PPARγ激动剂罗格列酮钠对2型糖尿病大鼠肾保护作用的实验研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮钠(RSG)对2型糖尿病大鼠是否具有肾脏保护作用.方法 30只SD大鼠,随机分成正常对照组(n=10)、糖尿病模型组(n=10)和RSG治疗组(n=10).糖尿病模型组和RSG治疗组予高糖高脂饮食,并结合小剂量链脲佐菌素(STZ),成功诱导2型糖尿病大鼠模型.造模成功后,RSG治疗组以RSG无菌水混悬液灌胃.4周后观察各组大鼠血清胱抑素C(Cystatin C)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、24 h蛋白尿定量、血糖等生化指标并宰杀测量肾重/体质量,并加以比较.结果 与糖尿病模型组相比,RSG治疗组大鼠血糖、血清胱抑素C及24 h尿蛋白定量均明显降低(P均<0.05),但仍高于正常对照组(P均<0.05).RSG治疗组肾重/体质量比值、TC及TC水平均较糖尿病模型组低(P均<0.05),与对照组比较无明显差异(P均>0.05).3组BUN、Cr无明显变化(P>0.05).结论 PPARγ激动剂(RSG)能明显减少2型糖尿病大鼠血糖、尿蛋白及血清胱抑素C水平,对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用.     

辛伐他汀对链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠血糖的影响

[目的]探讨辛伐他汀对链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠血糖的影响.[方法]选取100只Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后随机分为4组,每组各25只.A组(正常对照组)普通饲料喂养4周后腹腔注射柠檬酸钠缓冲液;B组(糖尿病模型组)、C组(他汀早期诱导组)和D组(他汀晚期诱导组)高脂饲料喂养4周后一次腹腔注射STZ 35 mg/kg溶液建立2型糖尿病大鼠模型,C组在高脂饲料喂养的同时给予辛伐他汀10 mg/kg·d-1的剂量灌胃,D组在糖尿病模型建立后给予相同剂量辛伐他汀灌胃,B组在糖尿病模型建立后给予等量蒸馏水,成模后均连续观察4周.测定各组0、4和8周大鼠体质量、空腹血糖和血脂水平,并于第8周末行OGTT试验.[结果]在第4周末和第8周末,2型糖尿病大鼠与正常对照组大鼠相比,空腹血糖(FPG)水平均显著升高(P＜0.05)、血清胰岛素(Ins)水平显著降低(P＜0.05),差异有统计学意义;与糖尿病大鼠相比,第4周末他汀晚期诱导组轻微升高FPG和降低Ins (P＞ 0.05)、他汀早期诱导组显著升高FPG和降低Ins (P＜0.001)以及更容易诱导糖尿病大鼠模型的建立;第8周末他汀晚期诱导组FPG显著高于糖尿病模型组(P＜0.05).[结论]对高脂饲料喂养的大鼠进行辛伐他汀(10 mg/kg· d-1)早期诱导更容易引起胰岛β细胞功能的减退从而升高FPG和诱发糖尿病模型的建立;在糖尿病模型建立之后,对糖尿病大鼠进行他汀治疗可以引起FPG升高.     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛素水平的影响

目的:观察丝胶对2型糖尿病模型大鼠血清胰岛素水平的影响.方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、2型糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍阳性对照组4组,每组12只大鼠.采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(35mg/kg,2次)连续腹腔注射的方法制作2型糖尿病大鼠模型,以空腹血糖≥11.1mmol/L作为成模标准.待模型成功建立后,丝胶组和阳性对照组大鼠分别给予丝胶(2.4g/kg/d)和二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃35天.分别采用葡萄糖氧化酶法和ELISA法检测各组大鼠的血糖和血清胰岛素水平.结果:模型组大鼠的血糖明显高于正常组大鼠、血清胰岛素水平明显低于正常组大鼠(P＜0.05);丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血糖明显低于模型组大鼠,血清胰岛素水平明显高于模型组大鼠(P＜0.05).结论:丝胶可提高2型糖尿病大鼠血清胰岛素水平,这可能是丝胶降血糖作用的机制之一.     

2型糖尿病大鼠心肌IR、IRS-1的表达与罗格列酮及APP5肽类似物P165的干预效应

目的 研究2型糖尿病大鼠心肌胰岛素信号转导通路蛋白胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达与正常SD大鼠的区别,并探讨进行罗格列酮及APP5肽类似物P165干预后对上述蛋白表达的影响.方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、正常对照+罗格列酮组(C+RSG组)、2型糖尿病组(T2DM组)、2型糖尿病+罗格列酮组(T2DM+RSG组)、糖尿病给予P165小剂量组(T2DM+P165小剂量组)、糖尿病给予P165大剂量组(T2DM+ P165大剂量组),其中糖尿病动物采用高脂饮食后给予小剂量STZ腹腔注射的方法造模.后将各组SD大鼠处死,采用免疫组织化学染色和Western blot的方法检测心肌组织IR、IRS-1的表达. 结果 (1)2型糖尿病组(T2DM组)心肌组织IR、IRS-1的表达水平显著低于对照组(C组);(2)2型糖尿病+罗格列酮组(T2DM+ RSG组)心肌组织IR、IRS-1的表达水平显著高于T2DM组;(3) 免疫组化染色发现2型糖尿病+P165小/大剂量组(T2DM+P165小/大剂量组)心肌组织IR、IRS-1免疫反应阳性颗粒沉着的累积光密度值显著高于T2DM组;Western blot 结果显示T2DM+P165小/大剂量组心肌组织IRS-1的表达水平显著高于T2DM组;而IR的表达水平与T2DM组相比无差别.结论 (1)2型糖尿病大鼠心肌存在胰岛素抵抗或信号转导障碍;(2)罗格列酮干预后可以改善2型糖尿病心肌的胰岛素信号转导异常;(3)P165对2型糖尿病大鼠心肌胰岛素信号转导具有调节作用,其作用靶点可能为胰岛素受体底物.     

EFFECTS OF PURENDAN SUPERFINE POWDER ON BLOOD GLUCOSE AND BLOOD LIPID OF TYPE 2 DIABETES RATS

目的:观察菩人丹超微粉(PRD)对2型糖尿病大鼠血糖(BG)和血脂的影响.方法:36只雄性Wistar大鼠随机分为3组,正常对照组、糖尿病模型组和PRD治疗组,每组12只.糖尿病模型组和PRD治疗组大鼠均采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.模型成功建立后,PRD治疗组大鼠给予PRD灌胃3个月.分别检测各组大鼠的BG,血甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C).结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠的BG、TG、TC、LDL-C明显升高(P＜0.05),HDL-C明显降低(P＜0.05).与糖尿病模型组比较,PRD治疗组大鼠的BG、TG、TC和LDL-C明显降低(P＜0.05),HDL-C明显升高(P＜0.05).结论:PRD可有效降低2型糖尿病大鼠BG和改善血脂代谢紊乱.     

黄连素对实验性2型糖尿病大鼠心肌SOD活性、MDA含量水平的影响

目的:观察黄连素对实验性2型糖尿病大鼠心肌SOD活性、MDA含量水平的影响.方法:采用小剂量链脲佐茵素加高糖高脂饲料喂养的方法建立Wistar大鼠2型糖尿病模型,成模后给予黄连素0.1g/kg·d灌胃治疗8周,检测血糖、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,各观察值均与糖尿病组存在显著性差异(p＜0.05).结果:与糖尿病组相比,黄连素治疗组血糖、MDA含量均下降,SOD活性明显升高,并可改善2型糖尿病大鼠心肌病变.结论:黄连素可以明显改善2型糖尿病大鼠的心肌损害,延缓其病变的发生和发展,可能与其降血糖、清除自由基等机制有关[1].     

FGF-21对2型糖尿病大鼠心肌氧化应激影响的研究

目的 探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF - 21)对2型糖尿病大鼠心肌氧化应激的影响.方法 用高热量脂肪饮食联合小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,随机分成2型糖尿病组与FGF- 21治疗组,并与正常对照组比较.测定三组间大鼠血浆及心肌组织葡萄糖糖、胰岛素、FGF - 21、脂质产物及氧化应激指标的变化.结果 2型糖尿病组血糖、胰岛素、游离脂肪酸(FFAs)、甘油三酯、FGF - 21及氧化应激指标平均水平较其他两组显著增高(P ＜0.05).FGF- 21治疗组血糖、胰岛素、FFAs、甘油三酯及氧化应激指标平均水平较2型糖尿病组显著降低(P＜0.05),与对照组无差异.结论 FGF- 21可以改善2型糖尿病大鼠心肌心肌氧化应激状态,并参与调控2型糖尿病代谢紊乱.     

罗格列酮钠保护STZ糖尿病大鼠胰岛β-细胞及对JNK信号通路的影响研究

目的 观察罗格列酮钠对链脉佐菌素(STZ)糖尿病大鼠残存胰岛β-细胞的作用,及其对JNK信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为正常对照组(6只),糖尿病对照组(OM组,14只),罗格列酮钠组(RSG组,14只),后两组予STZ(50 mg/kg)腹腔内注射诱导成模后,RSG组予罗格列酮钠干预治疗[4 mg/(kg·d)].治疗10周后,各组大鼠行灌胃葡萄糖耐量试验,评价胰岛功能,之后处死动物,取胰岛组织,光镜下观察胰岛组织病理学形态,以免疫组化法检测胰岛中INS、P-JNK、Caspase-3的表达,TUNEL法检测β-细胞凋亡率.结果 ①与DM组相比,RSG组血糖降低.两组0 h INS(FINS)和2 h INS分别为(17.49±4.59) μU/L vs (23.59±4.59) μU/L和(20.24±3.32) μU/L vs (30.98±9.15) μU/L,RSG组INS水平更高,但差异无统计学意义(P＝0.056),其胰岛功能有好于DM组的趋势.②RSG组较DM组的胰岛边缘较清晰,细胞排列较整齐,染色质较丰富.③RSG组胰岛表达INS的水平高于DM组(P<0.05).④TUNEL检测结果显示RSG组的胰岛β-细胞凋亡率(%)较DM组小,分别为6.52±0.77 vs 10.33±1.07(P<0.05);Caspase-3的表达亦减少(P<0.05).⑤与DM组相比,RSG组JNK的活化受到抑制,P-JNK的表达减少(P<0.05).结论 RSG能够减少胰岛β-细胞的凋亡,改善STZ糖尿病大鼠的胰岛功能,降低血糖,其对胰岛β-细胞的抗凋亡作用可能是通过JNK信号通路起作用的.     

马来酸罗格列酮治疗2型糖尿病的疗效及安全性

目的观察马来酸罗格列酮(RSG Maleate)的降糖效果及安全性, 并与盐酸二甲双胍(格华止)比较.方法 54例2型糖尿病患者经2周平衡期后随机分为A组和B组,分别给马来酸罗格列酮、格华止治疗8周.结果无论是A组还是B组, 试验结束时空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(PPG)与治疗前比较均显著下降(P＜0.05);FPG下降值两组之间比较无统计学差异(P＞0.05),但PPG下降值B组明显优于A组(P＜0.05);试验结束时两组空腹及餐后2h胰岛素及C肽与治疗前比较均无明显变化(P＞0.05),治疗后两组患者HbA1c、血脂、肾功等无明显变化; A组、B组患者均无低血糖发生,无肝功异常.结论马来酸罗格列酮是一种安全、疗效确切的降糖新药.     

APP5肽类似物P165及罗格列酮对Ⅲ型糖尿病大鼠学习记忆功能的影响

目的研究APP5肽类似物P165及罗格列酮对Ⅲ型糖尿病大鼠学习记忆功能的影响。方法将Sprague Dawley(SD)大鼠68只按抽签法随机分为正常对照组,Ⅲ型糖尿病模型组,模型+P165组和模型+罗格列酮组,每组17只。采用双侧脑室注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法,剂量为3 mg/kg,建立Ⅲ型糖尿病模型。成模后给予P165及罗格列酮灌胃治疗4周,进行水迷宫实验。每2周测量大鼠体质量,造模前和取材前检测空腹血糖。应用ELISA方法检测大鼠血清胰岛素、胰高血糖素、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)。结果水迷宫实验结果显示,与对照组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01);与模型组相比,模型+P165组及模型+罗格列酮组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)。大鼠血清检测结果可见,与对照组相比,模型组大鼠血清IGF-1水平明显降低(P<0.05),而与模型组相比,模型+P165组大鼠血清IGF-1显著增高(P<0.01)。各组动物治疗前后体质量和血糖、胰岛素、胰高血糖素之间差异无统计学意义。结论Ⅲ型糖尿病大鼠存在学习记忆功能障碍,应用P165治疗可以提高大鼠血清IGF-1的水平,改善大鼠的学习记忆功能,但不影响血糖及其调节激素水平。     

鼠尾肌腱胶原蛋白的提取及凝胶的制备

为了探索鼠尾肌腱胶原蛋白在实验医学中的应用,用简单的方法溶解新鲜大白鼠鼠尾肌腱,从中提取较纯的胶原蛋白,制成胶原凝胶。将提取的胶原蛋白液进行定性、定量鉴定。结果：提取液主要为Ｉ型胶原蛋白：７２小时３７℃恒温培养箱内培养无细菌生长;紫外分光度计测定,吸收高峰为２３０ｎｍ;氨基酸成分主要为甘氨酸：占４０％,脯氨酸：１４．３％,显微镜下见：相互交织的胶原原纤维结构组成的网状结构;纤维均匀,有规则横纹。胶     

小柴胡汤对实验性肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达干预研究

目的:研究肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化情况,探讨不同剂量小柴胡汤对实验性模型大鼠肝纤维化程度的影响。方法:肉眼观察、常规HE染色法和免疫组化染色法观察小柴胡汤对实验性肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响。结果:6、12周肝纤维化模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与正常对照组比较显著增加(P<0.01);12周肝纤维化模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较6周肝纤维化模型组显著增加(P<0.05)。小柴胡汤治疗组与同期肝纤维化模型组相比,肝纤维化程度显著减轻(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少(P<0.05)。不同剂量小柴胡汤组间Ⅰ、Ⅲ型胶原含量比较无显著性差异(P>0.05)。结论:肝纤维化发生、发展过程中,Ⅰ、Ⅲ型胶原含量显著增加,小柴胡汤能减轻模型大鼠肝纤维化程度,下调Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。     

离心法制得角膜胶原膜的检测与实验研究

目的 旨在说明新法－－离心法制得角膜胶原膜的意义。方法 鉴定分析了由猪巩膜中提取纯化的胶原并由该胶原经离心法制得角膜胶原膜的理化生物指标进行检测与实验研究。结果 提取纯化的胶原属大量１型及少量３型胶原蛋白，离心法制得角膜胶原膜的多项理化指标可达到或优于国内外同类产品指标。结论 本研究可为法制得角膜胶原膜的应用提供科学的依据。     

兔角膜上皮——基质层组织工程方法三维重建

目的：利用细胞生物学和工程学原理在体外重建角膜上皮和基质层,提供与正常生理结构相似的模型。方法：兔角膜上皮和基质细胞原代并传代培养,免疫组化方法对细胞进行鉴定,以鼠尾为原料提取I型胶原溶液,重建角膜的基质和上皮,上皮实行气-液界面培养,倒置显微镜观察细胞形态。36h、72h、7d、14d、20d重建组织常规病理切片。结果：倒置显微镜下角膜成纤维细胞呈梭形三维生长,上皮细胞多层生长。组织病理检查显示重建的角膜组织结构类似于天然角膜组织。结论：本实验可为角膜的病理生理、毒理、药理以及基因表达等研究提供有利的模型和工具。     

原发性高血压患者血浆PⅢNP含量的变化

目的：了解原发性高血压患者Ⅲ型胶原代谢情况,以及血浆Ⅲ型胶原的Ｎ末端肽（ＰⅢＮＰ）含量与左心室功能参数之间的关系。方法：采用放射免疫分析方法测定了５０例原发性高血压患者及２６例正常人血浆ＰⅢＮＰ含量,以二维Ｍ型多普勒超声心动图检测所有观察对象的左心室收缩和舒张功能。结果：高血压组血浆ＰⅢＮＰ含量明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１）;原发性高血压Ⅱ期和Ⅲ期患者血浆ＰⅢＮＰ含量明显高于原发性高血压Ⅰ期患     

鸡Ⅱ型胶原镇痛的作用

目的观察一次性灌胃和口腔喷雾给予鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)5、10、20 μg/kg对小鼠痛阈的影响.方法采用热板法和温浴甩尾法测定小鼠的痛阈.结果一次性灌胃给予CⅡ5、10、20μg/kg和腹腔注射哌替啶10 mg/kg可以明显升高小鼠的痛阈,且大剂量组(20 μg/kg)较哌替啶起效快,维持时间长.而口腔喷雾给予上述剂量的CⅡ有提高痛阈的趋势,但差异无显著性.结论口服CⅡ具有明显的镇痛作用.     

Ⅰ型胶原与血管成形术后再狭窄的关系

目的探讨Ⅰ型胶原与血管成形术后再狭窄的关系。方法应用球囊拉伤动脉内膜加高脂饲养的方法建立兔髂动脉粥样硬化模型。对２４只模型兔进行球囊扩张血管成形术。采用核酸分子杂交技术对髂动脉壁平滑肌细胞（ＳＭＣ）的Ⅰ型胶原基因的表达情况进行观察。结果Ⅰ型胶原在术后１周开始表达，术后２周显著表达。结论血管成形术后晚期由于胶原增生促进了再狭窄的形成。     

60例硬肿病临床分析

本文分析30例硬肿病的临床和实验室资料,包括临床表现、血液流变学、病理,超微结构等方面的观察结果。提示本病不仅有皮肤损害,还有系统症状,预后并非完全良好,严重者可丧失劳动能力并危及生命,因此,应重视对本病的治疗和随访。     

重组缓释白介素4的克隆表达与鉴定

目的 重组表达可以缓释的抗炎因子白介素4（Interleukin 4,IL-4）。方法 根据小鼠IL-4的氨基酸序列,并基于大肠杆菌密码子偏爱性合成IL-4的基因,通过聚合酶链式反应(PCR)方法将胶原蛋白结合域(collagen binding domain, CBD)的编码序列和组氨酸标签序列连接到IL-4基因上,运用无缝克隆技术将上述重组基因插入pET-30a(+)载体。重组蛋白通过组氨酸标签进行纯化,纯化的蛋白被用于诱导M0巨噬细胞分化成M2巨噬细胞,同时检测M2巨噬细胞相关基因表达以及对白介素10（Interleukin 10, IL10）的分泌。与Ⅰ型胶原蛋白的联用验证胶原蛋白对重组因子的吸附和缓释功能。结果 带有CBD序列和组氨酸纯化标签的IL-4通过镍柱纯化,具有与商业化IL-4相似的生物活性。功能实验证实其能够被胶原蛋白吸附,并能脱离胶原蛋白缓释。结论 通过大肠杆菌表达纯化获得了能够缓释的抗炎因子IL-4.     

胶原凝胶包埋软骨细胞接种骨胶原基质支架体外构建组织工程软骨

目的探讨复合应用胶原凝胶和骨胶原基质（BCM）支架作为软骨细胞载体体外构建组织工程软骨的有效性和可行性.方法将胶原凝胶包埋的软骨细胞接种BCM支架并在体外培养,应用倒置相差显微镜和扫描电镜观察软骨细胞的粘附、生长和增殖情况,培养14d,行HE、TB（甲苯胺蓝）染色观察软骨组织形成情况.结果软骨细胞在支架上粘附、生长和增殖良好,体外培养14d能形成较成熟的软骨组织.结论胶原凝胶复合BCM支架可作为软骨细胞的载体体外构建组织工程软骨.