．7±1．3）个／高倍视野，缺血-再灌注组分别为（40．8±3．7）、（60．7±3．5）个／高倍视野，与假手术组的（2．8±0．8）、（3．0±Q7）个／高倍视野的表达比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），缺血-再灌注组与PACAP组比较，差异亦有统计学意义（P〈0.01）。③再灌注12和24h，PACAP组NF—kB065表达的灰度值为57±7、49±8，缺血-再灌注组为90±14、74±10，与假手术组的41±17、41±10比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），缺血-再灌注组与PACAP组比较差异亦有统计学意义（P〈0．01）。结论 PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血-再灌注后TNF—α、NF—kB p65的表达，这可能是其脑保护作用机制之一。     

促红细胞生成素对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

目的探讨促红细胞生成素(EPO)在大鼠心肌缺血过程中的保护作用及其可能机制。方法建立大鼠心肌缺血模型。将雄性Wistar大鼠60只随机分为治疗组(n=30)和对照组(n=30)。比较24、48 h及1周后血清肌钙蛋白(cTnI)及心肌组织丙二醛(MDA)含量的变化;TFC染色法测定心肌梗死面积;电镜观察心肌超微结构的变化。结果 EPO治疗组大鼠于24、48 h及1周的cTnI水平分别为(10.05±0.81) μg/L、(8.67±0.63) μg/L和(1.36±0.59)μg/L,而对照组相应时间的cTnI水平分别为(11.87±1.19)μg/L、(10.12±0.78)μg/L,和(2.34±0.65)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组大鼠心肌组织MDA含量在24、48 h和1周时分别为(1.56±0.09)nmol/L、(1.34±0.18)nmol/L和(1.12±0.10)nmol/L,而对照组心肌组织存相对应时间的MI)A含量分别为(2.02±0.14)nmol/L、(1.84±0.20)nmol/L和(1.61±0.11)nmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。EPO治疗组大鼠于24、48 h及1周的心肌梗死面积(心肌梗死面积/心室肌总面积)分别为30.33%±2.02%、26.25%±3.81%和27.18%±5.15%,而对照组相应时间的心肌梗死面积比例分别为41.11%±1.65%、36.25%±1.85%和38.58%±3.09%,治疗组的心肌梗死面积明显减小,与对照组相比,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 EPO对大鼠心肌急性缺血损伤有明显的保护作用,其机制可能与减轻氧自由基及钙超载损害有关。     

缺血预处理对大鼠脑梗死后NF—KB和细胞间黏附因子1表达的影响

目的研究NF-KB与细胞间黏附因子1（ICAM-1）在脑缺血预处理后,诱导脑缺血耐受过程中的作用。方法取100只清洁级Wistar大鼠,随机分为对照组、缺血组、预处理组和缺血预处理组。建立局灶缺血和缺血预处理模型,观察相应时间点大鼠的神经行为学评分、脑梗死体积比、缺血区域NF-KB与ICAM-1的表达情况。结果①缺血组的神经功能缺损评分高于缺血预处理组,脑梗死体积比[（28．6±3．2）％对（16．2±3．8）％,t=2．668]高于缺血预处理组,差异均有统计学意义,P〈0．05。②缺血预处理组的NF—KB阳性细胞数量均低于同时间点的缺血组,但高于预处理组,差异有统计学意义,P〈0．05;缺血预处理组的阳性细胞数量达高峰时间点延迟为48h。③缺血预处理组的ICAM-1阳性细胞数量均低于同时间点的缺血组,但高于预处理组,差异有统计学意义,P〈0．05。结论缺血预处理可减少缺血后NF-KB、ICAM-1的表达,抑制炎性反应可能是缺血预处理诱导脑缺血耐受的机制之一。