电针对颈椎病模型大鼠椎间盘细胞Wnt1、GSK-3β蛋白的影响

目的 观察电针“大椎穴”对颈椎病模型大鼠椎间盘纤维环细胞Wnt1蛋白、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响,并初步探讨电针对颈椎间盘退变调控及抑制纤维环细胞凋亡的机制.方法 选用SPF级SD大鼠40只,随机分成空白组、模型组、电针组、美洛昔康组,采用Western blot法检测颈椎间盘的纤维环细胞Wnt1、GSK-3β蛋白的表达水平的改变.结果 模型组与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05);电针组、美洛昔康组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).电针可增加颈椎间盘纤维环细胞的阳性表达,显著上调Wnt1、GSK-3β蛋白表达的水平.结论 电针“大椎穴”可能是通过调节经典的Wnt/β-catenin信号通路中关键因子Wnt1蛋白、GSK-3β蛋白的表达来抑制颈椎病模型大鼠的椎间盘纤维环细胞凋亡.     

蜂胶黄酮对衰老小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达的影响

目的：研究蜂胶黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达的影响,探讨蜂胶黄酮的抗衰老机制。方法：用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以蜂胶黄酮治疗,RT-PCR法观察小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达。结果：与正常对照组比较,模型组bcl-2基因表达降低,bax基因表达升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,治疗组bcl-2基因表达升高,bax基因表达降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：蜂胶黄酮能增加衰老小鼠bcl-2基因表达,降低bax基因表达,具有抗衰老作用。     

六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22小鼠肝癌组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:观察六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22肝癌小鼠肝癌组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响。方法:雄性昆明小鼠40只,随机分为模型组、化疗组、六味组、六味化疗联合组,每组10只。腋下注射H22细胞建立H22荷瘤模型,六味组造模前两周开始用药[剂量为22 g/(kg·d)],化疗组[剂量为50mg/(kg·d),隔日1次]及六味化疗组造模后用药,造模14 d后处死小鼠称重,取瘤组织称重计算抑瘤率,取脾组织称重计算脾指数,免疫组化检测VEGF与VEGFR2蛋白的表达。结果:化疗组与六味化疗联合组有良好的抑瘤作用;六味组脾指数增大,与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05),六味化疗联合组VEGF蛋白表达明显减少,与化疗组比较,差异有统计学意义(P0.05),与六味组相比较,差异有统计学意义(P0.05);六味化疗联合组VEGFR2蛋白表达减少,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);与六味组比较,有显著性差异(P0.01)。结论:六味地黄汤辅助环磷酰胺可抑制荷H22肝癌小鼠组织VEGF与VEGFR2蛋白表达,减少肝癌组织血管增殖,从而发挥辅助化疗作用。     

六味地黄生物制剂对衰老小鼠脾淋巴细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨六味地黄生物制剂延缓衰老的机制。方法小鼠随机分为正常对照组、阳性药物(维生素E)组、衰老模型组与六味地黄生物制剂组。除正常对照组注射生理盐水外,其余各组皮下注射0.5mL 5%D-半乳糖以建立衰老模型,连续50 d。第10天开始以0.2 mL.10 g-1给予各组小鼠灌胃相应的药物,50 d后处死小鼠,分离脾淋巴细胞并利用单细胞凝胶电泳法检测各组小鼠脾脏淋巴细胞的DNA损伤情况。结果与正常对照组比较,衰老模型组小鼠的脾淋巴细胞有较为严重的损伤(P<0.01),尾长、尾距与DNA拖尾率分别为(145.96±94.63)μm、(51.34±44.67)μm、(23.14±15.90)%;与衰老模型组比较,阳性药物组和六味生物制剂组小鼠的DNA损伤均显著降低(P<0.01)。结论六味地黄生物制剂对D-半乳糖所致的衰老小鼠的脾淋巴细胞有明显的保护作用,这可能是六味地黄生物制剂延缓衰老的机制之一。     

双歧杆菌脂磷壁酸对衰老小鼠胸腺Bcl-2、Fas基因表达的影响

目的研究双歧杆菌脂磷壁酸对D-半乳糖致衰老小鼠胸腺组织Bcl-2、Fas基因表达的影响,探讨双歧杆菌脂磷壁酸的抗衰老机制。方法用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以双歧杆菌脂磷壁酸治疗,反转录-聚合酶链反应法观察小鼠胸腺Bcl-2、Fas基因mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型组Bcl-2基因表达降低,Fas表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,治疗组Bcl-2基因表达升高,Fas表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论双歧杆菌脂磷壁酸能降低衰老小鼠Fas表达水平,增加Bcl-2表达,具有抗衰老作用。     

六味地黄汤对D-半乳糖致衰老小鼠运动能力的影响

目的：探讨六味地黄汤对D-半乳糖致衰老小鼠的运动能力影响机制。方法：以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型，同时给予六味地黄汤治疗，6周后以全面观察六味地黄汤对运动能力的影响及机制。结果：六味地黄汤能有效延长衰老小鼠的游泳力竭时间、提高衰老小鼠的学习记忆成绩，不同程度提高衰老小鼠心、脑、骨骼肌中的SOD、Na^＋-K^＋-ATP、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性，降低心肌细胞、骨骼肌细胞内Ca^2＋、MDA含量。结论：六味地黄汤能有效肪止D-半乳糖致衰老小鼠的运动能力下降．学习记忆障碍等多项衰老体征的出现。     

益气活血方和补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3表达的影响

目的 探讨益气活血方和补肾生髓方对脑缺血大鼠海马Wnt/β-catenin信号通路Wnt3a、卷曲蛋白9(Frizzled9)和T细胞因子3(TCF3)蛋白表达的影响.方法 采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组,脑缺血2h后持续灌注7d.采用Western-Blot法检测缺血侧海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达,用免疫组化Envision两步法检测缺血侧海马CA1区Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达.结果 在缺血侧海马区,与假.手术组比较,模型组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著增加(P＜0.01);与模型组比较,益气活血方组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01),补肾生髓方组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01或P＜0.05).在缺血侧海马CA1区,与假手术组比较,模型组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,益气活血方组与补肾生髓方组能显著降低CA1区Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达(P＜0.01).结论 2种中药复方能通过抑制缺血侧海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达,调节Wnt/β-catenin信号通路,促进局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织修复.     

六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22肝癌小鼠MMP9、NF-KB表达的影响

目的:观察六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22肝癌小鼠MMP9、NF-KB表达的影响。方法:雄性昆明小鼠40只,随机分为模型组、化疗组、六味组、六味化疗组,每组10只。腋下注射H22细胞建立H22荷瘤模型,六味组造模前两周开始用药(剂量为22g/kg·d),化疗组(剂量为50mg/kg·d,隔日1次)及六味化疗组造模后用药,造模14d后处死小鼠称重,取瘤组织称重计算抑瘤率,取脾组织称重计算脾指数,免疫组化检测MMP9、NF-k B蛋白的表达。结果:化疗组及六味化疗联合组具有明显的抑瘤作用,与模型组比较有统计学意义(P<0.01),与六味组比较,有统计学意义(P<0.05);六味组脾指数增大,与模型组及化疗组比较,均有统计学意义(P<0.05),六味化疗联合组的脾指数均高于化疗组,有显著性差异(P<0.01);与模型组比较六味化疗联合组MMP9蛋白表达水平显著下降(P<0.05),六味、化疗、六味化疗联合均可显著降低NF-k B蛋白的表达水平,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:六味地黄汤辅助环磷酰胺可提高动物免疫功能,其抗肝癌的协同机制可能不是通过NF-KB,而是通过降低肝癌组织MMP9蛋白表达来实现。     

芹菜素改善D-半乳糖衰老模型小鼠衰老指征的研究

目的:观察芹菜素对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的影响.方法:建立D-半乳糖致小鼠衰老模型,以Y型电迷宫检测其学习记忆能力,分别采用黄嘌呤氧化酶法、TBA比色法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察小鼠服用不同剂量芹菜素后上述指标的变化.结果:芹菜素低、中、高剂量均可显著提高衰老模型小鼠的学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01),显著增加D-半乳糖所致衰老模型小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01).结论:芹菜素能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的多项体征.     

大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响

目的 观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因.方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C组,每组10只.模型组、大蒜素组和维生素C组小鼠以100 mg/kg体重剂量皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液,对照组小鼠注射同体积生理盐水,每日1次,同期大蒜素组以20 mg/kg剂量腹腔注射大蒜素注射液,维生素C组以50 mg/kg剂量腹腔注射维生素C,对照组及模型组腹腔注射同体积生理盐水,共持续6周.给药结束后采集标本,Western blot法检测卵巢组织FSHR与LHR表达水平,免疫荧光法观察active Caspase-3表达变化.结果 与对照组相比,模型组FSHR与LHR表达水平明显升高(P＜0.05),active Caspase-3表达增强,大蒜素组FSHR与LHR表达水平(与β-actin比较)分别为0.63±0.07和0.82±0.06,较模型组明显下降(P＜0.05),active Caspase-3表达亦有减弱趋势.结论 大蒜素能下调FSHR与LHR表达水平,提示其一定程度上延缓了D-半乳糖所致小鼠卵巢的衰老,该作用可能与其减少卵巢细胞凋亡有关.     

D-半乳糖衰老模型致衰特征及衰老标志物的研究

目的 论证8-羟基脱氧鸟苷作为衰老标志物的可行性,比较D-半乳糖模型鼠与自然衰老鼠在各方面的差异,进一步探究D-半乳糖衰老模型的致衰特征。方法 采用SD大鼠作为受试动物,将动物分为3组：3月龄鼠给予 D-半乳糖6周作为 D-半乳糖模型组;20月龄鼠作为自然衰老组;3月龄鼠作为正常对照组。实验前后测定各组大鼠尿液中8-羟基脱氧鸟苷含量,实验末对各组大鼠血清中丙二醛(MDA) 含量、超氧化物歧化酶(SOD) 活力、还原性谷胱甘肽(GSH)含量及生化指标测定、并对各组大鼠进行Morris水迷宫试验及病理检测。结果 8-羟基脱氧鸟苷含量试验前自然衰老组高于D-半乳糖模型组和对照组(P<0.05),D-半乳糖模型组与对照组差异无统计学意义;实验末期自然衰老组大鼠与D-半乳糖模型组8-羟基脱氧鸟苷含量均高于对照组 (P<0.01) ,前两组间差异无统计学意义 (P>0.05)。自然衰老组和 D-半乳糖模型组 MDA含量均高于对照组(P<0.05)、SOD 活性和GSH含量均低于对照组(P<0.05或P<0.01),前两组间差异无统计学意义 (P>0.05)。生化检验结果中,自然衰老组三酰甘油相对于正常对照组差异有统计学意义(P<0.01),其余生化结果差异均无统计学意义 (P>0.05)。D-半乳糖模型组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、尿素氮、肌酐及血糖相对于正常对照组差异均有统计学意义(P<0.01),其余生化结果差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠Morris水迷宫试验,自然衰老组大鼠与D-半乳糖模型组逃避潜伏期、游泳速度及穿越平台区次数与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,前两组间差异无统计学意义 (P>0.05)。组织病理学检查中,D-半乳糖模型组大鼠与自然衰老组大鼠病理形态更接近。结论 D-半乳糖造成的衰老模型在氧化损伤、神经行为及病理形态方面接近自然衰老动物组,尚存在一定肝肾损伤。8-羟基脱氧鸟苷可作为一种有效的衰老标志物,实现对衰老模型的无创检测。     

CHANGES OF SOD, MDA CONTENT IN TESTIS AND SERUM TESTOSTERONE CONTENT OF AGING RATS

目的:观察D-半乳糖致亚急性衰老大鼠和自然衰老大鼠睾丸组织SOD、MDA和血清睾酮含量的变化.方法:D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型,并以自然衰老大鼠和正常大鼠作为对照,分别检测各组大鼠睾丸组织SOD、MDA的含量,放射免疫法检测血清睾酮含量.结果:与正常组大鼠比较,模型组和自然衰老组大鼠血清睾酮含量、睾丸组织SOD含量明显降低,睾丸组织MDA含量明显升高(P＜0.01);三个指标模型组和自然衰老组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:衰老大鼠睾丸抗氧化能力明显降低,睾丸间质细胞分泌睾酮的功能发生障碍,且D-半乳糖致衰老模型是自然衰老的很好再现.     

还少丹对D-半乳糖衰老模型小鼠心肌线粒体DNA缺失的影响

目的 探讨还少丹对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠心肌线粒体DNA(mtDNA)缺失的影响.方法 将40只小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、还少丹低、高剂量组,用D-半乳糖建立衰老模型,分别给予蒸馏水和还少丹水煎液灌胃.连续给药6周后,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增心肌组织mtDNA,经琼脂糖凝胶电泳检测扩增条带,用光密度扫描定量各组mtDNA的缺失率.结果 空白对照组未见mtDNA缺失型扩增条带,其余各组均出现不同程度的缺失型扩增条带;与模型组比较,低、高剂量组小鼠心肌mtDNA缺失率明显降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05);而低剂量与高剂量纽之间比较mtDNA的缺失率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 还少丹能减少D-半乳糖诱导的衰老小鼠心肌mtDNA的缺失程度,提示该方能降低mtDNA的氧化损伤,保护mtDNA的结构完整性,从分子水平上为还少丹抗衰老的作用机制提供了一定的实验依据.     

心脑宁对皮肤衰老小鼠的干预性作用

目的观察心脑宁对D-半乳糖诱导的皮肤衰老小鼠的干预性作用。方法将40只雌性小鼠随机分为模型组、心脑宁组、生理盐水组和对照组,每组10只。对照组小鼠不进行任何处理;其余3组小鼠于颈背部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg-1·d-1,连续42 d。在注射D-半乳糖21 d后,模型组不给予任何干预措施,心脑宁组小鼠给予心脑宁灌胃(0.375 g·kg-1·d-1),生理盐水组小鼠给予等量生理盐水灌胃,连续灌胃21 d后,处死所有小鼠。分别检测血清与皮肤组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醇(MDA)和羟脯氨酸(HYP)水平。结果模型组小鼠血清与皮肤组织中SOD活性和HYP水平明显低于对照组,MDA水平明显高于对照组(P<0.01)。心脑宁组小鼠血清与皮肤组织中SOD活性和HYP水平明显高于模型组和生理盐水组(P<0.01);MDA水平明显低于模型组和生理盐水组(P<0.01)。模型组小鼠血清与皮肤组织中SOD活性及HYD、MDA水平与生理盐水组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。心脑宁组小鼠血清和皮肤组织中SOD活性及MDA、HYP水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论心脑宁可阻止由D-半乳糖引起的皮肤衰老现象,对延缓和预防皮肤衰老具有一定作用。     

生活方式干预对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中GSK-3β表达的影响

目的 探讨生活方式干预对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)表达的影响.方法 40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组10只,普通饲料喂养;模型组30只,高脂饲料喂养.4周后模型形成,模型组随机等分为3个亚组(胰岛素抵抗组、饮食干预组、运动干预组),对照组和饮食干预组喂以普通饲料,另外2组续以高脂饲料喂养;运动干预组大鼠进行游泳运动.干预6周后,用Westernblot方法检测各组大鼠附睾脂肪组织中GSK-3β的表达水平;定期检测大鼠体重(BW)、空腹血糖(FPG)及血浆胰岛素(FINS)、血甘油三酯(TG)和胆固醇(TC),并计算胰岛素敏感指数(ISI).结果 (高脂饲料喂养4周后,与正常对照组比较,模型组大鼠BW、FPG、FINS、TC、TG显著升高(P＜0.05或P＜0.01),ISI显著下降(P＜0.01),胰岛素抵抗模型诱导成功.)与正常对照组比较,胰岛素抵抗组GSK-3β的表达上升(P＜0.01),而干预组大鼠GSK-3β的表达均无显著差异;与胰岛素抵抗组大鼠比较,2个干预组大鼠脂肪组织中GSK-3β的表达均下降(P＜0.05);2个干预组间GSK-3β的表达无显著差异.结论 生活方式干预显著下调脂肪组织GSK-3β的表达,并且参与其改善胰岛素抵抗的机制.     

果王素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆的影响

目的观察果王素对D-半乳糖(D-gal)致衰老模型小鼠学习记忆能力及抗氧化能力的影响。方法皮下注射10%D-gal 6周建立衰老小鼠模型,同时灌胃给予果王素,正常对照组和模型组给予等量生理盐水。用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,同时检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量。结果与正常组比较,模型组小鼠学习记忆能力降低,脑组织SOD活力下降,MDA含量增加,差异均有统计学意义(P0.01)。灌胃给予高、低不同剂量的果王素后,小鼠上述变化明显改善,与模型组、正常组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论果王素可改善D-gal衰老模型小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与果王素具有抗氧化能力有关。     

银耳多糖对实验性衰老小鼠的保护作用

目的:观察银耳多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的作用.方法:40只雄性ICR小鼠,随机分为5组,正常对照组腹腔注射生理盐水,其余4组每天腹腔注射D-半乳糖120mg/kg,连续60d,建立亚急性衰老模型.同时在这4组中,衰老对照组灌胃生理盐水,其余3组每天分别灌胃800、400和200mg/kg银耳多糖.实验结束后,比色法检测各组小鼠心、脑中氧化性指标丙二醛(MDA)与脂褐质(LP)的含量,抗氧化酶SOD与GSH-Px的活性以及小鼠皮肤中羟脯氨酸含量,免疫组化法检测肾脏中细胞周期调节因子P21的表达情况,MTT法检测ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化.结果:各银耳多糖干预组SOD及GSH-Px高于衰老对照组,而MDA及LP低于衰老对照组,并均有显著性差异(P＜0.05);银耳多糖能明显促进ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖转化;各银耳多糖干预组肾脏P21的表达量比衰老对照组低(P＜0.05),而皮肤羟脯氨酸含量比衰老对照组高(P＜0.05).结论:银耳多糖对D-半乳糖所致的衰老有一定的改善作用.     

老鹳草素对骨质疏松大鼠BMSCWnt3a表达的影响

［摘要］目的　研究老鹳草素对骨质疏松（OP）大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）信号分子Wnt3a表达的影响．方法　摘除大鼠双侧卵巢,复制骨质疏松症模型,分离、培养BMSC．将源于假手术大鼠第3代BMSCs常规培养作为正常对照组,将骨质疏松模型大鼠的BMSCs分别设以下组别:模型对照组、1 μmol/L的辛伐他汀阳性对照组、0.01、0.1、1、10、100 μmol/L的老鹳草素组．分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测mRNA及蛋白的表达．结果　与正常对照组比较,OP模型对照组Wnt3a蛋白及其mRNA的表达明显降低,且有统计学意义（P＜0.01）;与模型组比较,1 μmol /L辛伐他汀、0.1、1、10、100 μmol/L的老鹳草素明显升高Wnt3a蛋白及其mRNA的表达,且均有统计学意义,而0.01 μmol/L老鹳草素对Wnt3a表达无明显影响．结论　老鹳草素可能通过增加BMSC中Wnt/β-catenin信号通路的信号蛋白Wnt3a的表达,进一步激活Wnt/β-catenin信号通路,这有利于BMSC的成骨分化及骨形成．     

PI3K/AKT/GSK-3β信号在脑缺血预处理中的作用及对海马细胞凋亡的影响

目的 研究脑缺血预处理(CIPC)中PI3K/AKT/GSK-3β信号通路调节变化及对海马细胞凋亡的影响.方法 制作脑缺血、CIPC及LY294002干预模型.进行神经功能缺损评分;TTC染色计算脑梗死体积;TUNEL法检测海马细胞凋亡;Western blot检测p-PDK1、AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β(ser9)、Mcl-1的蛋白表达,RT-PCR检测GSK-3β的转录.结果 ①与脑缺血组比较,CIPC组在神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡、GSK-3β蛋白表达及转录水平均降低(均P＜0.05),但脑缺血组与LY294002组比较,上述各检测值差异均无统计学意义(均P＞0.05);②与脑缺血组比较,CIPC组的p-PDK1、p-AKT、p-GSK-3β(ser9)、Mcl-1的蛋白表达均增高,LY294002组各蛋白表达较CIPC组均降低(均P＜0.05),LY294002组与脑缺血组比较各蛋白表达差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 脑缺血预处理降低GSK-3β的转录和蛋白表达,增加p-PDK1、p-AKT、p-GSK-3β(ser9)、Mcl-1的表达,减少神经元凋亡.LY294002可抵消脑缺血预处理的保护作用.     

芦丁对D-半乳糖诱导衰老小鼠认知功能的保护作用研究

目的研究芦丁对D-半乳糖诱导衰老小鼠认知功能的保护作用机制。方法将80只雄性ICR小鼠采用直接抽取法分为对照组、D-半乳糖组、D-半乳糖+芦丁组和D-半乳糖+维生素E组,每组20只。D-半乳糖诱导小鼠“衰老”模型,同时给予芦丁口服6周。使用Morris水迷宫实验,记录小鼠的逃避潜伏期、游泳距离和游泳路径,试剂盒检测海马组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和一氧化氮合酶（NOS）活性以及丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量。用甲酚紫染色观测海马神经元损伤情况,用微管相关蛋白-2（MAP-2）观测海马神经元树突完整性情况,用半胱天冬酶-3（Caspase-3）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）抗体标记脑冠状切片来分别观测海马神经元凋亡情况与星型胶质细胞损伤情况。结果D-半乳糖明显诱导小鼠海马区的神经毒性。与D-半乳糖组小鼠比较,D-半乳糖+芦丁组小鼠在第5、6天训练的逃避潜伏期和游泳距离均缩短（P＜0.05）,训练结束后实验结果显示,与D-半乳糖组小鼠比较,D-半乳糖+芦丁组小鼠海马完整神经元数增加（P＜0.05）,凋亡阳性细胞数明显减少（P＜0.01）,神经元树突损伤减轻,T-SOD和GSH-Px的异常活性恢复（均P＜0.05）,MDA水平降低（P＜0.01）。此外,D-半乳糖+芦丁组小鼠中海马星形胶质细胞树突损伤有所缓解（P＜0.05）,细胞中NOS活性恢复,NO释放明显降低（均P＜0.01）。而维生素E作为阳性对照有与芦丁相似的神经保护功能。结论芦丁可通过缓解脑损伤来改善D-半乳糖诱导衰老小鼠的认知功能,在脑老化过程中可能有正效应的作用。