细胞角蛋白20对膀胱癌早期诊断的前瞻性研究

目的：评估细胞角蛋白20（CK20）标志物作为膀胱癌早期诊断及临床监测的价值。方法：对62例患者的尿液进行尿脱落细胞学及CK20标志物免疫荧光检测的前瞻性研究。分析参数包括肿瘤数目、大小及WHO分级，术前或活检前尿脱落细胞学和CK20标志物。结果：病理活检证实15例移行细胞癌中，CK20为13例阳性，2例阴性；47例非膀胱癌中，CK20标志物2例假阳性。与尿脱落细胞学比较，CK20标志物对膀胱移行细胞癌诊断的特异性和阳性预报值更高，分别为96．0％比82．5％（U＝2．18，P＜0．05），86．7％比52．4％（U＝2．16，P＜0．05）；但两者在敏感性和阴性预报值间无显著性差异（U值分别为：0．91和1．02，P＞0．05）。CK20表达与肿瘤分级间无明显相关性。结论：CK20是诊断膀胱移行细胞癌的一种良好标志物，其特异性明显优于尿脱落细胞学。     

环氧化酶-2 在膀胱癌组织及尿脱落细胞中的表达和意义

 目的 探讨COX-2在膀胱癌组织中的表达，了解尿脱落细胞COX-2表达在膀胱癌早期诊断中的价值。方法 应用免疫组化技术检测48例膀胱移行细胞癌组织、免疫细胞化学技术检测40例膀胱移行细胞癌患者和30例非肿瘤患者尿脱落细胞COX-2的表达。结果 膀胱移行细胞癌组织COX-2阳性表达率为72．9％，对照组正常膀胱黏膜无表达。COX-2的表达与膀胱癌临床分期显著相关(P<0．05)，不同病理分级膀胱癌的表达差别无显著性意义。非肿瘤患者尿脱落细胞无COx-2表达，膀胱癌尿脱落细胞COX-2免疫细胞化学检测阳性率为67．5％，明显高于常规尿细胞学的37．5％(P<0．05)，尤其对于G1级和Ta～T1期的低级、早期肿瘤，尿脱落细胞COX-2免疫细胞化学检测与常规尿细胞学检查相比，具有显著性意义(P<0．05)。结论 COX-2在膀胱移行细胞癌的发生发展中起重要作用，与肿瘤的浸润、转移相关。尿脱落细胞COX-2表达检测特异性高，可作为早期诊断膀胱癌的一种标志物。     

尿细胞角蛋白检测与尿脱落细胞学检查在膀胱癌诊断中的价值

目的:探讨尿细胞角蛋白检测与尿脱落细胞学检查在膀胱移行细胞癌诊断中的价值。方法:136例怀疑膀胱癌者,进行尿细胞角蛋白8和18的含量(UBC值)。检测与尿细胞学检查,其中87例经组织学证实为膀胱移行细胞癌。比较两者诊断膀胱癌的敏感性和特异性。结果:尿细胞角蛋白的敏感性为70.1%,特异性为73.3%;尿细胞学的敏感性为42.5%,特异性为83.7%。尿细胞角蛋白在膀胱癌不同分级和分期中的敏感性优于尿细胞学(P<0.05)。结论:尿细胞角蛋白的检测在早期诊断膀胱癌方面优于尿细胞学检查,可作为膀胱癌的早期检测指标。     

膀胱移行细胞癌尿脱落细胞CD44v6 mRNA表达的临床意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞CD44v6mRNA的表达及其临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测膀胱移行细胞癌37例,所有患者行经尿道膀胱肿瘤电切术或膀胱部分切除术;20例泌尿科非肿瘤患者以及10例健康志愿者尿脱落细胞CD44v6mRNA的表达设为对照组。结果 术前37例膀胱移行细胞癌中有29例尿脱落细胞CD44v6mRNA表达阳性,阳性率为78．4％,术后2周37例膀胱移行细胞癌尿脱落细胞CD44v6mRNA表达均为阴性;20例泌尿科非肿瘤患者以及10例健康志愿者尿脱落细胞CD44v6mRNA表达均为阴性。结论 尿脱落细胞CD44v6mRNA的表达阳性可以作为膀胱移行细胞癌的证据之一,有助于膀胱移行细胞癌的筛选和术后随访。     

CK20在血尿患者膀胱癌诊断中的前瞻性研究

目的评估无痛性血尿患者尿脱落细胞CK20表达的检测在诊断膀胱癌的前瞻性研究中的价值。方法采用双盲法检测59例无痛性血尿患者尿脱落细胞CK20mRNA的表达,另取20例正常对照标本。分析参数包括肿瘤数目、大小、病理和CK20mRNA标志物。结果17例CK20阳性者中病理活检确诊15例为膀胱癌。该项检测具极高的特异性(90·91%)及阳性预报值(88·24%)。在复发病例中阳性率(58·82%)比初发者中(25·00%)明显要高,P=0·0498。CK20表达与肿瘤分级间无明显相关性。结论CK20阳性表达在血尿患者膀胱癌诊断预测中极具价值。     

CK20在血尿患者膀胱癌诊断中的前瞻性研究

目的：评估无痛性血尿患者尿脱落细胞CK20表达的检测在诊断膀胱癌的前瞻性研究中的价值。方法：采用双盲法检测59例无痛性血尿患者尿脱落细胞CK20mRNA的表达，另取20例正常对照标本。分析参数包括肿瘤数目、大小、病理和CK20mRNA标志物。结果：17例CK20阳性者中病理活检确诊15例为膀胱癌。该项检测具极高的特异性（90．91％）及阳性预报值（88．24％）。在复发病例中阳性率（58．82％）比初发者中（25．00％）明显要高，P=0．0498。CK20表达与肿瘤分级间无明显相关性。结论：CK20阳性表达在血尿患者膀胱癌诊断预测中极具价值。     

Livinα在膀胱移行细胞癌组织中表达的研究

目的：研究膀胱癌相关Livin基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达以及Livin基因表达与膀胱移行癌生物学行为的关系;研究抑癌基因p53在膀胱癌组织中突变以及Livin表达与p53基因突变的关系。方法：100例膀胱移行细胞癌组织,设计Livinα引物,以半定量RT—PCR的方法,检测膀胱癌组织LivinαmRNA,以免疫组化法检测癌组织中p53蛋白。将膀胱肿瘤病理分级、临床分期、是否复发等生物学行为及p53蛋白染色强度分别量化,与组织LivinαmRNA RT-PCR产物量进行等级相关分析。并以10例正常膀胱黏膜作为对照。结果：100例膀胱移行细胞癌,67例检测到LivinαmRNA表达,10例正常膀胱黏膜组织未检测到LivinαmRNA表达,LivinαmRNA在膀胱移行细胞癌组织中表达率高于正常膀胱黏膜,x^2=14．4,P=0．000。LivinαmRNA在膀胱癌组织中表达与p53蛋白阳性（rs=0．465,P=0．002）及肿瘤病理分级（rs=0．463,P=0．002）有相关性。结论：膀胱移行细胞癌组织中可见LivinαmRNA高表达,LivinαmRNA表达与膀胱癌病理分级及癌组织中p53蛋白呈正相关。     

膀胱移行细胞癌的分子细胞遗传学研究

目的　分析膀胱移行细胞癌的染色体畸变。方法　采用 7,9,11,17号染色体着丝粒探针对 34例膀胱移行细胞癌患者尿液、30例膀胱冲洗液的脱落细胞核进行荧光原位杂交 (fluorescenceinsituhybridization ,FISH )研究 ,并同时做了细胞学检查。结果　 (1)膀胱癌患者尿液脱落细胞核中 7,9,11,17号染色体数目畸变阳性率分别为 2 3.5 %、38.2 %、14.7%和 11.8% ;冲洗液中各号染色体畸变阳性率分别为 30 .0 %、5 0 .0 %、2 6 .7%和 16 .7%。其中 9号染色体畸变率较高 ,但与膀胱癌分级、分期无明显关系 ;7号染色体数目畸变与膀胱癌的分期密切相关 ;11,17号染色体数目畸变与膀胱癌分级、分期无显著相关性。 (2 )膀胱癌患者尿液组中尿细胞学、FISH阳性率分别为 2 9.4%和 5 5 .9% ,两种方法联合后阳性率达 6 7.6 % ;膀胱冲洗液组中阳性率则分别为 2 7.6 %和 73.7% ,两种方法联合后阳性率达 80 .0 %。结论　膀胱癌的发生发展与染色体的畸变有关。FISH检测膀胱癌患者尿液、冲洗液脱落细胞间期核染色体数目畸变 ,有可能作为膀胱癌诊断、预后判断的一项辅助方法。     

联合检测尿液Survivin浓度及脱落细胞端粒酶活性在膀胱移行细胞癌中的诊断价值

目的：探讨尿液中Survivin浓度检测联合尿脱落细胞端粒酶活性检测在膀胱移行细胞癌诊断中的应用价值。方法：收集膀胱移行细胞癌患者尿液64例及非膀胱癌对照组患者尿液42例,应用ELISA方法检测各尿液标本中Survivin浓度及脱落细胞端粒酶的活性。结果：尿液中Survivin在膀胱癌诊断中的敏感度为82.8%,特异度为85.7%;尿脱落细胞端粒酶活性检测对膀胱癌诊断的敏感度为84.4%,特异度为69.0%;两种方法联合应用,两者均为阴性时诊断为阴性,否则为阳性,诊断膀胱癌的敏感度为95.3%,特异度为64.3%。结论：应用ELISA方法对尿液中Survivin浓度及脱落细胞端粒酶活性联合检测可显著提高膀胱移行细胞癌诊断的敏感度,而特异度变化不大,因此,两种指标联合检测较单一检测对膀胱移行细胞癌诊断更有价值。     

联合检测尿液Survivin浓度及脱落细胞端粒酶活性在膀胱移行细胞癌中的诊断价值

目的:探讨尿液中Survivin浓度检测联合尿脱落细胞端粒酶活性检测在膀胱移行细胞癌诊断中的应用价值。方法:收集膀胱移行细胞癌患者尿液64例及非膀胱癌对照组患者尿液42例,应用ELISA方法检测各尿液标本中Survivin浓度及脱落细胞端粒酶的活性。结果:尿液中Survivin在膀胱癌诊断中的敏感度为82.8%,特异度为85.7%;尿脱落细胞端粒酶活性检测对膀胱癌诊断的敏感度为84.4%,特异度为69.0%;两种方法联合应用,两者均为阴性时诊断为阴性,否则为阳性,诊断膀胱癌的敏感度为95.3%,特异度为64.3%。结论:应用ELISA方法对尿液中Survivin浓度及脱落细胞端粒酶活性联合检测可显著提高膀胱移行细胞癌诊断的敏感度,而特异度变化不大,因此,两种指标联合检测较单一检测对膀胱移行细胞癌诊断更有价值。     

检测尿脱落细胞中CK-20表达的临床意义

目的探讨膀胱癌病人尿脱落细胞CK-20的表达情况及其可能的临床意义.方法尿液标本经适当处理后,采用RT-QCR方法检测尿脱落细胞中CK-20mRNA的表达情况,分析其与临床病理参数的关系,了解其能否为膀胱癌的一种无创检测手段.结果CK-20mRNA表达在膀胱癌病人尿中阳性率为40.48%(17/42),在浸润性肿瘤病人尿中阳性率较高,但无统计学意义(P＞0.05);在复发病例中阳性率(60%)比初发者中(22.73%)明显要高(P＜0.05).但在所有正常对照者尿中均无表达.结论检测尿脱落细胞CK-20表达可以作为膀胱癌的一种无创诊断及筛查手段.     

Evaluation of two new urinary tumor markers: bladder tumor fibronectin and cytokeratin 18 for the diagnosis of bladder cancer.

Our objectives were to evaluate the diagnostic value of two new urinary tumor markers, cytokeratin 18 (CK18) and bladder tumor fibronectin (BTF), for the detection and monitoring of bladder cancer. The study comprised 931 urine samples belonging to 402 subjects: 112 individuals under suspicion for a primary bladder tumor (group 1); 104 bladder cancer patients under scheduled follow-up (group 2); 109 bladder cancer patients receiving intravesical instillations (group 3); 45 patients with other urological diseases (group 4); and 32 healthy subjects (group 5). Voided urine samples were collected before cystoscopies, between them and before intravesical instillations. CK18 and BTF tests were measured by chemiluminescent immunoassays. Optimal receiver operating characteristic cutoffs of 7.4 microg/L for CK18 and 52.8 microg/liter for BTF rendered overall sensitivities of 66.2% for CK18 and 80.0% for BTF at specificities of 88.4 and 74.7%, respectively. Urinary cytology provided a sensitivity of 29.2% at a specificity of 99.1%. Sensitivities were 80.8, 74.2, and 82.3% for BTF and 71.1, 77.4, and 64.7% for CK18 for groups 1 to 3, respectively. False positive rates were higher for BTF in all groups of patients. Elevated urinary tumor markers during the monitoring of patients with bladder cancer could detect recurrence sooner than scheduled cystoscopies. Persistence of negative markers was greatly indicative of free of disease status in follow-up. CK18 and BTF in urine may eventually prove to be of benefit for specific patients with bladder carcinoma given its higher sensitivity compared with cytology. In selected patients, namely those with persistent negative urinary CK18 and BTF, the number of cystoscopies could be reduced.     

膀胱癌尿液脱落细胞角质素mRNA表达检测方法的建立

目的：建立采用RT—PCR对膀胱癌尿液脱落细胞CK8和CK20的mRNA表达进行分析的实验方法。方法：从22例膀胱癌患尿液脱落细胞中提取总RNA，采用RT—PCR和特异性引物进行逆转录、扩增，并用琼脂糖凝胶电泳进行分析。结果：从所有标本中提取的总RNA均有较好纯度和均一性；22例标本均表达CK8 mRNA，18例标本表达CK20 mRNA。结论：RT—PCR是一种敏感、快捷的检测膀胱癌尿液脱落细胞中CK8、CK20 mRNA表达的方法，可采用此方法从分子水平对膀胱癌患尿液脱落细胞表达产物进行无创性检测，为研究膀胱癌的发病机制、生物学行为和探索膀胱癌早期无创性诊断方法奠定了实验基础。     

检测尿脱落细胞CK20表达的临床意义

目的探讨尿路移行细胞癌(TCC)患者尿脱落细胞CK20的表达及其意义.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测38例TCC患者、6例泌尿系非移行细胞癌肿瘤患者、14例泌尿科非肿瘤患者以及7例健康志愿者尿脱落细胞CK20表达.以GAPDH作为内参照.结果38例TCC患者中33例尿脱落细胞CK20阳性表达,阳性率为86.8%.6例泌尿系非移行细胞癌肿瘤患者、14例泌尿科非肿瘤患者以及7例健康志愿者尿脱落细胞CK20表达阴性.结论检测尿脱落细胞CK20表达诊断TCC敏感性和特异性高,可作为TCC筛查的方法之一.     

Cytokeratin 20 as an immunocytochemical marker for detection of urothelial carcinoma in atypical cytology: preliminary retrospective study on archived urine slides

Previous studies have shown that expression of cytokeratin 20 (CK20), a constituent of intermediate filaments, is increased in malignant versus benign urine samples. To evaluate whether immunocytochemical staining of CK20 on archived urine slides could be used as a potential adjunct marker for triage of atypical urine cytology, we analyzed a total of 77 archived urine slides obtained from a spectrum of patients with various risks of developing urothelial carcinoma. These patients were divided into four groups on the basis of initial urine cytologic results and subsequent follow-up biopsy findings; group 1 had negative results in both evaluations, whereas the results in group 4 were positive for both cytology and biopsy. Groups 2 and 3 had a diagnosis of atypical urine cytology; however, patients in group 3 had a positive follow-up biopsy, and patients in group 2 did not. The Papanicolaou-stained archived urine slides were destained and then restained immunocytochemically with monoclonal antibody against CK20. With 5% positively stained nonumbrella cells as a threshold, CK20 was positive in 94.4% of group 3 or 4 patients. In contrast, CK20 was positive in 27.3% of group 2 patients and in 10.5% of group 1 patients. The overall sensitivity and specificity for CK20 for the detection of urothelial carcinoma in this population of patients were 94.4% and 80.5%, respectively. This study demonstrated that immunocytochemical analysis of CK20 on archived urine slides could be used to triage atypical urine cytology into low- and high-risk categories and that CK20 might be a simple and useful early detection marker for urothelial carcinoma.     

CK20m RNA在大肠癌病人外周血中的表达及其临床意义

目的：以CK20mRNA作为靶产物,检测大肠癌病人外周血中的癌细胞即微转移。并探讨其存在的临床意义。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）。检测20例健康志愿者和47例大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达。同时检测20例大肠癌新鲜组织标本中CK20mRNA的表达。结果：20例大肠癌组织标本均扩增出370bp的条带。结肠腺癌HT-29细胞系作为阳性对照亦扩增出370bp的条带,20例正常人外周血中CK20mRNA表达均阴性。全组47例大肠癌病人,19例外周血中表达CK20mRNA,总阳性率为40.4%(19/47),CK20mRNA的表达与肿瘤Dukes分期,最大直径,肝转移有关,结论：CK20mRNA可作为检测大肠癌病人外周血中微转移的良好指标;外周血中CK20mRNA的检测有助于识别出具有复发或远处转移倾向的高危大肠癌病人。