多发性硬化患者外周血γδT细胞与CD_4~+CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例的变化

目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例的变化。方法采集37例MS患者(MS组)及25例健康对照者(NC组)的外周静脉血,分离外周血单个核淋巴细胞,以流式细胞术检测γδT细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例。结果 MS组外周血γδT细胞比例较NC组显著升高,且活动性患者较非活动性患者进一步升高;MS组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例较NC组显著降低,而活动性患者较非活动性患者进一步降低。MS组外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例呈显著负相关(P<0.05)。结论 MS患者外周血γδT细胞比例的升高可下调CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例,从而促进疾病的发生。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在心脏疾病中的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是体内具有免疫调节功能的一类特殊T细胞亚群。近年来,国内外的大量研究表明Treg与很多种心血管疾病的发生和进展密切相关。因此,认识Treg及其在心脏疾病中免疫抑制的机制,有助于提高心脏疾病的免疫治疗效果。现就CD4+CD25+Treg的产生、特征、作用机制及其与心脏疾病的联系予以综述。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞与支气管哮喘

人体内存在多种调节性T细胞,其中CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Treg)具有独特的作用方式和功能特征。CD4+CD2+5Treg在移植耐受、肿瘤免疫、过敏性疾病及微生物感染方面起着重要作用。支气管哮喘作为一种常见的慢性呼吸道疾病,其发病机制极为复杂,与免疫等多种因素有关。本文就CD4+CD2+5Treg的特性及在哮喘的发病和治疗方面研究进展作一综述。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在儿科临床的实用价值

CD4+CD25+Treg细胞可分为天然性Treg细胞和获得性/诱导性Treg细胞。在病毒感染过程中,CD4+CD2+5Treg细胞维持机体对病毒的免疫耐受状态,促进病毒感染并导致其慢性化。CD4+CD2+5Treg细胞在幼年特发性关节炎的发病过程中发挥重要作用。哮喘患儿血CD4+T淋巴细胞表面的烟碱样乙酰胆碱受体(nAChRα7)表达增加,CD4+CD2+5FoxP3+Treg细胞明显减少。特发性血小板减少性紫癜患儿体内存在自身反应性T细胞的活动及细胞因子的紊乱,CD4+CD25highFoxP3+Treg细胞数量减少。体内外有效诱导、扩增和控制CD4+CD2+5Treg细胞的技术将会为相关儿科疾病的治疗提供崭新思路和有效方法。     

磁激活分选法双重分离大鼠外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞

目的:应用磁激活细胞分选(MASC)技术从卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出大量高纯度CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg),以研究其在支气管哮喘中的作用。方法:从OVA免疫耐受大鼠外周血中分离出PBMCs,应用MASC技术阴性分选CD4+T细胞,再阳性分选出CD4+CD25+Treg;流式细胞仪检测。结果:分选前的CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的11.07%,CD4+T细胞占总数的21.88%;CD4阴性分选后,CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的10.95%,CD4+T细胞占总数的89.28%;CD25阳性分选后,CD4+T细胞超过总数的95%,而CD4+CD25+Treg细胞占总数的90.92%,CD4+CD25+Treg细胞纯度大于90%。结论:应用MASC技术成功从OVA免疫耐受大鼠的PBMCs中分选出了高纯度的CD4+CD25+Treg细胞。     

乳腺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+细胞胞浆FoxP_3与胞膜CD_(127)的关系研究

目的:探讨人体外周血CD4+CD25+细胞胞浆FoxP3与胞膜CD127的关系,为用CD4+CD25+CD127-作为界定调节性T细胞(Treg)的标志提供依据。方法:利用三色流式细胞计数分别测定32份外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127-细胞和CD4+CD25+FoxP3+细胞百分率,对两者作相关性研究分析。结果:人体外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127-与CD4+CD25+FoxP3+细胞的百分率均呈正相关(r值分别为0.962和0.803,P<0.01),CD4+CD25+CD127-的检测比CD4+CD25+FoxP3+检测更简便快捷。结论:人体外周血CD4+CD25+T细胞和血CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127-与CD4+CD25+FoxP3+细胞百分率呈正相关,CD4+CD25+CD127-可以作为界定Treg细胞的标志及其检测。     

TGF-β_1和COX-2对CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的调控作用

作为一种抑制性T细胞功能亚群,CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Treg)在维持机体的免疫自稳和免疫耐受方面发挥了关键作用。近年来研究表明,CD4+CD2+5Treg能通过相同的机制削弱机体的抗肿瘤效应。在乳腺癌、卵巢癌、肺癌以及肝癌等多种实体肿瘤和血液恶性肿瘤患者外周血和肿瘤局部微环境中,CD4+CD25+Treg比例增高,且数目与患者肿瘤进展程度和预后、生存率呈负相关,是免疫治疗的新的有效靶点。现就转化生长因子β1和环氧合酶2对CD4+CD2+5Treg参与肿瘤免疫逃逸的调控及作用方式予以综述。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

LAP~+CD4~+T细胞在胃癌外周血中的分布情况及临床意义

目的 检测胃癌患者外周血中LAP+CD4+T 细胞和CD4+CD25+ Treg 细胞的分布比例,初步研究LAP+CD4+ T细胞与病理因素的相关性及在胃癌发生、进展中的作用。方法 收集2018 年1 月～2019 年6 月我院胃肠疝外科收治的50 例胃癌患者术前及术后临床病理资料,收集术前患者的外周血标本,收集同期50 例健康志愿者外周血作为对照组。流式细胞技术检测LAP+CD4+T 细胞和CD4+CD25+ Treg 的分布比例,比较外周血中胃癌患者和健康志愿者LAP+CD4+T 细胞的分布比例差异;Pearson 法分析LAP+CD4+T 细胞与临床病理因素及CD4+CD25+Treg 细胞的相关性。结果 外周血LAP+CD4+T 细胞占CD4+T 细胞的比例,胃癌患者为[7.58（6.23,8.22）%]高于健康志愿者的[1.76（0.79,2.35）%]（P＜0.001）;Pearson 相关性分析结果显示,外周血中LAP+CD4+T 细胞与CD4+CD25+Treg 细胞分布比例呈正相关（r=0.629,P＜0.001）;肿瘤TNM 分期越晚,LAP+CD4+T 细胞占CD4+T 细胞比例越高（P＜0.001）;有远处转移患者LAP+CD4+T 细胞占CD4+T 细胞比例高于无转移者（P＜0.001）。结论LAP+CD4+T 细胞在胃癌患者外周血中比例升高,可能参与了胃癌的发生、进展,起到促进肿瘤生长、转移的作用。     

CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞在成人过敏性哮喘急性发作期和缓解期外周血中的表达

目的:探讨成人过敏性哮喘急性发作期和缓解期外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况及与病情的相关性。方法:收集健康人、过敏性哮喘急性发作期和缓解期患者外周血,流式细胞术测定CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例。结果:CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在三组间的差异有统计学意义。哮喘缓解期组、哮喘急性期组较健康对照组该细胞比例均明显下降,哮喘急性期组较哮喘缓解期组更低。CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量与哮喘病情严重程度呈负相关。结论:CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能在过敏性哮喘的发病过程中起重要作用,它的降低导致的免疫缺陷可能与哮喘的发生相关。     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

非小细胞肺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测70例NSCLC患者和30例健康人外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平,并进行2组水平比较和分层分析。结果NSCLC组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平(29±5)%,明显高于健康对照组(11±5)%(P<0.01);外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平与NSCLC病理类型无相关性(P>0.05);与临床分期密切相关,I+II期亚组(16±5)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而与III期亚组(26±6)%、IV期亚组(35±6)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论NSCLC患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标。     

冠心病与外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的关系

目的 探讨不同类型冠心病患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平变化,以及CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉粥样硬化严重程度的相关性.方法 选择2012年6月-2012年12月在杭州市第一人民医院心内科住院,经冠状动脉造影术检查及治疗的患者57例,其中造影检查正常对照组13例,稳定型心绞痛组14例,不稳定型心绞痛组15例,急性心肌梗死组15例.采用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞比例,评价各组间差异,并对外周血T淋巴细胞亚群与冠状动脉粥样硬化严重程度进行相关性分析.结果 ①外周血CD4＋CD25＋细胞占CD4＋淋巴细胞比例在对照组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、心肌梗死组分别为（57.51＆#177;12.62）％、（50.19＆#177;9.27）％、（39.85＆#177;11.88）％和（32.37＆#177;9.56）％;②急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例较稳定型心绞痛组和对照组显著减少（P＜0.05）,但是急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组之间,以及稳定型心绞痛组和对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.③外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉Genisi评分呈显著负相关（r=-0.617,P＜0.01）.结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞参与了冠心病的发生发展,是导致动脉粥样斑块不稳定的原因之一,与斑块的不稳定呈显著负相关.     

CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg在慢性阻塞性肺疾病中的表达及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Treg细胞的表达水平,探讨COPD患者体内免疫功能的状态及Treg细胞在疾病进展中的临床意义。方法选择AECOPD和COPD稳定期患者各30例,20例健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪进行检测外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞、CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞占CD4^＋T淋巴细胞比例。SPSS17．0软件进行统计学分析处理。结果AECOPD组和COPD组外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例分别为（9．52±0．95）％和（9．72±0．97）％均低于对照组（10．22±1．10）％,差异无统计学意义（F=2．48,P=0．093）。3组间CD4＋CD25＋CD127^（low/-）Treg细胞比例差异有统计学意义（F=13．57,P=0．0）,AECO．PD组（4．50±0．83）％显著低于COPD稳定期（5．22±0．64）％和对照组（5．61±0．67）％,而COPD稳定期较对照组降低,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COPD患者外周血中CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞降低,存在免疫内环境的失衡,Treg细胞可能参与了COPD的发病和急性加重过程。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究

目的：探讨HCV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达状况以及与疾病进程的相关性。方法：选取HCV感染者69例及健康对照23例,应用流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达。结果：HCV感染组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比例明显高于对照组（P〈0.01）;慢性感染组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于HCV无症状携带组（P〈0.05）;肝硬化组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于慢性感染组（P〈0.05）。结论：HCV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与疾病进程具有相关性。     

TGF-β1诱导的新生儿脐带血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖动力学研究

目的：探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导的新生儿脐带血CD8^＋CD25^＋调节性T细胞增殖活性。方法：新生儿脐带血单个核细胞经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE）标记后,加入TGF-β1,同时用CD3mAb激活和IL-2培养扩增。培养第4、6、8天收集细胞,用流式细胞术检测活化增殖后的CD4^＋CD25^＋、CD8^＋T细胞增殖动力学变化。结果：培养后第6、8天,实验组CD4^＋CD25^＋T细胞增殖指数分别为11.52、23.04,高于对照组CD4^＋CD25^＋T细胞（6.68,10.46）及实验组CD8^＋T细胞（4.23,5.43）。培养后第8天,实验组CD4^＋CD25^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为52.74%,在各代中以第8代所占比例最高,而对照组CD4^＋CD25^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为36.26%;实验组CD8^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为13.54%,在各代中所占比例最高的为第2代,而对照组CD4^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为29.44%。结论：TGF-β1诱导的新生儿脐带血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖活性明显强于CD8^＋T细胞。     

过敏性紫癜患者外周血CD8^＋ CD28^- Treg细胞表达及意义

目的研究CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^-Treg细胞在过敏性紫癜中的表达及临床意义。方法 78例确诊的过敏性紫癜患者在入院时各采静脉血2 ml,予肝素抗凝后行流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^-Treg细胞的表达水平。78例患者给予抗组胺药物、维生素C、芦丁片、钙剂治疗,对于紫癜型肾炎组病情严重者给予丙球蛋白治疗以缓解症状;治疗2周后治愈或好转后再次采取外周血样,流式细胞仪检测外周血CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^-Treg细胞的表达水平。结果治疗后患者外周血中CD4^＋上升、CD8^＋下降、CD8＋CD28^-Treg细胞上升明显。结论外周血CD8^＋CD28^-Treg细胞的表达水平对过敏性紫癜的诊断和治疗具有一定的指导作用。     

体外扩增小鼠CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的研究

目的研究体外扩增小鼠CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的表面分子标志、分化途径及细胞属性。方法获取超抗原SEB活化后体外扩增的小鼠效应细胞,用抗CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRVβ8-FITC和CD69-FITC荧光抗体染色后,用流式细胞仪（FCMCalibueBD,USA）鉴定CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的表面分子标志和分化途径。用逆转录聚合酶链反应测定细胞内各种细胞因子和Foxp3基因转录水平。结果体外扩增的细胞中91.92%是CD8^＋T细胞,其中22.75%的细胞是CD8^＋NN1.1＋NKT细胞,高于正常值（0.21±0.19,n=12）108倍以上。19.61%NKT细胞是TcRVβ8＋NN1.1＋NKT细胞。CD69分子的表达由原始0.11%增加到85.95%。CD4＋T、CD3＋T细胞亚群和CD4＋NKT、CD3＋NKT及CD4-CD8-NKT细胞亚群没有增加。扩增细胞TGF-β的mRNA表达呈阳性,不表达Foxp3和细胞因子IL-2、4、5、6、10及IFN-γ。CD8^＋NKT细胞直接由CD8^＋T细胞分化而来。结论 CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的分子特征为CD69＋Foxp3-TcRVβ8＋TGF-β＋CD8^＋NK1.1^＋;它们既不是CD8^＋T调节细胞（Treg.）,也不是CD4^＋NKT细胞,直接由CD8^＋T细胞分化而来,带有TCRVβ8受体,应属于T细胞亚群。